In vitro, ex vivo and clinical approaches to evaluate the potential effect of Gentiana lutea extract on skin

International audienceAbstract Background Dark circles affect subjects of all ages and in all skin types. They can be treated by various methods, particular by topical solutions. This investigation was directed towards exploring the effect of gentiopicroside (GP) on the skin around the eyes. For this, an extract of Gentiana lutea (GIE) containing GP (65% by dry matter) was evaluated on oxidant and angiogenesis parameters using in vitro and ex‐vivo studies. A clinical experimentation was also realized. Methods The effect of GIE at different concentrations on antioxidant gene was evaluated in vitro by RT‐qPCR after treatment of NHDF. The effect of 2.93 μg mL −1 GIE on the release of VEGF‐A and VEGF‐C by NHDF was also studied. The effect of 87.9 μg mL −1 GIE was also evaluated on pseudotube formation in a coculture system of normal dermal microvascular endothelial cells (HMVEC‐d)‐NHDF stimulated or not with VEGF as pro‐angiogenic factor. Prior to these assays, preliminary cytotoxicity assays were performed using a standard WST‐8 reduction assay. The expressions of carboxymethyl‐lysine and glyoxalase‐1 were quantified on skin explants topically treated with 147 μg mL −1 GIE in basal and UVA‐irradiated conditions. A clinical study was conducted in 22 subjects using topical twice daily for 14 days on eye area (split‐face application: cream containing 147 μg mL −1 GIE versus placebo). 3D image acquisition and skin colour measurement were performed at D0 and D14. Results Treatment of GIE upregulated the gene expression of NFE2L2 and downregulated the expression of CXCL8. GIE targeted AGEs pathways and reduced the formation of pseudotubes. A total of 147 μg mL −1 GIE gel cream significantly reduced significantly the average roughness and relief of the upper eyelid skin as well as the redness of dark circles after 14 days of application. Conclusion By acting on the pathway of AGEs, VEGF‐A and VEFG‐C, GIE seems to allow a rejuvenation of the skin resulting, among others, in a decrease in redness. It now would be interesting to evaluate the efficacy of GIE on skin around eyes microbiota, antibacterial gentiopicroside property being well‐established.Résumé Contexte Le contour des yeux est une zone sensible. Les cernes affectent les sujets de tout âge et de tout type de peau. Différentes solutions peuvent être proposées, dont les solutions topiques. Cette étude visait a explorer l'effet d’un extrait de Gentiana lutea (GIE) riche en gentiopicroside (65% de matière sèche) sur des paramètres d'oxydation et d'angiogenèse au moyen d’études in vitro et ex‐vivo. Une expérimentation clinique a également été réalisée. Méthodes L'effet du GIE a différentes concentrations sur des gènes antioxydants a été évalué in vitro par RT‐qPCR après traitement de fibroblastes (NHDF). L'effet de 2.93 μg mL−1 GIE sur la libération de VEGF‐A et VEGF‐C a également été étudié. Il en est de même pour l'effet de 87.9 μg g mL−1 GIE sur la formation de pseudotubes qui a été évalué dans un système de co‐culture de cellules endothéliales (HMVEC‐d)‐ NHDF stimulées ou non avec du VEGF comme facteur pro‐angiogénique. Les expressions de la carboxymethyl‐lysine et de la glyoxalase‐1 ont été quantifiées sur des explants cutanés traites par voie topique avec 147 μg g mL−1 GIE dans des conditions basales et irradiées par UVA. Une étude clinique a été menée sur vingt‐deux sujets en utilisant un traitement topique deux fois par jour pendant 14 jours sur le contour des yeux (crème contenant 147 μg g mL−1 GIE contre placebo). L'acquisition d'images 3D et la mesure de la couleur de la peau ont été réalisées a J0 et J14. Résultats Le traitement par GIE a augmenté l'expression génétique de NFE2L2 et diminue l'expression de CXCL8. GIE a cible les voies des AGEs et a réduit la formation de pseudotubes. 147 μg g mL−1 GIE gel crème a significativement réduit la rugosité moyenne et le relief de la peau de la paupière supérieure ainsi que la rougeur des cernes après 14 jours d'application. Conclusion En agissant sur la voie des AGEs, du VEGF‐A et du VEFG‐C, GIE semble permettre un rajeunissement de la peau se traduisant, entre autres, par une diminution des rougeurs. Il serait maintenant intéressant d'évaluer l'efficacité du GIE sur le microbiote de la peau du contour des yeux, la propriété antibactérienne du gentiopicroside étant bien établie