Biosynthesis of 5-aminolevulic acid in trypanosoma cruzi

Trypanosoma cruzi requires heme-compounds for growing, due to its partially or totally deficient biosynthetic pathway of heme. There are reports that support the functionality of mitochondrial enzymes involved in this pathway, such as 5-aminolevúlico synthetase (ALA-S) and Heme synthetase (Heme-S). T. cruzi genome is known and two homologous genes, Tc00.1047053511899.40 y Tc00.1047053511071.140, were identified by bioinformatic studies. Both of them are candidates to code with high score (50%) for the ALA-S enzyme, responsible for synthesizing ALA from succinyl CoA and glycine. Our hypothesis is that the parasite is able to synthesize ALA (although it cannot be metabolized to heme) and the Tc00.1047053511899.40 y Tc00.1047053511071.140 sequences encodes for a protein with ALA-S activity. Using epimastigotes, we were able to detect and quantify, by spectrophotometric studies and HPLC chromatography, the presence of ALA in the parasite both intra and extracellularly. The mesasurements were made in 30ml of parasite culture which yielded about 608,31 ± 45,20 nmol of ALA. The extracellular content represents 96% of the total synthesized. Such excretion would be avoiding the citotoxicity of ALA since it cannot be metabolized to heme From bioinformatic studies using the Blast, ORF Finder, Mitoprop, Prosite and ClustalW platforms, it was determined that the above genes would code for a mitochondrial protein (98%) which is dependent on pyridoxal phosphate and shown a KBL domain, which is characteristic of enzymes as ALA-S. Both, ALA detection and the computer analysis would support our hypothesis and encourages us to continue trying to confirm it.Fil: Puente, Vanesa Rocío. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Martinez, Maria del Carmen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Abou Assali, Lubna. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Benlolo, Micaela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Bontempi, Esteban. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; ArgentinaFil: Lombardo, Maria Elisa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaLXIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LI Reunión Anual de la Asociación Argentina de Farmacología Experimental; XXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biología; XXXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; IX Reunión Anual de la Asociación Argentina de Nanomedicinas y VI Reunión Científica Regional de la Asociación Argentina de Ciencia y Tecnología de Animales de LaboratorioMar del PlataArgentinaSociedad Argentina de Investigación ClínicaAsociación Argentina de Farmacología ExperimentalSociedad Argentina de BiologíaSociedad Argentina de ProtozoologíaAsociación Argentina de NanomedicinasAsociación Argentina de Ciencia y Tecnología de Animales de Laboratori

Haplotype analysis of single nucleotide polymorphisms of cyp1a1 and cyp1a2 and its relationship with the development of porphyria cutanea tarda

Abstract : Objective: Porphyria Cutanea Tarda results from decrease hepatic uroporphyrinogen decarboxylase activity. There are twoprincipal types: sporadic or acquired and familial or hereditary Porphyria Cutanea Tarda. Hereditary Porphyria Cutanea Tarda is observed in 25-30% of the patients in whom one allele of the uroporphyrinogen decarboxylase gene reduces the enzyme activity by approximately 50% in all tissues. There are experimental evidences that suggest a possible relationship between CYP1A1, CYP1A2 andPorphyria Cutanea Tarda symptomatology development but the results described in dif erent populations are very conflictive.The aim ofthis work is provide additional evidences about the participation of the CYP system on the manifestation of this disease. Subjets/Methods: We analyse the polymorphisms already described in these CYPs isoforms in 112 Porphyria Cutanea Tarda Argentinianpatients and 89 controls. Of these 64 were used for haplotype analysis. The polymorphisms were detected by RFLP-PCR or sequencing. Results: For CYP1A2*1F polymorphism C allele (wt) was exceptionally the less frequent while the polymorphic A allele, with an increasedtranscriptional activity, resulted to be the risk allele. For CYP1A1 m4 polymorphism, for which are not previous reports about this effect, our results indicated that the A variant would be arisk factor to develop the disease. For m2 polymorphism we obtained contradictory results depending on the groups compared. The risk haplotype calculated with the snpSTATs was m4-m2-m1-1A2: C-G-C-C. Conclusions: These results indicated that, among other factors, these polymorphisms would be related with Porphyria Cutanea Tardadevelopment.Fil: Gordillo, Diego Miguel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Abou Assali, Lubna. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Cerbino, Gabriela Nora. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Varela, Laura Sabina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Batlle, Alcira Maria del C.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Parera, Victoria Estela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Rossetti, Maria Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; Argentin

Acute Intermittent Porphyria in a Man with Dual Enzyme Deficiencies

Porphyrias are a heterogeneous group of metabolic disorders that result from the altered activity of specific enzymes of the hemebiosynthetic pathway and are characterized by accumulation of pathway intermediates. Porphyria cutanea tarda (PCT) is the mostcommon porphyria and is due to deficient activity of uroporphyrinogen decarboxylase (UROD). Acute intermittent porphyria(AIP) is the most common of the acute hepatic porphyrias, caused by decreased activity of hydroxymethylbilane synthase(HMBS). An Argentinean man with a family history of PCT who carried the UROD variant c.10_11insA suffered severe abdominalpain. Biochemical testing was consistent with AIP, and molecular analysis of HMBS revealed a de novo variant:c.344 + 2_ + 5delTAAG. *is is one of the few cases of porphyria identified with both UROD and HMBS mutations and the firstconfirmed case of porphyria with dual enzyme deficiencies in Argentina.Fil: Cerbino, Gabriela Nora. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Abou Assali, Lubna. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Varela, Laura Sabina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Tomassi, L.. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital General de Agudos "Ramos Mejía"; ArgentinaFil: Batlle, Alcira Maria del C.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Parera, Victoria Estela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Rossetti, Maria Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; Argentin

Study of the relationship between variants of cyp2c9 enzyme and acute intermittent porphyria manifestation

Abstract: Objective: The manifestation of Acute Intermittent Porphyria (AIP) requires many factors. In situations of high demand of heme, initial enzyme of the pathway in parallel to P450 cytochrome genes (CYPs) is induced in response to drugs. It was suggested that variants in CYP2C9, would play a role in AIP manifestation, according to the theory of Thunell.S at 2006Acute. Method: It was studied genotype and allele frequency of some SNPs in a control and AIP patients groups, then was analyzed the relation of those found variants with heme precursors. We amplified by PCR a fragment covering from intron 1 to intron 3. All obtained data were analyzed by Statistical programs VccSTAT© and InfoSTAT©. Results: We detected 4 different polymorphisms: two missense variants in exon 3 g.8633 C <T and g.8652 G <A, and two SNPs no translated g.8187 G <C and g.8436 T <C in introns 1 and 2, respectively. And there were not significant frequencies in all studied groups. Conclusions: The presence of genotypes G/C-C/T was in major frequency in AIP men, which also have high levels of ALA and PBG comparing with women. Worldwide, this study clearly demonstrated for the first time that AIP men with G/CC/T variants could have a high possibility to trigger the disease due to porphyrinogenic drug consumption, as a mainly reason to development the disease in male patients.Fil: Abou Assali, Lubna. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Gordillo, Diego Miguel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Cerbino, Gabriela Nora. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Varela, Laura Sabina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Batlle, Alcira Maria del C.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Parera, Victoria Estela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Rossetti, Maria Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; Argentin