Platelet toll-like receptors mediate thromboinflammatory responses in patients with essential thrombocythemia

Essential thrombocythemia (ET) is comprised among chronic myeloproliferative neoplasms (MPN) and is caused by driver mutations in JAK2, CALR and MPL, which lead to megakaryocyte proliferation and prominent thrombocytosis. Thrombosis remains the main cause of morbidity in ET and is driven by the interplay between blood cells, the endothelium, the clotting cascade and host-derived inflammatory mediators. Platelet activation plays a key role in the thrombotic predisposition, although the underlying mechanisms remain poorly defined. In addition to their role in hemostasis, platelets participate in innate immunity and inflammation owing to the expression of toll-like receptors (TLR), which recognize inflammatory signals, triggering platelet functional responses. Considering the impact of inflammation on ET procoagulant state, we assessed the contribution of TLR2 and TLR4 to platelet hemostatic and inflammatory properties in ET patients, by using Pam3CSK4 and lipopolysaccharide (LPS) as specific TLR2 and TLR4 ligands, respectively. TLR2 ligation induced increased surface translocation of α-granule-derived P-selectin and CD40L, which mediate platelet interaction with leukocytes and endothelial cells, respectively, and higher levels of dense granule-derived CD63 in patients, whereas PAC-1 binding was not increased and LPS had no effect on these platelet responses. Platelet-neutrophil aggregate formation was elevated in ET at baseline and after stimulation of both TLR2 and TLR4. In addition, ET patients displayed higher TLR2- and TLR4-triggered platelet secretion of the chemokine RANTES (CCL5), whereas von Willebrand factor release was not enhanced, revealing a differential releasate pattern for α-granule-stored inflammatory molecules. TLR-mediated hyperresponsiveness contrasted with impaired or preserved responses to classic platelet hemostatic agonists, such as TRAP-6 and thrombin. TLR2 and TLR4 expression on the platelet surface was normal, whereas phosphorylation of downstream effector ERK1/2 was higher in patients at baseline and after incubation with Pam3CSK4, which may partly explain the enhanced TLR2 response. In conclusion, exacerbated response to TLR stimulation may promote platelet activation in ET, boosting platelet/leukocyte/endothelial interactions and secretion of inflammatory mediators, overall reinforcing the thromboinflammatory state. These findings highlight the role of platelets as inflammatory sentinels in MPN prothrombotic scenario and provide additional evidence for the close intertwining between thrombosis and inflammation in this setting.Fil: Marin Oyarzún, Cecilia Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Glembotsky, Ana Claudia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Goette, Nora Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Lev, Paola Roxana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: de Luca, Geraldine. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Baroni Pietto, Maria Constanza. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Moiraghi, Beatriz. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital General de Agudos "Ramos Mejía"; ArgentinaFil: Castro Ríos, Miguel A.. Consultorios Hematológicos; ArgentinaFil: Vicente, Angeles. Hospital Alemán; ArgentinaFil: Marta, Rosana Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Schattner, Mirta Ana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Heller, Paula Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentin

Desialilación plaquetaria e influencia de los autoanticuerpos en la trombocitopenia del lupus eritematoso sistémico

En estudios previos demostramos que la apoptosis y activación plaquetaria junto con la inhibición en la formación de proplaquetas (FPP) contribuyen a la trombocitopenia en el lupus eritematoso sistémico (LES). En el presente estudio evaluamos la pérdida de ácido siálico inducida por plasma de LES como un posible mecanismo adicional que favorece la eliminación periférica de plaquetas en esta entidad y la participación de los autoanticuerpos anti-plaquetarios en la inhibición de la FPP. Se obtuvieron muestras de plasma de 25 pacientes LES sin (PNT) y con trombocitopenia (PT) y 25 controles (C) y muestras de plaquetas normales por centrifugación diferencial. Las plaquetas normales se incubaron con plasmas LES o controles y se evaluó la desialinización de glicoproteínas plaquetarias por citometría de flujo a través de la unión de RCA (Ricinus communis agglutinin I) y PNA (peanut agglutinin), lectinas con afinidad por galactosa que queda expuesta tras la pérdida de ácido siálico. Los plasmas de LES indujeron la desialilación de las plaquetas (p<0.01, test t) siendo mayor el efecto observado en presencia de plasmas PT. Para evaluar el efecto de los autoanticuerpos anti-plaquetarios en la inhibición de la FPP, se seleccionaron 3 plasmas LES que previamente demostraron un marcado efecto inhibitorio sobre la trombopoyesis y se incubaron con plaquetas normales para inducir la unión de los autoanticuerpos presentes en los plasmas de LES a sus blancos antigénicos en plaquetas normales. Luego se separaron las plaquetas para obtener el plasma libre de autoanticuerpos (inmunodepletado). Posteriormente, se cultivaron progenitores hematopoyéticos CD34+ obtenidos de sangre de cordón umbilical normal en medio libre de plasma, hasta obtener megacariocitos maduros. Al día 12 de cultivo se les adicionó en pocillos independientes 10% de plasma LES o el mismo plasma inmunodepletado y se evaluó la trombopoyesis al día 15, observándose reversión de la inhibición en presencia de los plasmas inmunodepletados, lo que demuestra el rol fundamental de los autoanticuerpos en este proceso.Considerando en conjunto tanto las alteraciones descriptas anteriormente (apoptosis y activación plaquetaria, inhibición de trombopoyesis) como la desialilación, estas anormalidades fueron más frecuentes en pacientes con PT que en PNT y dentro de los PT, en aquellos con mayor actividad de la enfermedad (SLEDAI) (Fisher exact test, **p<0.01).Nuestros resultados sugieren que los mecanismos de trombocitopenia son variados y pueden ser concomitantes en un mismo paciente, y que la incidencia de los mismos está asociada con mayor severidad de la enfermedad.Fil: Baroni Pietto, Maria Constanza. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Lev, Paola Roxana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Glembotsky, Ana Claudia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Collado, V.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Pisoni, C.. Centro de Educaciones Médicas e Investigación Clínica "Norberto Quirno"; ArgentinaFil: Gonzalez, J.. Gobierno de la Ciudad Autónoma de Buenos Aires. Hospital General de Agudos Carlos Durand; ArgentinaFil: Gomez, R.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; ArgentinaFil: Gomez, G.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Heller, Paula Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Goette, Nora Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Marta, Rosana Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaXIV Congreso Argentino de Hemostasia y Trombosis y V Curso Educacional de la ISTHbuenos airesArgentinaSociedad Argentina de Hemostasia y Trombosi

Pheno-genotyping of inherited thrombocytopenias: our experience in 50 families

Dada la heterogeneidad de las entidades comprendi- das en las trombocitopenias hereditarias y la escasez de marcadores distintivos, su diagnóstico constituye un verdadero desafío. El abordaje clásico se basa en la caracterización fenotípica seguida del estudio mo- lecular de genes candidatos, orientado según la sos- pecha clínica. La introducción de la secuenciación de nueva generación (NGS), que permite evaluar múltiples genes simultáneamente, constituye una al- ternativa diagnóstica de alto costo, siendo de acceso limitado en nuestro medio. Nos propusimos evaluar la utilidad del abordaje clásico en una cohorte conse- cutiva de 50 familias y describir la aplicación de NGS en un subgrupo de pacientes sin diagnóstico etioló- gico luego del enfoque clásico. Mediante el abordaje clásico se efectuó el diagnóstico en 27 (54%) familias. Posteriormente, 8 familias que quedaron sin diag- nóstico luego del algoritmo clásico, se evaluaron me- diante NGS, identificando el gen causal en 4 de ellas. Considerando ambos abordajes, el rédito diagnóstico fue 31/50 (62%) familias, con la siguiente distribu- ción: 38% desorden relacionado a MYH9, 8% síndro- me de Bernard-Soulier (4% clásico, 4% monoalélico), 4% síndrome de plaquetas grises, 4% desorden pla- quetario con predisposición a leucemia, 6% trom- bocitopenia relacionada a ANKRD26, 2% síndrome Wiskott-Aldrich. Los pacientes en los que no se pudo efectuar un diagnóstico etiológico presentaban trom- bocitopenia aislada leve, con aumento moderado del tamaño plaquetario y sangrado escaso.En conclusión, la aplicación de NGS permitió au- mentar el rédito diagnóstico, si bien sería necesa- rio ampliar la población estudiada para establecer el valor real de este abordaje en nuestro medio. Por lo tanto, el uso inicial del abordaje clásico, reserván- dose la aplicación posterior de NGS a los casos que permanecen sin diagnóstico luego de este enfoque, constituiría una alternativa útil en países con pocos recursos, apuntando a un diagnóstico adecuado que posibilite la pesquisa de complicaciones sindrómicas, oriente al tratamiento y consejo genético acertado.Diagnosis of inherited thrombocytopenias represents a true challenge owing to heterogeneity of these disorders and the absence of distinctive features in a substantial proportion of patients. Classical diagnostic approach is based on phenotypic characterization followed by molecular analysis of candidate genes guided by clinical suspicion. The introduction of next generation sequencing (NGS), that allows multiple genes analysis, is a high-cost alternative with limited access in our country. The aim of this work was to evaluate the utility of the classical approach in a consecutive cohort of 50 families and to describe the application of NGS in a subgroup of patients without an etiological diagnosis after the initial approach. Through the conventional approach, an etiologic diagnosis was made in 27 (54%) families. NGS was performed in 8 that remained without diagnosis after initial characterization, attaining a diagnosis in 4. Combining both approaches, the diagnostic yield was 31/50 (62%) families: 38% MYH9-related disorder, 8% Bernard-Soulier syndrome, 4% gray platelet syndrome, 4% familial platelet disorder with predisposition to leukemia, 6% ANKRD26-related thrombocytopenia, 2% Wiskott-Aldrich syndrome. Most patients without diagnosis had isolated macrothrombocytopenia and mild bleeding. NGS increased the diagnostic rate in this cohort, although it would be necessary to expand the population to establish its actual value in our setting. Therefore, the use of the classical approach and subsequent application of NGS in undiagnosed patients would represent a useful alternative in low-income countries, pointing out that a correct etiological diagnosis enables the detection of syndromic complications, appropriate treatment and adequate genetic counseling.Fil: Heller, Paula Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Goette, Nora Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Marin Oyarzún, Cecilia Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Baroni Pietto, Maria Constanza. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Ayala, Daniela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Altuna, Diana R.. Instituto Universidad Escuela de Medicina del Hospital Italiano; ArgentinaFil: Arrieta, Maria Elizabeth. Hospital Público Descentralizado Dr. Guillermo Rawson.; ArgentinaFil: Arbesú, Guillermo. Hospital Dr. Humberto Notti; ArgentinaFil: Basqueira, Ana L.. Hospital Privado Universitario de Cordoba.; ArgentinaFil: Bazack, Nora. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital General de Niños "Ricardo Gutiérrez"; ArgentinaFil: Bonacorso, Silvina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; ArgentinaFil: Brodsky, Andrés. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; ArgentinaFil: Castro Rios, Miguel. No especifíca;Fil: Cosentini, María L.. Hospital Materno Infantil Doctor Hector Quintana ; Gobierno de la Provincia de Jujuy;Fil: Donato, Hugo Sebastian. Hospital Municipal del Niño de San Justo ; Municipalidad de la Matanza (buenos Aires);Fil: Korin, Jorge D.. No especifíca;Fil: Gomez, Silvina. No especifíca;Fil: Guglielmone, Hugo. Sanatorio Allende; ArgentinaFil: Lagrotta, Pablo. Hospital Nacional Profesor Alejandro Posadas.; ArgentinaFil: Marti, Alejandra. Provincia de Buenos Aires. Ministerio de Salud. Hospital Alta Complejidad en Red El Cruce Dr. Néstor Carlos Kirchner Samic; ArgentinaFil: Negro, Fernando Javier. Sanatorio Sagrado Corazon; ArgentinaFil: Rapetti, María C.. Hospital Municipal del Niño de San Justo ; Municipalidad de la Matanza (buenos Aires);Fil: Rosso, Diego. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital General de Niños Pedro Elizalde (ex Casa Cuna); Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Ponzinibbio, Carlos. Hospital Italiano de La Plata; ArgentinaFil: Veber, Ernesto. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital General de Niños Pedro Elizalde (ex Casa Cuna); ArgentinaFil: Zerga, Marta Elisa. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; ArgentinaFil: Molinas, Felisa Concepción. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Savoia, Anna. Instituto para la Salud Materna e Infancia; Italia. Università degli Studi di Trieste; ItaliaFil: Pecci, Alessandro. Universita Degli Studi Di Pavia; ItaliaFil: Marta, Rosana Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Glembotsky, Ana Claudia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentin

Toll-like receptor expression and functional behavior in platelets from Systemic Lupus Erythematosus patients

Abstract Background: Multiple blood cell abnormalities participate in the development of inflammation in systemic lupus erythematosus (SLE). Although platelets were pointed as one of these contributors through the release of their content during activation, there is scarce specific data about their role as immune players in SLE. Materials and Methods: Thirteen SLE patients were included. Toll-like receptor (TLR) 2, 4 and 9 were evaluated in resting platelets, while platelet-activation markers (PAC-1 binding, P-selectin, CD63 and CD40 ligand -L) and platelet-leukocyte aggregates were measured before and after specific TLR stimulation, by flow cytometry. Soluble CD40L and von Willebrand factor (vWf) release from stimulated platelets was measured by ELISA. Results: In resting conditions, TLR levels were normally expressed in SLE platelets. Platelet surface activation markers, soluble CD40L and vWf release were normal at baseline and after TLR stimulation. In contrast to normal samples behavior, platelet-monocyte aggregates in SLE were elevated in resting conditions and barely increased after TLR stimulation, while basal and stimulated platelet-neutrophil and platelet-lymphocyte aggregates in SLE samples were normal. C-reactive protein levels positively correlated with platelet-monocyte aggregates, at baseline and after stimulation with the TLR-2 agonist PAM3CSK4, suggesting these complexes could reflect the inflammatory activity in SLE. In this cohort 12 from 13 patients were under hydroxychloroquine (HCQ) treatment, a known inhibitor of endosomal activity and a potential inhibitor of platelet activation. The fact that SLE platelets responded normally to TLR agonists suggest that, in spite of this treatment, they are able to respond to increased damage-associated molecular patters (DAMPs) present in circulation from SLE patients. Interestingly, increased plasmatic levels of High Mobility Group Box 1 (HMGB1), a known DAMP, correlated with vWf release from TLR-stimulated platelets, suggesting HMGB1 could be also released by platelets, generating a positive platelet activation feedback loop that contribute to inflammation. Conclusion: This study shows normal platelet TLR expression and function, increased circulating platelet-monocyte aggregates and a direct correlation between plasmatic HMGB1 levels and platelet vWf release after TLR2 stimulation. This platelet behavior in a group of patients who are under HCQ, suggests platelets participate in the inflammatory state of SLE.Fil: Baroni Pietto, Maria Constanza. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Glembotsky, Ana Claudia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Lev, Paola Roxana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Marin Oyarzún, Cecilia Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: de Luca, Geraldine. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Charó, Nancy Lorena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Cellucci, Adela Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Heller, Paula Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Goette, Nora Paula. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Gomez, Graciela Noemi. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Marta, Rosana Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentin

Pathogenic mechanisms contributing to thrombocytopenia in patients with systemic lupus erythematosus

Systemic lupus erythematosus (SLE) is an autoimmune condition developing thrombocytopenia in about 10?15% of cases, however, mechanisms leading to low platelet count were not deeply investigated in this illness. Here we studied possible causes of thrombocytopenia, including different mechanisms of platelet clearance and impairment in platelet production. Twenty-five SLE patients with and without thrombocytopenia were included. Platelet apoptosis, assessed by measurement of loss of mitochondrial membrane potential, active caspase 3 and phosphatidylserine exposure, was found to increase in thrombocytopenic patients. Plasma from 67% SLE patients (thrombocytopenic and non-thrombocytopenic) induced loss of sialic acid (Ricinus communis agglutinin I and/or Peanut agglutinin binding) from normal platelet glycoproteins. Concerning platelet production, SLE plasma increased megakaryopoiesis (evaluated using normal human cord blood CD34+ hematopoietic progenitors), but inhibited thrombopoiesis (proplatelet count). Anti-platelet autoantibody depletion from SLE plasma reverted this inhibition. Overall, abnormalities were more frequently observed in thrombocytopenic than non-thrombocytopenic SLE patients and in those with active disease (SLEDAI≥5). In conclusion, platelet clearance due to apoptosis and desialylation, and impaired platelet production mainly due to inhibition of thrombopoiesis, could be relevant mechanisms leading to thrombocytopenia in SLE. These findings could provide a rational basis for the choice of proper therapies to correct platelet counts in these patients.Fil: Baroni Pietto, Maria Constanza. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari; ArgentinaFil: Lev, Paola Roxana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari; ArgentinaFil: Glembotsky, Ana Claudia. Universidad de Buenos Aires. Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Marín Oyarzún, Cecilia P.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari; ArgentinaFil: Gomez, Graciela. Universidad de Buenos Aires. Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari. Departamento de Reumatología; ArgentinaFil: Collado, Victoria. Universidad de Buenos Aires. Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari. Departamento de Reumatología; ArgentinaFil: Pisoni, Cecilia. Centro de Educaciones Médicas e Investigación Clínica "Norberto Quirno"; ArgentinaFil: Gomez, Ramiro A.. Universidad de Buenos Aires. Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari. Departamento de Reumatología; ArgentinaFil: Grodzielski, Matías. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari; ArgentinaFil: Gonzalez, Jacqueline. Gobierno de la Ciudad Autónoma de Buenos Aires. Hospital General de Agudos Carlos Durand; ArgentinaFil: Mariño, Karina Valeria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Heller, Paula Graciela. Universidad de Buenos Aires. Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Goette, Nora Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Marta, Rosana Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari; Argentin