Ex vivo differentiation towrd hepatocyte lineage cells from stem cells in human umbilical cord blood and bone marrow

Objective: The purpose of this study was whether stem cells from human umbilical cord blood and bone marrow are able to generate mature hepatocyte lineage cells in ex vivo culture system. Methods: Mononuclear cells from cord blood and bone marrow were cultured with fibroblast growth factor-1, fibroblast growth factor-2, stem cell factor, and hepatocyte growth factor. Morphology of cultured cells was monitored in inverted light microscopy. Cultured cells were analyzed by reverse transcription-polymerase chain reaction, immunofluorescent staining for detecting hepatocyte lineage markers and by flow cytometry for demonstrating specific hepatocyte lineage differentiation rather than hematopoietic one. Results: Cutured mononuclear cells differentiated to large round shaped cells. In immunofluorescent staining, cultured cells expressed albumin, cytokeratin-19 and some of the albumin producing cells contained PCNA. mRNA of albumin, cytokeratin-18 and alpha-fetoprotein were detected by RT-PCR. Cellular differentiation toward hepatocyte lineage cells was observed by flow cytomery analysis. Conclusions: Stem cells in human umbilical cord blood as well as bone marrow can differentiate toward hepatocyte lineage cells in primary culture system ex vivo and may serve a cell source for cell therapy of hepatic tissues.;본 연구에서는 인간의 골수와 제대혈의 두 상이한 조직에서 얻은 성체 줄기 세포가 간세포 성장 과정에 작용하는 것으로 알려진 성장인자들을 이용한 동일 조건의 배양 실험하에서 간세포로 분화가 가능한지 관찰해보고자 하였다. 환자 동의하에 얻은 제대혈과 골수에 Ficoll-Paque 용액을 첨가한 후 원심분리하여 단핵세포를 추출하였다. 분리된 단핵세포를 배지에서 배양하였는데 간세포 분화 발달 단계에 작용하는 것으로 알려진 fibroblast growth factor 1, 2(이하 FGF-1,2), Stem cell factor(이하 SCF), hepatocyte growth factor(이하 HGF)를 첨가하였다. 21일간 배양하면서 세포의 형태를 관찰하였고 간세포계열로 분화하였는지 판단하기 위해 간세포에서 나타나는 표지자들을 역전사 중합효소 연쇄반응, 면역형광염색, 흐름세포 측정법 등을 이용하여 분석하였으며 그 결과는 다음과 같았다. 1) 제대혈과 골수에서 분리한 단핵세포들은 성장 인자들을 첨가한 배지에서 배양하자 균질한 난원형의 커다란 세포들로 분화하였다. 2) 역전사 중합효소 연쇄반응 검사에서 골수와 제대혈의 배양세포 모두에서 간세포 계열 표지자인 albumin, cytokeratin-18(이하 CK-18), alpha-fetoprotein(이하 AFP)의 mRNA가 관찰되었다. 3) 면역형광염색에서도 제대혈 배양 시간이 경과할수록 albumin과 cytokeratin-19 (이하 CK-19)의 발현이 증가하는 것을 관찰할 수 있었고 골수 배양 7일째에도 albumin과 CK-19가 강하게 발현되었다. 간세포의 표지자를 발현하는 세포들의 증식 능력을 보기 위하여 proliferating cell nuclear antigen(이하 PCNA)으로 염색하였을때 albumin을 발현하는 세포들에서 PCNA가 발현되어 간세포 계열로 분화한 세포들이 증식 능력도 있음을 보여주었다. 4) 흐름세포측정법을 이용하여 배양된 골수 단핵세포들의 표현형을 분석하였는데 간세포계열 표지자인 CK-18는 배양 기간이 경과할수록 증가하는데 비하여 조혈세포 계열의 표지자들은 감소하는 것이 관찰되어 본 연구에서의 배양 조건은 줄기세포가 간세포 계열로 분화하도록 하였다는 것을 알 수 있었다. 골수와 제대혈에서 분리한 줄기세포는 FGF-1, FGF-2, SCF, HGF를 첨가한 배양 실험에서 간세포계열 세포로 분화하였으며 이는 줄기세포를 필요한 간세포로 특이적으로 체외에서 분화시켜 임상적 활용의 가능성을 보여 주었다.목차 Ⅰ. 서론 = 1 Ⅱ. 연구 대상 및 방법 = 3 A. 연구 대상 = 3 B. 연구 방법 = 3 1. 세포 배양 = 3 2. 역전사 중합효소 연쇄반응(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR) = 4 3. 면역형광염색(Immunofluorescent staining) = 4 4. 흐름세포측정(Flow cytometry) = 4 Ⅲ. 연구 결과 = 7 A. 형태학적 관찰 = 7 B. 역전사 중합효소 연쇄반응을 이용한 간세포 표지자의 mRNA 검출 = 7 C. 면역형광염색을 이용한 간세포 표지자 발현과 증식능 분석 = 7 D. 흐름세포 측정법을 이용하여 배양된 골수세포의 표현형 분석 = 8 Ⅳ. 고찰 = 14 Ⅴ. 결론 = 19 참고 문헌 = 20 ABSTRACT = 2

교합 인기재의 중합수축 양상

이 논문의 목적은 교합 인기재 (5 polyvinylsiloxane, 1 polyether와 1 dimethacrylate)의 시간에 따른 중합 수축양상을 기록하고 1, 3, 5, 7, 10 분에 나타나는 체적 변화량을 비교 평가하는 것이다. 이 실험에 사용된 5개의 polyvinylsiloxane는 ImprintTM Bite (3M ESPE), Silagum Automix Bite (DMG), Blu-Mousse?Classic (Parkell), O-Bite (DMG)와 Exabite II (GC) 였으며, 1개의polyether는 Ramitec (3M ESPE)과 1개의 dimethacrylate는 Luxabite (DMG)였다. Bonded-disk method에 의해 LVDT (linear variable differential transformer)를 이용하여 재료 혼합 20초 후 10분까지shrinkage-strain (%)이 측정되었다. 모든 자료는 one-way ANOVA와 multiple comparison Scheffé test를 통해 분석되었으며, 유의수준은 p< 0.05였다. 초기 팽창을 보인 Luxabite를 제외한 표본들은 모두 급격한 수축을 나타냈다. 이후 10분간 shrinkage-strain은 증가하였으나 shrinkage rate는 점차적으로 감소하였다. Blu-Mousse?Classic, ImprintTM Bite와 Silagum Automix Bite가 10분 동안 나타낸 shrinkage-strain의 차이는 유의성이 없었다. Exabite II와 Luxabite는 가장 높은 shrinkage-strain (2.02 ~ 3.30 %)을 보였다. 전반적으로 Ramitec은 Exabite II를 제외한polyvinylsiloxane 재료 보다 높은 shrinkage-strain을 보였다. O-Bite는 3분 부터 가장 낮은 shrinakge-strain을 보였으며 기타 재료들과 유의한 차이는 5분부터 나타났다 (p < 0.05). 위 교합 인기재들은 서로 다른 중합수축 양상을 나타냈으며 각 제조사가 제시한 경화시간 경과 후에도 경미한 수축을 보였다.;Purpose. The purpose of this in vitro study was to investigate the polymerization shrinkage behavior and measure the polymerization shrinkage-strain of 5 polyvinylsiloxane (PVS), 1 polyether (PE) and 1 dimethacrylate (DM) -based interocclusal recording materials. Material and methods. The materials investigated in this study were 5 PVS-based materials: ImprintTM Bite (3M ESPE, Germany), Silagum Automix Bite (DMG, Germany), O-Bite (DMG, Germany), Blu-Mousse?Classic (Parkell, Inc., USA) and Exabite II (GC America Inc., USA); 1 PE-based material: Ramitec (3M ESPE, Germany); and 1 DM-based material: Luxabite (DMG, Germany). The polymerization shrinkage values of ten specimens for each material mentioned above were measured at 1, 3, 5, 7 and 10 minutes after mixing at 37 °C. Then, the amount of shrinkage-strain (%) was derived and all data were statistically analyzed by one-way ANOVA and the multiple comparison Scheffé test at the significance level of 0.05. Results. The representative shrinkage-strain kinetics graph showed that all specimens shrank immediately, except the Luxabite which expanded for the initial few seconds. After that, the shrinkage-strain increased in the magnitude up to 10 minutes, but its rate decreased gradually with time. During the measurements up to 10 minutes, the shrinkage-strain values presented by Blu-Mousse?Classic, ImprintTM Bite and Silagum Automix Bite were comparable to each other. Exabite II and Luxabite showed the highest values (2.02 ~ 3.30 %), significantly different from other materials all the time (p < 0.05). Generally, Ramitec presented higher shrinkage-strain values than PVS-based materials, except Exabite II. And O-Bite presented the lowest values of shrinkage-strain from 3 minutes, but they were significantly different from the other materials just from 5 minutes (p < 0.05). Conclusion. Within the limitations of this study, the materials investigated presented significantly different polymerization shrinkage-strain and showed dimensional changes even after the setting time indicated by respective manufacturers.ABSTRACT 2 I.INTRODUCTION 4 II.MATERIAL AND METHODS 6 III.RESULTS 11 IV.DISCUSSION 16 V.CONCLUSION 23 REFERENCES 24 Appendix 31 국문초록 5

The Korean Constitutional Court and Countermajoritarian Difficulty under the Roh Moo Hyun Administration: Analysis on Judicial Nullification Cases in Major Policy Issues

1987년 한국의 민주화는 대통령 직선 및 입법부 강화와 헌법재판제도 신설이라는 제도적 틀로 시작되었다. 전자는 민주주의의 강화라면 후자는 헌정주의의 강화였다. 한국민주주의는 이후 사법부의 독립성 증대와 정치의 사법화를 경험하게 되었고 특히 헌법재판소 역할의 양적·질적 팽창에 직면하게 되었다. 따라서 서구민주주의에서 전통적으로 대두되어온 사법부의 반다수제 문제(countermajoritarian difficulty)가 한국정치에서 도 중요한 현실이 되었는 바 본고에서는 이를 실증적으로 검토하려고 한다. 이를 위해 미연방대법원을 중심으로 이 문제를 다룬 여러 논의들을 고찰하고 다알의 입법다수 개념을 사용, 노무현 정부 시기 정책이슈에 대한 헌재의 위헌결정을 살펴본다. 그 결과 중차대한 이슈의 사법화가 이루어졌지만 헌재 결정의 실질은 반다수적이 아니었다. 동시에 합의 및 대안형성 부재의 민주주의가 제왕적 위치로 헌재를 자주 초청하였는 바, 이런 상황의 지속은 마침내 반다수적 결정과 제왕적 사법부를 야기할 수도 있을 것이다. 결국 지금까지의 논의는 좋은 민주주의가 좋은 헌정주의를 가능하게 한다는 것을 가리키고 있는 것으로 보인다. After the democratization in South Korea in 1987, the new Constitution was adopted which introduced the direct presidential election system with a more powerful legislature and new constitutional review system. As the Korean Constitutional Court gained more independence and started to deal with essential political issues, it grew to be an important political actor. Accordingly, the matter of countermajoritarian ifficulty, which has always been important in the U.S. politics, has also become very critical in Korea. Therefore this paper aims to empirically analyze this matter in Korean context. First, I reviewed various related arguments on the U.S. Supreme Court. Then, I analyzed the matter of countermajoritarian difficulty in the Korean Constitutional Court under the Roh Moo Hyun administration based on the concept of law-making majority of Dahl. In conclusion, the Korean Constitutional Courts decisions on major issues were not against a determined and persistent law making majority but against a unstable and transient majority. Also, the frequent invitation of Judiciary to the imperial status will possibly cause countermajoritarian difficulty and an imperial judiciary in the future. This implies that a better constitutionalism ultimately needs a better democracy

친화도 기반의 전력 절약 프로토콜

Thesis(master`s)--서울대학교 대학원 :전기·컴퓨터 공학부,2005.Maste