Case report on the localized cutaneous leishmaniasis: intralesional treatment with meglumine antimoniate

Introduction: Leishmaniasis is a contagious disease endemic in Brazil, transmitted by a vector, and its installation and form of presentation depend on the immunological status, location, and type of transmitted protozoan. Objective: A case report of a patient with localized American tegumentary leishmaniasis. Method: Reviews of medical records, analysis of photographic records of diagnostic tests and the evolution of the treatment to which the patient was submitted and literature review were carried out. Case Report: An 85-year-old woman, with a history of a single lesion on the 4 cm right forearm, with raised borders, ulcerated and clean bottom, subcutaneous edema, local pain and heat, pruritus, bloody secretion in small amounts, and no systemic symptoms. The same did not show improvement with the use of ointments (dexamethasone, neomycin, ketoconazole) and lasted for 2 months. The diagnosis of leishmaniasis was confirmed and treatment with intralesional meglumine antimoniate was carried out, with the application of 3 injections with an interval of 15 days. Final considerations: The case reported and the studies surveyed reveal the importance of the new treatment route and show that, although the approach requires specific conditions, such as being a single lesion, it courses with fewer adverse effects, lower cost, and greater safety

Lapachol, a compound targeting pyrimidine metabolism, ameliorates experimental autoimmune arthritis

Abstract\ud \ud Background\ud The inhibition of pyrimidine biosynthesis by blocking the dihydroorotate dehydrogenase (DHODH) activity, the prime target of leflunomide (LEF), has been proven to be an effective strategy for rheumatoid arthritis (RA) treatment. However, a considerable proportion of RA patients are refractory to LEF. Here, we investigated lapachol (LAP), a natural naphthoquinone, as a potential DHODH inhibitor and addressed its immunosuppressive properties.\ud \ud \ud Methods\ud Molecular flexible docking studies and bioactivity assays were performed to determine the ability of LAP to interact and inhibit DHODH. In vitro studies were conducted to assess the antiproliferative effect of LAP using isolated lymphocytes. Finally, collagen-induced arthritis (CIA) and antigen-induced arthritis (AIA) models were employed to address the anti-arthritic effects of LAP.\ud \ud \ud Results\ud We found that LAP is a potent DHODH inhibitor which had a remarkable ability to inhibit both human and murine lymphocyte proliferation in vitro. Importantly, uridine supplementation abrogated the antiproliferative effect of LAP, supporting that the pyrimidine metabolic pathway is the target of LAP. In vivo, LAP treatment markedly reduced CIA and AIA progression as evidenced by the reduction in clinical score, articular tissue damage, and inflammation.\ud \ud \ud Conclusions\ud Our findings propose a binding model of interaction and support the ability of LAP to inhibit DHODH, decreasing lymphocyte proliferation and attenuating the severity of experimental autoimmune arthritis. Therefore, LAP could be considered as a potential immunosuppressive lead candidate with potential therapeutic implications for RA.The research leading to these results received funding from the European\ud Union Seventh Framework Programme (FP7-2007-2013) under grant\ud agreement n° HEALTH-F4-2011-281608 (TIMER), from the São Paulo Research\ud Foundation (FAPESP) under grant agreements n° 2009/54014-7, 2011/1967-0,\ud 2012/25075-0, 2014/50265-3, 2012/20990-2 and 2013/08216-2 (Center for\ud Research in Inflammatory Diseases), and from the University of São Paulo\ud NAP-DIN and NPPNS under grant agreement n° 11.1.21625.01.0 and\ud 2012.1.17587.1.1, respectivel

Development of mass spectrometry imaging methods (MALDI-MSI and DESI-MSI) applied to in vitro and in vivo models of cutaneous and nervous system permeation studies

A química de produtos naturais da família Asteraceae tem sido foco de estudo do Núcleo de Pesquisa em Produtos Naturais e Sintéticos (NPPNS) da FCFRP-USP que relatou diversas novas moléculas, com destaque para a classe das lactonas sesquiterpênicas. Para essas substâncias já foram atribuídas diversas atividades farmacológicas tais como antioxidante, anti-inflamatória, antimicrobiana, analgésicas e tripanossomicida. A atividade antitumoral da lactona sesquiterpênica goyazensolido (GOYA) foi avaliada no NPPNS e esse estudo revelou uma atividade farmacológica interessante paras as linhagens de tumor cutâneo e cerebral. Com isso, viu-se nesta classe de substâncias uma oportunidade para explorar o potencial antitumoral assim como sua distribuição e metabolismo. Para compreender melhor a distribuição dessa substância na pele, o modelo in vitro de penetração utilizando células de Franz e pele de orelha de porco como membrana foi aplicado. Para esse estudo um método de geração de imagem MALDI-MSI para avaliação da distribuição do GOYA na pele, assim como, um método por UPLC-MS/MS foram desenvolvidos. Para o desenvolvimento e validação do método de MALDI-MS as substâncias doxorrubicina e minoxidil, com estudos de penetração já estabelecidos, foram utilizadas. Para avaliação da distribuição de GOYA em sistema nervoso central (SNC) um modelo em insetos, utilizando gafanhotos foi aplicado. Nesse experimento os gafanhotos receberam a dose de 500 ?M de GOYA, e foram coletadas amostras de hemolinfa, fezes e cérebro nos tempos de 15 e 30 minutos, assim como amostras de gafanhoto total. Para determinação de GOYA nas amostras de gafanhoto um método quantitativo por UPLC-MS/MS e um método de geração de imagem por DESI-MSI foram desenvolvidos. Com os estudos de penetração cutânea pudemos concluir que MALDI-MSI foi capaz de confirmar a distribuição de minoxidil nas amostras de pele, no entanto, não se mostrou uma técnica eficaz para determinação de doxorrubicina. A técnica de MALDI-MSI, em adição ao método de UPLC-MS/MS foi capaz de revelar que o GOYA não penetrou na pele estando acumulado na sua camada superior, provavelmente no estrato córneo. Nos ensaios de distribuição em SNC foi possível observar através do método de UPLC-MS/MS que o GOYA está presente no cérebro, hemolinfa e fezes do gafanhoto. Com isso podemos concluir que o modelo utilizado é um bom modelo de predição de permeação a barreira-hematoencefálica, bem como para estudos de metabolismo. Conclui-se também que o método desenvolvido para essa finalidade foi adequado. A técnica de DESI-MS apesar de não gerar resultados positivos para permeação cerebral revelou a presença de GOYA no intestino do animal no tempo de 30 minutos, o que caracteriza uma rápida eliminação de GOYA do organismoThe Natural Products\' Chemistry has been the focus of the \"Núcleo de Pesquisa em Produtos Naturais e Sintéticos\"(NPPNS) at School of Pharmaceuthical Science of Ribeirão Preto, University of São Paulo (FCFRP- USP). NPPNS reported a variety of unknown molecules from Asteraceae family, highlighting the sesquiterpene lactones (STL). STL showed important pharmacological activities, such as antiinflammatory, antimicrobial, analgesic and trypanossomicide. The STL goyazensolide (GOYA) exhibit antitumor activity for skin and central nervous system (CNS) cancer cell lines . With that the research group saw in this class of compounds a chance to explore the antitumor potential as well as unveil its distribution and metabolism. For a better understanding of the distribution of this compound in the skin, the Franz cell in vitro model using ear pig skin was applied. For that, a MALDI-MSI method was developed to assess the distribution of GOYA in the skin, along with a UPLC-MS/MS method, to confirm the results. In order to develop and validate a MALDI-MSI method, doxorubicin and minoxidil, known substances in the cutaneous penetration studies, were used. An insect model with locust was applied for the investigation of GOYA distribution in CNS. The locust received a 500 ?M GOYA dose and hemolymph, brain and feces samples were collected in 15 and 30 minutes, as well as the entire locust. In order to assess GOYA in the locust samples, an UPLC-MS/MS method was developed, and for distribution in the entire locust a DESI-MSI was developed. The MALDI-MSI method developed for cutaneous penetration study was able to confirm the results for minoxidil experiments and allowed us to see the distribution of this compound in the skin. Unfortunately for doxorubicin MALDI-MSI by the is source analythe dissociation. The MALDI-MSI and the UPLC-MS/MS was able to show that GOYA does not permeate the skin, but is in the skin, probably interacting with the stratum corneum barrier. In the CNS studies we could see through the UPLC-MS/MS method that GOYA is present in the brain, hemolymph and feces in the in vivo model. With that we can conclude that the in vivo insect model is a good alternative for the metabolism and blood-brain-barrier studies. Also we can conclude that, although the DESI-MSI technique was not suitable for CNS permeation studies, it can be applied for metabolism studies, as it revealed the presence of GOYA in the intestine with a 30 minutes experiment, what characterizes a fast distribution and elimination of GOYA in the living organis

Development of mass spectrometry imaging methods (MALDI-MSI and DESI-MSI) applied to in vitro and in vivo models of cutaneous and nervous system permeation studies

A química de produtos naturais da família Asteraceae tem sido foco de estudo do Núcleo de Pesquisa em Produtos Naturais e Sintéticos (NPPNS) da FCFRP-USP que relatou diversas novas moléculas, com destaque para a classe das lactonas sesquiterpênicas. Para essas substâncias já foram atribuídas diversas atividades farmacológicas tais como antioxidante, anti-inflamatória, antimicrobiana, analgésicas e tripanossomicida. A atividade antitumoral da lactona sesquiterpênica goyazensolido (GOYA) foi avaliada no NPPNS e esse estudo revelou uma atividade farmacológica interessante paras as linhagens de tumor cutâneo e cerebral. Com isso, viu-se nesta classe de substâncias uma oportunidade para explorar o potencial antitumoral assim como sua distribuição e metabolismo. Para compreender melhor a distribuição dessa substância na pele, o modelo in vitro de penetração utilizando células de Franz e pele de orelha de porco como membrana foi aplicado. Para esse estudo um método de geração de imagem MALDI-MSI para avaliação da distribuição do GOYA na pele, assim como, um método por UPLC-MS/MS foram desenvolvidos. Para o desenvolvimento e validação do método de MALDI-MS as substâncias doxorrubicina e minoxidil, com estudos de penetração já estabelecidos, foram utilizadas. Para avaliação da distribuição de GOYA em sistema nervoso central (SNC) um modelo em insetos, utilizando gafanhotos foi aplicado. Nesse experimento os gafanhotos receberam a dose de 500 ?M de GOYA, e foram coletadas amostras de hemolinfa, fezes e cérebro nos tempos de 15 e 30 minutos, assim como amostras de gafanhoto total. Para determinação de GOYA nas amostras de gafanhoto um método quantitativo por UPLC-MS/MS e um método de geração de imagem por DESI-MSI foram desenvolvidos. Com os estudos de penetração cutânea pudemos concluir que MALDI-MSI foi capaz de confirmar a distribuição de minoxidil nas amostras de pele, no entanto, não se mostrou uma técnica eficaz para determinação de doxorrubicina. A técnica de MALDI-MSI, em adição ao método de UPLC-MS/MS foi capaz de revelar que o GOYA não penetrou na pele estando acumulado na sua camada superior, provavelmente no estrato córneo. Nos ensaios de distribuição em SNC foi possível observar através do método de UPLC-MS/MS que o GOYA está presente no cérebro, hemolinfa e fezes do gafanhoto. Com isso podemos concluir que o modelo utilizado é um bom modelo de predição de permeação a barreira-hematoencefálica, bem como para estudos de metabolismo. Conclui-se também que o método desenvolvido para essa finalidade foi adequado. A técnica de DESI-MS apesar de não gerar resultados positivos para permeação cerebral revelou a presença de GOYA no intestino do animal no tempo de 30 minutos, o que caracteriza uma rápida eliminação de GOYA do organismoThe Natural Products\' Chemistry has been the focus of the \"Núcleo de Pesquisa em Produtos Naturais e Sintéticos\"(NPPNS) at School of Pharmaceuthical Science of Ribeirão Preto, University of São Paulo (FCFRP- USP). NPPNS reported a variety of unknown molecules from Asteraceae family, highlighting the sesquiterpene lactones (STL). STL showed important pharmacological activities, such as antiinflammatory, antimicrobial, analgesic and trypanossomicide. The STL goyazensolide (GOYA) exhibit antitumor activity for skin and central nervous system (CNS) cancer cell lines . With that the research group saw in this class of compounds a chance to explore the antitumor potential as well as unveil its distribution and metabolism. For a better understanding of the distribution of this compound in the skin, the Franz cell in vitro model using ear pig skin was applied. For that, a MALDI-MSI method was developed to assess the distribution of GOYA in the skin, along with a UPLC-MS/MS method, to confirm the results. In order to develop and validate a MALDI-MSI method, doxorubicin and minoxidil, known substances in the cutaneous penetration studies, were used. An insect model with locust was applied for the investigation of GOYA distribution in CNS. The locust received a 500 ?M GOYA dose and hemolymph, brain and feces samples were collected in 15 and 30 minutes, as well as the entire locust. In order to assess GOYA in the locust samples, an UPLC-MS/MS method was developed, and for distribution in the entire locust a DESI-MSI was developed. The MALDI-MSI method developed for cutaneous penetration study was able to confirm the results for minoxidil experiments and allowed us to see the distribution of this compound in the skin. Unfortunately for doxorubicin MALDI-MSI by the is source analythe dissociation. The MALDI-MSI and the UPLC-MS/MS was able to show that GOYA does not permeate the skin, but is in the skin, probably interacting with the stratum corneum barrier. In the CNS studies we could see through the UPLC-MS/MS method that GOYA is present in the brain, hemolymph and feces in the in vivo model. With that we can conclude that the in vivo insect model is a good alternative for the metabolism and blood-brain-barrier studies. Also we can conclude that, although the DESI-MSI technique was not suitable for CNS permeation studies, it can be applied for metabolism studies, as it revealed the presence of GOYA in the intestine with a 30 minutes experiment, what characterizes a fast distribution and elimination of GOYA in the living organis

Evaluation of the pharmacokinetic profile of the flavonoid avicularin in rats

A substância 3-O-α-arabinofuranosil-quercetina (avicularina) é um flavonol já relatado em uma grande variedade de espécies vegetais, podendo ser encontrada em diversas frutas e plantas medicinais. Neste trabalho o flavonóide foi isolado da espécie Bidens sulphurea, popularmente conhecida como cosmo-amarelo, picãogrande e áster-do-méxico, com pureza de 93,27%. O flavonóide avicularina apresenta diversas propriedades biológicas descritas na literatura, e estudos científicos que comprovam a eficácia deste composto. No entanto não há estudos que avaliem os mecanismos que envolvem a farmacocinética (ADME) deste flavonóide, bem como sua biodisponibilidade. Sendo assim este trabalho teve como objetivo a determinação dos perfis farmacocinéticos de absorção da avicularina em ratos na presença e ausência de sais biliares e inibidor da glicoproteína-P, pelo ensaio de perfusão intestinal in situ. Neste trabalho também foi realizado a avaliação do perfil farmacocinético de distribuição e eliminação através de administração intravascular do flavonóide avicularina na dose de 1mg/kg em ratos. Para ambos os ensaios um método analítico sensível por CLUE-DAD-EM/EM foi desenvolvido e validado obedecendo às diretrizes do guia para validação de métodos bioanalíticos da ANVISA. Os ensaios de absorção com este flavonóide revelaram que sua taxa de absorção intestinal é baixa, em torno de 30% para as duas doses testadas (1 e 5 mg/kg), sugerindo uma baixa biodisponibilidade para este flavonóide. No entanto na presença do inibidor de glicoproteína-P, verapamil, o percentual absorvido final de avicularina foi de aproximadamente 80%, o que sugere o envolvimento de proteínas de efluxo em sua absorção. Através do estudo de farmacocinética com administração intravascular de avicularina pudemos concluir que o perfil farmacocinético do flavonóide em questão é bicompartimental, e possui rápida distribuição e eliminação do organismo, sendo o t ½α de 8 minutos e t ½β de 45 minutos, e, portanto baixa afinidade por tecidos, sendo baixa ou numa sua acumulação tecidual.The compound 3-O-α-arabinofuranosyl-quercetin (avicularin) is a flavonol already reported in a wide variety of plant species and can be found in many fruits and medicinal plants. In this work the flavonoid was isolated from the species Bidens sulphurea, popularly known as yellow cosmos and aster of mexico, with 93.27% of purity. The flavonoid avicularin has several biological properties described in the literature, and several scientific studies that prove the efficacy of this compound. However there are no studies that evaluate the mechanisms involving the pharmacokinetics (ADME) of this flavonoid as well as its bioavailability. Thus, this study aimed to determine the pharmacokinetic profiles of avicularin absorption in rats in the presence and absence of bile salts and inhibitor of P-glycoprotein by in situ intestinal perfusion technique. This work was also performed to evaluate the pharmacokinetic profile of distribution and elimination through intravascular administration of the flavonoid avicularina at the dose of 1mg/kg in rats. For both studies a sensitive analytical UPLC-DAD/MS/MS method was developed and validated following the guidelines of the Guide for the validation of bioanalytical methods of ANVISA. The absorption assays have shown that with this flavonoid its intestinal absorption rate is low, around 30% for both tested doses (1 and 5 mg / kg), suggesting a low bioavailability of this flavonoid. However in the presence of Pglycoprotein inhibitors, verapamil, the percentage of absorbed avicularina was approximately 80%, suggesting the involvement of protein efflux in the absorption. Through pharmacokinetic study with intravascular administration of avicularin we could concluded that the pharmacokinetic profile of the flavonoid in question is twocompartmental model, and has quickly distribution and elimination of the organism, being the t ½α of 8 minutes, and t ½β of 45 minutes, thus this compound has low affinity for tissues, with low or none tissue accumulation

Criminalising male homosexuality in the Middle East, a study case of Lebanon

O trabalho desenvolvido nesta dissertação se volta à análise dos tipos legais criminais e das persecuções policiais, investigatórias e judiciais, aplicados a homens homossexuais e bissexuais em países do Oriente Médio e do Norte da África. A análise compreende também a emergência de ativismos locais de reconhecimento da população LGBT e de promoção dos seus direitos. A perspectiva de análise adotada se baseia nas construções estruturais de controle social das práticas sexuais e da sociabilidade de pessoas gays e bissexuais. A sistematização de formas de repressão e de contenção da visibilidade da população gay são objeto central da análise do emprego de estruturas de força e de justiça na aplicação dos tipos penais. O estudo de caso do Líbano busca singularizar a experiência libanesa, particularmente pelo proeminente associativismo civil, para destaque da persecução criminal no país e para explorar as razões do aumento da visibilidade da população LGBT local.The following study analyses the criminal dispositions and law enforcement, prosecution and judicial measures applied to male homesexuals and bisexuals in countries of the Middle East and North Africa Region. The analysis also hilights the rise of local activisms foccusing on LGBT recognition and promotion of their rights. The perspective in which the study is developped is that of structural constructs of social control over sexual practices and sociality of gay and bisexuals individuals. The systematization of repressive conducts and exposure containment of gay people is a central subject of analysis in the implementation of judicial enforcement of the criminal dispositions. Lebanon\'s study case intends to single out the lebanese experience, particularly given its outstanding civil organization effort, pontctuating lebanese criminal persecution of gay men and exploring the reasons as to why the increasing visibility of its LGBT community happened in the country

Frequency of the changes in the serum immunoglobulins levels of the patients attended at the University Hospital, Londrina, Paraná <br> Freqüência das alterações dos níveis séricos de imunoglobulinas dos pacientes atendidos no Hospital Universitário, Londrina, Paraná

The immunoglobins constitute a group of glycoproteins detected in the serum and body fluids and are produced by the B-activated lymphocytes that are differentiated in the plasma cells. They are divided into five distinct classes or isotypes: IgG, IgA, IgM, IgD, and IgE. The aim of this study was to evaluate the frequency of changes in the serum levels of immunoglobins in patients attended at the University Hospital (HU), in Londrina, Paraná, assayed during the period from August 2001 to February 2006, by the nephelometry method. The immunoglobin levels were evaluated in 773 serum samples: 410 samples (53.0%) were from female patients and 363 (47.0%) from male patients, with ages ranging from one month to 86 years old. Among the 1719 serum evaluations, the IgA was evaluated in 568 serum samples and changes were observed in 88 (15.5%) of them. Among 495 IgG evaluations, 107 (21.6%) showed changes in the serum levels. The IgM was evaluated in 465 serum samples and 142 (30.5%) showed increased levels. The IgE was evaluated in 191 samples and 129 (67.5%) presented increased serum levels. The results obtained confirm the occurrence of different changes in the serum immunoglobin levels and the importance of this laboratory evaluation for the diagnosis of the infectious, allergic, and autoimmune diseases, and the congenital or acquired humoral immunodeficiencies. <p><p>As imunoglobulinas constituem um grupo de glicoproteínas presentes no soro e nos líquidos orgânico se são produzidas pelos linfócitos B ativados que se diferenciam em plasmócitos. São divididas em cinco classes ou isotipos: IgG, IgA, IgM, IgD e IgE. O objetivo deste trabalho foi determinar a freqüência das alterações dos níveis séricos das imunoglobulinas nos pacientes atendidos pelo Hospital Universitário (HU), Londrina, PR, no período de agosto de 2001 a fevereiro de 2006, avaliados pelo método de nefelometria. Foram analisadas 773 amostras de soro de pacientes, 410 (53,0%) do sexo feminino e 363 (47,0%) do sexo masculino, com idade variando de um mês a 86 anos. Das 1719 dosagens de imunoglobulinas séricas realizadas, os níveis de IgA sérica foram avaliados em 568 amostras e foram observadas alterações em 88 (15,5%) das amostras. Das 495 dosagens de IgG, 107 (21,6%) estavam com os níveis séricos alterados. A dosagem de IgM sérica foi realizada em 465 amostras e 142 (30,5%) estavam com os níveis séricos alterados. Os níveis de IgE sérica foram avaliados em 191 amostras e 129 (67,5%) amostras apresentaram níveis aumentados. Os dados obtidos confirmam a ocorrência de diferentes alterações nos níveis séricos das imunoglobulinas e a importância destas dosagens laboratoriais no diagnóstico de doenças infecciosas, parasitárias, alérgicas, auto-imunes e das imunodeficiências humorais congênitas ou adquiridas. <!--[if !supportEmptyParas]--

Characterization of intestinal absorption of C-glycoside flavonoid vicenin-2 from Lychnophora ericoides leafs in rats by nonlinear mixed effects modeling

AbstractVicenin-2 (apigenin-6,8-di-C-&#946;-d-glucopyranoside) is present in hydroalcoholic extracts of the Brazilian species Lychnophora ericoides Mart., Asteraceae, leaves, and the biological effects of this compound have been demonstrated including anti-inflammatory, antioxidant and anti-tumor effects in rat models. Given the potential of this compound as a pharmacological agent, the aims of this investigation were to evaluate the extent of intestinal absorption of vicenin-2, and to determine the intestinal permeation profile using an in situ single-pass intestinal perfusion technique. A validated HPLC&#8211;UV method was applied to measure the amount of unabsorbed vicenin-2 in the gut after an oral administration of 180 mg kg-1 in five rats. A nonlinear mixed effects model was used to determine the absorption pharmacokinetic parameters assuming a first order absorption and active secretion processes for this compound, wherein the active secretion was characterized by a zero-order process. The population pharmacokinetic parameters obtained were 0.274 min-1 for the first-order absorption rate constant, 16.3% min-1 for the zero-order rate constant; the final percentage of the original dose that was absorbed in vivo was 40.2 ± 2.5%. These parameters indicated that vicenin-2 was rapidly absorbed in the small intestine. In contrast to literature information indicating no absorption of vicenin-2 in Caco-2 cells, our results suggested that vicenin-2 can be absorbed in the small intestine of rats. The finding supports further investigation of vicenin-2 as a viable oral phytopharmaceutical agent for digestive diseases