Etude de l'immunogénicité de longs peptides d'antigènes de mélanomes humains in vitro, et in vivo chez des souris HLA-A2 transgéniques ( implication en vaccinothérapie )

Les échecs des vaccinations du mélanome utilisant des peptides épitopiques peuvent s expliquer par leur incapacité à générer des réponses CD8 durables et CD4 efficaces, ou par la faible liaiso n au HLA de certains épitopes CD8, tels que les épitopes immunodominants des antigènes Melan-A et NY-ESO-1. Deu x solutions, ont été proposées: 1/ l utilisation de longs peptides (LP) incluant des épitopes CD4 et CD8, afin de restreindre la présentation des antigènes aux cellules présentatrices et permettre la coopération CD4/ CD8, 2/ l utilisation d épitopes optimisés pour l ancrage au HLA . Le potentiel immunogénique de LP d antigènes de tumeurs hu maines, n ayant pas été étudié, nous avons choisi de poser ce tte question pour des LP Melan-A et NY-ESO-1 contenant l épitope immunodominant, optimisé ou non pour la liaison au HLA -A 2, et pour deu x LP contenant l épitope NA17A1-10. Les résultats majeurs montrent que ces LP induisent tous une présentation croisée durable, restreinte aux cellules dendritiques myéloïdes ou à leurs précurseurs. Cependant, pour Melan-A, une telle présentation de l épitope naturel est ineffica ce à induire une réponse CD8 a lors que, de façon majeu re, la présentation croisée de l épitope opt imisé à part ir du LP modifié induit des réponses CD8 anti-tumorales fortes et durables parmi les PBL de donneurs sains et de patients. De plus, chez certains donneurs, cette réponse est amplifiée par les lymphocytes CD4 et le LP modifié induit une réponse CD4 spécifique du Melan-A naturel. Cette étude établit l intérêt vaccina l unique du LP Melan -A modifié pour le traitement des mélanomes HLA-A2 et l impact de l affinité de liaison d un épitope au HLA sur l immunogénicité des LP.NANTES-BU Sciences (441092104) / SudocSudocFranceF

HLA Anchor Optimization of the Melan-A-HLA-A2 Epitope within a Long Peptide Is Required for Efficient Cross-Priming of Human Tumor-Reactive T Cells

International audienceThe uptake and long-term cross-presentation of tumor Ag long peptides (LP) by dendritic cells (DC) make them attractive cancer vaccine candidates. However, it remains to be established whether LP can prime long-lived tumor-reactive CTL and whether other cell types are able to cross-present them. Using HLA-A2 healthy donor and melanoma patient-derived PBMC, we studied the in vitro cross-priming potential of Melan-A 16-40 LP bearing the HLA-A2-restricted epitope 26-35 or its analog 26-35(A27L) and compared it to the priming capacity of the short analog. We then addressed LP priming capacity in vivo using HLA-A2 mice. We also studied LP cross-presentation by monocyte-derived DC, plasmacytoid DC, monocytes, and B cells. We showed that the modified LP gave rise to high and sustained cross-presentation by monocyte-derived DC. This led to cross priming in vitro and in vivo and to expansion of long-lived tumor-reactive cytotoxic T cells. In contrast, the LP containing the natural 26-35 epitope primed specific T cells poorly, despite its long-lived cross-presentation, and T cells primed against the short analog were short-lived. We further showed that LP cross-presentation is restricted to monocytes and conventional DC. These results document for the first time, to our knowledge, the strong immunogenicity of a human tumor Ag LP. Of note, they underscore that this property is critically dependent on sufficient HLA binding affinity and/or TCR ligand potency of the cross-presented epitope. We conclude that LP fulfilling this requirement should be used as tumor vaccines, together with DC maturating agents, especially the Melan-A 16-40(A27L) LP, for the treatment of HLA-A2(+) melanoma patients