USO DE LA LECTINA DE OLNEYA TESOTA (PF2) PARA LA PURIFICACIÓN Y DETECCIÓN HISTOQUÍMICA DE UNA PROTEÍNA DE CHOQUE TÉRMICO (GP14) DE BAZO/ USE OF THE Olneya tesota LECTIN (PF2) FOR PURIFICATION AND HISTOCHEMICAL DETECTION OF A SPLEEN HEAT SHOCK PROTEIN

PF2 es una lectina de las semillas de Olneya tesota (Palo fierro) con afinidad alta hacia carbohidratos complejos triantenarios tetrasialilados. El objetivo de este estudio fue localizar glicoconjugados que interactúen con PF2 en secciones de tejido de bazo y purificar glicoproteínas usando cromatografía de afinidad con PF2. Se incubaron secciones finas de tejido de bazo con PF2 biotinilada y se observaron interacciones con linfocitos en los nódulos y estructuras internas de tipo reticular en la pulpa blanca. Se prepararon extractos de bazo para purificar la glicoproteína detectada, usando dos etapas cromatográficas, intercambio iónico (CM-celulosa) y afinidad (PF2-agarosa). Por electroforesis nativa y con SDS se mostró una glicoproteína monomérica de 14 kDa (GP14). Una vez digerida con una proteasa, se identificaron seis secuencias peptídicas en la GP14. Cada péptido mostró 100% de homología a secuencias internas de diferentes proteínas de choque térmico de la familia de 70 kDa (HSP70). Esta similitud con las HSP fue confirmada por electrotransferencia e inmunodetección usando anticuerpos específicos para HSP70. En conclusión, la lectina PF2 tiene especificidad hacia un glicoconjugado denominado GP14 que pudiera ser una glicoproteína de estrés del bazo humano, identificada por primera vez. ABSTRACT PF2 is a lectin from Olneya tesota (Palo fierro) seeds with high affinity towards triantennary tetrasialylated complex carbohydrates. The goal of this study was to localize PF2-interacting glycoconjugates in spleen tissue thin sections, and to purify glycoproteins using PF2 affinity chromatography. Biotinylated PF2 was incubated with thin sections of fixed spleen tissues and interactions with lymphocytes in nodules of splenic white pulp were observed. Two chromatographic steps, using ion exchange chromatography (CM-cellulose) and affinity chromatography (PF2-agarose) made possible the purification of a glycoprotein from spleen extracts. Both SDS-PAGE and PAGE showed a 14-kDa monomeric glycoprotein (GP14). GP14 was protease digested and the sequences of six peptides were identified. Each of the GP14 peptides showed 100% homology to different internal sequences of the 70-kDa family of heat shock proteins (HSP70). The similarity with HSP was confirmed by Western blot using an antibody specific to HSP70. In conclusion, PF2 lectin has specificity toward a glycoconjugate named GP14 from spleen extract. GP14 could be a novel stress glycoprotein from human spleen

Formulation and characterization of gentamicin-loaded albumin microspheres as a potential drug carrier for the treatment of E. coli K88 infections

The aim of this study was to formulate and characterize gentamicin-loaded albumin microspheres for their potential therapeutic use in E. coli K88 infections. Based on in vitro assays, it is proposed that microspheres may serve as a carrier of gentamicin and may provide localized antibacterial activity in the treatment of porcine colibacillosis. Gentamicin-albumin microspheres (GAM) were obtained using a water/oil (W/O) emulsion followed by cross-linking with different concentrations of glutaraldehyde. Electron microscopy showed spherical particles with indentations. The average size of the GAM was 10.5-12.3 µm. At pH 7.2, the release kinetics of gentamicin from the GAM was successfully described as an initial burst defined by a first order equation.  Gentamicin release was unaffected by the glutaraldehyde concentrations used but was affected by acidic conditions.  The behavior of gentamicin release from the GAM was not altered by digestion with trypsin and chymotrypsin at pH 7.2. Additionally, the concentration of gentamicin released from GAM to reach antibacterial activity was similar to that of free gentamicin against E. coli K88. This work shows the potential use of GAM as therapeutic vehicles of gentamicin to counteract intestinal infections in pig

Fiebre manchada por Rickettsia rickettsii en las Américas: un problema creciente de salud pública

Rocky mountain spotted fever is a public health problem in America. The disease remains as a challenge for Health Systems at regional level. It is an illness of medical relevance due to its high case-fatality rate when it is not diagnosed and treated early. Although anyone is susceptible to infection, some groups are more vulnerable due to increased exposure to ticks, including children who have higher morbidity and fatal outcomes. A myriad of biological, ecological and social factors, complexly interrelated, are associated with its epidemiological pattern, which requires integrated and multidisciplinary interventions at different levels. The incidence of the disease may continue to increase in the region and its actual occurrence required an urgent call for regional action. Preventive actions that reduce contact with ticks and increase early disease suspicion should be priorities in the health agenda of various nations in America.El comportamiento epidemiológico de la fiebre manchada por Rickettsia rickettsii constituye un desafío para los sistemas de salud del continente americano. Es un padecimiento de relevancia médica por la letalidad que provoca si no es diagnosticado ni tratado oportunamente. Aunque cualquier persona es susceptible a la infección, algunosgrupos poblacionales son más vulnerables debido a un mayor contacto con la garrapata transmisora, entre ellos los niños, quienes tienen mayor morbilidad por lo que se asocian con resultados fatales. En su origen participa una multitud de factores biológicos, ecológicos y sociales, interrelacionados complejamente, y cuyo abordaje requiere de intervenciones integradas y multidisciplinarias. La incidencia de la enfermedad puede continuar aumentando en la región, de modo que su ocurrencia actual constituye un llamado urgente para la acción regional. Acciones preventivas que disminuyan el contacto con garrapatas e incrementen la sospecha temprana de la enfermedad, son prioritarias en la agenda de salud de varias naciones de las Américas

Fiebre manchada por Rickettsia rickettsii en las Américas: un problema creciente de salud pública

Rocky mountain spotted fever is a public health problem in America. The disease remains as a challenge for Health Systems at regional level. It is an illness of medical relevance due to its high case-fatality rate when it is not diagnosed and treated early. Although anyone is susceptible to infection, some groups are more vulnerable due to increased exposure to ticks, including children who have higher morbidity and fatal outcomes. A myriad of biological, ecological and social factors, complexly interrelated, are associated with its epidemiological pattern, which requires integrated and multidisciplinary interventions at different levels. The incidence of the disease may continue to increase in the region and its actual occurrence required an urgent call for regional action. Preventive actions that reduce contact with ticks and increase early disease suspicion should be priorities in the health agenda of various nations in America.El comportamiento epidemiológico de la fiebre manchada por Rickettsia rickettsii constituye un desafío para los sistemas de salud del continente americano. Es un padecimiento de relevancia médica por la letalidad que provoca si no es diagnosticado ni tratado oportunamente. Aunque cualquier persona es susceptible a la infección, algunosgrupos poblacionales son más vulnerables debido a un mayor contacto con la garrapata transmisora, entre ellos los niños, quienes tienen mayor morbilidad por lo que se asocian con resultados fatales. En su origen participa una multitud de factores biológicos, ecológicos y sociales, interrelacionados complejamente, y cuyo abordaje requiere de intervenciones integradas y multidisciplinarias. La incidencia de la enfermedad puede continuar aumentando en la región, de modo que su ocurrencia actual constituye un llamado urgente para la acción regional. Acciones preventivas que disminuyan el contacto con garrapatas e incrementen la sospecha temprana de la enfermedad, son prioritarias en la agenda de salud de varias naciones de las Américas

EVIDENCIA DE ESTRÉS CARBONÍLICO EN PACIENTES CON DIABETES MELLITUS TIPO 2 DE UNA UNIDAD MÉDICA DE PRIMER NIVEL DE ATENCIÓN DE HERMOSILLO, SONORA

En la diabetes mellitus tipo 2 (DM2), la carbonilación proteica está asociada con la hiperglicemia crónica. Es una modificación química espontánea que altera la estructura y funciones nativas de las proteínas, por lo que podría ser un estimador del control metabólico de los pacientes. En México no es utilizado en la práctica clínica, por lo que no es posible saber si los pacientes con DM2 presentan una concentración alta de proteínas carboniladas. En este trabajo, de tipo transversal analítico, se incluyeron 68 pacientes con diabetes mellitus tipo 2 de una unidad médica de primer nivel de Hermosillo, Sonora, para determinar la concentración de proteínas séricas carboniladas y estimar su relación con los marcadores de control metabólico de la DM2. Los resultados demostraron el incremento significativo en la concentración de proteínas séricas carboniladas que correlacionó positivamente con la glicemia y con la concentración de albúmina carbonilada. Estos sugieren que el estrés carbonílico de los pacientes está asociado con el descontrol glicémico y que la albúmina es una de las principales fracciones proteicas modificadas. Se recomiendan futuros estudios para determinar el valor clínico de las proteínas séricas carboniladas como marcador de control metabólico en los pacientes estudiados

Mutaciones asociadas con resistencia a rifampicina o isoniazida en aislamientos clínicos de M. tuberculosis de Sonora, México DNA mutations associated to rifampicin or isoniazid resistance in M. tuberculosis clinical isolates from Sonora, Mexico

OBJETIVO: Realizar el análisis de regiones específicas de genes asociados con resistencia a isoniazida o rifampicina. MATERIAL Y MÉTODOS: Se estudiaron 22 cepas de M. tuberculosis, aisladas en Sonora, México. Se utilizaron iniciadores para regiones específicas de los genes rpoB, katG e inhA y la región ahpC-oxyR. Los productos de PCR se secuenciaron y analizaron. RESULTADOS: Se identificaron mutaciones en la región promotora del gen inhA, región ahpC-oxyR, codón 315 del gen katG y codones 451 ó 456 del gen rpoB. CONCLUSIONES: La identificación de mutaciones no descritas previamente obliga a continuar el análisis genotípico de cepas aisladas en Sonora.<br>OBJECTIVE: To perform the analysis of specific regions of the major genes associated with resistance to isoniazid or rifampin. MATERIALS AND METHODS: Twenty two M. tuberculosis strains, isolated from human samples obtained in Sonora, Mexico. Specific primers for hotspots of the rpoB, katG, inhA genes and the ahpC-oxyR intergenic region were used. The purified PCR products were sequenced. RESULTS: Mutations in the promoter of inhA, the ahpC-oxyR region, and codon 315 of katG and in 451 or 456 codons of rpoB, were identified. CONCLUSIONS: Detection of mutations not previously reported requires further genotypic analysis of Mycobacterium tuberculosis isolates in Sonora

Codificación geométrica y análisis de conglomerados para evaluar el control metabólico de pacientes con diabetes mellitus tipo 2 Geometric coding and cluster analysis to assess metabolic control of patients with type 2 diabetes mellitus

OBJETIVO: Determinar la frecuencia de las combinaciones de los parámetros de control metabólico por arriba de lo normal, usando la codificación geométrica y el análisis jerárquico de conglomerados, en pacientes con diabetes mellitus tipo 2 (DM2). MÉTODOS: Se desarrolló en México un estudio transversal descriptivo para evaluar a un grupo de 1 051 pacientes con DM2, cuyos criterios de inclusión eran tener uno o más de los siguientes valores: glucosa en ayunas > 130 mg/dL, colesterol total > 240 mg/dL, triglicéridos totales > 200 mg/dL, índice de masa corporal > 27 kg/m², y presión arterial sistólica mayor de 130 mmHg o presión arterial diastólica mayor de 85 mmHg. Por medio de codificaciones geométricas se obtuvieron las frecuencias de todas las combinaciones. Para definir similitudes entre las combinaciones se utilizó el método de análisis de conglomerados. RESULTADOS: Utilizando el instrumento propuesto, se observó que la combinación en pares con mayor número de sujetos estuvo representada por hiperglucemia-hipertrigliceridemia (7,3%) e hiperglucemia-hipercolesterolemia (3,6%). Las policombinaciones de mayor frecuencia fueron hiperglucemia-hipercolesterolemia-hipertrigliceridemia (13,2%) e hiperglucemia- hipertrigliceridemia-hipercolesterolemia-hipertensión (10,5%). CONCLUSIONES: La codificación geométrica y el análisis por conglomerados podrían llegar a ser un instrumento idóneo para evaluar el control metabólico de los pacientes con DM2, así como para identificar parámetros que contribuyan a mejorar su monitoreo y su tratamiento.OBJECTIVE: Determine the frequency of combinations of higher-than-normal metabolic control parameters, using geometric coding and hierarchical cluster analysis, in patients with type 2 diabetes (DM2) METHODOLOGY: A descriptive cross-sectional study was conducted in Mexico to assess a group of 1 051 patients with DM2. The inclusion criteria were to have one or more of the following values: fasting glucose of 130 mg/dL, total cholesterol of 240 mg/dL, total triglycerides of 200 mg/dL, Body Mass Index of 27 kg/m², and systolic blood pressure higher than 130 mmHg or diastolic blood pressure higher than 85 mmHg. Through geometric coding, the frequencies of all combinations were obtained. Cluster analysis was used to determine similarities among the combinations. RESULTS: Using the proposed instrument, it was observed that the paired combinations with the highest number of subjects were hyperglycemia-hypertriglyceridemia (7.3%) and hyperglycemia-hypercholesterolemia (3.6%). The most frequent polycombinations were hyperglycemia-hypercholesterolemia-hypertriglyceridemia (13.2%) and hyperglycemia-hypertriglyceridemia-hypercholesterolemia-hypertension (10.5%). CONCLUSIONS: Geometric coding and cluster analysis could become a suitable instrument for assessing the metabolic control of patients with DM2, as well as for identifying parameters that will help improve their monitoring and treatment