Estudo comparativo entre as microscopias de contraste de fase e contraste de interferência diferencial para análise de sêmen congelado de bovinos

Two hundred ampules of frozen bull semen were evaluated for per cent acrosomal pathology and major and minor defects of spermatozoa. The ampules referred to 4 groups of 50 each, corresponding to semen frozen in 1975, 1976, 1977 and 1978. Semen examinations were made after thawing and after being placed in a 38°C water bath for 5 hours (Slow Thermo resistance Test) or in a 45°C water bath for 1 hour (Quick Thermo resistance Test). Analysis of variance showed highly significant differences (P<.01)between phase-contrast and differential interference contrast microscopies for evaluation of acrosomal pathology and major defects of spermatozoa. For minor defects analysis of variance did not show statistical differences between the two technics employed.Duzentas ampolas de sêmen de bovinos, constituindo 4 grupos de 50, correspondentes a congelamentos efetuados, respectivamente, nos anos de 1975, 1976, 1977 e 1978, foram estudadas para avaliação da porcentagem de patologia do acrossomo e de defeitos maiores e menores. Os exames foram realizados após o descongelamento e após submissão às provas rápida (1 hora a 45°C) e lenta (5 horas a 38°C) de termo resistência, em microscopia de contraste de fase e em microscopia de contraste de interferência diferencial. Os resultados das análises de variância mostraram haver diferença estatística, altamente significante (P<0,01), a favor da microscopia de contraste de interferência diferencial para patologia do acrossomo e defeitos maiores, o mesmo não ocorrendo em relação aos defeitos menores

Avaliação do sêmen de reprodutores zebuínos visando a sua utilização em inseminação artificial

The semen picture of 13 zebu bulls, used as donors in an Artificial Insemination Center, was studied weekly during nine weeks. Average seminal characteristics were as follows: volume ranged from 7.89 to 13.44 ml progressive motility from 48 .6 3 to 73.89%, spermatic concentration from 712.000 to 1.774.000 spermatozoa / mm3. Spermatic pathology percentage observed with DIC and phase contrast microscopy, varied, respectively to total, major and minor defects, from 11.83 to 45.87%; from 3.50 to 35.50% and from 1.72 to 14.90% and from 7.56 to 42.3 4% from 2.83 to 31.02% and from 1.72 to 11.32%. Results based on a single examination of semen did not offer sufficient information because many samples with a high percentage of abnormal spermatozoa exhibited normal motility. The DIC microscopy was appreciably superior that of phase contrast for observation of spermatic defects.O quadro espermático de 13 touros Zebus, doadores em Central de Inseminação Artificial, foi estuda do em colheitas semanais obtidas por meio de eletroejaculação, durante 3 semanas. As características seminais foram, em média, volume de 7,89 a 13,44 ml. motilidade progressiva retilínea de 48, 83 a 73,831, concentração de 712.000 a 1.774.000 espermatozoides por mm3. A taxa de patologia espermática, através das microscopias de contraste de interferência diferencial e de contraste de fase juntamente com a coloração Williams, variou respectivamente, para defeitos totais, maiores e menores, de 11,83 a 45,871; 3,50 a 35,50% e 1,72 a 14,90% e 7, 55 a 42,34%; 2,83 a 31,02% e 1,72 a 11,32%. Constatou-se, ainda, que uma única prova não constitui elemento suficiente para a avaliação do sêmen, pois muitas amostras que apresentaram motilidade possuem altas porcentagens de espermatozoides anormais e que a microscopia de contraste de interferência diferencial mostrou-se sensivelmente superior ao contraste de fase para a observação de defeitos espermáticos

Correlações entremotilidade progressiva e retenção do acrossomo em semen congeladode bovinos após o descongelamento e após provas de termo resistência

Correlation determinations for the relationship between progressive motility of sperm cells and acrosomal retention were calculated on 200 ampules of frozen bull semen after thawing and after incubation at 45°C for 1 hour or at 38°C for 5 hours (Quick and Slow Thermoresistance Tests). Evaluations of progressive motility were estimated at 200 magnifications in optics microscope and those of acrosomal retention under 1000X magnifications phase-contrast or 1250X magnifications differential interference contrast microscopies, both in oil immersion. Highly significant correlations(P <.01) were so observed for progressive motility and acrosomal retention: a) negative correlation between both characteristics after thawing; b) positive correlation between progressive motility after Quick Thermoresistance Test and acrosomal retention after thawing; c) negative correlation between both characteristics after Quick and Slow Thermoresistance Tests.Duzentas ampolas de sêmen de bovinos foram analisadas visando o estudo de correlações entre a motilidade progressiva dos espermatozóides após o descongelamento e após as provas rápida (1hora a 45°C) e lenta (5 horas a 38°C) de termo resistência e a prova de retenção do acrossomo. Os exames da motilidade progressiva foram realizados em microscópio óptico, com aumento de 200X e aprova de retenção do acrossomo em microscopia de contraste de fase com aumento de 1000X e em microscopia de contraste de interferência diferencial, com aumento de 1250X, ambas com objetiva de imersão. As análises estatísticas revelaram as seguintes correlações significantes (P<0,01) entre motilidade progressiva dos espermatozoides e a prova de retenção do acrossomo: a) negativa para ambas as características após o descongelamento; b) positiva para motilida de progressiva após a prova rápida de termo resistência e retenção do acrossomo após o descongelamento; c) negativa para ambas as características apos as provas rápida e lenta de termo resistência

Uma função discriminante para qualificação de sêmen de touros zebuínos antes do congelamento

A discriminant function is presented for the selection of semen ejaculates from Zebu bulls before dilution and freezing. The estimated function was L= 100+ + 0.248 X1 - 0.237 X2 - 0.142 X3, where X1 is the percent initial motility, X2 the proportion of primary abnormalities, and X3 the proportion of secondary abnormalities, these variables being previously submitted to an arc-sin transformation. The above function was tested in terms of the probability of misclassification of any ejaculate and is considered suitable for practical use.É apresentada uma função discriminante para qualificação e seleção de ejaculados de sêmen de touros zebuínos antes de sua diluição e congelação, visando economia de tempo e de material. A função estimada é L = 0,248 X1- 0,237 X2 - 0,142 X3, onde X1 representa a percentagem de motilidade progressiva inicial, X2 a percentagem de anomalias primárias e X3 a proporção de anomalias secundárias dos espermatozóides antes da congelação, devendo estes dados ser previamente transformados em ângulos de arco-seno. A função acima foi testada em termos de probabilidade de erro de classificação de uma amostra qualquer de sêmen em "aproveitável" ou "não aproveitável" para congelação, tendo sido verificado ser a mesma um bom critério de seleção, desde que sejam usados dois valores-limites: se L ≤ 104,0, a amostra deve ser rejeitada, e se L ≥ 110,0 a amostra deve ser aprovada para fins de congelação; valores de L entre esses limites levam à necessidade de recorrer à tabela de probabilidades, fornecida no trabalho, para se decidir quanto ao destino do ejaculado