Metabolomic and high-throughput sequencing analysis—modern approach for the assessment of biodeterioration of materials from historic buildings

Preservation of cultural heritage is of paramount importance worldwide. Microbial colonization of construction materials, such as wood, brick, mortar and stone in historic buildings can lead to severe deterioration. The aim of the present study was to give modern insight into the phylogenetic diversity and activated metabolic pathways of microbial communities colonized historic objects located in the former Auschwitz II-Birkenau concentration and extermination camp in Oświęcim, Poland. For this purpose we combined molecular, microscopic and chemical methods. Selected specimens were examined using Field Emission Scanning Electron Microscopy (FESEM), metabolomic analysis and high-throughput Illumina sequencing. FESEM imaging revealed the presence of complex microbial communities comprising diatoms, fungi and bacteria, mainly cyanobacteria and actinobacteria, on sample surfaces. Microbial diversity of brick specimens appeared higher than that of the wood and was dominated by algae and cyanobacteria, while wood was mainly colonized by fungi. DNA sequences documented the presence of 15 bacterial phyla representing 99 genera including Halomonas, Halorhodospira, Salinisphaera, Salinibacterium, Rubrobacter, Streptomyces, Arthrobacter and 9 fungal classes represented by 113 genera including Cladosporium, Acremonium, Alternaria, Engyodontium, Penicillium, Rhizopus and Aureobasidium. Most of the identified sequences were characteristic of organisms implicated in deterioration of wood and brick. Metabolomic data indicated the activation of numerous metabolic pathways, including those regulating the production of primary and secondary metabolites, for example, metabolites associated with the production of antibiotics, organic acids and deterioration of organic compounds. The study demonstrated that a combination of electron microscopy imaging with metabolomic and genomic techniques allows to link the phylogenetic information and metabolic profiles of microbial communities and to shed new light on biodeterioration processes

Rapid continuous microwave-assisted synthesis of silver nanoparticles to achieve very high productivity and full yield: from mechanistic study to optimal fabrication strategy

Systematic studies of silver nanoparticle synthesis in a continuous-flow single-mode microwave reactor using polyol process were performed, revealing that the synthesis is exceptionally effective to give very small metal particles at full reaction yield and very high productivity. Inlet concentration of silver nitrate or silver acetate, applied as metal precursors, varied between 10 and 50 mM, and flow rates ranged from 0.635 to 2.5 dm3/h, to give 3–24 s reaction time. Owing to its much higher reactivity, silver acetate was shown to be far superior substrate for the synthesis of small (10–20 nm) spherical silver nanoparticles within a few seconds. Its restricted solubility in ethylene glycol, applied as the solvent and reducing agent, appeared to be vital for effective separation of the stage of particle growth from its nucleation to enable rapid synthesis of small particles in a highly loaded system. This was not possible to obtain using silver nitrate. All the observations could perfectly be explained by a classical LaMer–Dinegar model of NPs’ formation, but taking into account also nonisothermal character of the continuous-flow process and acetate dissolution in the reaction system. The performed studies indicate an optimal strategy for the high-yield fabrication of metal particles using polyol method

Assessment of value of mould contamination of building materials in the definited microclimate condition

Artykuł przedstawia badania wpływu określonych warunków mikroklimatycznych na stopień zapleśnienia betonu komórkowego, płyty kartonowo-gipsowej, płyty kartonowo-gipsowej pokrytej farbą emulsyjną. Badano 2 warianty zmian mikroklimatycznych mających często miejsce w praktyce tj. przeniesienie materiałów budowlanych porażonych pleśniami z warunków wilgotnych do warunków suchych. W drugim wariancie przeniesiono materiały bez widocznych objawów zapleśnienia do pomieszczeń nawilżanych i ogrzewanych. Stopień porażenia pleśniami oceniany był metodą oznaczania zawartości ergosterolu. Stwierdzono, iż poziom porażenia pleśniami jest zależny od warunków przechowywania materiałów budowlanych, od rodzaju materiału (najwyższe zapleśnienie wykazywał beton komórkowy). Stwierdzono, iż naturalne suszenie zapleśniałych materiałów budowlanych w pomieszczeniach podgrzewanych nie wpływa hamująco na rozpoczęty wzrost pleśni. W przypadku zmiany mikroklimatu na bardziej wilgotny następuje stymulacja wzrostu grzybni pleśni. Stwierdzono, iż metoda oznaczania ergosterolu odzwierciedla faktyczny stan porażenia pleśniami materiału budowlanego i może być stosowana w praktyce laboratoryjnej do oceny porażenia pleśniami tych materiałów.The paper presents the study of influence definite climate conditions on degree of mould contamination of cellular concrete, gypsum-carton board and gypsum-carton board covered with emulsion paint. Investigated 2 variants of microclimatic changes having often place in practice i.e. carriage of moulds contaminated building materials from moist conditions to dry conditions. In second variant materials without visible moulds growth transferred to rooms moistened and heated. Degree of moulds contamination was estimated on the ground of ergosterol contents. Ascertained, that level of moulds contamination depends on conditions of storage of building materials, kind of materiał (highest contamination' s level showed cell u lar concrete ). Also ascertained, that natura! desiccation of moulds contaminated building materials in rooms heated up does not inhibit of commencement moulds growth. In chance of change of microclimate on more moist follows stimulation of growth of fungal mycelium. Method of determination of ergosterol shows factual state of moulds contamination of building materials and can be used in laboratory practice to estimation moulds contamination of these materials

The aplication of ergosterol determination method to measure of fungal contamination in air

Celem pracy była ocena skażenia grzybami pleśniowymi powietrza atmosferycznego oraz powietrza w pomieszczeniach użytkowych, szpitalnych i przemysłu farmaceutycznego. Wykazano wysoki poziom zanieczyszczenia powietrza atmosferycznego w Łodzi, również powietrza w pomieszczeniach szkolnych na uczelni, pomieszczeniach mieszkalnych oraz powietrza w gabinecie zabiegowym w szpitalu (powyżej 300 jtk/m³). W powietrzu zakładu farmaceutycznego oraz w pozostałych pomieszczeniach w szpitalu zanotowano niską liczbę pleśni. Poziom zanieczyszczenia pleśniami badano 3 metodami: sedymentacyjną Kocha, zderzeniową oraz metodą oznaczania ergosterolu. Oznaczano korelację między wynikami uzyskanymi z tych metod. Porównując metodę oznaczania ergosterolu oraz metodę zderzeniową wykazano, iż ilość ergosterolu [μg/m³] jest proporcjonalna do ilości grzybów [jtk/m³] mierzonych metodą zderzeniową. Zależność opisano funkcją wykładniczą. Ma to istotne znaczenie, ponieważ ocenę skażenia mikrobiologicznego powietrza można wykonywać przy pomocy szybkiej, metody chemicznej - oznaczania ergosterolu zamiast metodami hodowlanymi.Moulds contamination of air, indoor air in dwellings, air in hospital and pharmaceutical industrial rooms was researched. Ascertained, high level of mould contamination of atmospheric air in Lodz, indoor air in university rooms, in dwelling-house and out-patients department in hospital (above 300 CFU/m³ of air). The lower number of moulds was noted in the pharmaceutical industrial rooms and another rooms in hospital. The moulds contamination was estimated by three methods: traditional Koch plate method, air sampler method and ergosterol measurement method. Also the correlation between results obtained with these methods was estimated. Comparing ergosterol measurement method and air sampler method, ascertained, that quantity of ergosterol [μg/m³] is proportional to quantities of moulds [CFU/m³] measured by air sampler method. This dependence described by an exponential equation. It has essential meaning, because estimation of moulds contamination in the air can be execute by quicker chemical method measuring of ergosterol content, instead of plate methods

Enzymatic capability of moulds overgrown building materials

Zewnątrzkomórkowe enzymy grzybów strzępkowych mają duże znaczenie w procesach biodegradacji i niszczenia materiałów budowlanych. W pracy zbadano tworzenie enzymów zewnątrzkomórkowych przez 5 gatunków pleśni na podłożu standardowym z dodatkiem różnych materiałów budowlanych lub ich składników. Enzymy oznaczano przy pomocy testów API-Zym. Zaobserwowano istotny wpływ środowiska budowlanego na tworzenie enzymów przez pleśnie. Stwierdzono, iż na każdym podłożu z dodatkiem materiałów budowlanych wszystkie pleśnie tworzyły dwa enzymy: fosfatazę kwaśną i naftaleno-AS-Bl-fosfohydrolazę, czego nie zaobserwowano na podłożu kontrolnym, bez dodatku materiałów budowlanych. Ponadto poszczególne materiały budowlane lub ich składniki stymulowały tworzenie odpowiednich enzymów np. dodatek celulozy i tapety do pożywki uaktywnił tworzenie enzymów amylolitycznych takich jak β-glukozydaza, β-galaktozydaza, N-acetylo- β-glukozoaminidaza. Po trzykrotnym pasażowaniu na tapecie i następnie przeniesieniu na podłoże kontrolne stwierdzono zanik tworzenia niektórych enzymów w porównaniu ze szczepem nie pasażowanym. Wszystkie gatunki tworzyły znacznie mniej enzymów i w mniejszych ilościach, nawet o 60% mniej.Extracellular enzymes of filamentous fungi have important meaning in biodegradation and decays of building materials. In this study extracellular enzymes production by 5 moulds species growing on standard medium (Czapek Dox) with addition of different building materials or thier components was examined. Enzymes were determined by API-Zym test. Essential influence of building materials environment onto enzymes production by moulds was observed. It has been found out, that all moulds species produced 2 enzymes - acid phosphatase and naphthol-AS-BIphosphohydrolase on the medium with addition of building substrates. These enzymes were absent on standard medium without addition of building materials. Moreover, individual building materials or them components stimulated production of suitable enzymes e.g. production of amylolytic enzymes such as β-glucosidase, β-galactosidase, N-acetyl- β-glucosaminidase was activated on the medium with addition of cellulose or wallpaper. After triple cultures on wallpaper and then transferred onto standard medium, moulds loss of ability of production of some enzymes. All species produced considerably less enzymes and in smaller quantities, even about 60% less

Comparison of two methods of estimation of moulds contamination in herbs and spices

W pracy określono stan zanieczyszczenia grzybami strzępkowymi ziół i przypraw ziołowych metodą hodowlaną oraz metodą oznaczania ergosterolu. Wykonano również diagnostykę pleśni. Analiza stopnia zanieczyszczenia wskazała na wysoki poziom zagrzybienia. W metodzie hodowlanej 76% analizowanych ziół i przypraw ziołowych wykazywało wysoki poziom zapleśnienia, powyżej wartości 5x l 04 jtk/g, 16% prób wykazywało poziom średni od I 03 do 5x l 04 jtk/g, a tylko 8% niską zawartość pleśni. Najbardziej zanieczyszczony pleśniami był estragon, kłącze tataraku, kwiatostan lipy, pieprz czarny, imbir, papryka. Stwierdzono, iż ergosterol może być bardzo dobrym i szybkim wskaźnikiem zanieczyszczenia ziół pleśniami. Zawartość ergosterolu w 48% prób była na poziomie wysokim, również w 48% prób stwierdzono poziom ergosterolu kwalifikujący zioła i przyprawy jako zanieczyszczone na poziomie średnim, w 4% prób stwierdzono niską zawartość ergosterolu. Porównując dwie omawiane metody stwierdzono, iż istnieje zgodność metod w 76%. Stan zanieczyszczenia pleśniami ziół i przypraw ziołowych budzi niepokój, nie tylko pod względem ilości, ale również rodzaju obecnej mikroflory. Stwierdzono bowiem występowanie grzybów strzępkowych wytwarzających mykotoksyny: Aspergillus flavus, Aspergillus versicolor, Penicillium expansum, Fusarium moniliforme i Alternaria alternata.The study presented estimation of moulds contamination of herbs and spices by dilution plate method and ergosterol method as well as identification of moulds had been done. Analysis of moulds in herbs and spices showed high level contamination. On the basis of dilution plate method, had been found out, that 76% of analysed herbs and herbs spices showed high moulds Jevel, above value 5xI04 cfu/g , 16% of tested herbs and spices showed average level of contamination, between 103 do 5xl04 cfu/g, and only 8% of herbs had low content of moulds. Tarragon, rhizome sweet flag, inflorescence lindens, black pepper, ginger, paprika were most contaminated. It was confirmed, that ergosterol could be the best and fast indicator of moulds contamination in herbs and spices. In 48% of tested herbs was high level of ergosterol, in 48% of tested herbs ergosterol content showed average level of contamination, in 4% of herbs had low ergosterol content. It was confirmed, that agreement of comparing methods was in 76%. Contamination of herbs and herbs spices is anxiety, not only under regard of quantity, but also kind of present microflora. It was affirmed of occurrence of toxigenic moulds producing mycotoxins: Aspergillus flavus, Aspergillus versicolor, Penicillium expansum, Fusarium moniliforme and Alternaria alternata