20 research outputs found
A Study on the Design and Application of Metaevaluation model for Maritime Traffic Safety Assessment Scheme
This study is intended to comprehensively analyze and evaluate the Maritime Traffic Safety Scheme(MTSA Scheme) conducted in Korea up to the present by developing the Metaevaluation model to be applicable to this safety assessment. For this purpose, the Metaevaluation model is designed for the maritime traffic safety assessment, developing evaluation index which is based on the Metaevaluation model to be verified, thus having it practicable for the MTSA Scheme.
In the process of illuminating the essence of maritime traffic safety assessment, it is clarified as preevaluation and institutional evaluation. Although it can be identified as a type of the policy evaluation in a broad sense, it has its own unique analysis.
As a result of reviewing the previous study about Metaevaluation, Metaevaluation is a series of task to investigate the validity for the initial evaluation from the perspective of the supervisor, including the overall evaluation system as well as the performance of the evaluation. Accordingly, it works as a tool to examine whether to utilize the outcome of the evaluation or not, it is also regarded as a comprehensive metaevaluation to ensure its value and advantages.
Metaevaluation of the basic model has been derived from the standpoint of public policy, Metaevaluation model of MTSA, PIP'OU evaluation model was set up based on this, it can be identified as Plan, Input, Process, Output and Utilization of the cyclic process. This accounts for the Metaevaluation in the terms of a systematic opinion, allowing us to be more accessible to its own purpose of improving the evaluation system via the reflux of the evaluation result.
For the main focus, it is provided that assessment grounds, goals, target, and design entry to the domain of assessment plan. assessment capabilities, budget, data and period items are offered to the domain of the assessment input. Assessment perform methods, content, items, procedures items are offered to the domain of the assessment process. Assessment report reliability, usability, reporting results, results screening and follow-up management items are offered to the domain of assessment output. And finally assessment results management, diffusion and proposed assessment system to improve results are proposed by the domain of assessment utilization. 52 indexes of evaluation indicators have been developed for MTSA of the Metaevaluation.
Survey of the experts is used to inspect the validity of the metaevaluation model and evaluation index which were established by a theoretical discussion. Accordingly, the survey team of 20 members including MTSA of council members, specialty organizations, assessment experts conducted expert survery over two times. The result is that 44 evaluation index was confirmed by 12 indexes of assessment plan domain, 9 indexes of assessment input domain, 10 indexes of assessments process domain, 7 indexes of assessment output domain, and 6 indexes of assessment utilization domain.
In the following the verification for reliability was conducted targeting MTSA experts. A total of 30 questionnaires answered over the 0.60 Cronbach's α value in the evaluation domains and evaluation item, resulted higher overall reliability to(of) 0.967. Rating value of the importance for 44 evaluation indices was proved to be reasonable because it offers higher than 3.0 in each 44 index.
In a metaevaluation methods, evaluation scores were assessed the average of sub-evaluation index by 5-point scale as very high (5 points), excellent (4 points), usual (3 points), unsatisfied (2 points) and poor (1 point).
MTSA for the metaevaluation was carried out for the involved, and 121 questionnaires were analyzed using by Microsoft Excel and SPSS 20.0 program.
As the result of metaevaluation, it included grade of index, frequency analysis, difference analysis, correlation analysis, improvement priority, question analysis and case analysis.
Particularly, in the result of the analysis of the differences between groups, the difference of significance level of p <.05 appeared in three assessment domains including the assessment plan, input and output. And it is shown that the one of business operator and business approval authority is to be underrated by one grade comparing to one of the assessment agencies and review authority. This difference seems to be because business operator and business approval authority take account of maritime traffic safety assessment from the participatory perspective. The difference of significance level of p <.05 is unseen in the analysis for the average work period difference (One-Way ANOVA). It explains that there has been no differences between groups regardless of work period engaged in maritime traffic safety assessment.
This study suggests that the positive acceptance which is maintained by discourse model has to be found by means of the effective model of MTSA in order to enhance safety aspects and respond to trends of the change in the paradigm in MTSA.
In this study, the further implications can be found as followTo clarify the nature of maritime traffic safety assessment, and seek to expand the research field about the meta-evaluation, and try the new approach to the research methodology of the meta-evaluation. Also the issue that is available for the policy is introduced in this study by presenting a model of the metaevaluation which was applicable to maritime traffic safety assessment.제 1 장 서 론 1
1.1 연구 배경 및 목적 1
1.2 연구 범위 및 방법 3
1.3 연구 구성 5
제 2 장 해상교통안전진단제도의 특성 7
2.1 해상교통안전진단의 의의 7
2.1.1 해상교통안전진단의 개념 7
2.1.2 해상교통안전진단의 기본원칙 8
2.2 해상교통안전진단제도의 변천 9
2.2.1 해상교통안전진단제도의 도입배경 9
2.2.2 해상교통안전진단제도의 발전과정 10
2.3 국내외 유사제도의 평가모형 12
2.3.1 국외 유사제도의 평가모형 12
2.3.2 국내 유사제도의 평가모형 15
2.4 해상교통안전진단과 메타평가의 관계 18
2.4.1 평가의 의의 18
2.4.2 정책평가와 해상교통안전진단 19
2.4.3 해상교통안전진단과 메타평가 20
제 3 장 메타평가의 이론적 고찰 23
3.1 메타평가의 의의 23
3.1.1 메타평가의 개념 23
3.1.2 메타평가의 목적 26
3.2 메타평가의 접근방식 28
3.2.1 메타평가의 유형 28
3.2.2 메타평가의 접근방법 30
3.3 메타평가의 방법 32
3.3.1 메타평가 방법 비교 32
3.3.2 해상교통안전진단의 메타평가 방법 35
3.4 메타평가의 구성요소 37
3.4.1 국외 선행연구 분석 37
3.4.2 국내 선행연구 분석 45
3.4.3. 메타평가의 선행연구 종합 53
제 4 장 해상교통안전진단 메타평가 모형설계 및 검증 61
4.1 해상교통안전진단의 메타평가 기본모형 61
4.1.1 메타평가 기본모형의 도출 61
4.1.2 해상교통안전진단의 메타평가 모형설정 63
4.2 해상교통안전진단 메타평가 모형의 구성요소 개발 64
4.2.1 메타평가 구성요소 초안 64
4.2.2 메타평가 구성요소 수정안 67
4.3 메타평가 구성요소 적합성 검증 77
4.3.1 메타평가 구성요소의 타당성 검증 80
4.3.2 메타평가 구성요소의 신뢰성 검증 85
4.4 메타평가 모형 확정 87
4.4.1 메타평가 모형의 구성요소 87
4.4.2 메타평가 모형 구성요소의 특징 89
제 5 장 해상교통안전진단 메타평가 모형적용 및 결과분석 93
5.1 메타평가 모형 적용 93
5.1.1 메타평가 모형 적용 개요 93
5.1.2 메타평가 모형적용 결과의 신뢰도 검증 95
5.2 메타평가 결과 양적 분석 96
5.2.1 평균, 분산, 편차분석 96
5.2.2 빈도분석 100
5.2.3 차이분석 109
5.2.4 상관관계 분석 119
5.2.5 진단개선 우선순위 129
5.2.6 메타평가 구성요소의 요인분석 133
5.2.7 메타평가 양적 분석 결과종합 141
5.3 메타평가 결과 질적 분석 148
5.3.1 진단계획 영역 148
5.3.2 진단투입 영역 155
5.3.3 진단수행 영역 157
5.3.4 진단결과 영역 167
5.3.5 진단활용 영역 168
5.4 진단사례의 메타평가 분석 170
5.4.1 진단계획 영역 주요쟁점사항 173
5.4.2 진단투입 영역 주요쟁점사항 174
5.4.3 진단수행 영역 주요쟁점사항 175
5.4.4 진단결과 영역 주요쟁점사항 176
5.4.5 진단활용 영역 주요쟁점사항 177
5.4.6 진단사례 분석결과 종합 177
제 6 장 해상교통안전진단 시스템의 개선방안 179
6.1 평가영역별 주요 개선사항 179
6.1.1 진단계획 179
6.1.2 진단투입 186
6.1.3 진단수행 190
6.1.4 진단결과 195
6.1.5 진단활용 197
6.2 개선사항 종합 198
제 7 장 결 론 205
7.1 연구결과의 요약 205
7.2 연구결과의 정책적 시사점 208
7.3 연구의 의의와 한계 210
참 고 문 헌 213
[부록 A] 해상교통안전진단 메타평가 구성요소 수정에 관한 전문가 조사 설문지 221
[부록 B] 해상교통안전진단에 대한 메타평가 구성요소의 적합성 검증을 위한 설문지 229
[부록 C] 해상교통안전진단에 대한 메타평가를 위한 설문지 233
감사의 글 23
The Comparison Assessment of Navigation Safety for a Ship Passing under the Sea Bridges
Recently, there are many sea bridges which is under construction or planned to connect the island with the land in coastal sea. From the viewpoint of navigation safety, it would be the best to build the main span of bridges as wide as possible. But it may not be possible due to geographical or economic reasons.
To construct the bridge on the navigation route, consideration factors for navigation safety must be investigated and examined from the viewpoint of ship maneuverability preferentially.
In this study, the FMSS(Full Mission Ship handling Simulator) of the Korea Maritime University(KMU) was utilized as a tool of analyzing the data acquired from ship's maneuvering. It provides a unique opportunity to check the ship handler's subjective stress level and to collect detailed data including the ships' tracks of passing under the sea bridge. In addition, the assessment of the navigation safety for a ship passing under the sea bridges is evaluated from the proximity, control and subjectivity.
In the conning ship handling simulator, experienced masters and pilots conducted the modeled vessels along the designed channel and under the sea bridges.
This study aims to prepare safety assessment for approaching navigation and safety review in passing under the sea bridge according to the procedures. Examination factors such as environment, a ship type and the bridge with width were arranged accordingly about 6 sea bridges and then analyzed with comparison and assessed synthetically as using the results of simulation.
Further researches on maneuvering ships in various condition will be necessary for making individual rules for each special case.Abstract = ⅴ
제1장 서 론 = 1
1.1 연구 배경 및 목적 = 1
1.2 연구 방법 및 내용 = 2
제2장 선박 통항 교량의 건설지침 현황 = 4
2.1 진입 항로 및 부근 수역시설에 대한 항로설계 지침 = 4
2.1.1 항로의 배치 = 5
2.1.2 항로의 폭 = 7
2.2 교량 설계에 관한 연구 = 10
2.2.1 미국의 교량 설계에 관한 연구 = 10
2.2.2 일본의 교량 설계에 관한 연구 = 11
2.2.3 기타 교량 설계에 관한 연구 = 12
2.3 주요 해상교량 = 13
2.3.1 주요 해상교량의 수역시설 = 13
2.3.2 해상교량에 의한 선박의 충돌 사례 = 17
제3장 선박 통항 교량의 운항 안전성 평가를 위한 이론적 검토 = 19
3.1 운동방정식 및 시뮬레이션 데이터베이스 개발 = 19
3.1.1 선체 운동방정식의 개발 = 19
3.1.2 시뮬레이션 데이터베이스의 개발 = 22
3.2 시뮬레이션 평가 방법 = 23
3.2.1 선박의 근접도 평가 = 23
3.2.2 선박의 제어도 평가 = 24
3.2.3 조종자의 주관적 평가 = 25
제4장 선박조종시뮬레이션 = 26
4.1 선박조종시뮬레이터 = 26
4.1.1 선박조종시뮬레이터의 구성 = 26
4.1.2 선박조종시뮬레이션 과정 = 30
4.2 시뮬레이션 대상 선박 = 32
4.3 대상 해역 및 대교 = 34
4.3.1 목포대교 = 34
4.3.2 거가대교 = 35
4.3.3 마창대교 = 36
4.3.4 서해대교 = 38
4.3.5 보안-태안 연육교 = 39
4.3.6 광양대교 = 40
4.4 시나리오 설계 = 41
4.5 조종자의 구성 = 43
제 5장 시뮬레이션 결과에 대한 비교 분석 = 44
5.1 목포대교 = 44
5.1.1 근접도 평가 = 44
5.1.2 제어도 평가 = 51
5.1.3 주관적 평가 = 52
5.2 거가대교 = 54
5.2.1 근접도 평가 = 57
5.2.2 제어도 평가 = 57
5.2.3 주관적 평가 = 57
5.3 마창대교 = 58
5.3.1 근접도 평가 = 58
5.3.2 제어도 평가 = 61
5.3.3 주관적 평가 = 62
5.4 서해대교 = 63
5.4.1 근접도 평가 = 63
5.4.2 제어도 평가 = 64
5.4.3 주관적 평가 = 65
5.5 보령-태안 연육교 = 67
5.5.1 근접도 평가 = 67
5.5.2 제어도 평가 = 70
5.5.3 주관적 평가 = 70
5.6 광양대교 = 72
5.6.1 근접도 평가 = 72
5.6.2 제어도 평가 = 75
5.6.3 주관적 평가 = 76
5.7. 종합 평가 = 78
5.7.1 근접도 평가 = 78
5.7.2 제어도 평가 = 79
5.7.3 주관적 평가 = 80
5.8. 시뮬레이션을 이용한 통항안전성 평가 및 제안 = 81
5.8.1 목포대교 = 81
5.8.2 거가대교 = 81
5.8.3 마창대교 = 81
5.8.4 서해대교 = 82
5.8.5 보령~태안 연육교 = 82
5.8.6 광양대교 = 82
제 6장 결론 = 83
참고문헌 = 8
A Study on the Motion of Triangles through Repetition
모든 예술은 분야를 막론하고 예술가에 의해 창작되는 결과물로서, 예술가의 생각과 감정을 표현하는 언어이자 행위이며, 미를 탐구하고 창조하는 것에 목적을 두고 있다. 조형 예술도 이러한 전제에서 시작되는데 미를 창조하고 표현함에 있어서 형태는 내용을 담아내는 형식이며, 예술가에게 표현하고자 하는 바를 시각화할 수 있게 해주는 도구가 된다. 하지만 표현하고자 하는 것에 따라 형태는 주제를 더욱 강조시키는 역할을 하지만 오히려 방해하는 요소가 되기도 한다.
조형 작업을 하는 본인에게도 형태는 매우 중요한 표현 수단이 되며 이는 자연스럽게 주요 관심의 대상이 되었다. 특히, 기하학적 형태는 단순하면서도 일시적이거나 우연적인 모습이 아닌 개념적으로 확실하고 순수한 형태로 모든 형태의 기본이 된다. 특히, 자로 잰 듯이 표현된 기하학적 형태 중에서도 삼각형에서 강한 미적 요소를 발견하며, 삼각형은 내게 처음으로 다가온 형태에 대한 경험이자 무한한 변화를 가능하게 하는 출발점이 되었다. 이에 본인은 직접적인 이미지를 묘사하거나 제시하는 것이 아닌 형태를 통해 조형적 아름다움과 효과를 강조하여 표현할 수 있는 대상으로서 삼각형을 연구주제로 삼게 되었다.
이로써 본 논문에서는 삼각형의 개념에 대해서 고찰하고 형태적 특성에서 느껴지는 아름다움과 의미에 대해서 살펴보고자 한다. 삼각형에 대한 이해를 바탕으로 운동성을 형성하는 요소로서 반복에 대해 알아보고 반복된 형태로 표현되는 시각적 효과와 반복적 행위의 의미에 대해 살펴본다. 선의 구성을 통해 표현된 삼각형은 반복의 원리를 통해 시각적으로 강한 이미지를 표출하고 여러 삼각형으로 조합되었을 때에는 리듬과 방향감이라는 또 다른 조형 효과를 얻을 수 있으며 운동성을 형성하게 된다. 그리고 반복되는 형태들의 나열은 무한 공간으로의 확장을 의미한다.
또한 본 논문에서 직접적으로 표현된 삼각형은 형태에서 느껴지는 조형적 아름다움과 방향성, 그리고 삼위일체를 의미하는 종교적인 상징성을 지니며 이는 표현소재로서 다양한 변화를 주는 요소로 존재한다. 이러한 표현적 요소를 지닌 다른 조형예술작품을 찾아 비교, 분석하여 본 연구에서 삼각형의 명확한 기하학적 조형성을 구체화시키고 형태를 통해 표현되는 운동성을 시각화하여 그 미적 가치를 극대화하는데 연구의 목적이 있다.
표현방법에서는 삼각형을 이루는 선을 표현하기 위한 기법으로 자수에 대해 연구하고 자수기법을 통해 보여지는 반복적인 행위로서의 의미와 행위의 결과물인 선의 밀집과 확산을 통해 표현된 명도의 변화와 질감에 대해 살펴보았다. 또한 표현재료로 사용한 실크노방과 면사의 특성을 파악하고 조형 작업에 있어 표현기법으로서의 발전 가능성을 확인하였다.
본 연구를 통해 기하학적 도형인 삼각형의 형태에 대해 다시 한 번 개념을 정리하는 계기가 되었고 선을 이용하여 표현된 기하학적인 역동성의 무한한 변화 가능성을 인식할 수 있었으며 새로운 조형세계를 이해하는 안목을 넓히는 기회가 되었다. 이를 통해 연구자에게 있어서 조형 활동은 본인이 추구하는 아름다움을 실현시킬 수 있는 표현 언어이자 수단임을 확인하였다. 그리고 그 과정에서 얻는 만족과 기쁨은 계속적인 작업을 할 수 있게 해주는 동기가 되었으며 앞으로도 지속적인 탐구와 연구를 수행하고자 하는 의지를 다지는 계기가 되었다.;Regardless of any fields, all the types of art are language and action as a result that is created by artists. The purpose of art is to seek and create beauty. Formative art also starts from such premises. In creating and expressing beauty, form is a means for expressing its content, and a tool for visualizing what artists want to express. However, although form emphasizes its subject, it may deemphasize the role of form according to the expression.
As a formative artist, I place a high value on form in order to express my desire. Above all, geometric forms become the basic for all art forms because these are simple, but pure and solid in concept. Especially, I discover strong aesthetic elements from triangles, among geometric forms that are expressed in apple-pie order. To me, triangles became the first experience about form and a starting point to create infinite changes. Accordingly, as my study subject, triangles that formative beauty and its effects are emphasized and expressed through form were used, not directly depicting or suggesting images.
In this study, It intends to study the concept of a triangle, and its beauty and meaning from the character in terms of form. Based on the understanding of a triangle, repetition is firstly studied as an element that has motion, and then both the visual effect expressed by repeated forms and the meaning of repeated actions are studied as well. The triangle expressed through construction of lines presents a visually strong image by the principle of repetition. In case many triangles are combined, another formative effect called rhythm and direction is shown along with motion. And the arrangement of repeated forms means an extension into infinite space.
In addition to this, the triangle expressed in this study has formative beauty and direction from the character in terms of form. As a subject matter in expression, it also has religious symbolism meaning the Trinity and at the same time becomes an element that gives various changes.
The purpose of this study is to investigate, compare, and analyze such expressive elements. Based on it, the geometric formativeness of a triangle is clearly concretized and its aesthetic value is maximized by visualizing the motion that is expressed through form.
In expression method, embroidery were studied in order to express lines for triangles. The meaning of repeated action in terms of embroidery technique was investigated, along with the change of brightness and texture expressed through the result of action, or the density and spread of lines. In addition, the character of silk organza and cotton used as expression materials was understood, and its development possibility as expression technique for formative work was investigated.
Through this study, the concept of a geometrical figure, or the form of a triangle was studied, the possibility of infinite changes in geometrical dynamics expressed with lines was recognized, and I could develop my ability to look at a new formativeness world. Through it, it was confirmed that formativeness activity is an expression language and a means that I can realize the beauty they pursue. The satisfaction and pleasure obtained from its process became a motive for me to continue work. With this study as a momentum, I will conduct further study.1. 서론 1
1.1 연구목적 1
1.2 연구방법 및 내용 3
2. 표현주제에 관한 이론적 배경 4
2.1 삼각형과 조형예술 4
2.2 삼각형의 반복을 통한 운동성 12
3. 표현주제에 관한 조형적 접근 22
3.1 자수기법을 통한 표현연구 22
3.2 표현재료의 연구 28
4. 작품제작 및 분석 32
4.1 제작의도 32
4.2 제작과정 35
4.3 작품분석 38
5. 결론 58
참고문헌 60
ABSTRACT 6
서울역 고가는 무엇을 넘고 있는가?
서울역 고가를 배회하면서 가장 많이 받았던 질문주의 하나가 고가나 육교를 철거하는 것이 세계적인 추세인데 왜 서울역 고가는 재활용하느냐?이다. 고가도로는 산업화 시대의 유산으로 어둡고 음침한 도시의 흉물이 된 데다가 안전등급까지 D를 받았으니 이 참에 없애는 것이 맞지 않느냐는 친절한 부연설명까지 덧붙이니 대답하기가 여간 까다로운 게 아니다. 과연, 철거가 답일까? 보행친화도시를 만들려면 온당 그렇게 하는 것이 옳을까? 지난 1년여간 수백 차례에 걸쳐 고가도로를 건너보고 주변에 사는 주민들을 만나고, 전문가들에게 묻고, 고민한 결과 내가 내린 첫 번째 결론은 재활용하되 사람만 다닐 수 있게 해야 한다.이다. 그 이유는 다른 고가와 달리 서울역 고가는 훨씬 더 큰 단절인 철도를 건너는 이며 이기 때문이라는 것이다. 그럼에도, 항상 무언가 명쾌하지 못했다. 아무리 그래도, 고작 철도 하나 넘어가지고 380억을 들여 이 소란을 떨며 재활용을 하는 것인가? 고민은 꼬리를 물었고 1년이 지난 지금 나의 두 번째 결론은 서울을 바꾸는 계기가 될 것이기 때문이라는 데까지 왔다. 어떻게 어느 방향으로 바꿀 것인가? 이 질문에 답하기 위해서 서울역 고가가 넘고 있는 오늘을 점검해보는 것에서부터 시작해보는 것으로 한다
하이브리드 피셔-트롭시 합성 공정에서 중간 증류액 제조를 위한 촉매 및 촉매 반응기 개발
학위논문(석사) --서울대학교 대학원 :화학생물공학부,2008.8.Maste
Economic analysis for active battery balancing
학위논문(석사) - 한국과학기술원 : 산업및시스템공학과, 2017.2,[iv, 31 p. :]지금까지의 전기차용 중대형 배터리는 모듈의 직렬 연결을 이용하여 고정된 높은 전압으로 팩을 설계하고, 모터의 요구 파워에 맞도록 전류를 제공하는 방식으로 단순 전원 공급 장치로 이용되었다(수동적 에너지원). 이로 인해 한 개의 모듈에 고장이 발생하여도 전류 패스가 차단되어 배터리 팩 전체를 교환하여야 하는 것이 일반적이었다. 설령 문제가 발생한 한 개의 모듈을 교환한다고 하더라도, 다른 모듈과의 수명을 맞추어 주기 위해 유사 수명을 가진 모듈을 찾거나, 일부러 에너지를 가속 소모함으로써 다른 모듈과 수명을 맞추어 주어야 하는 문제점을 가지고 있었다.
이를 해결하기 위해 본 논문에서는 배터리 모듈에 스위치를 추가하고 이것의 제어를 통해 모듈을 선택함으로써 직렬 연결로 구성된 배터리 시스템의 전압 변화를 만들어 내고, 이를 이용하여 모터가 요구하는 파워에 효율적이고 능동적으로 대응하고자 한다(능동적 에너지원). 본 논문에서는 이런 배터리 시스템의 개념적 변화에 의한 모듈의 개별 제어가 가능한 시스템을 제안함으로써 모듈의 에너지 낭비를 줄이면서도 다른 모듈과의 수명을 맞추어 줌으로써, 모듈 한 개의 문제 발생 시 어려움 없이 교체할 수 있게 하고자 하였다.
제안된 시스템의 효율적인 운영을 위하여 유전적 알고리즘(Genetic Algorithm)을 이용하여 최적의 모듈 제어 알고리즘을 제시하였다. 이 알고리즘을 적용한 시스템이 기존의 교체 방식과의 비용적 효율성을 시뮬레이션을 통하여 검증하였고, 이를 이용하여 고장 시 모듈의 잔여 수명에 따른 구체적 교체 시기에 대한 전기차 소유자와 제작 업체의 의사 결정 기준을 제시해 줌으로써 사용성이 제한된 중고 배터리의 생산을 줄이고, 배터리에 정해진 수명에 맞는 사용을 보장해 줌으로써 불필요한 비용 낭비를 줄이는데 기여할 것으로 기대한다.한국과학기술원 :산업및시스템공학과
국화왜화바이로이드 저항성 유전자 조작 국화 개발
학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 농생명공학부, 2013. 8. 김국형.Chrysanthemum (Dendranthema X grandiflorum) belonging to the family Asteraceae has been cultivated for more than 3,000 years in Asia and Europe. It is currently one of the most popular flowers and also important for the worldwide floriculture industry. Viroids are the smallest pathogens composed of circular RNAs and cause infectious diseases in the plant host. So far, two viroids including Chrysanthemum stunt viroid (CSVd) and Chrysanthemum chlorotic mottle viroid (CChMVd) infecting chrysanthemum has been reported. Especially,
CSVd infection leads to serious damage in chrysanthemum production with following symptoms like bleached leaves, stunting, and reduced level of anthocyanin. Therefore, it is desirable to make genetically modified (GM) chrysanthemums resistant to CSVd. To engineer viroid resistant chrysanthemums, RNAi mediated silencing system using partial RNA sequences of the viroid was applied. Four different vectors containing different sense/antisense RNA sequences of CSVd were constructed and used for Agrobacterium mediated transformation. Initially, a total of 39 transgenic lines carrying the individual CSVd RNA sequence were finally obtained. To test resistance against CSVd infection, 60 out of 145 GM chrysanthemum plants were inoculated with CSVd by the sap inoculation. Relative resistance level was determined by semi-quantitative RT-PCR using total RNAs extracted from both inoculated and upper systemic leaves and CSVd specific primers. Of 16 tested GM chrysanthemums, nine GM chrysanthemum lines showed very strong resistance against CSVd infection and/or replication. In general, GM chrysanthemums grow uniformly and are much healthier than non-GM chrysanthemums. This study is the first report which develops GM chrysanthemums resistant to CSVd using CSVd sense/antisense RNAs.ABSTRACT……………………………………………….……5
CONTENTS……………………………………………………7
LIST OF TABLES……………………………………………...9
LIST OF FIGURES…………………………………………..10
Ⅰ. NTRODUCTION…………………………………………12
Ⅱ. MATERIALS AND METHODS…………………………20
1. Generation of constructs for chrysanthemum transformation…….20
2. Preparation of medium for chrysanthemum tissue culture and propagation……………………………………………………………..20
3. Preparation of plant hormones and antibiotics……………………..23
4. Methods for Agrobacterium-mediated transformation and tissue culture.............................................................................................23
5. Propagation of chrysanthemums…………………………………….24
6. Genomic DNA and total RNA extraction from chrysanthemums….25
7. Polymerase chain reaction (PCR) to check T-DNA insertion in transgenic chrysanthemums...........................................................25
8. Inoculation of CSVd in chrysanthemums.......................................27
9. Reverse transcription (RT)-PCR....................................................27
10. Examination of morphological characteristics………………………29
Ⅲ. RESULTS…………………………………………………30
1. Generation of constructs for chrysanthemum transformation…….30
2. Agrobacterium-mediated transformationto generate GM Chrysanthemums...........................................................................30
3. Selection of GM chrysanthemums by PCR ………………………...33
4. Chrysanthemum transformation efficiency …………………………33
5. Propagation of chrysanthemums ……………………………………33
6. CSVd resistance test by sap inoculation and RT-PCR…………….36
7. Examination of GM chrysanthemum lines for CSVd resistance by RT–PCR………………………………………………………………...36
8. Phenotype analysis of GM chrysanthemum lines as compared to wild type ………………………………………………………………..44
Ⅳ. DISCUSSION…………………………..………………..50
Ⅴ. LITERATURE CITED……………………………………55
Ⅵ. ABSTRACT IN KOREAN……………………………….60Maste
