Enhanced Analgesic Properties and Reduced Ulcerogenic Effect of a Mononuclear Copper(II) Complex with Fenoprofen in Comparison to the Parent Drug: Promising Insights in the Treatment of Chronic Inflammatory Diseases

Analgesic and ulcerogenic properties have been studied for the copper(II) coordination complex of the nonsteroidal anti-inflammatory drug Fenoprofen and imidazole [Cu(fen)2(im)2] (Cu: copper(II) ion; fen: fenoprofenate anion from Fenoprofen, im: imidazole). A therapeutic dose of 28 mg/kg was tested for [Cu(fen)2(im)2] and 21 mg/kg was employed for Fenoprofen calcium, administered by oral gavage in female mice to compare the therapeutic properties of the new entity. The acetic acid induced writhing test was employed to study visceral pain. The percentage of inhibition in writhing and stretching was 78.9% and 46.2% for the [Cu(fen)2(im)2] and Fenoprofen calcium, respectively. This result indicates that the complex could be more effective in diminishing visceral pain. The formalin test was evaluated to study the impact of the drugs over nociceptive and inflammatory pain. The complex is a more potent analgesic on inflammatory pain than the parent drug. Ulcerogenic effects were evaluated using a model of gastric lesions induced by hypothermic-restraint stress. Fenoprofen calcium salt caused an ulcer index of about 79 mm2 while the one caused by [Cu(fen)2(im)2] was 22 mm2. The complex diminished the development of gastric mucosal ulcers in comparison to the uncomplexed drug. Possible mechanisms of action related to both therapeutic properties have been discussed.Fil: Agotegaray, Mariela Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Química del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Química. Instituto de Química del Sur; ArgentinaFil: Gumilar, Fernanda Andrea. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Boeris, Monica. Universidad Nacional de la Pampa. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Toso, Ricardo Enrique. Universidad Nacional de la Pampa. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Minetti, Silvia Alejandra. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Efecto de Prosopis flexuosa DC. var. flexuosa (algarrobo) sobre la motilidad gastrointestinal

In the present work was evaluated the effect of different parts of Prosopis flexuosa DC. var. flexuosa over the gastrointestinal activities of rats. In a complementary study were also assessed toxicity tests from aerial parts, bark and fruits, and increased dose-response essays of hydro-alcoholic extract of bark and aerial parts. The administration of aerial parts and bark increased the time of gastric emptying and reduce the intestinal motility when it was compare with the witness drug (hyoscin bromuro). Phyto-chemical studies of the bark showed present of the compound saponin, and tannins and flavonoids in aerial parts. As conclusion it was observed a toxicity effect in doses higher than 100 mg of the aerial parts, and an inhibitory effect doses-depended of the gastro-intestinal motility of steam and leaf of Prosopis flexuosa DC. var. flexuosa.Con el objetivo de obtener información sobre los efectos que producen distintas partes de Prosopis flexuosa DC. var. flexuosa sobre el tránsito gastrointestinal, en este trabajo se llevaron a cabo bioensayos en ratones para evaluar extractos obtenidos a partir de partes aéreas, corteza y frutos. En forma complementaria, se hicieron estudios de toxicidad de partes aéreas, corteza y frutos. También se realizaron bioensayos dosisrespuesta administrando dosis crecientes de extractos hidroalcohólicos de hojas y tallos y estudios fitoquímicos a extractos hidroalcohólicos obtenidos de partes aéreas y de corteza. Se concluyó que la administración de extractos de partes aéreas y corteza aumenta el tiempo de vaciado gástrico y disminuye el tránsito intestinal superando el efecto logrado con hioscina butilbromuro empleada como droga testigo, mientras que los extractos de frutos lo aumentan. Estudios fitoquímicos confirmaron la presencia de compuestos saponósidos y fenólicos como taninos y flavonoides en la fracción metanólica de partes aéreas. Se observó toxicidad al administrar dosis mayores de 100 mg de partes aéreas y un efecto inhibitorio en la motilidad gástrica dosis dependiente de los extractos de hojas y tallos de Prosopis flexuosa DC. var. flexuosa

Caracterización fitoquímica de Prosopis flexuosa var. flexuosa (algarrobo) y Prosopis flexuosa var. depressa (alpataco), plantas con acción farmacológica

It was made a phytochemical characterization of the leaves of Prosopisflexuosa var. flexuosa and Prosopis flexuosa var. depressa. The presence of flavonoids, triterpenes and steroidal groups, alkaloids and amino groups in both plant species was determined through the phytochemical progress. In the case of Prosopis flexuosa var. derpressa the presence of tannin was negative, but in the case of Prosopis flexuosa var. flexuosait was positive. Saponins regarding Prosopis flexuosa var. depressa showed lower surfactant power and more emulsifier power than Prosopis flexuosa var. flexuosa.Se realizó la caracterización fitoquímica de hojas de Prosopis flexuosa var. flexuosa (Algarrobo) y Prosopis flexuosa var. depressa (alpataco). En la marcha fitoquímica se determinó la presencia de flavonoides, grupos esteroidales y triterpenos, alcaloides y aminogrupos en ambas especies vegetales. En Prosopis flexuosa var. derpressa no se detectaron taninos, y si en Prosopis flexuosa var. flexuosa. En la detección de saponinas se observó que Prosopis flexuosa var. depressa demostró menor poder tensioactivo y mayor poder emulsificante que Prosopis flexuosa var. flexuosa DOI:HTTP://DX.DOI.ORG/10.19137/CIENVET2013-1511

Estudio de las propiedades antiinflamatorias de Marrubium vulgare

Marrubium vulgare (Malvarubia) is an adventitious plant broadly distributed in Argentina. Popular medicine attributes it diuretic, anti-inflammatory, febrifugal and expectorant properties. This work was carried out with mice using the test of the carragenin with the purpose of confirming the anti-inflammatory action. Ethanolic, hydroalcoholic, chloroformic and aqueous extracts from 1 g of dried up air parts of Marrubium vulgare in a carboxymethylcellulose and Tween 80 suspension, were respectively administered per os, one hour before the application of a carragenin solution in the plantar pad, to four groups of five animals each. The control group received a dose of the excipient and the witness group got one of Piroxicam per os, an hour before the carragenin injection. The inflammation was evaluated by measuring the inflammatory edema in the different groups at 3, 5 and 7 hours after to the carragenin application. The ethanolic extract inhibited the inflammatory edema in a 49%, respect to the control group, three hours after the carragenin administration. The hydroalcoholic, chloroformic and aqueous extracts inhibited the edema 4%, 35% and 18% respect thecontrol group. A comparative study administering different dose of ehtanolic extract from 0,5, 1 and 2 g of dried up Marrubium vulgare, evidenced that the ethanolic extract from 1 g of the plant, possesses a significant anti-inflammatory effect 3, 5 and 7 hours after administration respect the control group. These values of the edema inhibition are similar to those obtained with a 30 mg/kg of Piroxicam doseMarrubium vulgare (Malvarrubia) es una planta adventicia, ampliamente distribuida en Argentina. La medicina popular le atribuye propiedades diurética, antiinflamatoria, febrífuga y expectorante. En el presente trabajo se llevaron a cabo estudios en ratones, utilizando el test de la carragenina, con el fin de confirmar la acción antiinflamatoria. Extractos etanólico, hidroalcohólico, clorofórmico y acuoso provenientes de 1 g de partes aéreas desecadas de Marrubium vulgare, vehiculizados en una suspensión de carboximetilcelulosa y Tween 80, fueron respectivamente administrados per os, una hora antes de la aplicación de una solución de carragenina en la almohadilla plantar, a cuatro grupos de cinco animales cada uno. El grupo control recibió una dosis del excipiente y el grupo testigo Piroxicam per os una hora antes de la inyección de carragenina. La inflamación se evaluó midiendo el edema inflamatorio en los distintos grupos a las 3, 5 y 7 horas posteriores a la aplicación de carragenina. El extracto etanólico inhibió significativamente el edema inflamatorio en un 49% (P<0,05), respecto al grupo control, tres horas después de la administración de carragenina. Los extractos hidroalcohólico, clorofórmico y acuoso inhibieron el edema un 4%, 35% y 18% respecto al grupo control, sin presentar diferencias significativas (P<0,05).Un estudio comparativo, administrando distintas dosis de extracto etanólico provenientes de 0,5, 1 y 2 g de Marrubium vulgare desecada, evidenció que el extracto etanólico proveniente de 1 g de la planta posee un efecto antiinflamatorio significativo a las 3, 5 y 7 horas con respecto al control.Estos valores de inhibición del edema son similares a los obtenidos con una dosis de 30 mg/kg de Piroxica

Obtención, purificación y evaluación de inmunoglobulina Y (IgY) específicas con fines diagnósticos y terapéuticos

La hiperinmunización de gallinas con vistas a obtener IgY específicas contra enfermedades de otras especies es un método altamente eficiente, no estresante ni invasivo para las mismas. Permite generar grandes cantidades de anticuerpos específicos, los cuales se pueden aislar, purificar y cuantificar por métodos relativamente simples y económicos. Estos anticuerpos específicos pueden ser usados para brindar inmunidad pasiva, instaurar tratamientos, como aditivo alimenticio en reemplazo de antibióticos promotores de crecimiento o para diagnóstico. Esta última aplicación es de gran valor debido la alta especificidad brindada por la amplia distancia filogenética entre las especies involucradas, implica una alta confiabilidad de los resultados y disminuye notablemente la aparición de falsos negativos. En este proyecto se evaluaron diferentes métodos de extracción, purificación y cuantificación de IgY específicas para el modelo de caracterización y aplicación de las IgY contra Lawsonia intracellularis. Para la extracción de las IgY se seleccionó el método de deslipidación mediante la técnica de precipitación con polietilenglicol. El contenido de proteína de las muestras obtenidas se mide fotométricamente a 280 nm con un coeficiente de extinción de 1,33 para IgY. Posteriormente se determina la concentración de IgY específicas contra Lawsonia intracellularis mediante ELISA utilizando anti IgY producida en conejo marcada con peroxidasa. El grado de pureza y recuperación de las IgY se realiza mediante SDS-PAGE, con geles T 4-20% coloreados con Coomasie Blue permitiendo la visualización de las IgY como una única banda de 180.000 Da. En este proyecto se ha seleccionado Lawsonia intracellularis como antígeno inductor de inmunidad, debido a las pérdidas económicas que provoca en la actualidad la Enteropatía Proliferativa Porcina. El modelo de obtención de anticuerpos propuesto en este proyecto evita el empleo de equinos hiperinmunizados, los cuales deben someterse a continuas extracciones de sangre para obtener los anticuerpos. Desde el punto de vista del bienestar animal este proceso es beneficioso, ya que las gallinas trasmiten la inmunidad a través de un proceso natural como es la postura, haciendo innecesario el empleo de equinos para obtención de suero. Otras ventajas del modelo seleccionado en este proyecto son; a) las aves producen en corto tiempo mayor cantidad de anticuerpos a las obtenidas por el método tradicional de hiperinmunización y sangrado de equinos. b) la extracción de los anticuerpos no se realiza por punción, ya que las aves ponen el huevo naturalmente y no deben ser obtenidos por técnicas invasivas. c) los métodos de extracción, purificación y evaluación de IgY son relativamente simples y tienen un costo razonable. d) el equipamiento necesario es accesible y puede ser operado por personal entrenado sin dificultad, lo cual hace posible que estos desarrollos puedan llevarse a cabo en laboratorio de mediana complejidad. e) la obtención de anticuerpos por este método reduce sensiblemente los costos de producción versus los métodos tradicionales de fabricación de anticuerpos policlonales. f) el costo de mantenimiento y el espacio que se debe dedicar para alojar las aves es notablemente inferior a la necesaria para mantener equinos, lo que redunda en una optimización de los costos de producción

Chitosan-bovine serum albumin complex formation: A model to design an enzyme isolation method by polyelectrolyte precipitation

Interactions between a model protein (bovine serum albumin-BSA) and the cationic polyelectrolyte, chitosan (Chi), have been characterized by turbidimetry, circular dichroism and fluorescence spectroscopy. It has been found that the conformation of the BSA does not change significantly during the chain interaction between BSA and chitosan forming the non-covalently linked complex. The effects of pH, ionic strength and anions which modify the water structure around BSA were evaluated in the chitosan-BSA complex formation. A net coulombic interaction force between BSA and Chi was found as the insoluble complex formation decreased after the addition of NaCl. Around 80% of the BSA in solution precipitates with the Chi addition. A concentration of 0.05% (w/v) Chi was necessary to precipitate the protein, with a stoichiometry of 6.9 g BSA/g Chi. No modification of the tertiary and secondary structure of BSA was observed when the precipitate was dissolved by changing the pH of the medium. Chitosan proved to be a useful framework to isolate proteins with a slightly acid isoelectrical pH by means of precipitation.Fil: Boeris, Valeria. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Departamento de Química y Física. Área Fisicoquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Química Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Química Rosario; ArgentinaFil: Farruggia, Beatriz Monica. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Departamento de Química y Física. Área Fisicoquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Química Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Química Rosario; ArgentinaFil: Picó, Guillermo Alfredo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Química Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Química Rosario; Argentina. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Departamento de Química y Física. Área Fisicoquímica; Argentin

Aqueous two-phase extraction and polyelectrolyte precipitation combination: A simple and economically technologies for pepsin isolation from bovine abomasum homogenate

The combination of two bioseparation techniques, partition in aqueous two-phase systems and polyelectrolyte precipitation of the target enzyme from the phase where it is present, was assayed to purify pepsin from bovine abomasum homogenate. Pepsin was partitioned in favor of the polyethyleneglycol-rich phase in an aqueous two-phase system of polyethyleneglycol 600 and 1450-sodium phosphate; however, a great amount of impure proteins were present. Chitosan (a cationic natural polyelectrolyte) was added to precipitate this acid enzyme as a form of insoluble complex. The addition of this second step increased the purity of the enzyme significantly while the yield was not significantly decreased. The combination of both partition in polyethyleneglycol 1450-phosphate system and chitosan precipitation produced a pepsin recovery of 48.5% with a purification factor of 9.0. The biological activity of the recovered enzyme remained unaltered.Fil: Boeris, Valeria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario; Argentina. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas; ArgentinaFil: Spelzini, Darío. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario; ArgentinaFil: Farruggia, Beatriz Monica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario; Argentina. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas; ArgentinaFil: Picó, Guillermo Alfredo. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario; Argentin