Differential binding of hyaluronic acid in two CD44+ sublines: Relationship with tumor infiltration.

A partir de un linfoma T murino de origen espontáneo LB se estableció una línea celular LBL que fue caracterizada. Por análisis histopatológicos se demostró que el tumor parental inoculado en ratones singeneicos infiltró bazo, ganglios linfáticos, hígado, timo, médula ósea y pulmón, mientras que la línea celular lo hizo en estos mismos órganos pero no en pulmón. A partir de la línea LBL se originaron dos sublíneas con características diferentes. Una de ellas creció en suspensión formando grumos (LBLc) mientras que la otra lo hizo adhiriéndose al frasco de cultivo (LBLa). Cuando se evaluó la velocidad de crecimiento, respuesta a estímulos mitogénicos e inducción de apoptosis se observaron algunas diferencias entre la línea celular y las sublíneas. Se analizó la expresión de la glucoproteína de superficie CD44 encontrándose que tanto la línea madre LBL como la sublínea LBLa expresaron esta molécula constitutivamente, mientras que LBLc necesitó ser estimulada con PMA para alcanzar estos niveles de expresión. Las células LBLa unieron ácido hialurónico (AH), por el contrario las células LBL y LBLc no lo hicieron ni aun luego de ser activadas con PMA. Se postula que la unión diferencial de AH podría estar relacionada con una diferente capacidad de anclaje e infiltración en los distintos órganos.We have established and characterized a cell line (LBL) from a spontaneous murine T lymphoma LB. Histopatological analysis has demonstrated LB primary tumor infiltration in spleen, lymph nodes, liver, thymus, bone marrow and lung. However LBL cells infiltrated all these organs except lung. Two sublines with different growth behavior were derived from LBL cell line. One of them grew in suspension as clusters (LBLc) while the other one grew as adherent monolayers (LBLa). Growth rate, response to mitogenic stimuli and apoptosis induction were different among the parental cell line and the derived sulblines. CD44 was expressed constitutively in LBL and LBLa cells. In contrast LBLc cells only expressed similar levels of this molecule when stimulated with PMA. LBLa cells showed hyaluronic acid (HA) binding properties, while LBL and LBLc cells were not able to bind HA even when activated with PMA. We postulate that differences in HA binding could be related with different infiltration behaviors.Fil: Ernst, Glenda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Caldas Lopes, Maria Eloisi. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Cabrera, Paula V.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; ArgentinaFil: Alvarez, Elida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; ArgentinaFil: Hajos, Silvia Elvira. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentin

BCL6 repression of EP300 in human diffuse large B cell lymphoma cells provides a basis for rational combinatorial therapy

B cell lymphoma 6 (BCL6), which encodes a transcriptional repressor, is a critical oncogene in diffuse large B cell lymphomas (DLBCLs). Although a retro-inverted BCL6 peptide inhibitor (RI-BPI) was recently shown to potently kill DLBCL cells, the underlying mechanisms remain unclear. Here, we show that RI-BPI induces a particular gene expression signature in human DLBCL cell lines that included genes associated with the actions of histone deacetylase (HDAC) and Hsp90 inhibitors. BCL6 directly repressed the expression of p300 lysine acetyltransferase (EP300) and its cofactor HLA-B–associated transcript 3 (BAT3). RI-BPI induced expression of p300 and BAT3, resulting in acetylation of p300 targets including p53 and Hsp90. Induction of p300 and BAT3 was required for the antilymphoma effects of RI-BPI, since specific blockade of either protein rescued human DLBCL cell lines from the BCL6 inhibitor. Consistent with this, combination of RI-BPI with either an HDAC inhibitor (HDI) or an Hsp90 inhibitor potently suppressed or even eradicated established human DLBCL xenografts in mice. Furthermore, HDAC and Hsp90 inhibitors independently enhanced RI-BPI killing of primary human DLBCL cells in vitro. We also show that p300-inactivating mutations occur naturally in human DLBCL patients and may confer resistance to BCL6 inhibitors. Thus, BCL6 repression of EP300 provides a basis for rational targeted combinatorial therapy for patients with DLBCL