An immunoblotting technique for the serodiagnosis of brucellosis by Brucella ovis

An immunoblotting (IB) technique was developed for the serodiagnosis of brucellosis caused by Brucella ovis. Immunoblotting was performed, using a B. ovis HS (hot saline extract) antigen, on 44 blood serum samples which came from rams belonging to known brucella-free flocks, 114 samples originating from ten experimentally B. ovis infected rams and 100 from rams of naturally B. ovis infected flocks. No bands were noted on any of the 44 serum samples which originated from known negative flocks. Sera from naturally and experimentally infected rams identified antibodies to antigenic components with molecular masses of 67, 63, 58, 55, 38, 35, 32, 30, 28, 25, 23, 21, 20-18 (proteins) and 15-12 (RLPS) kDa

Evaluation of tests employed in serological diagnosis of Brucellosis caused by Brucella ovis.

A survey was carried out to verify the sensitivity and specificity of various tests (complement fixation test - CF; agar gel immunodiffusion - AGID; indirect enzyme linked immunosorbent assay - ELISA; immunoblotting - IB) employed in the serological diagnosis of brucellosis caused by Brucella ovis. The tests were executed on 44 blood serum samples of rams coming from B.ovis-free flocks, 75 of B. ovis experimentally infected rams and 1139 from rams living in flocks where B. ovis had been previously isolated. All tests were performed using B. ovis hot saline extract (HS) as antigen. Sensitivity results were 97.4% for IB, 98.68% for CF, 100% for AGID and ELISA; specificity was 100% for all methods. Concordance values were 89.62% (CF-AGID), 78.77% (CF-ELISA), 77.74% (AGID-ELISA), 65.45% (IB-CF), 62.93% (IB-ELISA), 67.24% (IB-AGID). IB identified antibodies to antigenic components with molecular weight of 67, 63, 58, 55, 38, 35, 32, 30, 28, 25, 23, 21, 20-18 kDa (proteins) and 15-12 kDa (rough lipopolysaccharide

Comparação entre a imunidade induzida em bovinos vacinados com bacterinas polivalentes comerciais e uma monovalente experimental

O presente estudo avaliou a indução da produção de anticorpos contra Leptospira spp.por dez bacterinas, sendo nove polivalentes e uma monovalente experimental para a sorovariedade Hardjo amostra Norma. A concentração celular foi controlada e utilizou-se adjuvante de emulsão óleo em água. Um ensaio imunoenzimático (ELISA) indireto foi desenvolvido utilizando-se conjugado anti-IgG total para mensurar os níveis de anticorpos da classe IgG conferido pelas bacterinas utilizando três amostras diferentes: Hardjoprajitino, Norma e Hardjo-bovis. Paralelamente foi utilizado também o Teste de Soroaglutinação Microscópica (SAM) para mensurar os níveis de anticorpos contra as mesmas amostras. Encontraram-se títulos variáveis entre as bacterinas de acordo com o teste ELISA. Os títulos no SAM foram de pouca intensidade e de curta duração indicando a necessidade de controle celular para uma posterior padronização destes produtos. Com base nos resultados encontrados no presente estudo, a bacterina monovalente foi a que apresentou melhor desempenho