돌연변이와 인산화에 의한 핵 라민의 조립과정에 대한 구조적 연구

학위논문(박사) -- 서울대학교대학원 : 농업생명과학대학 농생명공학부, 2023. 2. 하남출.세포핵 중간세사 라민은 핵의 형태를 유지하고 외부의 기계적 자극으로부터 대항하는 힘을 갖는 3차원 그물망 구조를 형성한다. 핵 라민은 세포의 생명유지에 중요하다. 라민은 유전자 돌연변이에 의해 다양한 laminopathies가 나타나는데, 그 중 S143F의 유전자 돌연변이는 프로게리아와 근육 파괴를 모두 특징으로 하는 표현형을 유발한다. 본 연구에서는 S143F변이를 가진 라민 A/C의 단백질 결정 구조를 규명하였다. 라민 A/C S143F의 구조에서 페닐알라닌으로 치환된 143번 잔기는 소수성 상호작용에 의해 결정구조에서 사량체의 코일들 사이의 X 자형 상호작용을 보여주었다. 후속연구는 필라멘트 사이의 X자형 상호작용이 정상적인 라민 그물망 구조를 방해하는데 중요한 역할을 한다는 것을 보여주었다. 이 연구 결과는 3차원 그물 구조의 조립 메커니즘을 제안하고 핵 변형에 의해 노화과정을 이해하기 위한 분자적 수준의 토대를 추가로 제공한다. 핵 라민은 A11과 A22 결합 방법으로 알려진 코일형 이량체의 두가지 분자 배열을 통해 길고 선형의 필라멘트를 형성함으로써 핵의 구조를 유지한다. 라민의 사량체 형성과정에서 A11과 A22와 결합하는 코일형 이중체 사이의 결합은 ACN 결합이라는 또다른 평행한 코일 1a와 코일 2의 카르복실 말단 사이의 머리-꼬리 상호작용을 형성한다. 체세포분열 동안 CDK1 인산화효소 복합체에 의해 라민의 아미노 말단의 머리 부분의 인산화는 핵 라민의 해체를 유발하지만, 이에 관한 분자수준의 메커니즘은 알려지지 않은 상태로 남아있다. 본 연구에서는 정제된 단백질을 이용하여 CDK1 복합체에 의한 인산화는 코일 1a와 코일 2의 C-말단 사이의 ACN 결합을 직접적으로 방해함으로써 섬유질 라민의 분해를 촉진한다는 것을 밝혔다. 또한 코일 1a와 코일 2 사이의 결합이 아미노산 잔기간의 이온 결합력의 변화로 인해 중단되었음을 관찰하였습니다. 덧붙여 분자모델을 곁들여 라민이 CDK1에 의존한 해체 메커니즘을 제시하였다. L59R 돌연변이에 의한 laminopathy는 근육파괴질환에서 골격근육질병과 심장근육병증의 표현형을 모두 유발한다. 이 유전자 돌연변이는 coil 1a의 안정도를 변화시켜 ACN 결합을 강하게 유도하며, 이는 인산화효소에 의한 라민의 해체 시도를 저지할 정도로 강력하다는 것을 앞서 실험을 통해 확인하였다. 본 연구에서는 이 결합을 억제하는 천연물을 스크리닝 하였고 플라보노이드 계열의 모린, 바이칼레인, 피세틴, 그리고 아피제닌을 선정하였다. 분자 도킹과 분자 동력학 시뮬레이션을 활용하여 이들의 분자적 작동기전에 대한 단서를 제공하였다. 그리고 HT1080 세포 기반 분석은 라민 A의 비정상적 상호작용에 플라보노이드가 효과적인 분자로서 활용 가능성을 보여주었다. 이러한 결과들은 라민의 유전질병에서 플라보노이드가 항산화 기능 외에 단백질의 결합방해에 직접적으로 관여하여 치료제로서의 활용 가능성을 보여준다.Intermediate filament lamins in the cell nucleus form a three-dimensional meshwork that maintains the shape of the nucleus and offers a framework against external mechanical stress. The nuclear lamin is crucial to maintain the life of a cell. Lamin has various laminopathies caused by genetic mutations, of which the gene mutation of S143F has caused phenotypes characterized by both progeria and muscular dystrophy. This study determined the crystal structure of the lamin A/C fragment harboring the S143F mutant. The obtained structure revealed an X-shaped interaction between the tetrameric units in the crystals, potentiated by the hydrophobic interactions of the mutated Phe143 residues. Subsequent studies indicated that the X-shaped interaction between the filaments is crucial for disrupting the normal lamin meshwork. These results suggest the assembly mechanism of the 3-D meshwork and provide a molecular framework for understanding the aging process by nuclear deformation. Nuclear lamins maintain the nuclear envelope structure by forming long, linear filaments via two alternating molecular arrangements of coiled-coil dimers, known as A11 and A22 binding modes. The coupling between the coiled-coil dimer that binds to A11 and A22 during the lamin tetramer formation produces another parallel head-to-tail interaction between coil 1a and the C-terminal region of coil 2, called the ACN interaction. During mitosis, phosphorylation in the lamin N-terminal head region by the cyclin-dependent kinase (CDK) complex triggers the depolymerization of lamin filaments, but the associated molecular-level mechanisms remain unknown. This study revealed that phosphorylation by the CDK1 complex promotes the disassembly of lamin filaments by directly interfering with the ACN interaction between coil 1a and the C-terminal portion of coil 2 using purified proteins. Furthermore, it was observed that this interaction was disrupted as a result of alteration in the ionic interactions between coil 1a and coil 2. In addition, the disassembly mechanism of CDK1-dependent lamin filaments was presented in combination with molecular modeling. The L59R mutation of lamin-induced laminopathy causes cardiomyopathy and Malouf syndrome phenotypes in muscular dystrophy. It was confirmed through previous experiments that this gene mutation changes the stability of coil 1a to strongly induce ACN interaction, which is strong enough to restrain attempts to disperse lamin by kinase. This research screened a natural compound that inhibits ACN interaction and selected the flavonoids morin, baicalein, fisetin, and apigenin. Molecular docking and molecular dynamics simulations were used to explain their molecular mechanisms. Furthermore, HT1080 cell-based assays showed the possibility of using flavonoids as effective molecules for abnormal interactions of lamin A. These results show the possibility that flavonoids are directly involved in both the inhibition of protein binding and antioxidant function in the genetic diseases of lamin and can be used as a therapeutic agent.Chapter 1. Background 1 1.1. The role of nuclear lamins in cells ２ 1.1.1. Expression of nuclear lamins and gene organization ２ 1.1.2. Characteristic structural features of lamin ３ 1.1.3. Lamins regulate nuclear mechanics ４ 1.1.4. Lamins regulate chromatin organization and DNA damage and repair ５ 1.2. Classification of laminopathies ７ 1.2.1. Muscular dystrophy ７ 1.2.2. Lipodystrophy ７ 1.2.3. Hutchinson Gilford Progeria Syndrome (HGPS) ８ 1.3. Flavonoid ９ 1.3.1. Classification of flavonoid ９ 1.3.2. Flavonoid as an anti-aging agent ９ 1.4. Purpose of Research 10 Chapter 2. Crystal structure of progeria mutant S143F lamin A/C and its implications for premature aging 11 2.1. Introduction 12 2.2. Materials and Methods 15 2.2.1. Plasmid construction 15 2.2.2. Purification of the recombinant proteins 15 2.2.3. Crystallization, structure determination, and analysis 16 2.2.4. Pull-down assays 19 2.3. Results 20 2.3.1. The overall structure of the lamin S143F mutant protein 20 2.3.2. The S143F mutation does not change the interactions to make the linear filament 24 2.3.3. Phe143-mediated x-shaped interaction between the A11 tetramers ２８ 2.3.4. Synergistic aggregation of the S149C mutation near Phe143 in the cell ３３ 2.4. Discussion ３６ Chapter 3. Cyclin-dependent Kinase 1 depolymerizes nuclear lamin filaments by disrupting the head-to-tail interaction of the lamin central rod domain. 40 3.1. Introduction 41 3.2. Materials and Methods 46 3.2.1. Expression and purification of proteins 46 3.2.2. Phosphorylation of the lamin N-terminal fragment 47 3.2.3. GST pull-down assays 47 3.2.4. Lamin coil 2-conjugated Sepharose pull-down assay 48 3.2.5. Circular dichroism (CD) 48 3.2.6. Lamin complex modeling 49 3.3. Results 50 3.3.1. The phosphorylation of lamin by CDK1 inhibits the A22 interaction 50 3.3.2. Phosphorylation of Thr19 and Ser22 inhibits the ACN mode 56 3.3.3. The phosphorylation of lamin A/C/ does not affect the coiled-coil structure of coil 1a 59 3.3.4. Synergistic effects of the other cellular kinases with CDK1 activity on lamin 65 3.3.5. The importance of the ionic interaction in the ACN binding 67 3.4. Discussion 70 Chapter 4. The flavonoid alleviates incorrect lamin assemblies by interrupting the ACN interaction of lamin A 75 4.1. Introduction 76 4.2. Materials and Methods 78 4.2.1. Protein expression and purification 78 4.2.2. ELISA 78 4.2.3. Molecular docking and molecular dynamics simulation studies 79 4.2.4. Human fibrosarcoma cell culture and flavonoid treatment 79 4.3. Results 83 4.3.1. Screening of inhibitory compound for abnormal ACN interactions in nuclear lamin L59R mutant 83 4.3.2. Predicting the effect of flavonoids on abnormal interaction of lamin A 87 4.3.3. The flavonoid improves the nuclear deformation formed by an abnormal interaction 93 4.4. Discussion 96 Bibliography 98 국문초록 110박

Use of hazardous event frequency to evaluate safety integrity level for safety instrumented system of subsea BOP

학위논문 (박사)-- 서울대학교 대학원 : 산업·조선공학부, 2016. 8. 임영섭.해저방폭장치(Subsea BOP) 안전계장시스템(SIS)의 안전무결성등급(SIL) 평가는 작동이 요구되는 빈도가 낮기 때문에 낮은 요구 모드(low demand mode)의 평가 기준인 작동 요구 시 고장확률(PFD)로 계산하는 것이 일반적이다. 그러나 일부 안전무결성등급(SIL) 평가 결과는 작동 요구 시 고장확률(PFD)의 유효 범위보다 큰 값을 가지고 있다. 본 연구는 해석 대상으로 안전계장시스템(SIS)으로서의 해저방폭장치의 기능을 정의하고, 공통원인고장(common cause failure) 요소를 반영하여 해저방폭장치 안전계장기능(SIF)을 분석하였다. 분석을 통해 현재 안전계장시스템(SIS)을 분류하는 경계에서 기존의 평가 방법의 한계를 지적하였다. 대안으로 위험사건발생빈도(HEF)를 제안하고 적용함으로써 평가에 필요한 평가 기준을 마련하였다. 또한, 기존의 작동 요구 시 고장확률(PFD)와 단위 시간당 고장확률(PFH)에서는 해석이 불가능하였던 안전계장시스템(SIS)을 구성하는 각 장비들의 요구빈도가 다른 경우에 대한 해석 방안을 마련하는데 의의가 있다. 작동 요구 시 고장확률(PFD)은 일년에 한번 이상 작동이 요구되는 안전계장시스템(SIS)에 대해서는 유효하지 않으며, A/PR function은 일년에 한번 이상, BSR function을 수행하는 장비 중, POD는 일년에 한번 이상 작동이 요구되는 것을 확인하여 해저방폭장치의 두 기능에 대한 기존의 안전계장시스템(SIS) 평가가 원래 위험보다 저평가되어 있음을 알 수 있었다. 기존의 평가 방법인 작동 요구 시 고장확률(PFD)과 새로운 평가 방법인 위험사건발생빈도(HEF)를 바탕으로 리스크 제어 옵션을 각각 도출하여 평가 방법에 따라 리스크 제어 옵션이 다름을 보이고, 각 평가 방법에서 SIL 2 요구사항을 만족시키기 위해 필요한 리스크 제어 옵션을 분석하였다. 작동 요구 시 고장확률(PFD)관점에서 SIL 2 만족을 위한 리스크 제어 옵션은 기존보다 A/PR function은 88%, BSR function은 89%의 감소 방안이 필요하였고, 가장 지배적인 영향을 주는 장비인 POD와 BSR preventer를 통한 대책이 마련되어야 함을 알 수 있었다. 또한, 위험사건발생빈도(HEF)관점에서 A/PR function과 BSR function 두 기능 모두 SIL 2 요구사항을 만족하기 위해서는 각각 기존보다 97%의 감소 방안이 필요하며, 가장 지배적인 영향을 주는 장비인 POD와 HPU를 통한 대책이 마련되어야 한다는 것을 알 수 있었다. 그리고 위험사건발생빈도(HEF) 관점에서 Combined POD system 적용 시 BSR function의 안전성이 크게 향상됨을 알 수 있었다. 본 연구는 현재 낮은 요구 모드(low demand mode)와 높은 요구 모드(high demand mode)로 이원화 되어 있는 안전계장시스템(SIS)의 평가 방법을 일원화 할 수 있는 구체적인 사례와 방법을 제시하고 안전계장시스템(SIS) 평가의 새로운 대안으로 위험사건발생빈도(HEF)를 제안하여 더욱 현실적 해석 가능성을 제시하였다.1. 서 론 13 1.1. 연구의 배경과 현황 13 1.2. 연구의 구성 16 2. 안전계장시스템 18 2.1. 작동모드 19 2.2. MooN voting logic을 위한 작동 요구 시 고장확률과 단위 시간당 고장확률 (PDS 방법) 21 2.3. 위험사건발생빈도 23 2.3.1. 위험사건발생빈도를 위한 안전무결성등급 범위 25 3. 해저방폭장치와 해저 유정 킥 이벤트 28 3.1. 해저방폭장치 구성 28 3.1.1. POD 35 3.1.2. Annular preventer 38 3.1.3. Ram preventer 40 3.1.4. Connector 46 3.1.5. Choke/kill valve 47 3.2. 해저방폭장치 사용 48 3.3. 해저방폭장치 기능과 해저 유정 킥 이벤트 50 3.3.1. 해저방폭장치 기능 50 3.3.2. 해저 유정 킥 이벤트 54 4. 작동 요구 시 고장확률과 요구빈도 평가 58 4.1. 해저 유정 제어를 위한 작동 요구 시 고장확률 58 4.2. 장비와 이벤트의 요구빈도 74 5. 해저방폭장치 기능 평가를 위한 위험사건발생빈도 79 5.1. 작동 요구 시 고장확률과 위험사건발생빈도 79 5.2. 작동 요구 시 고장확률과 단위 시간당 고장확률 그리고 위험사건발생빈도 비교 90 6. 안전무결성등급 만족을 위한 리스크 제어 옵션 94 6.1. 작동 요구 시 고장확률 관점의 리스크 제어 옵션 94 6.2. 위험사건발생빈도 관점의 리스크 제어 옵션 99 6.2.1. 작동 요구 시 고장확률 고려 방안 99 6.2.2. 요구빈도 고려 방안 104 7. 결론 109 참고 문헌 112 부록 117 Abstract 135Docto

초임계 에탄올에서 고부가가치 화합물 생산을 위한 리그닌의 촉매적 분해반응

학위논문 (박사)-- 서울대학교 대학원 공과대학 화학생물공학부, 2017. 8. 김도희.Finding alternative resources is inevitable as the conventional fossil fuels are rapidly depleted due to the increasing demand. In this respect, biomass is the most abundant renewable carbon resources so that it is considered as one of the promising alternative chemicals. Especially, lignocellulosic biomass, the second-generation biomass does not have a food vs. fuel issue like the first-generation biomass. Therefore, the supply of lignocellulosic biomass is relatively easy compared with the other resources. Especially, lignin, one of the constituents of lignocellulosic biomass, is an amorphous co-polymer consisting of various aromatic compounds, cross-linked by C-C and C-O bonds. Therefore, it has considerable potential to be used as value-added chemicals. Meanwhile, the amount of C-O bonds in lignin such as β-O-4 (46 ~ 60 %), α-O-4 (6 ~8 %) and 4-O-5 (3.5 ~ 6.5 %) is much more than that of C-C bonds in lignin such as β-β (7 %), β-5 (6 ~ 12 %), β-1 (4.5 ~11 %) and 5-5 (2 ~3 %). Hence, the selective cleavage of C-O bonds in lignin is considered as an essential process to depolymerize lignin into value-added chemicals. For the decades, various thermochemical processes such as pyrolysis, gasification, catalytic cracking and solvolysis have been applied for depolymerization lignin in order to get the high yield of value-added chemicals. However, the recalcitrant structures of lignin make it hard to be converted into value-added chemicals. Meanwhile, solvolysis has gained attention as one of the promising techniques because yield of products is relatively high and the better quality of products can be obtained by using solvolysis compared with the others. Especially, solvolysis by using alcohol solvents such as methanol or ethanol receives more attention because in-situ hydrogen is generated from supercritical alcohol, which is essential to cleave C-O bonds. Also, the combination of catalyst and supercritical ethanol is recently applied to the depolymerization of lignin since the catalyst is able to selectively cleave C-O bonds. In this work, catalytic conversion in supercritical ethanol was conducted to explore i) reaction pathway of benzyl phenyl ether, containing α-O-4 bonds ii) depolymerization of real lignin sources (concentrated strong acid hydrolysis ligninCSAHL, Protobind ligninPL) without supplying external hydrogen. At first, model compound reaction was conducted by using benzyl phenyl ether (BPE, containing α-O-4 bonds) in supercritical ethanol. The yield of phenol and toluene over carbon-supported catalysts was two times higher than that of phenol and toluene over Al2O3-supported catalysts. In addition, Ru catalysts demonstrated the maximum yield of phenol and toluene of 96.4 % among the three different metal catalysts (Ru, Pt and Ni). It was ascribed to the small particle size (about 1.5 nm) with highly dispersed phases. Meanwhile, both the amount of generated H2 and the amount of alkylated phenols were the highest in supercritical ethanol over 5 wt.% Pt/C among the catalysts, implying that the catalyst promoted alkylation more abundantly. Secondly, the concentrated strong acid hydrolysis lignin (CSAHL) was used for depolymerization lignin in supercritical ethanol over various catalysts. In case of MO(30)MgAlOy (M=Co, Ni, and Cu) catalysts, CuO(30)MgAlOy revealed the highest yield of monoaromatic compounds of 18.4 wt.% because the amount of NH3 desorbed from the catalyst was the highest among the catalysts. It can be concluded that acid sites is a critical factor for depolymerization of lignin to produce monoaromatic compounds. Meanwhile, as the amount of Cu loading was changed from 10 wt.% to 40 wt.% in CuO(X)MgAlOy, the trend of the yield of monoaromatic compounds showed a volcano shape. Thus, the maximum yield of monoaromatic compounds displayed in CuO(30)MgAlOy, resulting from the highest number of acid sites. When the amount of Cu loading exceeded over 30 wt.%, the number of acid sites decreased, leading to the decrement of the yield of monoaromatic compounds. The depolymerization of Protobind lignin was conducted in supercritical ethanol over various parameters based on ZSM-5 zeolites such as types of transition metals (Co, Ni and Cu), the amount of Cu loading (5 wt.%, 10 wt.% and 30 wt.%) and the Si/Al2 ratio (30, 50, 80 and 200). As a result, 10 wt.% Cu/ZSM-5(30) showed the highest yield of monoaromatic compounds of 98.2 wt.% due to the highest acid density (3.2 mmol/m2). As the acid density increased, the yield of monoaromatic compounds increased as well. Thus, the linear correlation between the acid density and the yield of monoaromatic compounds was confirmed. On the basis of the results, it can be summarized that the acid density played a key role in depolymerizing Protobind lignin to convert monoaromatic compounds. Meanwhile, through HSQC NMR analysis, it was identified that depolymerization of Protobind lignin was conducted via hydrogenolysis. Moreover, HSQC NMR signals corresponding to ethylated products were observed with weak intensity, which is consistent with the product analysis. It was also found that the addition of Cu metal plays a promotional role in enhancing the lignin depolymerization.Chapter 1. Introduction 1 1.1 Biomass as a renewable source 1 1.2 Structure of lignin and linkages 2 1.3 Valorization of lignin 8 1.4 Catalytic depolymerization of lignin in supercritical fluid 11 1.4.1 Supercritical fluids (in-situ Hydrogen) 13 1.4.2 Porous metal oxides (PMOs) 15 1.4.3 Zeolites 16 1.5 Objectives 17 Chapter 2. Understanding the catalytic cleavage of C-O linkages in benzyl phenyl ether by using carbon-supported catalysts in supercritical ethanol 18 2.1 Introduction 18 2.2 Experimental 20 2.2.1 Chemicals 20 2.2.2 Catalyst preparation 21 2.2.3 Characterization 21 2.2.4 Experimental setup and procedure 22 2.2.5 Product analysis 22 2.3 Results and discussion 23 2.3.1 Decomposition of BPE in supercritical ethanol 23 2.3.2 Characterization of the catalysts 32 2.3.3 Decomposition of phenol as reactant 35 Chapter 3. Depolymerization of lignin by using MO(X)MgAlOy mixed oxide catalyst (M=Co, Ni and Cu) in supercritical ethanol 41 3.1 Introduction 41 3.2 Experimental 43 3.2.1 Materials and Chemicals 43 3.2.2 Catalyst preparation 43 3.2.3 Characterization 44 3.2.4 Catalytic activity measurement 45 3.2.5 Product analysis 46 3.3 Results and discussion 46 3.3.1 Effect of MO(X)MgAlOy mixed oxide catalysts (M=Co, Ni and Cu) on lignin depolymerization 47 3.3.1.1 Analysis of as-calcined MO(X)MgAlOy samples 47 3.3.1.2 Lignin depolymerization over MO(X)MgAlOy 52 3.3.2 Effect of Cu loadings in CuO(X)MgAlOy on lignin depolymerization 57 3.3.2.1 Analysis of as-calcined CuO(X)MgAlOy catalysts 57 3.3.2.2 Catalytic effect on lignin depolymerization 61 3.3.2.3 Analysis of post-reaction CuO(X)MgAlOy catalysts 62 Chapter 4. Depolymerization of Protobind lignin to produce monoaromatic compounds over Cu/ZSM-5 catalyst in supercritical ethanol 64 4.1 Introduction 64 4.2 Experimental 66 4.2.1 Materials and Chemicals 66 4.2.2 Catalyst preparation 66 4.2.3 Characterization 67 4.2.4 Catalytic activity measurement 68 4.2.5 Product analysis 69 4.3 Results and discussion 70 4.3.1 Screening of the reaction parameters 70 4.3.2 ZSM-5-supported catalysts for lignin depolymerization 74 4.3.3 Physical properties of 10 wt.% Cu/ZSM-5(ratio) catalysts 81 4.3.4 Acidic properties of 10 wt.% Cu/ZSM-5(ratio) catalysts 86 5. Summary and Conclusions 90 Bibliography 93 6. 국 문 초 록 106Docto

Detection of functional variants using exome sequencing and gene expression profiling in breast cancer

학위논문 (박사)-- 서울대학교 대학원 : 의학과, 2015. 2. 노동영.연구목적: 본 연구에서는 차세대 염기 서열 분석 기술을 이용하여 유방암 환자의 암조직과 정상조직 및 혈액의 전엑솜 서열 분석 (whole-exome sequencing)을 통해 유방암에서의 체세포 변이를 찾고자 하였다. 이를 통해 확인된 체세포변이에 대해 Sanger 서열 분석 (Sanger sequence)을 시행하여 재확인하고자 하였다. 또한, 체세포 변이가 발견된 유전자 중 proteasome 26S subunit, non-ATPase, 2 (PSMD2) 에 대해 유방암에서 역할을 규명하고자 하였다. 연구방법: 유방암으로 진단된 120명의 환자에서 유방암 조직과 41명의정상조직 또는 52명의 혈액을 채취하여 HiSeq 2000 (Illumina, California, USA) 을 이용하여 전엑솜 서열 분석을 시행하였다. 정상에서는 발견되지 않으면서 유방암 조직에서만 발견된 변이에 대해 Sanger 서열 분석을 통해 확인하였다. 최종적으로 확인된 50개의 유전자에 대해 K-M plotter 를 이용하여 생존분석을 시행하고 이 중 예후와 관련된 유전자를 선별하였다. 이 중 PSMD2 를 우선 선정하였고, 유방암 세포주에서 PSMD2 의 발현을 확인하고, siRNA 와 약물(bortezomib)을 이용하여 억제시킨 후 세포주 증식을 확인하였다. 연구결과: 전엑솜 서열 분석을 통해 7,373개의 유전자의 11,684개의 변이가 발견되었고, 이 중 가장 흔한 유전자는 PT53, PIK3CA, BRCA1 순으로 나타났다. 이 중 64명의 환자에서50개의 유전자의 198개의 변이를 선별한 후, Sanger 서열 분석을 이용하여 38개의 유전자의 58개 변이를 확인하였다. 다른 환자에서 동일하게 발견된 변이는 leucyl-tRNA synthetase (LARS, 5: 145537108, C>T), protein tyrosine kinase 7 (PTK7, 6: 43112282, G>T), polo-like kinase 3 (PLK3, 1: 45268667, G>A), fatty acid synthase (FASN, 17: 80037439, C>A) 였고, 이 중 PTK7 와 PLK3의 변이는 삼중음성 유방암에서 FASN의 변이는 호르몬 수용체 양성 유방암에서만 확인되었다. 이중 PSMD2를 선별하여 유방암 세포주에서 siRNA 를 이용, PSDM2 를 억제하였을 때, 세포증식 및 이동이 감소하는 것을 관찰할 수 있었고, bortezomib 를 처치하였을 때 PSMD2의 발현이 감소하고 세포 증식이 감소하는 것을 확인하였다. 결론: 이 연구에서 전엑솜 서열 분석 기법을 이용하여 38개의 유전자, 58개의 변이를 발굴하였고, 이 중 FASN, PTK7, 그리고 PLK3 는 유방암 아형 특이적인 변이를 보였다. 또한 변이가 확인된 유전자 중에서 PSMD2 에 대해 유방암 치료를 위한 표적으로서의 가능성을 확인하였다.Abstract ------------------------------------------------------------------------------ i Contents ------------------------------------------------------------------------------- iii List of Tables & Figures List of Tables ------------------------------------------------------------------ iv List of Figures ------------------------------------------------------------------- v I. Introduction ---------------------------------------------------------------- 1 II. Materials and Methods --------------------------------------------------- 4 III. Results ------------------------------------------------------------------------ 15 IV. Discussion ------------------------------------------------------------------- 48 V. References ------------------------------------------------------------------- 52 Abstract - Korean --------------------------------------------------------------------- 57Docto

(The) symbolic abstraction based on the eastern consciousness of color

80년대 포스트 모더니즘(post-modernism)은 그 이전까지 비주류로 취급당하며, 미술사의 외곽에서 머물고 있던 제 3세계 미술에 대하여 새로운 시각을 조명하였다. 수평적 다양성을 중시하는 다원주의적 시대 조류에 따라 동양의 사상과 문화에 관심과 초점이 모아지고 지역성과 특수성의 한계를 벗어나서 재해석되고 재평가되는 과정을 통해 그 가치는 새롭게 부각되기 시작하였다. 이러한 시대적 특성에 따라 한국에서도 우리것 찾기에 대한 관심이 고조되고, 한국성 모색에 대한 각계의 연구가 활발히 이루어지고 있다. 그러나 전통문화의 뿌리 찾기가 시간성과 공간성을 망각한 채 과거의 답습에만 머문다면 그 진정한 의미와 정신은 빛이 바래고 말 것이다. 그러므로 시간성에 있어서 전통과 현대의 문제를 하나의 연결 선상에서 파악하여 계승·발전시키고, 공간성에 있어서 동양과 서양의 미적 조화를 꾀하며 국수주의의 오류를 범하지 않는 진정한 의미의 발전적 자기 성찰을 위해 시대에 역행하지 않으면서도 한국적, 동양적 사상에 기반을 둔 조화로 운 작업을 위한 기초 공부로서 본 논문을 작성하였다. 본인의 작품에 있어서의 주 요소의 색채와 형태에 초점을 맞추어서 색채면에 있어서는 오방색(五方色)을 중심으로 그 사상적 기반인 음양오행설과 그에 따른 동양의 우주관과 자연관, 음양사상등에 대하여 연구해 보고 일상생활면에 있어서의 오방색(五方色)의 쓰임과 그 의미를 조명해 보고자 하였고, 형태면에서는 본인이 사용하고 있는 원(圓)이라는 형태를 통해 그 상징적 의미를 고찰해 보고 본인이 원(圓) 모양의 오브제(objet)를 사용함에 따라 오브제에 대한 이해를 위하여 시대에 따른 오브제의 개념 변화와 본인 작품 속에서의 의미에 대해 서술하였다. 끝으로 본인 작품의 설명을 통하여 동양의 색채의식과 사상과 정서가 어떠한 과정으로 현대적 표현 양식을 통하여 상징화되었는가를 설명하는 과정을 통해 동양 사상에 기반을 둔 상징적 추상 작업이 나아갈 방향을 탐구해 보고자 하였다.;Post-modernism, which stayed on the periphery of art history as non-mainstream genre until the 1980s, brought a spotlight on non-Western art. The interest of the art world was focused on Eastern thought and culture, influenced by the pluralistic trend of the time that placed an emphasis on worldwide diversity. The value of Eastern thought and culture has emerged through a process of re-evaluation and reinterpretation that went beyond the limits and peculiarities of the region. Reflecting those trends, interest in rediscovering our own artistic and cultural heritage was also heightened in this country. In particular, active effort has been made aimed at finding distinguishing Korean characteristics in various fields. However if our efforts to search for tradition and culture were only confined to following previous steps without taking the elements of space and time into consideration, their meaning and spirit would be lost. Therefore, with respect to time, we have to try and grasp traditional and modern esthetic problems at the same time and continue to work on them. As for the question of space in a work of art, we should work to harmonize the beauties of the East and the West. I wrote this paper for a genuine and progressive sell-examination while trying to avoid the mistake of resorting to nationalism, and for harmonious artistic works based on the Korean and Eastern thoughts. In my works, I have attempted to focus on the important elements of color and shape. For color, I have studied the "Obang" or five colors, which are blue, yellow, red, white and black. And studied the yin-yang theory and the Eastern outlook on the universe and nature, on which the use of the "0bang"colors are based. I wanted to put an emphasis on the use and the meaning of the "Obang" colors in our daily life. With regard to shape, I tried to study the symbolic meaning of the shape of circle or "Won" and stated about changes in the concept of an object and the meaning of object in my works for the benefit of others who want to understand my use of the circular object. Finally, in analyzing my works, I have searched for the direction for symbolic abstraction based on Eastern philosophy and attempted to indicate the direction by explaining how the Eastern consciousness of color, ideas and emotion are manifested in works of arts through a modern method of expression.목차 = ⅲ 논문개요 = ⅵ Ⅰ. 서론 = 1 Ⅱ. 본론 = 3 A. 색채 = 4 1. 동양사상에 나타난 色개념 - 오방색 (五方色) = 4 (1) 음양오행설(陰陽五行說)과 음양의 원리 = 5 (2) 빨강, 노랑, 파랑의 삼태극(三太極)과 天符思想 = 7 (3) 정색(正色), 간색(間色), 잡색(雜色) = 8 2. 생활 속의 오방정색 = 13 (1) 풍속 = 14 (2) 종교 = 15 (3) 전통 예술 = 16 B. 형태 = 19 1. 원(圓)의 상징적 의미 = 19 2. 원의 반복과 집합에 의한 형태적 조형성 = 21 C. 작품 설명 = 23 Ⅲ. 결론 = 39 참고작품 = 40 참고문헌 = 43 ABSTRACT = 4

A Monte-Carlo study on the unit root test based on huber-type estimator in seasonal autoregressive model

For estimating unit root of Seasonal autoregressive(AR) processes, we propose a new instrumental variable(IV) estimator whose pivotal statistic has a standard normal limiting distribution for autoregressive parameter. The proposed estimator is based on IV estimator which discounts large value of regressors corresponding to the unit root. A simulation using observations adjusted by recursive mean shows that the proposed tests for unit roots are locally more powerful than the tests based on the ordinary least squares estimator(OLSE).;계절형 자기회귀 모형의 자료에서 UNIT ROOT를 추정하는 데 있어서, OLSE(Ordinary Least Square Estimator)를 이용하는 전통적인 방법에 반해, Huber-type instrumental variable(IV) estimator를 이용한 방법을 제안하였다. 본 논문에서 제시된 이 방법은 pivotal statistic의 극한분포가 정규분포를 따르며 unbiased함을 보여준다. 그리고, 제안된 추정량은 cauchy-type estimator의 변형된 형태로서, nonstationary한 모형에서 큰값을 적절히 조절하여 준다. recursive mean adjust를 하여 simulation한 결과, 제안된 Huver-type IV estimator가 OLSE의 경우보다, locally powerful 하다는 것을 알 수 있다.CHAP 1 INTRODUCTI0N 2 CHAP 2 HUBER-TYPE IV ESTIMATOR FOR SEASONAL AR(1) MODEL 4 CHAP 3 UNIT ROOT TESTS FOR SEASONAL MODELS 11 3.1 no mean case 11 3.2 common mean adjusted case 12 3.3 seasonal mean adjusted case 13 CHAP 4 MONTE-CARLO SIMULATI0N 14 CHAP 5 DISCUSSI0NS 24 APPENDIX-PROOFS 25 REFERENCES 26 PROGRAM OF SIMULATI0NS IN SEASONAL AR(1) MODEL 27 논문초록 32 감사의 글 3

徐居正의 文學史 認識

학위논문(석사)--서울대학교 대학원 :국어국문학과 국문학전공,2002.Maste

질소 산화물 흡장 환원 반응에서 하이드로탈사이트에 담지된 Pt-BaO 촉매의 특성

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 화학생물공학부, 2013. 8. 김도희.Diesel engines are operated under excess of oxygen, so conventional three-way catalyst hardly removes NOx emitted from diesel engines. To remove NOx more effectively, NOx Storage Reduction (NSR) technology is being used as one of the potential methods. The typical NSR catalyst, Pt-BaO/Al2O3, shows good performancehowever, there are drawbacks such as inferior thermal stability and narrow active temperature region. This study addresses the use of Mg-Al mixed oxide, known as hydrotalcite material as NSR catalyst support to overcome these disadvantages. In this work, hydrotalcite was synthesized with various Mg/Al molar ratios and used NSR catalyst support on which Pt and Ba were loaded. Hydrotalcite (HT) was prepared by applying co-precipitation method with the Mg/Al ratios of 1:9, 2:8, 3:7, 4:6, 5:5 and 6:4. Hydrotalcite was then calcined at 800 ℃ and used as NSR catalyst support. All prepared catalysts were calcined at 500 ℃, 650 ℃ and 800 ℃, and the NOx storage activity of the catalysts was examined. Then, various characterizations were performed by the means of BET specific surface area, XRD, ICP, FT-IR, CO chemisorption, TEM/ EDS and NO2-TPD. On the samples calcined at 500 ℃, the NOx storage activities of HT-supported catalysts were superior to that of Al2O3 supported one. Also, the range of active temperature region was shifted to high temperature while that of Pt-BaO/Al2O3 catalyst was narrow. Especially, for the case of sample with the Mg/Al ratio of 2:8, the temperature where the activity is maximized is 400 ℃. On the samples calcined at higher temperature (650 ℃ and 800 ℃), the activity of Pt-BaO/Al2O3 catalyst was completely deactivated in all temperature regions due to the sintering of Pt while HT-supported catalysts still show remarkable NOx storage ability especially in high temperature region. It was confirmed that catalysts supported on Mg-Al mixed oxide have better thermal durability such as activity, minimized Pt sintering and less BaAl2O4 formation, thus better NOx storage activity. Especially, Mg/Al ratio is 4:6. This study provides the information on optimal Mg/Al ratio to use hydrotalcite as support for NSR reaction. When Pt and Ba were loaded on the support, HT-supported catalysts showed superior NOx storage performance compared with Al2O3-supported catalyst even after high temperature treatment. Also, we confirmed the positive effect of MgO on the stability of Pt. In summary, it was found that the use of hydrotalcite as NSR catalyst support can aid in improving NOx storage activity and Pt dispersion, and inhibiting sintering of Pt, thus potentially substituting Al2O3 support.Abstract List of Tables List of Figures Chapter 1. Introduction 1.1. Background of diesel engines and their emission regulations 1.2. Background of Hydrotalcites (HTs) 1.3. Objective Chapter 2. Theoretical formulation 2.1. Diesel engines aftertreatment systems 2.1.1. Diesel Oxidation Catalyst (DOC) 2.1.2. Selective Catalytic Reduction (SCR) 2.1.3. NOx Storage Reduction (NSR) Chapter 3. Experimental 3.1. Preparation of catalyst 3.1.1. Synthesis of Hydrotalcite 3.1.2. Preparation of Pt-BaO/Support catalysts 3.2. Characterization of the prepared catalysts 3.2.1. N2 adsorption-desorption 3.2.2. X-ray diffraction (XRD) 3.2.3. Inductively coupled plasma (ICP-AES) 3.2.4. Temperature-programmed desorption (TPD) 3.2.5. FT-IR and Chemisorption 3.2.6. Transmission electron microscopy (TEM) 3.3. Activity test – NOx Storage Reduction (NSR) Chapter 4. Results and discussion 4.1. Fresh samples 4.2. Aged samples 4.3. Pt/HT samples Chapter 5. Conclusions References 초 록Maste

A study on the pre-teachers' awareness on media usage in the class of Korean classical literature education: By comparing of high school students and undergraduate students

This research has investigated on the impact teachers' media support, richness of media, learning motives and learning commitment focus on the comparison of high school students and undergraduate students. The results showed that in all variables including media richness, teacher's media support, learning motive, learning commitment and media experience, the average was higher in university students, who were also preservice teachers. Moreover, the standard deviation was widespread in the high school group, whereas the preservice teacher group's scores gathered near the higher score range. However, regarding learning commitment, the differences were very minor, which showed that preservice teacher university students had a higher psychological resistance to the relationship between classic study and media usage. Therefore, there may need to be some improvement to fee mindset of pre-service teachers, regarding classical studies through media usage. ©2016 International Information Institute

Development of Marine-derived Protein-based Nanoparticles for Photothermal Cancer Therapy

MasterCancer has been a leading cause of human death worldwide, and various therapeutic therapies have been studied and developed. Surgery, radiation, and chemotherapy have traditionally been used as three standard anticancer therapies, however there is a limit to complete removal of the cancer by surgery, and anticancer drugs may cause side effects on normal cells. Drug resistant cells make it more difficult to treat cancer by chemotherapy. In addition, the poor quality of life is the main reason for patients to hesitate to take radiation therapy. Accordingly, new anti-cancer therapies have been developed with little concern about side effects and complications. Especially, photothermal cancer treatments that can kill cancer cells through light-induced hyperthermia have been attracted considerable attention due to high selectivity, and minimally invasiveness. Using photothermal agents, which can convert light to thermal energy, heat, can be generated locally, increasing the temperature of cancer cells above 42.5 ℃ to induce apoptosis. Additionally, combined treatments with chemotherapy and photothermal therapy have been reported to improve therapeutic efficacy synergistically through different mechanism of action. Inorganic materials having high photothermal conversion efficiency such as gold nanoparticles (NPs) and iron oxide NPs are widely used as photothermal therapeutic agents, but there are limitations in actual clinical applications due to their toxicity. Therefore, research has been developed for finding small molecules having high photosensitivity and biocompatibility. Indocyanine green (ICG), a FDA-approved safe substance, has a photosensitizing property with near infrared (NIR) light that has high skin permeability. However, rapid degradation of aqueous media (short half-life), low thermal stability, and its easy binding to blood proteins are the limitations in practical applications. In order to improve the stability of ICG, many researches are trying to deliver ICG using NPs. However, there are problems with immune response of NPs as well as the matter of toxicity come from high doses. Therefore, in order to further highlight the advantages of biocompatible ICG, there is a need to have high biocompatibility of the nanocarrier itself. In this study, we encapsulated ICG in highly stable NPs that are made of marine organism-derived proteins with dityrosine binding. The ultimate goal of this study was to maximize the photothermal effect of ICG and at the same time, minimize the side effects with high biocompatible protein-based nanoparticles. In detail, mussel adhesive protein (MAP) and sea anemone silk-like protein (aneroin) were used with different delivery system according to the characteristics of two materials. First, MAP-based NPs (MNPs) produced by electrospray through enzyme-catalyzed dityrosine crosslinking and confirmed to have a uniform size with excellent adhesive property. Cytotoxicity experiments also demonstrated the biocompatibility of the MNPs. The ICG was encapsulated in MNPs with high efficiency, and the ICG-loaded MNPs (M@ICG NPs) had a higher temperature rise rate than free ICG and demonstrated successful anticancer effect on breast cancer cells, MCF7. The unique adhesion property of MAP can be applied to the post-operative site or by intratumoral injection to maintain high concentrations of photothermal agents at the local site for effective anticancer treatment effect. Next, we developed aneroin-based NPs (ANPs) by electrospray combining dityrosine crosslinking through photo-oxidative reaction, we successfully fabricated ANPs with uniform particle size distribution, and verified low cytotoxicity, and passive tumor targeting property of ANPs via the enhanced permeability and retention (EPR) effect that NPs tend to accumulate in tumor much more than in normal tissues. These results confirmed the possibility of using it as a photothermal agent that can be administered systemically by intravenous injection. Overall, we have developed the two types of marine organism-derived proteins-based NP systems for photothermal therapy to maximize anticancer treatment efficacy with minimal side effects. Both bioengineered proteins have advantages of excellent biocompatibility, biodegradability, and mass production. In addition, molecular biotechnology also makes it possible to produce homogeneous proteins and add functional peptides easily. The NPs developed in this dissertation showed the possibility to be applied successfully to photothermal therapy by protecting ICG through stable dityrosine binding for a long time without releasing. In addition, these NPs are anticipated to be used throughout local or systemic cancer therapies not only because of their superior biocompatibility and biodegradability, but also due to their unique underwater adhesion property of MAP and the excellent physical property of aneroin.전세계적으로 암은 많은 사람들을 고통받게 하는 질병으로 꾸준히 인류의 주된 사망 원인이었다. 3대 표준 항암 치료 요법인 수술, 방사선 조사, 그리고 화학 요법이 전통적으로 활용되고 있지만, 수술로는 미세한 암세포의 제거가 어려워 완전한 암 치료에 한계가 있으며, 항암제의 경우 정상적인 세포에도 부작용을 일으킬 수 있으며, 약물내성세포의 경우 치료가 더 어렵다. 또한, 삶의 질 저하를 야기하는 방사선 치료 부작용에 대해 우려하는 환자에게는 이 치료법들만을 적용하기 어려운 것이 현실이다. 이에 따라 항암치료 부작용과 합병증에 대한 우려가 적은 새로운 항암 치료법들이 개발되어왔고, 그 중에서도 레이저를 통하여 암 병변에 국소적으로 42.5도가 넘는 열을 발생시켜 열에 민감한 암세포만 선택적으로 파괴하는 광열암치료가 해결책 중 하나로 주목받고 있다. 광열암치료는 빛을 조사하여 발생한 열로 암세포가 스스로 괴사하도록 유도하기 때문에 면역력을 높이고, 단독 치료만으로도 효과를 볼 수 있지만, 화학 요법과 병행될 경우 항암제가 종양 세포에 더욱 효과적으로 도달할 수 있도록 기여하며 상승효과를 줄 수 있다. 광열 치료제로써 높은 광열전환효율을 가진 금 나노입자, 산화철 나노입자 등 무기물질이 많이 이용되고 있지만 독성의 위험성으로 인하여 실제 임상 적용에는 한계가 있다. 이에 생체적합성을 지닌 유기물 기반의 저분자 물질에 대한 관심이 높아지고 있으며, 그 중에서도 특히 Indocyanine green(ICG)는 FDA 승인을 받은 물질로 높은 생체적합성을 가지고 있다. 오래전부터 의료계에서 조영제로 사용되어온 만큼 안전성이 확보되어 있으며 피부 투과성이 높은 근적외선 빛에서 광열효과를 가지고 있기 때문에 생체적합성이 높은 광열제로서 높은 가능성을 지니고 있다. 하지만 수중 매질에서의 낮은 안정성과 빠른 세포 흡수, 그리고 짧은 반감기로 인해 실제 응용에는 한계점이 있다. 이에 ICG의 안정성을 높이기 위해 나노입자를 이용해 전달하고자 하는 연구들이 많이 이루어져왔지만, 나노 입자 자체 혹은 가교제의 독성 및 면역 반응에 대한 문제와 광열 치료제 자체의 열적 한계로 인한 불충분한 발열량과 높은 투여량에 대한 문제들을 가지고 있기도 하다. 따라서 생체적합성을 지닌 ICG의 장점을 더욱 부각시키기 위해서는 이를 전달하는 나노캐리어 또한 높은 생체적합성을 지닐 필요성이 있으므로 단백질 기반의 나노 입자에 탑재하는 연구가 필요하다. 단백질 기반의 나노 입자는, 우선 단백질이라는 재료로부터 높은 생체적합성과 생분해성을 지니며, 다양한 작용기를 가지고 있어 여러 반응들을 통하여 생체재료 혹은 생체 의료용 소재로 제작하기 용이하다. 또한 분자생물공학을 활용하여 재생산된 단백질을 활용할 경우, 독특한 성질을 지닌 단백질을 균일한 상태로 대량생산할 수 있다는 장점이 있으며, peptide를 fusion시킴으로써 추가적인 기능도 부여할 수 있다. 결론적으로, 본 연구는 광열 효과가 높으면서도 FDA 승인을 받은 안전한 물질이지만, 수성 매질의 빠른 분해 및 신체로부터의 빠른 제거 및 혈액 단백질에 쉽게 결합하기 때문에 실질적인 활용에 제한이 있는 ICG를 다이타이로신 결합 기반의 매우 안정적인 단백질 나노입자에 탑재함으로써 ICG의 광열 치료 효과를 극대화하고, 생체적합성이 높은 단백질 기반의 나노입자로서 부작용을 최소화하는 것을 목표로 진행되었다. 본 연구에서는 자체 기술을 통하여 생산한 두 가지 단백질, 홍합접착단백질(MAP)과 아네로인을 활용하여 연구를 진행하였다. 홍합 접착 단백질 기반 나노입자는 효소에 의해 다이타이로신 결합을 형성하며 균일한 크기를 가짐을 확인하였으며, 접착력 역시 우수함을 확인하였다. 세포 독성 실험을 통하여 홍합 접착 단백질 기반 나노입자 자체의 생체 적합성 역시 증명하였다. ICG를 coelectrospray 기법을 통하여 다양한 몰비율로 탑재한 결과, MAP와 ICG의 몰 비율이 1:6이 될 때까지도 95%가 넘는 높은 효율로 ICG를 탑재함을 확인하였다. In vitro 실험결과, 탑재되지 않은 ICG 보다 더욱 빠른 온도 상승 속도를 보이며 유방암 세포주인 MCF7에서 성공적인 항암 효능을 보였다. 따라서, 홍합접착단백질 기반의 나노입자는 홍합 접착 단백질의 고유한 접착 능력을 통하여 수술 후 부위에 도포하거나 암 부위에 직접 주입하여 국소부위에 광열 치료제를 고농도로 유지시키며 효율적인 항암 치료 효과를 보일 수 있을 것으로 기대된다. 다음으로, 암의 전이를 예방하고 잔류 암세포를 제거하기 위하여 전신적 투여가 가능한 아네로인 기반 나노입자를 개발하였다. 아네로인 기반 나노입자는 전기방사를 진행하면서 빛을 가하여 빠르게 다이타이로신 결합을 형성시켜 제작되었으며, 균일한 입자 크기를 가지는 것을 확인하였다. 세포 독성실험을 통하여 아네로인 나노입자의 생체적합성을 증명하였으며, MCF7 세포를 BALB/c 누드 마우스에 주입한 유방암 종양 모델을 통하여 아네로인 나노입자가 EPR 효과를 통하여 암세포에 잘 전달됨을 확인함으로써 정맥주사를 통한 광열 치료제로서의 활용 가능성을 보았다. 종합적으로 본 학위 논문을 통해 최소한의 부작용으로 항암 치료 능력을 극대화 하기 위하여 두 가지 방식의 해양생명체 유래 단백질 기반 나노입자 시스템을 구성하였다. 홍합 전달 단백질과 아네로인 모두 우수한 생체적합성 및 생분해성을 보유하고 있으며, 본 연구실의 분자 생물 공학 기술을 통하여 균일한 단백질 생산뿐 아니라 변형도 용이하다는 점과 타이로신기를 충분히 보유하고 있어 가교 역시 용이하게 진행 될 수 있다는 장점을 가지고 있어 나노 입자들의 주 재료로 활용되었다. 또한, 안정한 다이타이로신 결합을 통해 나노입자의 안정성이 확보되어 오랜 시간 동안 ICG를 방출하지 않고 보호할 수 있어 광열 치료에 응용될 수 있음을 확인하였다. 본 학위 논문에서 개발된 해양생명체에서 유래한 단백질 기반의 나노입자는 우수한 생체적합성과 생분해성을 가질 뿐 아니라, 홍합접착단백질의 탁월한 수중 접착성과 아네로인의 우수한 물리적 특성을 통해 국소적, 전신적 암 치료에 두루 활용될 수 있을 것으로 크게 기대된다. 홍합접착단백질 기반의 나노입자의 경우는 ICG를 탑재하고 이에 따른 온도 상승효과를 in vitro까지 확인하였기 때문에, 후에 in vivo 상에서도 다음과 같이 종양내 주사나 수술 후 스프레이 기법 두 가지 방법으로 적용될 수 있을 것으로 기대된다. 한편 이번 연구에서 나노입자 제작의 최적화까지만 진행된 아네로인의 경우에는, 광열제인 ICG를 탑재하고, EPR effect 와 더불어 active targeting agents를 도입함으로써 더욱 확실한 항암 효과를 확인할 수 있을 것이다. 또한, ICG뿐 아니라 dityrosine도 자체의 형광을 가지고 있기 때문에 이 두 물질의 특징을 활용하여 치료와 진단을 동시에 할 수 있는 theragnosis로서의 활용성에 대한 연구도 진행될 수 있을 것으로 기대된다