Двунитевые разрывы ДНК при иммуновоспалительных ревматических заболеваниях

Objective: To study the frequency of spontaneous foci of DNA double-strand breaks (DSBs) in patients with immune-inflammatory rheumatic diseases (IIRD), their relationship to disease activity, levels of inflammatory markers, and levels of autoantibodies.Material and methods. The analysis included 40 patients with IIRD, including 19 patients with rheumatoid arthritis (RA, including 16 women, median disease duration 60 [20; 103] months, DAS28 was 5.05 [4.06; 5.9]) and 21 patients with systemic lupus erythematosus (SLE, 19 women, median disease duration 96.0 [40.0; 158.0] months, SLEDAI-2K 8.0 [4.0; 12.0]). The control group consisted of 17 healthy donors matched for sex and age.DNA DSBs were identified as discrete foci by immunofluorescence staining of lymphocyte cultures with antibodies against γH2AX and 53BP1 and subsequently analysed using the automated AKLIDES automated platform (Medipan).Results and discussion. There were no significant differences in the number of spontaneous DNA DSBs in patients with RA and healthy donors (p>0.05), a lower number of cells with the 53BP1 focus and a lower percentage of cells damaged in this focus were found in patients with SLE than in controls. There was a positive correlation between the number of γH2AXdamaged cells and CDAI(r=0.45, p=0.035), the number of cells with 53BP1 ruptures and the level of rheumatoid factor IgM (r=0.63, p=0.005) and ESR (r=0.53, p=0.02). In the group of SLE patients, a positive correlation was observed between the number of cells with breaks in the γH2AX focus and the level of antibodies against double-stranded DNA (anti-dsDNA; r=0.56, p=0.007), the average number of breaks in the cell in the γH2AX focus with the level of anti-dsDNA (r=0.57, p=0.004).Conclusion. The number of DNA DSBs may be an additional indicator of IIRD activity. In patients with SLE, DNA repair processes appear to be impaired, which is associated with the high activity of the disease.Цель исследования — изучить у пациентов с иммуновоспалительными ревматическими заболеваниями (ИВРЗ) частоту спонтанных фокусов двунитевых разрывов (ДР) ДНК, их взаимосвязь с активностью заболевания, уровнем маркеров воспаления и содержанием аутоантител.Материал и методы. В анализ включено 40 пациентов с ИВРЗ, среди которых было 19 больных ревматоидным артритом (РА, в том числе 16 женщин, медиана длительности заболевания — 60 [20; 103] мес, DAS28 — 5,05 [4,06; 5,9]) и 21 больной системной красной волчанкой (СКВ, 19 женщин, медиана длительности заболевания — 96,0 [40,0; 158,0] мес, SLEDAI-2K — 8,0 [4,0; 12,0]). Контрольную группу составили 17 здоровых доноров, сопоставимых с больными по полу и возрасту.ДР ДНК определялись как дискретные фокусы при иммунофлюоресцентном окрашивании культуры лимфоцитов антителами к γH2AXи 53BP1 с последующим анализом на автоматизированной платформе AKLIDES (Medipan).Результаты и обсуждение. Значимых различий числа спонтанных ДР ДНК у пациентов с РА и здоровых доноров не наблюдалось (p>0,05), у пациентов с СКВ выявлены меньшее число клеток с фокусом 53BP1 и меньший процент поврежденных клеток по данному фокусу, чем в контроле. Наблюдалась позитивная корреляция числа поврежденных по γH2AX клеток с CDAI (r=0,45, p=0,035), числа клеток с разрывами по 53BP1 с уровнем IgM ревматоидного фактора (r=0,63, p=0,005) и СОЭ (r=0,53, p=0,02). В группе пациентов с СКВ была позитивная корреляция числа клеток с разрывами по фокусу γH2AX с уровнем антител к двуспиральной ДНК (анти-дсДНК; r=0,56, p=0,007), среднего числа разрывов в клетке по фокусу γH2AXс уровнем анти-дсДНК (r=0,57, p=0,004).Заключение. Число ДР ДНК может быть дополнительным показателем активности ИВРЗ. У пациентов с СКВ, видимо, имеет место нарушение процессов репарации ДНК, ассоциирующееся с высокой активностью заболевания