El silenciamiento de la proteína priónica celular (PrPC) mediante RNA de interferencia (siRNA) reduce la infección por HSV-1 y HSV-2 en células SK-SY5Y

The transmissible spongiform encephalopathies (TSEs) are neurodegenerative and fatal diseases, affecting humans and some other animal species. The most accepted hypothesis suggests that the infectious agent, named “prion”, is composed mainly by the prion protein scrapie (PrPSc) and it corresponds to an abnormal conformation of a host encoded protein, the cellular prion protein (PrPC), which function is still unknown. However, the ubiquitous expression of PrPC and its highly conserved presence among different species suggests it has a very important role in cell functions. In this work, the PrPC in different cell types, including a primary fish cell culture (Oreochromis spp.), was detected. In addition, based on the human PrPC sequence, we designed a short interfering RNA (siRNA) to silence the PRNP gen in neuronal SK-SY5Y cells. The designed siRNA inhibited the PrPC expression along 96 hours posttransfection and the silenced cells were less susceptible to HSV-1 and HSV-2 infections, in comparison to non siRNA-transfected cells.Las encefalopatías espongiformes transmisibles (EETs) son enfermedades neurodegenerativas fatales que afectan a humanos y ciertas especies animales. La hipótesis más aceptada indica que el agente infeccioso, denotado como prion y compuesto principalmente por la Proteína Priónica Scrapie (PrPSc), corresponde a una conformación anormal de una proteína codificada por el huésped denominada Proteína Priónica Celular (PrPC), cuya función es aún desconocida; sin embargo, la expresión ubicua de PrPC así como su elevado grado de conservación entre especies, sugieren un papel importante para esta proteína. En este trabajo se detectó a la PrPC en diferentes tipos celulares incluyendo un cultivo primario de células de peces (Tilapia, Oreochromis spp.). Además, basándonos en la secuencia de la PrPC humana, se diseñó un RNA de interferencia (siRNA) con el fin de silenciar el gen PRNP en células neuronales SK-SY5Y. El siRNA diseñado inhibió la expresión de PrPC a lo largo de las 96 h post-transfección y las células silenciadas fueron menos susceptibles a la infección por HSV-1 y HSV-2, en comparación con células no transfectadas con el siRNA

CITOTOXICIDAD Y ACTIVIDAD ANTIVIRAL DE EXTRACTOS DE CHILES (Capsicum spp), CYTOTOXICITY AND ANTIVIRAL ACTIVITY OF PEPPER EXTRACTS (Capsicum spp)

RESUMENEn este trabajo se evaluaron  la citotoxicidad y la actividad antiviral en contra del virus herpes simplex tipo 1 (VHS-1)  de extractos  de chile Jalapeño, Serrano, Guajillo, Ancho, Pimiento (Capsicum annuum L. var. annuum.) y Habanero (Capsicum chinense Jacq), así como de los fenilpropanoides, ácidos fenólicos y flavonoides puros que fueron identificados por HPLC-MS en los extractos  de chile. La concentración que causa el 50 % de toxicidad en células Vero fue determinada (CC50) así como el potencial antiviral de los extractos de chiles y de los compuestos puros,  expresado como la concentración inhibitoria del 50 %  (CI50) en contra de los efectos citopáticos en células Vero infectadas con el virus. El índice de selectividad fue calculado como la relación de CC50 entreCI50.  El extracto de Pimiento mostró las más baja citotoxicidad (CC50= 9.82 ± 0.06 mg/mL) y la más alta  actividad antiviral (IC50= 0.56 ± 0.02 mg/mL), con el mayor índice de selectividad de 17.5. Los extractos de chile Ancho y Guajillo mostraron también una alta capacidad antiviral. El extracto de chile Habanero presentó la mayor citotoxicidad y el menor índice de selectividad. Los compuestos fenólicos contenidos en los extractos también mostraron actividad antiviral, lo que sugiere que pueden ser estos compuestos los responsables de la actividad antiviral de los chiles.Palabras clave: Capsicum spp, citotoxicidad, actividad antiviral, compuestos fenólicos.