Detection of the MDR1 mutation in Portuguese dog breeds

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina VeterináriaP-glycoprotein is an ATP-driven drug efflux carrier, encoded by the multidrug resistance gene MDR1, also been referred as ABCB1, that is responsible for the transport of a broad variety of compounds, including drugs commonly used in veterinary medicine, out of the cell against the concentration gradient. The influence of P-gp on drug disposition has been demonstrated in Collies and in other herding dog breeds since a severe intoxication in response to treatment with the antiparasitic drug ivermectin and other avermectins has been reported in a subpopulation of these breeds. This adverse reaction is related to a 4-bp deletion in the ABCB1 gene. To our knowledge, no study was conducted in portuguese dog breeds to detect this gene mutation and there is no available information for the clinicians about this fact and consequently, about the safety of the administration of drugs that are P-gp substrates. Thus, it is important to know the status about the presence of MDR1 in dog breeds in Portugal. The main objective of this project was to implement the genetic test to identify the gene mutation on MDR1 gene and to perform this analysis in several animals from dog breeds in Portugal to obtain their MDR1 genotype. For that, we performed biological samples of saliva in animals from the dog breeds belonging to Group 1 and from the ones already identified as affected. The diagnosis technique used was adapted from the ones utilized by other authors, namely Mealy and collaborators. We analyzed 105 animals, 21.9% of which are Barbado da Terceira, 9.5% are Cão da Serra d’Aires, 52.4% belonging to breeds known to carry the mutation and 16.2% to other breeds. With this study we were able to establish the analysis in our laboratory, we identified the mutation in dogs of breeds already signalized as having the mutation and we evidenced that the mutation already is in Barbado da Terceira - carriers.RESUMO - DETEÇÃO DA MUTAÇÃO MDR1 NAS RAÇAS CANINAS PORTUGUESAS - A glicoproteína P é um transportador dependente de ATP, codificado pelo gene de resistência a fármacos MDR1, também conhecido como ABCB1, que é responsável pelo transporte contra o gradiente de concentração (para o espaço extracelular) de vários substratos, incluindo fármacos comummente utlizados em Medicina Veterinária. A influencia deste transportador na reação a fármacos foi demonstrada em Collies e outras raças pastoras devido ao desenvolvimento de sinais neurológicos, de intoxicação grave, após o tratamento destes animais com antiparasitários do grupo das avermectinas, nomeadamente, a ivermectina. Esta reação está relacionada com a deleção de 4 pares de base no gene canino ABCB1, descoberta em 2001, em cães com fenótipo sensível à ivermectina. Até à data, não temos conhecimento de nenhum estudo feito em Portugal para detetar esta mutação genética e não existe informação disponível para os clínicos sobre este facto e, consequentemente, sobre a segurança de administração de medicamentos que sejam substratos da gp-P. É, por isso, importante saber-se o estatuto MDR1 em raças caninas em Portugal. O principal objetivo deste trabalho foi implementar o teste genético para identificação da mutação genética no gene MDR1 e realizar esta análise em vários exemplares de raças caninas em Portugal para obter o seu genótipo MDR1. Para o efeito foram realizadas colheitas de amostras biológicas de saliva em exemplares das raças caninas pertencentes ao grupo I e das raças já identificadas como afetadas. A técnica de diagnóstico utilizada foi adaptada das técnicas utilizadas por outros autores, nomeadamente Mealey e colaboradores. Foram analisados 105 animais, 21.9% dos quais são Barbados da Terceira, 9.5% são Cão da Serra d’Aires, 52.4% pertence a raças já identificadas como portadoras da mutação e 16.2% a outras raças. Com a realização deste estudo, conseguimos estabelecer a técnica no nosso laboratório, identificámos a mutação em cães de raças já sinalizadas como tendo a mutação e detetámos evidências que a mutação também circula na raça Barbado da Terceira - portadores.N/