Protein Phosphatase 1 Beta is Modulated by Chronic Hypoxia and Involved in the Angiogenic Endothelial Cell Migration

Background/Aim: Endothelial cell migration is required for physiological angiogenesis, but also contributes to various pathological conditions, including tumour vascularization. The mRNA expression of PP1cβ, the beta isoform of the catalytic PP1 subunit, was shown to be upregulated in chronic hypoxia. Since hypoxia is a major regulator of angiogenesis, the potential role of PP1cβ in angiogenesis was investigated. Methods: We examined PP1cβ protein level in pediatric heart following chronic hypoxia and found PP1cβ upregulation in cyanotic compared with acyanotic myocardium. By treating HUVEC cells with hypoxia mimicking agent, PP1cβ protein level increased with maximum at 8 hours. The effect of PP1cβ pharmacological inhibition, knockdown and overexpression, on endothelial cell migration and morphogenesis, was examined using in vitro wound healing scratch assay and endothelial tube formation assay. The PP1cβ knockdown effects on F-actin reorganization (phalloidin staining), focal adhesion formation (vinculin) and focal adhesion kinases (FAK) activation, were evaluated by immunocytochemical staining and immunoblotting with specific antibodies. Results: PP1cβ knockdown significantly reduces endothelial cell migration, but does not have any significant effect on endothelial tube formation. Endothelial cell migration in the knockdown group is restored to the control level upon consecutive transfection with PP1cβ cDNA. PP1cβ overexpression does not significantly affect endothelial cell migration. Furthermore, PP1cβ knockdown induces profound cytoskeletal reorganization, loss of focal adhesion sites and impairment of focal adhesion kinases (FAK) activation. Conclusions: PP1cβ is regulator of endothelial cell migration, which is critical in the angiogenic process. PP1cβ inhibition reduces endothelial cell migration through focal adhesion turnover and actin polymerization pathways

Efecto de la variedad y el momento de fertilización sobre la producción y calidad del forraje de verdeos de invierno

En el otoño de 2000 se estableció un ensayo de verdeos de invierno en siembra directa con cuatro cultivares de avena y centeno, aplicando 40 Kg/ha de N en Zadocks 12 (NI), después de un primer pastoreo (N2) y después de un segundo pastoreo (N3). Se utilizó un diseño de bloques al azar y medidas repetidas en el tiempo, con 3 repeticiones y parcelas de 25 m2. Se muestreo mensualmente el suelo por nitratos, densidad aparente y contenido de agua, en intervalos de 0 a 20, 20 a 40, y 40 a 100 cm de profundidad. Se realizaron tres cortes de forraje coincidentes con los meses de mayo, julio y septiembre. En cada uno de ellos se extrajo material de una superficie de 0,5 m2 por parcela a una altura media de corte de 6 cm., seguidos de pastoreo con novillos. Se determinó la producción de materia seca (MS/ha) y se caracterizó la calidad de la misma. En el primer corte, la oferta de MS y proteína bruta (PB)/ha fue mayor en los centenos que en las avenas y también la extracción de N (P < 0,01), sin embargo, la fertilización y la mineralización reabastecieron el nivel de nitratos del perfil diluyendo las diferencias. En ese corte se produjeron los contenidos de MS más bajos, particularmente en centenos. No hubo respuesta a la fertilización en ninguno de los tres cortes en producción de MS/ha (p > 0,371) ni en contenidos de fibra detergente neutro (FDN), fibra detergente ácido (FDA) o carbohidratos solubles no estructurales (CHOS) (P > 0,208). Se detectó un efecto significativo en el contenido de PB del primer corte a favor del tratamiento fertilizado en Zadocks 12 (P > 0,001). Los centenos produjeron más MS/ha que las avenas (4575 vs 3167 ± 88 Kg; P < 0,001). Entre las avenas se destacó el cultivar Millauquén (p < 0,05) Yentre los centenos los cultivares Don Luis y Quehué (P < 0.05). Todos los verdeos registraron niveles de CHOS muy bajos en el primer corte, con valores inferiores para los centenos (3,8 vs 6,5 + 0,26 % para centenos y avenas; P < 0,001). La relación PB/CHOS fue muy alta en ambas especies y mayor en centenos que en las avenas (6,7:1vs4,4:1 ± 0,33; P <0,001). En el segundo corte, la oferta de MS/ ha fue similar entre los materiales evaluados (P = 0,801; 609 kg MS/ha) y las relaciones PB/CHOS más equilibradas que en el corte anterior. En el tercer corte la oferta de MS/contenido de fibras mayor y nivel de CHOS menor (p < 0,01). El conocimiento del nivel de CHOS constituyó un insumo esencial para caracterizar el potencial nutricional del verdeo.Director: Ing. Agr. Anibal Pordoming

Degradación biológica de fenol utilizando técnicas respirométricas

El fenol es un constituyente común de las aguas residuales originarias de varias industrias. Es tóxico aun a bajas concentraciones y es por ello que son necesarios métodos de tratamiento eficientes para reducir la concentración de fenol en las aguas residuales a niveles aceptables. En la provincia de Buenos Aires el límite de descarga en agua superficial es de 0.5 mg/L (Res. N° 287). De los muchos métodos existentes aplicables para la degradación de fenol, el tratamiento biológico es especialmente recomendable porque tiene un potencial capaz de degradar casi completamente el fenol generándose productos finales inocuos. Los objetivos del presente trabajo fueron analizar la degradación biológica de fenol utilizando barros activados aclimatados y no aclimatados a dicho sustrato y determinar los parámetros cinéticos y estequiométricos correspondientes utilizando medidas respirométricas. Se utilizaron reactores semi-continuos a escala laboratorio para generar barros activados aclimatados y no aclimatados a fenol. Para evaluar el efecto del fenol sobre la respiración microbiana se utilizó un respirómetro cerrado. Se llenó el reactor con barros (aclimatados o sin aclimatar) previamente lavados y resuspendidos en buffer de pH=7 y se agregaron distintos pulsos de fenol a fin de obtener valores de concentración entre 20 y 4000 mg/L. Se representó la concentración de oxígeno en función del tiempo y de la pendiente se obtuvo el valor de velocidad de respiración. En el caso de la biomasa no aclimatada se observó que el fenol produce un efecto de inhibición sobre los microorganismos a concentraciones mayores a 20mg/L. Para la biomasa aclimatada se observó un rápido ascenso en la velocidad de respiración e inmediatamente una disminución a medida que la concentración de fenol aumentaba. Se ajustaron los datos de velocidad de respiración a la ecuación de Haldane, que contempla inhibición por sustrato, obteniéndose los siguientes valores para las constantes cinéticas: qO2* = 0.047mgO2.mgDQO-1.h-1, Ks = 14.04mgfenol/L y Ki=1912.09mgfenol/L. Por otra parte se realizaron ensayos utilizando un respirómetro abierto para obtener el coeficiente de oxidación del fenol obteniéndose un valor de YO/S = 0.74mgO2/mgfenol.Phenol is a common constituent of the wastewater, found in several industries. Even at low concentrations it is toxic, and for this reason efficient treatment methods are required, in order to reduce the phenol concentration in the wastewater to acceptable levels. In the province of Buenos Aires the limit of discharge in surface waters is as low as 0.5 mg/L. Of the many applicable existing methods for the degradation of phenol, biological treatment is especially recommended, as it has a great potential for transforming almost completely the phenolic components in innocuous end products. The objectives of the present investigation were to analyze the biological degradation of phenol, using a seeded and a non‐seeded activated sludge process; and also, to obtain kinetic and stechiometric parameters, by means of respirometry. Semi‐continuous to lab scale reactors were used in the activated sludge process. In order to evaluate the effect of the phenol on the microbial growth a closed respirometer was used. The reactor was filled with sludge (seeded and non seeded), previously washed and buffered at pH 7, and phenol was added in such a way that concentrations between 20 and 4000 mg/L were achieved. Oxygen concentration was measured along time, so that a representative slope could be obtained in graph. In the case of the non acclimatized biomass it was observed that the phenol produces an effect of `inhibition` on the microorganisms at concentrations over 20mg/L. For the acclimatized biomass a faster rate of oxygen uptake was observed as well as an immediate increase in the efficiency of phenol reduction. The oxygen uptake was adjusted to the equation of Haldane, several kinetic constants being obtained.Facultad de IngenieríaFacultad de Ciencias ExactasCentro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimento

Degradación biológica de fenol utilizando técnicas respirométricas

El fenol es un constituyente común de las aguas residuales originarias de varias industrias. Es tóxico aun a bajas concentraciones y es por ello que son necesarios métodos de tratamiento eficientes para reducir la concentración de fenol en las aguas residuales a niveles aceptables. En la provincia de Buenos Aires el límite de descarga en agua superficial es de 0.5 mg/L (Res. N° 287). De los muchos métodos existentes aplicables para la degradación de fenol, el tratamiento biológico es especialmente recomendable porque tiene un potencial capaz de degradar casi completamente el fenol generándose productos finales inocuos. Los objetivos del presente trabajo fueron analizar la degradación biológica de fenol utilizando barros activados aclimatados y no aclimatados a dicho sustrato y determinar los parámetros cinéticos y estequiométricos correspondientes utilizando medidas respirométricas. Se utilizaron reactores semi-continuos a escala laboratorio para generar barros activados aclimatados y no aclimatados a fenol. Para evaluar el efecto del fenol sobre la respiración microbiana se utilizó un respirómetro cerrado. Se llenó el reactor con barros (aclimatados o sin aclimatar) previamente lavados y resuspendidos en buffer de pH=7 y se agregaron distintos pulsos de fenol a fin de obtener valores de concentración entre 20 y 4000 mg/L. Se representó la concentración de oxígeno en función del tiempo y de la pendiente se obtuvo el valor de velocidad de respiración. En el caso de la biomasa no aclimatada se observó que el fenol produce un efecto de inhibición sobre los microorganismos a concentraciones mayores a 20mg/L. Para la biomasa aclimatada se observó un rápido ascenso en la velocidad de respiración e inmediatamente una disminución a medida que la concentración de fenol aumentaba. Se ajustaron los datos de velocidad de respiración a la ecuación de Haldane, que contempla inhibición por sustrato, obteniéndose los siguientes valores para las constantes cinéticas: qO2* = 0.047mgO2.mgDQO-1.h-1, Ks = 14.04mgfenol/L y Ki=1912.09mgfenol/L. Por otra parte se realizaron ensayos utilizando un respirómetro abierto para obtener el coeficiente de oxidación del fenol obteniéndose un valor de YO/S = 0.74mgO2/mgfenol.Phenol is a common constituent of the wastewater, found in several industries. Even at low concentrations it is toxic, and for this reason efficient treatment methods are required, in order to reduce the phenol concentration in the wastewater to acceptable levels. In the province of Buenos Aires the limit of discharge in surface waters is as low as 0.5 mg/L. Of the many applicable existing methods for the degradation of phenol, biological treatment is especially recommended, as it has a great potential for transforming almost completely the phenolic components in innocuous end products. The objectives of the present investigation were to analyze the biological degradation of phenol, using a seeded and a non‐seeded activated sludge process; and also, to obtain kinetic and stechiometric parameters, by means of respirometry. Semi‐continuous to lab scale reactors were used in the activated sludge process. In order to evaluate the effect of the phenol on the microbial growth a closed respirometer was used. The reactor was filled with sludge (seeded and non seeded), previously washed and buffered at pH 7, and phenol was added in such a way that concentrations between 20 and 4000 mg/L were achieved. Oxygen concentration was measured along time, so that a representative slope could be obtained in graph. In the case of the non acclimatized biomass it was observed that the phenol produces an effect of `inhibition` on the microorganisms at concentrations over 20mg/L. For the acclimatized biomass a faster rate of oxygen uptake was observed as well as an immediate increase in the efficiency of phenol reduction. The oxygen uptake was adjusted to the equation of Haldane, several kinetic constants being obtained.Facultad de IngenieríaFacultad de Ciencias ExactasCentro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimento

Preoperative Predictive Factors of Successful Weight Loss and Glycaemic Control 1 Year After Gastric Bypass for Morbid Obesity

BACKGROUND: Gastric bypass (GBP) is one of the most effective surgical procedures to treat morbid obesity and the related comorbidities. This study aimed at identifying preoperative predictors of successful weight loss and type 2 diabetes mellitus (T2DM) remission 1 year after GBP. METHODS: Prospective longitudinal study of 771 patients who underwent GBP was performed at four Italian centres between November 2011 and May 2013 with 1-year follow-up. Preoperative anthropometric, metabolic and social parameters, the surgical technique and the previous failed bariatric procedures were analyzed. Weight, the body mass index (BMI), the percentage of excess weight lost (% EWL), the percentage of excess BMI lost (% BMIL) and glycated haemoglobin (HbA1c) were recorded at follow-up. RESULTS: Univariate and multivariate analysis showed that BMI <50 kg/m2 (p\u2009=\u20090.006) and dyslipidaemia (p\u2009=\u20090.05) were predictive factors of successful weight loss. Multivariate analysis of surgical technique showed significant weight loss in patients with a small gastric pouch (p\u2009<\u20090.001); the lengths of alimentary and biliary loops showed no statistical significance. All diabetic patients had a significant reduction of HbA1c (p\u2009<\u20090.001) after surgery. BMI\u2009 65\u200950 kg/m2 (p\u2009=\u20090.02) and low level of preoperative HbA1c (p\u2009<\u20090.01) were independent risk factors of T2DM remission after surgery. CONCLUSIONS: This study provides a useful tool for making more accurate predictions of best results in terms of weight loss and metabolic improvement