Efecto del Tributiltin Cloruro sobre la V-ATPasa Presente en el Músculo Liso Traqueal

En este trabajo se demuestra que la actividad de V-ATPasa presente en fracciones de membrana plasmática del músculo liso de las vías aéreas es inhibida de manera específica y a baja dosis por el cloruro de tributil tin (TBT). Este compuesto representa una de las sustancias tóxicas, de gran utilización en la industria y se ha demostrado que puede afectar a las células y tejidos de humanos con una potencialidad para producir enfermedades.AbstractIn this work, it is demonstrated that the V-ATPase activity presents in a plasma membrane fraction from tracheal smooth muscle is specifically inhibited by tributyl tin chloride (TBT). This compound belongs to a great family of toxic pollutants with broad use in modern industry and they can affect humans tissues and cells and produce diseases

G-Protein-Dependent Antagonists Binding In M3 mAchR from Tracheal Smooth Muscle

Los subtipos M3 y M2 del mAchR fueron localizados en fracciones de membranas plasmáticas de músculo liso traqueal de bovino (MLTB). Los mAchRs nativos de MLTB fueron estudiados usando enlazamiento de [3H]QNB. La hetereogeneidad del receptor fue expresada para agonistas y antagonistas muscarínicos siendo los estados de alta afinidad sensibles a GTPS. Mostramos que los efectos de GTPgS parecen ser mediados por proteínas Gi/o sensibles a PTX. Se detectó la hetereogeneidad del mAchR hacia 4-DAMP (M3) y pirenzepina (M1). Sin embargo, los antagonistas subtipo M2 como methoctramina y AF-DX 116 no mostraron tales respuestas en la presencia o ausencia de GTPS. A través de la alquilación con 4-DAMP del subtipo M3 del mAchR, prevaleció el subtipo M2 el cual exhibió un enlazamiento dependiente de GTPS parecido a un agonista mientras el enlazamiento de los antagonistas fue insensible al GTPgS. Por lo anterior, la heterogeneidad a antagonistas del receptor descrita aquí es debida al subtipo M3 del mAchR, el cual muestra dos estados de afinidad siendo uno regulado por proteínas Gi/o.AbstractThe M3 and M2 mAchR subtypes were located in plasma membranes fractions from bovine tracheal smooth muscle (BTSM). Native mAchRs from BTSM were studied by using [3H]QNB binding. Receptor heterogeneity was expressed for muscarinic agonists and antagonists being the high affinity states sensitive to GTPS. We showed that GTPS effects seem to be mediated by PTX sensitive Gi/o proteins. Antagonist mAchR heterogeneity towards 4-DAMP (M3) and pirenzepine (M1) was detected. However, M2 antagonists as methoctramine and AF-DX 116 did not show such responses either in the presence or absence of GTPS. Through 4-DAMP alkylation of the M3 mAchR subtype, a M2 subtype prevailed, which exhibits GTPS-dependent agonist binding whereas antagonist binding was GTPS-insensitive. Thus, antagonists binding receptor heterogeneity here described is due to the M3 mAchR subtype showing two affinity states, one being regulated by Gi/o-proteins