Modulations biochimiques de l'activité des canaux K[indice supérieur +] de type GK[indice inférieur Ca] du sarcolemme des muscles lisses des voies respiratoires par le monoxyde d'azote

Le but de cette étude était d'élucider les mécanismes biochimiques qui régulent les canaux K\sp+ de type (GK\rm\sb{Ca}), impliqués dans le contrôle du tonus des muscles lisses des voies respiratoires (MLVR). Des mesures pharmacologiques ont permis de démontrer que le 3-morpholino-sydnonimine (SIN-1) relaxe des fragments de bronches de rat précontractées par 0.2 $\mu$M carbachol, de façon concentration-dépendante. Par contre, lorsque la contribution de la conductance potassique (GK) est éliminée, en présence de 135 mM KCl dans le milieu extracellulaire ou lorsque la guanylate cyclase soluble (GCs) est inhibée par 10 $\mu$M de bleu de méthylène (BM), l'effet relaxant du SIN-1 est moins efficace, ce qui suggère que le monoxyde d'azote (NO\sp\cdot)\sp* pourrait activer plusieurs effecteurs pour induire son effet relaxant via deux voies: une voie dépendante du GMPc et une autre qui serait indépendante de ce messager. Un autre objectif envisagé était de démontrer que le NO avait un effet relaxant indépendant du GMPc, et qu'il pourrait être dû, en partie, à une activation directe des GK\rm\sb{Ca}. Les tests pharmacologiques montrent que 100 nM de charybdotoxine (ChTX), un inhibiteur spécifique des GK\rm\sb{Ca}, changent la sensibilité des MLVR au SIN-1 lorsque la GCs est inhibée, ce qui indique que les GK\rm\sb{Ca} pourraient être activées directement par le NO. Ces résultats ont été confirmés au niveau moléculaire, suite à la reconstitution des canaux dans les BLP. Le SIN-1 (NO), mais pas ses métabolites, active les GK\rm\sb{Ca} avec une EC\sb{50} évaluée à 30 $\mu$M SIN-1. Afin de vérifier le mode d'activation direct des GK\rm\sb{Ca} par le NO, des expériences ont été réalisées en présence de 5 mM DTT, un agent réducteur qui empêche le NO d'activer les GK\rm\sb{Ca}, seulement lorsqu'il est ajouté du côté intracytoplasmique (trans) du canal. Ces résultats tendent à prouver que l'activation directe des GK\rm\sb{Ca} des MLVR, résulterait d'une interaction du NO avec les groupements des chaînes latérales d'acides aminés, situés sur les boucles intracellulaires de la sous-unité $\alpha,$ selon un mécanisme de nitrosylation**. En revanche, le DTT n'est plus capable de renverser l'effet du NO, ce qui suggère l'implication de d'autres groupements autres que les SH avec lesquels interagit le NO. En conclusion, cette étude a permis de montrer, pour la première fois, que le NO pourrait augmenter la P\rm\sb{o} des canaux K\sp+ de type GK\rm\sb{Ca} des MLVR par un mécanisme indirect (phosphorylation) catalysée par la PKG en présence du GMPc et par une interaction directe (nitrosylation) avec la sous-unité $\alpha$ du canal, sans altérer la conductance ni la sensibilité du canal au Ca\sp{2+} et au voltage, ce qui fait de ce type de canal un effecteur sensible et efficace dans le contrôle de la relaxation des MLVR Le NO dans un milieu biologique se trouve dans un état radicalaire NO actif. \sp{**}nitrosylation est un terme qui désigne l'interaction covalente entre le NO et les groupements SH des protéines. [Symboles non conformes

Purification et caractérisation biochimique des snake-like tubules (SLT) du pancréas du rat

Les pieux moulés dans le roc font partie des fondations profondes. Ce type de fondations voit son utilisation de plus en plus répandue pour des raisons techniques et économiques. Au cours des dernières années, leur utilisation s'est intensifiée en particulier dans les grandes villes où l'on commence à manquer d'espace. Cependant, les techniques de dimensionnement sont surtout empiriques, généralement peu perfectionnées ou basées sur les résultats d'essais de chargement de pieux en place. Ce type d'essais a le désavantage d'être très long et coûteux. Dans le cadre de ce projet, on essayera d'étudier quelques aspects qui mèneront à faire plus de confiance en ces éléments structuraux qui en pratique sont toujours surdimensionnés. L'idée générale retenue dans cette étude consistait à examiner le lien qui pourrait exister entre la résistance au frottement latéral et la résistance au cisaillement de joints modélisant une partie élémentaire de l'interface pieu/milieu encaissant. Un programme expérimental composé de quatre volets principaux a été entrepris en laboratoire pour étudier l'influence des paramètres d'étude dont on cite notamment: le type de béton, le diamètre des pieux et la rugosité de l'emboîture. Ce programme comporte des essais de chargement de pieux-modèles, des essais de cisaillement direct, des essais dilatométriques et des essais de caractérisation physico-mécaniques des matériaux utilisés. Notre recherche a vu tout d'abord la réalisation d'une étude préliminaire incluant des essais de chargement sur des pieux-modèles à échelle réduite et des essais de cisaillement de joints béton/roc. Les résultats de cette étude ont fait l'objet d'une publication dans la Revue canadienne de géotechnique (article joint en Annexe E. l). Aussi, cette première étude a montré que la résistance au frottement latéral des pieux moulés dans le roc ne dépend pas seulement de la résistance en compression du matériau le plus faible, du pieu ou du roc encaissant, mais aussi des rigidités et résistances relatives du roc encaissant et du pieu et également de la géométrie du pieu. En particulier, les propriétés de déformabilité du roc encaissant jouent un rôle important sur la résistance au cisaillement. Ces résultats furent très concluants et nous ont, alors, encouragé à étendre notre programme de recherche dans le cadre d'une deuxième phase. La deuxième phase de l'étude comprenait, quant à elle, des essais de chargement sur des pieux-modèles à grande échelle, des essais de cisaillement sur des joints béton/roc et des essais dilatométriques dans des modèles analogues à ceux utilisés pour les pieux. Un cylindre en acier (de diamètre intérieur égal à 762 mm et d'épaisseur de 6,35 mm) a été utilisé pour confiner les pieux-modèles lors des essais de chargement (chargement en compression). Aussi, des distributions de contraintes dans les modèles de pieux et d'essais dilatométriques ont pu être relevées grâce à une instrumentation adéquate à l'aide de jauges de déformation. Trois paramètres d'étude principaux ont été considérés dans cette deuxième phase: l'angle d'incidence des aspérités triangulaires régulières constituant la paroi rugueuse de l'emboîture du pieu (7 et 14°); le type de béton de construction du pieu (Béton Ordinaire (BO) et Béton à Haute Résistance (BHR)); et 3) le diamètre du pieu (152 et 229 mm). Il a été en particulier montré que la capacité portante des pieux-modèles à grande échelle augmente de 93% en passant d'une emboîture lisse à une emboîture rugueuse ayant un angle d'incidence des aspérités de 7°. Aussi, en passant d'un béton ordinaire à un béton à haute résistance, les pieux ayant un diamètre de 152 mm et un angle d'incidence des aspérités de 7° témoignent d'une croissance de la capacité portante de 13%. L'instrumentation du milieu encaissant des pieux montre que la rigidité normale ne reste pas constante durant leur chargement. Par conséquent, le cisaillement direct des joints béton/roc modélisant le comportement de l'interface pieu/milieu encaissant devrait plutôt se faire sous condition de rigidité normale variable. Le modèle de LADANYI et ARCHAMBAULT [1970] a prouvé son efficacité dans la prédiction de la résistance au cisaillement des joints béton/roc ainsi que du comportement charge-déplacement des pieux-modèles à grande échelle. Quant aux prédictions du modèle de JOHNSTON et LAM [1989], on a remarqué qu'elles étaient toujours supérieures aux valeurs expérimentales de la résistance au cisaillement. Les essais dilatométriques réalisés ont montré que ce type d'essais simule fidèlement le comportement radial des milieux encaissants de pieux. Une étude comparant les résultats expérimentaux à ceux prédits par les relations empiriques a montré que la majorité de ces relations sous­ estiment la valeur de la résistance au frottement latéral. Enfin, la réalisation de ce travail de recherche a nécessité la conception et la fabrication d'un nouvel appareil de cisaillement afin de pouvoir effectuer les essais de cisaillement direct sous condition de rigidité normale contrôlée. Une des particularités intéressantes de cet appareil, qui a fait l'objet d'une publication dans la revue ASTM Geotechnical Testing Journal (article joint en Annexe E.2), réside dans sa possibilité d'installation et d'utilisation sur des presses de chargement conventionnelles (ex., presse TS). Ceci permet alors de profiter de tous les avantages en terme de contrôle qu'offre ce type de presses (chargements statiques: monotone ou fluage, chargements cycliques, taux de chargement constant ou variable, etc.)

Modulations biochimiques de l'activité des canaux K[indice supérieur +] de type GK[indice inférieur Ca] du sarcolemme des muscles lisses des voies respiratoires par le monoxyde d'azote

Le but de cette étude était d'élucider les mécanismes biochimiques qui régulent les canaux K\sp+ de type (GK\rm\sb{Ca}), impliqués dans le contrôle du tonus des muscles lisses des voies respiratoires (MLVR). Des mesures pharmacologiques ont permis de démontrer que le 3-morpholino-sydnonimine (SIN-1) relaxe des fragments de bronches de rat précontractées par 0.2 $\mu$M carbachol, de façon concentration-dépendante. Par contre, lorsque la contribution de la conductance potassique (GK) est éliminée, en présence de 135 mM KCl dans le milieu extracellulaire ou lorsque la guanylate cyclase soluble (GCs) est inhibée par 10 $\mu$M de bleu de méthylène (BM), l'effet relaxant du SIN-1 est moins efficace, ce qui suggère que le monoxyde d'azote (NO\sp\cdot)\sp* pourrait activer plusieurs effecteurs pour induire son effet relaxant via deux voies: une voie dépendante du GMPc et une autre qui serait indépendante de ce messager. Un autre objectif envisagé était de démontrer que le NO avait un effet relaxant indépendant du GMPc, et qu'il pourrait être dû, en partie, à une activation directe des GK\rm\sb{Ca}. Les tests pharmacologiques montrent que 100 nM de charybdotoxine (ChTX), un inhibiteur spécifique des GK\rm\sb{Ca}, changent la sensibilité des MLVR au SIN-1 lorsque la GCs est inhibée, ce qui indique que les GK\rm\sb{Ca} pourraient être activées directement par le NO. Ces résultats ont été confirmés au niveau moléculaire, suite à la reconstitution des canaux dans les BLP. Le SIN-1 (NO), mais pas ses métabolites, active les GK\rm\sb{Ca} avec une EC\sb{50} évaluée à 30 $\mu$M SIN-1. Afin de vérifier le mode d'activation direct des GK\rm\sb{Ca} par le NO, des expériences ont été réalisées en présence de 5 mM DTT, un agent réducteur qui empêche le NO d'activer les GK\rm\sb{Ca}, seulement lorsqu'il est ajouté du côté intracytoplasmique (trans) du canal. Ces résultats tendent à prouver que l'activation directe des GK\rm\sb{Ca} des MLVR, résulterait d'une interaction du NO avec les groupements des chaînes latérales d'acides aminés, situés sur les boucles intracellulaires de la sous-unité $\alpha,$ selon un mécanisme de nitrosylation**. En revanche, le DTT n'est plus capable de renverser l'effet du NO, ce qui suggère l'implication de d'autres groupements autres que les SH avec lesquels interagit le NO. En conclusion, cette étude a permis de montrer, pour la première fois, que le NO pourrait augmenter la P\rm\sb{o} des canaux K\sp+ de type GK\rm\sb{Ca} des MLVR par un mécanisme indirect (phosphorylation) catalysée par la PKG en présence du GMPc et par une interaction directe (nitrosylation) avec la sous-unité $\alpha$ du canal, sans altérer la conductance ni la sensibilité du canal au Ca\sp{2+} et au voltage, ce qui fait de ce type de canal un effecteur sensible et efficace dans le contrôle de la relaxation des MLVR Le NO dans un milieu biologique se trouve dans un état radicalaire NO actif. \sp{**}nitrosylation est un terme qui désigne l'interaction covalente entre le NO et les groupements SH des protéines. [Symboles non conformes