피스톤 링 마찰력 측정시스템 개발

학위논문(박사) -- 서울대학교대학원 : 공과대학 기계항공공학부, 2022. 8. 민경덕.Due to the piston dynamics and its wide lubricating range, various factors can affect the friction change, including piston and ring designs, and environmental parameters such as engine oil temperature, engine speed, and in-cylinder pressure. It is important to separate the total piston friction into two major friction parts, piston skirt friction and ring friction to observe the effect of each factor on the piston friction. Though various measurement methods for the piston friction have been developed in the past, the piston ring friction has not been investigated separately from the entire piston friction considering both engine motoring and firing conditions. A new measurement system was developed to examine the piston ring friction in detail based on floating liner method. In comparison to conventional floating liner experiments, one another piston was adopted above the conventional crank-piston system to minimize friction from thrust force. The measuring piston is connected with the conventional piston by adding an extended connecting rod in between. The new system has double pistons. Therefore, with the new system, the measuring piston tends to move straight up and down in the liner. The piston secondary motion including the piston thrust and angular motion can be minimized nearly zero with the new system. Because of its structural characteristic, the piston skirt friction, from the interaction between the piston skirt and the liner, can be excluded with the new system. In addition, the irregular piston ring behavior such as piston ring twist and fluttering from the piston tilting motion can also be excepted. The friction changes from the interaction solely between the piston ring and the liner can be measured. This allows the parametric study of the friction force that occurs only in the piston ring. The new system has been built up as a reliable system through many updates. To implement the stable combustion with the floating liner, a gas seal has to be applied. However, it is difficult to maintain the liner in a floating state and seal the combustion gas at the same time. To compromise these two opposite aspects, several gas sealing methods were reviewed and tested. The gas seal showed the same sealing performance with the conventional fixed liner. Moreover, in order to minimize the disturbing extra force factors on floating liner and to measure only the friction force, the extra force factors are eliminated in two approaches. The system is modified to minimize these factors. On the other hand, the extra force factors are measured to exclude the effective amount from the measured friction data. Furthermore, the geometrical change of the entire system was made for more reliable friction measurement. With the modified system, only piston can be taken out from the engine, and the boundary conditions can be maintained throughout the several repetitive experiments. The data repeatability was confirmed with the experimental results. Various factors affecting lubrication conditions of piston rings were tested. The piston friction force is measured under the main engine operating conditions, which include engine oil temperature, engine speed, and in-cylinder pressure. Friction data shows a good agreement with the Stribeck curve as the engine operating parameter changes. Additionally, the tension effect of Oil Control Ring (OCR) was examined. The friction force change follows the amount of OCR tension changes. Through the experimental results drawn with the new system, it is possible to provide a quantitative analysis on friction. The newly developed device can highly contribute to fundamental piston ring researches.최근 지구 온난화에서 기인하는 기후, 생태계 변화가 가속화되면서 본 위기를 극복하기 위한 다양한 노력이 범국가적 차원에서 논의되고 있다. 지구 온난화의 주범으로 꼽히는 자동차 내연기관에서의 이산화탄소 배출로 인해 내연기관 자동차의 생산을 중단하고 판매를 금지하는 법을 오는 2035년부터 독일을 제외한 유럽 국가에서 시행하게 된다. 그러나 여전히 실 도로의 많은 교통수단이 내연기관을 사용하고 있고, 하이브리드 및 전기차로의 인프라 변경 과정에서 내연기관의 활용은 필연적이다. 내연기관에서의 연비를 향상시키고 이산화탄소를 줄이는 방법에는 다양한 효율 저감 인자를 개선시키는 방법이 있는데, 본 연구에서는 내연기관 기계적 마찰 손실에 기여하는 바가 큰 피스톤 링 마찰력에 대한 실험적 연구를 수행하였다. 피스톤 링 마찰력을 줄이고 개선하기 위해서는 우선 실제 내연기관에서의 피스톤 링 마찰력을 정량적으로 측정하는 것이 중요하다. 피스톤 링 마찰력을 측정하기 위해 다양한 측정방법이 고안, 개발되었으나, 여전히 해당 장비의 신뢰성이 엔진 고온 고압의 연소상황에서 현저히 떨어지며, 피스톤 링에 집중된 기초적인 측정 장비가 엔진 전체 구동 상황을 반영하기 어려운 실정이다. 따라서 본 연구에서는 엔진 모터링, 연소 조건에서 모두 구동 가능한 피스톤 링 마찰력 측정 장치를 개발하고 그 성능을 다양한 조건에서의 실험 결과를 기반으로 마찰 기초 이론과 비교, 검증하였다. 본 연구에서 새로 연구 개발한 피스톤 링 마찰력 측정 시스템은 기존의 부동라이너 기법을 활용하고 있으며, 실험 조건을 연구의 목적에 따라 다양하게 변경할 수 있는 단기통 엔진으로 제작, 완성되었다. 선행연구에서의 부동 라이너 기법은 엔진 연소시에 오직 피스톤 및 링 팩의 마찰력을 측정할 수 있는 장점을 가지나, 기존 피스톤-크랭크 시스템을 사용하여 피스톤 이차 거동까지 반영되므로, 순수 피스톤 링에서 기인하는 마찰력을 측정하기 어렵고, 피스톤 이차 거동에 의한 큰 피스톤 측력의 작용으로 부동 라이너에 추가 진동이 작용하여 마찰력 측정에 어려움이 있다. 그러나 본 장치는 이중 피스톤 구조를 고안하여, 기존 피스톤-크랭크 장치에 연장 콘로드를 활용하여 하나의 피스톤을 더 얹는 방식으로, 피스톤 측력을 0에 가까운 수준으로 크게 줄였다. 따라서 새롭게 개발된 장치는 구조적 특징으로 피스톤 측력에 의한 부동라이너의 추가 진동을 줄여 마찰력 데이터의 신뢰성을 높일 수 있다. 또한 피스톤의 각운동, 즉 피스톤 경사각(Piston Tilting Angle)의 영향을 기존 피스톤-크랭크 시스템 대비 1/17 수준으로 줄일 수 있어, 피스톤 경사각으로 인해 발생하는 피스톤 링의 무작위적 각운동이 마찰력에 끼치는 영향을 배제할 수 있다. 따라서 본 장치로 피스톤 이차 거동에 의한 피스톤 스커트 마찰력 뿐만 아니라, 피스톤 경사각 발생에 의해 무분별하게 생성되는, 피스톤 링 Twist, Fluttering 현상에서 기인한 마찰력 변화 또한 배제한 순수 피스톤 링 제원에 따른 마찰력 측정을 가능케 하였다. 개발된 장비가 기존의 선행연구에서의 현상, 기초 마찰 이론에 근거한 마찰력 변화를 잘 따라가는지 확인하기 위해 다양한 엔진 구동 조건에서의 실험을 수행하였다. 피스톤 상면에 압력이 걸리지 않는 상황에서 엔진 속도, 오일 온도에 따른 피스톤 링 마찰력 변화를 확인하는 기초적인 실험을 수행하였고, 피스톤 상면에 압력이 걸리는 모터링, 연소 조건에서의 마찰력 또한 측정하였다. 측정된 마찰력 데이터는 마찰 기초 이론인 Stribeck curve를 잘 따라가며, 윤활 조건의 변화에 따라서 마찰력 값의 변화를 확인할 수 있었다. 또한 세가지 피스톤 링에서 오일 컨트롤 링(OCR)의 장력 변화에 따른 마찰력 변화를 오일 온도, 엔진 속도에 따라 관찰하여, 오일 컨트롤 링 장력의 변화량이 마찰력에 기인하는 정도를 본 개발된 장비를 통해 확인할 수 있음을 입증하였다. 따라서 새롭게 고안된 본 장비를 활용하여 피스톤 링 개발 단계에서, 개발 방향에 대한 마찰력 측면에서의 정량적인 지표를 높은 신뢰도로 제공할 수 있다. 더욱이 본 장비에서 측정된 데이터는 추후 보다 신뢰성 높은 피스톤 링 마찰 시뮬레이션 모델 구축에 중요한 검증 자료로 활용될 수 있을 것이다.Abstract i List of Figures vii List of Tables xiv Nomenclature xv Chapter 1. Introduction 1 1.1 Research background and motivations 1 1.2 Literature review 7 1.2.1 Piston rings 7 1.2.2 Piston ring dynamics 10 1.2.3 Calculation of piston ring friction 13 1.2.4 Piston friction measurement 25 1.3 Research objectives 29 1.4 Structure of the thesis 30 Chapter 2. Development Process of a New Piston Ring Friction Measurement System Engine V1 31 2.1 Design concept 31 2.2 Engine structure 43 2.3 In-cylinder gas sealing method 48 2.4 Experimental setup & conditions 59 2.5 Experimental results from Engine V1 68 2.6 Remaining issues from Engine V1 77 Chapter 3. Development Process of a New Piston Ring Friction Measurement System Engine V2 78 3.1 Design improvements from Engine V1 78 3.2 Extra force elimination 87 Chapter 4. System Verification 101 4.1 Base piston ring friction study 101 4.1.1 Oil temperature effect 106 4.1.2 Engine speed effect 112 4.1.3 Data repeatability 118 4.1.4 Each ring friction 120 4.1.5 Engine load effect 123 4.1.6 Piston thrust force effect 128 4.2 Piston ring design parameter study 133 4.2.1 Ring tension effect 133 Chapter 5. Conclusion and Future Works 138 5.1 Conclusion 138 5.2 Future works 141 References 146 국 문 초 록 153박

In vivo bioluminescence reporter gene imaging for the activation of neuronal differentiation induced by neuronal activator neurogenin 1 (Ngn1) in neuronal precursor cells

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 의학과 핵의학 전공, 2013. 2. 정재민.Purpose: The facilitation capability of neuronal lineages derived from transplanted stem cells is essential to improve the low efficacy of neuronal differentiation in stem cell therapy in vivo. Neurogenin 1 (Ngn1), a basic helix-loop-helix factor, has been used as an activator of neuronal differentiation. In this study, we monitored the in vivo activation of neuronal differentiation by Ngn1 in neuronal precursor cells using neuron-specific promoter-based optical reporters. Methods: The NeuroD promoter coupled with the firefly luciferase reporter system (pNeuroD-Fluc) was used to monitor differentiation in F11 neuronal precursor cells. In vitro luciferase activity was measured and normalized by protein content. The in vivo-jetPEITM system was used for in vivo transgene delivery. The IVIS 100 imaging system was used to monitor in vivo luciferase activity. Results: The Ngn1-induced neuronal differentiation of F11 cells generated neurite outgrowth within 2 days of Ngn1 induction. Immunofluorescence staining demonstrated that early and late neuronal marker expression (βIII-tubulin, NeuroD, MAP2, NF-M, and NeuN) was significantly increased at 3 days after treatment with Ngn1. When Ngn1 and the pNeuroD-Fluc vector were co-transfected into F11 cells, we observed an approximately 11-fold increase in the luciferase signal. An in vivo study showed that bioluminescence signals were gradually increased in Ngn1-treated F11 cells until 3 days. Conclusions: In this study, we examined the in vivo tracking of neuronal differentiation induced by Ngn1 using an optical reporter system. This reporter system could be used effectively to monitor the activation efficiency of neuronal differentiation in grafted stem cells treated with Ngn1 for stem cell therapy.I. Introduction II. Materials and Methods III. Results IV. Discussion V. Reference VI. Korean AbstractMaste

상아모세포 분화와 상아질 형성 과정에서 CPNE7과 NFI-C의 역할

학위논문 (박사)-- 서울대학교 대학원 : 치의과학과, 2017. 2. 박주철.During the process of tooth morphogenesis, numerous signaling molecules and transcription factors mediate odontoblast differentiation and dentin formation through sequential epithelial-mesenchymal interactions. Dentin is formed by odontoblasts which secrete extracellular matrix (ECM) proteins. Among ECM proteins, dentin sialophosphoprotein (DSPP) is the most abundant ECM in dentin. However, the precise function and molecular mechanisms of odontoblast differentiation are still under investigation. In the present study, we investigated biological function and mechanisms of Cpne7 and NFI-C in regulation of odontoblast differentiation. Cpne7 was expressed in preameloblasts and inner enamel epithelium.The secreted Cpne7 was translocated to differentiating odontoblasts. In odontoblasts, Cpne7 promoted odontoblastic markers and mineralized nodule formationin vitro. Moreover, Cpne7 induces the differentiation of dental pulp cells into odontoblasts and dentin formation in vivo. Mechanistically, Cpne7interacted with Nucleolin and Cpne7-Nucleoin complex promoted the expression of Dspp. Zinc deficiency is involved in bone malformations and oral disease. Mice deficient in zinc transporter Zip13 show connective tissue and skeletaldisorders, abnormal incisor teeth, and reduced root dentin formation in the molar teeth and share a morphologically similar phenotype tonuclear factor I-C (NFI-C)-deficient mice. In the present study, we determined the NFI-C signaling on odontoblastdifferentiation and dentin formation with altered zinc concentration. Zinc enhanced the binding efficiency of NFI-C and phosphorylation of Smad2/3(p-Smad2/3) in the cytoplasm. In zinc deficiency, NFI-C accumulated into nucleus, and NFI-C bound to the Dspp promoter and regulated Dspp gene transcription. Furthermore, zinc deficiency condition promotedDSPP expression in odontoblasts and dentin mineralization, while zinc sufficiency condition decreased DSPP expression and slightly delayeddentin mineralization. Taken together, Cpne7 and NFI-C signaling regulate odontoblast differentiation and dentin formation through modulation of Dspp gene transcription.CHAPTER I. GENERAL INTRODUCTION 1 CHAPTER II. CPNE7, a preameloblast-derived factor, regulates odontoblastic differentiation of mesenchymal stem cells 6 1. ABSTRACT 7 2. INTRODUCTION 8 3. MATERIALS AND METHODS 10 4. RESULTS 19 5. DISCUSSION 45 CHAPTER III. Zinc Balance is Critical for NFI-C Mediated Regulation of Odontoblast Differentiation 49 1. ABSTRACT 50 2. INTRODUCTION 51 3. MATERIALS AND METHODS 54 4. RESULTS 62 5. DISCUSSION 81 CHAPTER IV. CONCLUDING REMARKS 87 REFERENCES 89 ABSTRACT IN KOREAN 96Docto

세포밖 NDP kinase (Nm23)와 sentrin의 생화학적 성질 및 기능에 관한 연구

Nucleoside diphosphate (NDP) kinase는 nucleoside-5' -triphosphate (NTP)의 말단 인산기를 nucleoside-5' -diphosphate (NDP)로 이동시켜 주는 효소로 세포내에서 중요한 역할은 NTP를 공급해 주어 생체내에서 필요한 NTP pool을 유지시키는 것으로 생각되어져 왔다. 그러나 최근들어 NDP kinase가 nm23의 gene product인 Nm23과 동일하다는 것이 밝혀짐에 따라 관심이 크게 증가되고 있고 또한 cell proliferation, differentiation, development, metastasis, apoptosis 등의 다양한 생체기능이 있는 것으로 알려지고 있다. Human N에 kinase는 NDPK-A (Nm23-H1)와 NDPK-B (Nm23-H2)로 구성되어 있음이 밝혀졌는데, NDPK-A (Nm23-H1)는 암전이 억제 인자로 작용하고 NDPK-B (Nm23-H2)는 c-myc oncogene promoter에 nuclease-sensitive element에 결합하여 transcription을 활성화시키는 PuF와 동일하다는 것이 확인되었고, 최근에는 새로운 NDPK gene인 DR-nm23, nm23-H4, nm23-H5, nm23-H6등이 더 발견되어졌다. NDPK (Nm23)는 세포내 cytosol과 핵에 분포하는 것으로 알려져 있는데, 세포밖에서 mouse myeloid leukemia M1 세포의 분화 억제 인자로 작용함이 밝혀지면서 세포밖의 분포가 제기되어졌고, 세포밖으로 분비되어진 NDPK(Nm23)이 세포밖에서 구체적으로 어떤 작용을 하는지에 대해서는 아직 밝혀져 있지 않다. 본 실험에서는 크게 두가지 부분에서 Nm23에 대한 연구를 실시하였다. 첫째, 세포내에서 serum starvation, heat shock등과 같은 stress에 대한 Nm23의 영향을 알아보기 위하여 Nm23이 과발현된 유방암 세포 P57을 control인 K10과 비교하여 실험하였다. K10과 P57에 heat shock을 가한 후에 회복시키면서 각 시점에서의 단백질 합성 양상의 변화와 SAPK/JNK의 활성화에 대한 영향을 알아보았고, 또한 성장인자의 공급을 차단시킨 serum starvation 상태에서 K10, P57 세포내 단백질 합성 pattern의 변화를 2D SDS-PAGE로 비교하여 변화된 단백질들을 MALDI-TOF-MS를 이용하여 확인하였다. 둘째, serum starvation과 같은 stress에 의해 Nm23 단백질이 hsp70과 함께 세포밖에 존재함을 확인하였으며 이렇게 세포밖으로 분비되어져 나온 Nm23을 순수 분리 정제하여 세포내에 존재하는 Nm23 단백질과 구조 및 효소 활성 등의 생화학적 성질에서 어떤 차이점을 가지는지 비교하여 관찰하였고, 세포밖에 존재하는 Nm23 단백질이 세포의 성장과 motility에 미치는 영향 등을 관찰하여 세포밖에서는 Nm23 단백질이 가지는 기능을 규명하고자 하였다. Yeast two-hybrid상에서 Nm23과 결합하는 단백질로 알려진 sentrin은 101개 amino acid를 지닌 ubiquitin-like protein으로서, Fas/APO-1과 tumor necrosis factor receptor 1의 death domain과 작용하여 anti-Fas/APO-1 혹은 TNF가 야기하는 세포의 죽음으로부터 세포를 보호하는 역할을 하는 것으로 밝혀졌다. Setrin은 ubiquitin과 18% 동일하고 48% 유사한 ubiquitin domain (residues 22-97)을 지니고 있어서 ubiquitination pathway와 유사한 방법으로 target protein에 conjugation하는 것으로 알려져 있는데 이 때 E1, E2, E3로 구성된 복합적인 효소 반응을 필요로 하고 그 중에서 특히 E2 enzyme인 Ubc9이 sentrinization pathway에서 중요한 conjugating enzyme으로 작용하고 있음이 밝혀졌다. Sentrin에 의해 modification되는 주요한 target substrate로 현재까지 밝혀진 것은 RanGAP1, IκBα, PML 등이 있는데, 더 많은 target molecule들을 밝혀내는데 관심이 집중되어지고 있다. 본 실험에서는, recombinant 단백질인 sentrin을 발현시켜 분리 정제한 후 sentrin polyclonal antibody를 제작하여 다양한 조직과 세포내에서 단백질 수준에서 sentrin의 발현과 분포 정도를 알아보았다. 또한, 본 실험실에서 확보하고 있는 인간 태반의 cytosol, membrane, nucleus 분획내에 존재하는 여러 요소들이 sentrin에 어떤 변화를 주는지 관찰하고 이에 대한 nm23 단백질의 영향을 알아보고자 하였다. 세포내에서 sentrin이 다른 target 단백질들에 conjugation하는데 중요한 E2 conjugating enzyme인 ubc9을 recombinant 단백질로 분리 정제하여 in vitro 상에서 sentrin과 ubc9의 interaction을 알아보고 wild-type cell lysate에 존재하는 다양한 다른 단백질들을 sentrinizaion시킬 때 ubc9의 직접적인 연관성을 살펴보고 이 때 nm23 단백질이 어떠한 영향을 미치는지 밝혀내고자 하였다. 앞으로는 sentrin과 ubc9의 transfection assay를 통하여 in vivo 상에서 ubc9에 의해 sentrinization되는 target 단백질들을 찾아내고 이러한 target 단백질의 성질과 기능에 sentrin이 어떠한 역할을 하는지에 대한 연구가 계속 진행될 예정이다. ;Nucleoside diphosphate (NDP) kinase catalyzes the transfer of the terminal phosphate group of the nucleoside triphosphate (NTP) to the corresponding N에 and the primary role of N에 kinase in the cell was considered as the maintenance of a pool of nucleoside triphosphate required for the biosynthesis. Recently, the interest of N에 kinase was increased due to their identification as the product of nm23, a putative metastasis suppressor gene. Also, protein Nm23 has been recognized to have a multifunctional roles in cell proliferation, differentiation, development, metastasis and apoptosis etc. In humans, two NDPKs have been identified as NDPK-A (Nm23-H1) and NDPK-B (Nm23-H2). NDPK-A acts as a suppressor of the metastasis of come tumor types and NDPK-B was shown to be identical to PuF, a protein that binds to a nuclease-sensitive element in the promoter of c-myc oncogene and activates the transcription of the c-myc oncogene. In vitro, Human NDPK was also identified as a differentiation inhibitory factor of myeloid leukemia M1 cells. Very recently, new NDPK genes, DR-Nm23, nm23-H4, nm23-H5 and nm23-H6 have been identified. In this study, at first, control K10 and nm23-transfected cell line P57 were examined to investigate the effect of Nm23 for the stress such as serum starvation and heat shock. In K10 and P57 cells, immediate inhibition and recovery after a few hours of protein synthesis were shown by heat shock and SAPK/JNK activation was measured. Also, during serum starvation, the change of cellular protein synthesis patterns of K10, P57 were compared using 2D SDS-PAGE and the alteration of protein expression was identified by applying MALDI-TOF-MS. Secondly, extracellular Nm 23 and hsp70 were secreted by serum starvation and extracellular Nm23 purified from P57 conditioned media were characterized in terms of enzymatic activity and structural properties as compared with other various cytosolic Nm23. The biological function of extracellular Nm23 in cell proliferation, cell motility was investigated and further studies are performing to characterize physiological roles of extracellular Nm23. Sentrin, a protein binding to Nm23 in a yeast two-hybrid screen is a 101-amino acid ubiquitin-like protein that protects cells against both anti-Fas and tumor necrosis factor induced cell death. Sentrin contains an ubiquitin domain (residues 22-97) that is 18% identical and 48% similar to ubiquitin. Sentrin can be conjugated to other proteins in a manner analogous to protein ubiquitination. Ubc9 appears to be a key conjugating enzyme for the sentrinization pathway. Recent data on the modification of proteins by sentrin focuses on three major substrates, RanGAP1, PML, IκBα and other protein substrates for sentrin modifications are investigated. In this study, recombinant sentrin was overexpressed and purified. We produced sentrin polyclonal antibody and determine the distribution of sentrin in various tissues and the subcellualr localization in whole cell, membrance, nucleus fraction. Also, modificaion of sentrin in placenta cytosol, membrance, nucleus fractionand nm23-H1,-H2 effects were monitored. We purified recombinant Ubc9 a key conjugating enzyme for the sentrinization pathway. In vitro, we study the interaction between sentrin and ubc9, the direct requirement for ubc9 in sentrinization to other proteins in wild-type cell lysate and the effects of nm23. Next, we will have transfection assay with sentrin or ubc9 and investigate target proteins to be sentrinized, the modification function of target protein by sentrin.I. 서론 1 II. 실험 방법 13 1. 시약 및 기기 13 1.1 재료 및 시약 13 1.2 기기 및 장치 14 2. 단백질 정량 (Lowry assay) 15 3. 전기 영동을 이용한 단백질 분석 16 3.1 SDS-PAGE 16 3.2 Western analysis 17 3.3 Native 상태에서 단백질의 구조 결정 18 3.4 pIs값과 분자량에 따른 단백질의 분리 19 3.4.1 2-Dimensional gel electrophoresis 19 3.4.2 Reverse 2-Dimensional gel electrophoresis 21 3.5 Zymography 21 4. 세포로부터 cytosol, membrane, nucleus의 fractionation 23 5. 다양한 stress에 의한 세포의 단백질 구성의 변화 23 5.1 Serum depletion에 의한 영향 24 5.2 Heat shock과 serum depletion에 의한 영향 24 5.3 [³5S]-methionine을 사용한 세포의 metabolic prelabeling(이미지참조) 25 5.4 Heat shock 후 metabolic pulse labeling을 통한 단백질의 합성 26 5.5 SAPK/JNK assay 26 6. 사람의 Nm23 단백질의 순수 분리 및 성질 측정 27 6.1 사람의 유방암 세포 P57의 conditioned media로부터의 Nm23 단백질의 순수 분리 27 6.2 Nucleoside diphosphate (NDP) kinase의 활성도 측정 29 6.3 단백질의 자가 인산화 29 7. 세포 밖에서 Nm23 단백질이 가지는 기능에 대한 연구 30 7.1 세포밖에 가해준 Nm23이 세포의 증식(proliferation)에 미치는 영향 30 7.2 세포밖에서 Nm23-H1,-H2의 세포의 이동성(motility)에 대한 영향(Invasion assay) 31 8. Sentrin / Ubc9 단백질의 순수 분리 32 9. MALDT-TOF mass spectrometry 33 9.1 In gel digestion and peptide extraction 33 9.2 MALDI-TOF mass spectrometry and Database searches 34 III. 결과 및 고찰 35 1. 세포내에서 Nm23의 과발현에 의한 영향 35 1.1 열에 의한 K10, P57의 단백질 합성 양상의 변화 및 SAPK/JNK의 활성화에 대한 영향 35 1.2 Serum starvation에 의한 K10, P57의 단백질 합성 양상의 변화 39 2. Stress에 의한 세포밖 단백질의 변화 44 2.1 세포내 단백질과 세포밖 단백질의 비교 44 2.2 세포밖에 존재하는 Nm23 (NDP kinase)와 HSPs의 확인 47 2.3 세포밖 Nm23 (NDP kinase)의 자가인산화 및 효소 활성 50 3. 사람의 유방암 세포 P57에서 분비되는 Nm23 단백질의 분리정제와 생화학적 특성에 대한 연구 54 3.1 P57의 세포밖에 존재하는 Nm23 단백질의 순수 분리 54 3.2 세포밖 Nm23과 다양한 cytosol Nm23의 생화학적 특성 비교 56 3.2.1 Native 상태의 세포밖 Nm23 단백질의 구조 결정 57 3.2.2 세포밖 NDP kinase의 효소 활성 59 4. 세포밖에 존재하는 Nm23 단백질의 생리적 기능에 관한 연구 61 4.1 세포밖에 가해준 Nm23-H1,-H2가 세포의 성장(proliferation)에 미치는 영향 61 4.2. 세포밖에 가해준 Nm23-H1,-H2의 세포의 이동성(motility)에 대한 영향 63 5. Sentrin의 순수 분리와 성질 확인 68 5.1 Sentrin의 발현 확인 및 순수 분리 68 5.2 Sentrin의 분포 확인 71 5.2.1 Rat 각 조직별 sentrin의 분포 확인 71 5.2.2 Sentrin의 세포내에서 분포 확인 73 5.2.3 Sentrin의 cell line별 분포 확인 75 5.3 Sentrin의 placenta cytosol, membrane, nucleus에서 modification 75 5.4 In vitro 상에서 Sentrin과 Ubc9의 interaction 77 6. 폐암조직의 암전이 정도에 따른 단백질의 발현 변화 확인 80 IV. 결론 84 참고문헌 88 ABSTRACT 106 감사의 글 10

An Analysis Based on Endogenous OCA Theory

The expanded EU needs to ask again if expanded European Union (EU, hereafter) could be an optimum currency area (OCA, hereafter) as endogenous OCA theory predicts. That is because the new member states of EU have no right to choose whether they enter the European Economic and Monetary Union (EMU, hereafter) while original members were given. Furthermore, the experience of the recent financial crisis raised the question if the EMU has more benefits for the whole members than costs. Therefore, this paper proposes to consider endogenous OCA theory based on the studies on international risk-sharing in order to regard risk-sharing as an endogenous change. According to the studies on international risk-sharing, financial globalization should improve international risk-sharing. Moreover, the development of the financial field can contribute to economic growth and to the increase in social welfare. This paper examines the rise in welfare in the original members of the EMU and the addition of the new member states by using welfare-based method, which states that to maximize social welfare is the equivalent to minimize the measure of risk-sharing. The following can then be concluded according to the analysis: each country has different aspects of improving in risk-sharing. Especially, the first test infers that the monetary union has not always had the country’s interest in social welfare. However, this result also proves that there is the tendency for richer countries to share risk better than poorer ones. Also, the second test shows that most central European countries have increased their risk-sharing as they entered the EU. Even though EMU membership does not seem to prevent them from difficulty in the recent financial crisis, they have won some positive gains from monetary integration such as the diversification of risk and the development of their financial industry. Furthermore, the degree of risk-sharing in the whole EMU generally rises, but the individual cost could occur to some countries like Germany or Greece. Therefore, policy makers of unions need to balance the benefits for all countries by well-arranged financial institutions and supervisory organizations. Finally, since the improvement in risk-sharing comes from a technological transfer as well as income transfer, the expanded EMU could become endogenously OCA in the long-term.;중부 및 동유럽 국가들을 포함한 EU가 최적통화지역이 될 수 있는지 불분명한 가운데, 새로운 회원국들은 통화동맹(EMU)에 반드시 가입해야 할 의무만 있을 뿐 영국과 같은 기존 회원국들이 가졌던 가입의 자유가 허용되지 않는다. 또한 최근 세계금융위기를 통해 EU 회원국이라는 사실 자체가 중부 및 동유럽 회원국들에게 보호막을 형성해주지 못함을 보았고 이러한 통화동맹이 과연 모든 회원국들에게 유익한 것인가에 관하여 많은 의문이 제기되었다. 그러므로 확장된 EU는 통합의 비용과 편익을 재분석함으로써 이 지역이 최적통화지역이론에서 제시하는 공동통화지역에 적합한지 다시 검토할 필요가 있다. 본 논문은 최적통화지역이론을 발전시킨 내생적 최적통화지역 이론에 기초하여 위험공유이론을 함께 고려함으로써, 최적통화지역 여부를 판단하기 위한 비용편익 분석에서 사회후생의 향상을 내생적 변수의 하나로 간주하였다. 위험공유이론에 따르면, 금융분야의 세계화가 진전됨에 따라 국제적으로 위험 공유수준이 향상되었으며 경제성장과 더불어 사회후생의 향상을 가져왔다. 본 논문에서는 대상 국가를 기존 유로 회원국가와 중부유럽에 한정하고 새로이 고안된 후생기초방법에 따라 사회후생향상의 극대화를 위험공유변수의 극소화로 측정하였다. 이를 통해 금융환경의 변화를 논의에 포함하여 EMU의 비용과 편익을 분석하고자 하였다. 분석 결과에 따르면 중부 유럽국가들의 경우 사회후생 정도가 향상되었는데 반해, 그들보다 전반적으로 후생 정도가 높은 기존 회원국들의 경우는 일부 향상되지 않았다. 또한 위험이 EMU 회원 국가에 분산됨에 따라 후생이 전체적으로는 향상되고 있으나, EMU의 확대가 언제나 개별 회원국들 모두의 후생을 향상시키는 것은 아님이 나타났다. 그러므로 본 논문은 통화통합은 경제적인 고려뿐 아니라 제도적인 노력도 필요하며 경제 개발과 제도적인 협력이 동행될 때 최적통화지역으로 진전될 수 있다고 판단하였다.I. INTRODUCTION = 1 II. BACKGROUND = 7 A. Institutional background - European Exchange Rate Mechanisms = 7 B. Theoretical background = 11 C. Literature review = 15 1. Existing study on endogenous OCA theory = 15 2. Existing study on international risk-sharing = 18 III. WELFARE BASED-METHOD = 22 A. Synthesis and proposition = 22 B. Methodology = 25 IV. COUNTRIES UNDER CONSIDERATION AND TEST RESULTS = 29 A. Central European countries = 29 B. Test results and finding = 32 V. CONCLUSION = 49 References = 52 국문초록 = 5

Analysis of the First and Third Movements of Hyun Joung Oh's "Sextet for 2 Violins, Clarinet; Bassoons Percussion and Vilolncello"

19 세기 말 Richard Wagner (1813-1833)에 의한 반음계주의의 영향으로 출현한 무조성 (atonality)은 Arnold Schoenberg (1874-1951)에 의해 한층 더 발전되어 20세기의 중요한 양식으로 자리 잡았다. 본 논문은 이러한 무조적 개념을 기초로 작곡한 본인의 작품 "Sextet for 2Flutes, Clarinet, Bassoon, Percussion and Violoncello" (1996)의 제 1악장과 제3악장을 분석한 것이다. 제 1악장은 ABA'의 3 Section으로 구성되어 있으며 지속음이 특징적으로 나타나고 각 성부의 지속음에 의해 단 2도로부터 장 7도까지의 다양한 음정구조와 완전 4도 또는 완전 5도로 구성된 화음이 형성된다. 제 3악장은 ABCA'의 4 Section으로 구성되어 있으며 도입부와 Section A에서 제시된 선율의 특징적 요소들이 각 Section의 선을 진행을 이끌어 간다. 또한 단2도, 증4도(감5도), 장·단7도 음정이 주요음정으로 제시되고 각 성부 사이에 장 2도, 단 2도로 구성된 cluster chord가 나타난다.;Atonality, appeared under the influence of Chromaticism by Richard Wagner( 1813∼1833) in the end of nineteenth century, was refined and established as a major mode in the twentieth century. This thesis is an analysis of the first and third movements of ˝Sextet for 2 Violins, Clarinet, Bassoon, Percussion and Violoncello˝(1996) which was composed on the basis of this atonal concept The first movement consists of three sections of ABA’ Sustained tone of each part exposed melodic characteristic and built up various intervals and chords in this movement. The third movement consists of four sections of ABCA’ Characteristic elements of melody in the introduction and section A were leading the melodic progression of each section, additionally, all minor seconds, augmented fourths (diminished fifths), major sevenths and minor sevenths together became major intervals in this movement목차 = ⅲ 논문개요 = ⅴ Ⅰ. 서론 = 1 Ⅱ. 본론 = 2 A. 1악장 = 2 1. SectionⅠ: mm. 1-34 = 2 2. Section Ⅱ (B) : mm. 35-47 = 9 3. Section Ⅲ (A') : mm. 48-52 = 12 B. 3악장 = 12 1. Section Ⅰ = 13 2. Section Ⅱ : mm. 26-47 = 17 3. Section Ⅲ (C) : mm. 47-59 = 20 4. Section Ⅳ : mm. 60-91 = 23 Ⅲ. 결론 = 27 참고문헌 = 28 부록 = 29 ABSTRACT = 5

카드뉴스를 활용한 읽기‧쓰기 통합 교재 개발

석사학위를 수여받기 위해 제출된 포트폴리오임. 이 논문은 저자가 원문공개에 동의하지 않은 논문으로, 도서관 내에서만 열람이 가능하며, 인쇄 및 저장은 불가합니다.본 포트폴리오는 한국 대학에서 유학 중인 외국 학생들의 읽기와 쓰기 능력 향상을 위한 한국어 교재를 개발하는 데 그 목적이 있다. 특히 유학생들의 학습에 도움이 될 배경지식을 확장시키고 독해와 작문에 재미를 붙일 수 있도록 최근 각광 받고 있는 미디어 콘텐츠인 카드뉴스를 활용하고자 한다. 국내 외국인 유학생 수는 한때 그 증가세가 주춤하기도 했으나 현재 다시 늘고 있는 추세이다. 그러나 외국인 유학생들의 한국어 능력은 대학에서 요구하는 수준에 미치지 못하는 경우가 많아 이를 위한 전문적인 교육과정이 요구된다. 이에 학문 목적 한국어 분야에서 다양한 연구가 이루어졌으며 대학에서 이를 적용한 교육과정이 운영되고 있다. 유학생들의 성공적인 학업을 위해서는 한국어 능력과 전공 지식에 대한 능력이 요구된다(정다운, 2014:5). 그 중에서도 읽기와 쓰기 기술은 학문 목적의 한국어 교육에서 필수적이다. 해당 분야의 과제나 연구를 수행하는 데 읽기와 쓰기 능력이 선행되어야 하기 때문이다. 학생들이 자신의 읽기 수준을 한 단계 뛰어넘어 외국어를 능숙하게 하는 고급 단계로 갈 수 있도록 교량 역할을 하는 최선의 방법은 학생들이 자발적으로 읽는 ‘자율 독서(Free Voluntary Reading)’이다(Krashen, 2004:15). 자율 독서는 읽기 능력뿐만 아니라 쓰기 능력도 향상시킨다. 더 많이 읽은 학생일수록 독해력, 쓰기, 어휘, 철자법, 문법 실력이 더 뛰어나다(Krashen, 2004:36). 학습자들이 교실 안과 밖에서 목표 언어를 익힐 수 있도록 하기 위해서는 자율 독서, 즉 확장형 읽기 활동이 필요하다. 교실 안 수업에서는 주로 짧은 텍스트를 통해 지식을 학습하고 관련된 표현의 기계적 산출에 집중하기 때문에 교실 안 수업만으로 학습자가 목표 언어를 다양한 방법으로 사용할 수 있도록 하는 유창성을 신장시키는 데에는 한계가 있기 때문이다. 확장형 읽기는 학습자들이 흥미와 관심을 바탕으로 다양한 텍스트를 스스로 선택하여 읽기 때문에 자료의 선정이 무엇보다 중요하다. 이때 활용되는 자료는 주제 면에서 학습자가 이해할 수 있으며 난이도가 적절하여 형식과 의미를 파악하는 데 무리가 없고 내용이 흥미로워야 한다(우형식, 2011:161). 신문은 이런 자료 선정 기준을 충족시킬 뿐만 아니라 읽기와 연계하여 쓰기나 말하기, 듣기 등의 기술을 통합할 수 있다는 점에서도 유용하게 활용할 수 있는 자료이다. 특히 최근 인기 있는 모바일 콘텐츠인 카드뉴스를 읽기와 쓰기 활동을 위한 자료로 검토해 볼 필요가 있다. 카드뉴스는 다양한 주제를 짧은 글과 이미지로 설명하여 모바일로 볼 수 있는 형식의 콘텐츠이다. 이미지 하나당 3~5줄 정도의 짧은 글로 내용을 줄여 인터넷 페이지에서 카드를 넘겨 가며 보는 형식으로 모바일에 최적화되어 있다. 엔터테인먼트, 생활 정보 등 가벼운 내용에서부터 정치, 사회 이슈 등의 무거운 내용까지 그 주제와 내용이 다양하게 제공되며 이미지를 중심으로 핵심을 요약한 간략한 텍스트로 인해 메시지의 전달력이 강하여 소셜 네트워크 서비스에서 주목도와 전파력이 크다(정소영, 2015:614). 카드뉴스는 형식이나 내용면에서 이용자의 흥미를 끌고 언제 어디서나 이용할 수 있어 접근성이 좋다. 외국인 학습자 입장에서는 글이 길지 않고 이미지가 내용 이해를 도와 읽기의 부담이 적으며 관심 있는 분야의 다양한 주제를 가볍게 읽을 수 있고 그 과정에서 자연스럽게 관련 어휘를 익힐 수 있다는 점에서 매력적인 학습 매체이다. 또 이후에 전문적인 내용을 더 찾아 읽거나 학습한 내용을 재생산해 보는 등의 활동을 한다면 읽기에서 쓰기 연습까지 통합하는 좋은 매개체가 될 것이다.Ⅰ. 서론 01 A. 교재 개발의 목적과 필요성 01 B. 선행 연구 검토 04 1. 대상 학습자 집단 04 2. 교수 학습 상황 06 3. 대상 학습자 집단의 요구 분석 08 4. 학문 목적 학습자 대상 교재 검토 09 Ⅱ. 교재 개발의 이론적 배경 12 A. 주제 중심 교육 12 B. 읽기와 쓰기 통합 교육 13 C. 신문 활용 교육 14 1. 신문 활용 교육의 효과 14 2. 카드뉴스의 구성 17 Ⅲ. 교재의 구성과 교육적 효과 19 A. 자료 선정 기준 19 1. 주제 선정 20 2. 기능 선정 22 B. 교재의 구성 23 1. 교재 전체 구성 23 2. 단원 세부 구성 24 C. 교재 사용의 교육적 효과 31 Ⅳ. 결론 32 참고 문헌 34 참고 사이트 3

빨간색을 사용하는 기업을 중심으로

수많은 기업과 브랜드가 존재하는 현대 사회에서 기업의 일방적인 공급이 아닌 소비자의 선택에 의한 구매가 이루어지게 되면서 판매자 중심에서 구매자 중심의 시장이 형성되었다. 이와 같은 시장의 형태가 생성되면서 기업의 시장을 바라보는 시선이 달라지게 되었다. 뿐만 아니라 과학기술의 발달로 각 기업의 기술력이 평준화되면서 제품 자체의 기능이나 외형적인 디자인만으로는 지속적인 구매를 이끌어내기 힘들게 되었다. 또한 감성시대의 소비자들은 단순히 기능이나 가격등을 통한 구매 뿐만 아니라 제품을 소유함으로써 그 이미지와 문화를 얻고자 한다. 이러한 사회적 변화는 기업으로 하여금 제품을 판매하는 전략 이상으로 다양한 통로를 통하여 제품과 함께 기업의 메세지와 기업의 문화를 제공하며, 이를 통해 생성된 기업 이미지는 소비자의 선택에 많은 영향을 끼치게 된다. 이같은 상황에서 기업은 타 기업과 차별화된 전략을 구사하게 되는데, 특히 광고나 다양한 매체를 통한 시각적인 자극으로 기업의 메시지를 전달하고자 한다. 특히 시각적 요소 중 형태나 질감등의 다른 어떤 요소보다 강력한 영향력을 가지는 색을 통해 말로 설명하기 어려운 직접적이고 통일된 감정을 전달하는 칼라마케팅을 전개하는 기업이 늘고 있다. 그러나 단순히 색상별로 다른 색채심리를 갖는 것만은 아니며, 칼라마케팅을 전개하는 데 있어 색을 어떻게 적용하는가에 따라 같은 색을 사용하는 기업의 경우에도 전혀 다른 이미지가 생성될 수 있다. 이에 본 연구는 빨간색을 활용한 기업들 (SK주식회사, BC카드, LG카드)을 선정하여 기업의 칼라시스템을 분석하고, 칼라마케팅을 전개하는 데 있어서의 구체적인 디자인 요소를 분석하고, 칼라마케팅을 전개하는 데 있어서의 구체적인 디자인 요소를 분석하여 기업이 전달하고자 하는 메시지가 무엇인지 살펴보았다. 구체적인 연구문제로 '빨간색의 상징적 이미지와 기업 이미지와의 연관성'이 있다. 이 연구문제를 통하여 실질적으로 기업이 전달하고자 하는 메시지와 실제로 소비자들이 느낀 이미지가 일치하는 지를 분석해보고, 기업이 추구하는 이미지와 빨간색의 상징적 이미지를 비교, 분석하여 그 연관성을 찾아보았다. 두번째로 '기업 이미지를 전달하는 전략적 차원에서 빨간색 적용에 일관성, 명확성, 간결성이 기업 이미지 제고에 어떠한 영향을 미치는가'를 연구문제로 삼아 이를 고찰하였다. 그 결과 각 기업의 전략에 따라 빨간색의 역할은 다르게 나타났으며 그에 따른 기업의 이미지도 상이하게 나타았다. SK주유소의 경우 빨간색 자체의 연상작용을 강조한 전략을 펼쳤고, BC카드의 경우 모델이나 메시지 등의 주위 환경에 시각적인 요소로 빨간색을 적용했으며, LG카드의 경우 칼라의 적용은 소극적이었으나 빅 모델의 이미지를 기업 이미지와 접목시켜 전달함과 동시에 오디오적 요소를 적용시켜 원하는 이미지를 전달하고자 하였다. 어느 정도 소비자들에게 이러한 이미지가 잘 전달되었으나, LG카드의 경우 친근하고 따뜻한 이미지보다는 비신뢰감과 권위적 이미지를 느끼는 것으로 조사되었다. LG의 상징색 자체에 대한 인지도가 많이 떨어졌으며 모 기업의 이미지와의 연관성을 고려하였으나 이것은 소비자에게 직접적인 영향을 미치지 못한 것으로 나타났다. 또한 색을 적용하기보다는 스타급 모델의 이미지와 함께 오디오적 요소를 활용한 전략을 전개했으나 이것이 소비자들에게 지속적으로 기억되지 못하였기 때문에 오히려 신뢰감을 떨어뜨리는 역할을 하였다. 또한 '빨간색 적용 방법의 효과'에서는 빨간색 적용에 일관성, 명확성, 간결성이 높을 때 더 긍정적인 효과를 가질 것으로 예상하였으나 실제로 BC카드의 경우 활력적인 이미지를 명확하게 보여줄 때 오히려 친근함이 낮아진다는 결과를 얻었다. 또한 LG카드의 경우 자극적인 이미지는 신뢰감과 친근감을 낮추는데, 이러한 이미지가 간결하게 전달되었을 때는 더욱 낮춘다는 결과를 얻게 되었다. 이는 LG카드의 아이덴티티 요소 안에 빨간색이 많이 존재하지 않으며 LG카드는 빨간색을 활용한 시각적인 강렬함보다는 모델의 이미지를 통해 신뢰감과 따뜻한 느낌을 전달하는 것을 중요시하는 경향을 보이기 때문인 것으로 해석할 수 있다. 이와 같이 현재 칼라마케팅을 전개하는 기업들의 사례를 살펴봄으로써 어떠한 요소에 의해 기업의 이미지가 창출되었는지를 알 수 있으며, 역으로 칼라마케팅을 전개하고자 하는 기업의 입장에서 원하는 이미지를 얻기 위해서 각각의 디자인 요소들을 어떻게 조절해야 하는지에 대한 방향을 제시하는 데 그 의의를 두었다.;In modern society where enormous enterprises and brands coexists, consumers could enjoy more choices when they purchase products than in the past. This atmosphere brought out the market trends that once was sales-centered to consumer-centered market, so that it automatically shifted the attitude of the enterprises towards the market nowadays. Due to the development in scientific technology, the technological prowess of the industry has been standardized, which made uneasy for consumers to choose a products merely by technical capacity or external design of a product. Also, for emotion-motivated consumers nowadays, prefer and consider to buy a product which can bring them to enjoy a unique culture and sense only by using and owning one, besides the value for the price category. These transition have been forcing industries to stress on the influencing societies with each of its cultures and messages through various channels as much as sales strategies, and these process creates an image of each corporations that strongly effect the consumer's choice of a product. During the image making process, each corporations perform strategies that distinguished from that of others to send a unique message to its customers, especially via commercials in media and various methods that stimulates visuality. Among the visual elements, using the most strongest influential element, "colour", more than other elements such as shape or texture, there has been increased in numbers of corporations developing colour marketing strategy, which delivers unified and direct senses that are not easy to describe in words. It is, however, hard to confirm that simply each colors stimulate a particular psychological response, but rather, how a color has been applied can make a difference in developing the color marketing strategies among the corporations, even if they are using same colors. Focused on these facts, this research choose to study three major corporations (SK Corp., BC card, LG card) which all use red as their color marketing strategies, analyze their color system, and investigate detailed design elements to find out the final messages that each of them willing to deliver to their customers. In addition, this research set its detailed assignment on whether there exist "the relevance between symbolic meaning of the color red and the red color as an image of a corporation" and tried to figure out the outcome. As comparing the messages that corporations willing to deliver and the images that consumers actually have towards the corporations, the study could find the relevance through comparative analysis between images that corporations pursuit and symbolic images of the color red. Also, this research set second detailed assignment on whether it is more effective strategy for corporations to be using the design concept of consistency, clearness and conciseness as they apply color marketing strategy. To summarize the conclusion, the role of the color red turned out to be different depends on their strategy, and their images response from consumers also turned out to be different as well. For instance in SK Motor oil corp., they used strategy that stressed on associate reaction of red itself. For BC Card corp., they used red as visual elements on surroundings, like models or comments. And for LG Card corp., they showed negative applications on colors, but they well managed to combine the images of big stars and their image, with audio effects, achieved wanted image that they intended to deliver. Overall, the images that corporations deliver to its customers have been well transmitted as they intended, but in some cases in LG Card corp., their intended images like, hostile and warm images have been wrongly transmitted as untrustworthy and authoritarian images. The reason for this results is that lack of comsumer's recognition of their symbolic color and their effort to connect their mother company's image turned out to be non-factor to direct influence consumers. Also, they relied on the big stars with audio effects rather than color marketing, so that their image did not last long enough to give trustworthy images to consumers. And for the outcome of "control effect of red color applying method", supposed, it would be better to apply red color in the image under consistent, clear and concise style, but in BC Card case showed when an active image combines with conciseness, the hostile effect actually decreased. Also, the study showed that excite images typically decreases hostile and trustworthy effect, but when this excite images concisely applied, just like in LG Card case, it even worsen the effects. What can be explained to this matter is that the identity elements in LG Card does not have much of red elements and LG Card rely more on big star's image which produces trustworthiness and warmness, rather than using more of red color marketing that produces more stressed images. As this research studied color marketing strategies of actual corporations, it could be figured out by what element did establish an image of a corporation, and on the other side, this research put deep significance on offering guiding lights for corporations who want to apply color marketing strategy concerning how to manage each of the design elements to achieve their intended image,목차 논문개요 = ⅵ Ⅰ. 서론 = 1 1. 연구의 배경 및 목적 = 1 2. 연구 내용 및 연구 방법 = 1 1) 연구 내용 = 2 2) 분석 방법 = 3 Ⅱ. 이론적 배경 = 4 1. 빨간색의 색채심리 = 4 1) 빨간색의 일반적인 특성 = 4 2) 빨간색의 심리적 효과 = 5 3) 빨간색의 감성 효과 및 칼라연상 = 6 2. 칼라마케팅 = 10 1) 칼라마케팅의 등장배경 = 10 2) 칼라마케팅의 개념과 필요성 = 13 (1) 마케팅의 개념 = 13 (2) 칼라마케팅의 개념 = 13 (3) 칼라마케팅의 필요성 = 13 3) 색채심리에 따른 칼라마케팅의 전개 = 14 3. 기업이미지 = 16 1) 기업이미지의 정의 = 16 2) 기업이미지의 구성요소 = 18 3) 기업이미지의 관리 = 19 4)기업이미지 관리의 전략 = 22 Ⅲ. 빨간색을 사용하는 기업의 칼라스스템 = 25 1.기업의 분류 = 25 1)SK주식회사 = 25 2)BC카드 = 26 3)LG카드 = 27 2. 기업의 칼라 시스템 = 27 1)SK주식회사 = 27 2)BC카드 = 29 3)LG카드 = 31 3. 기업의 다지인 요소 분석 = 32 1)SK주유소 = 33 2)BC카드 = 39 3)LG카드 = 46 Ⅳ. 빨간색을 사용하는 기업의 칼라 시스템 조사 및 분석 = 51 1. 자료의 내용 및 분석 결과 = 51 1) 기초자료 분석 = 51 (1) 응답자의 일반적 사항 = 51 (2) 선호 기업 = 52 (3) 기업별 상징색 = 53 (4) 요인 분석 및 신뢰도 분석 = 54 (5) 기업별 기업이미지와 빨간색의 이미지 = 57 (6) 기업별 기업 아이덴티티에서의 빨간색 적용 방법 = 61 2) 기업 이미지에서의 칼라마케틴의 역할 = 62 (1) 빨간색의 상징적 이미지와 기업이미지와의 연관성 = 62 (2) 빨간색 적용 방법의 조절효과 = 69 Ⅴ. 요약 및 결론 = 78 1. 연구의 요약 = 78 2. 결론 = 81 참고문헌 = 83 부록 = 86 ABSTRACT = 10

Conceptual framework and evaluation process of apparel quality

학위논문(박사)--서울대학교 대학원 :의류학과,1997.Docto

Cell-non-autonomous neurogenesis by exosome-mediated transfer of neurogenic miRNA in microfluidic system

학위논문 (박사)-- 서울대학교 융합과학기술대학원 : 융합과학기술대학원 분자의학및바이오제약학과, 2016. 2. 이동수.Neuronal cells release small vesicles known as secretory exosomes containing mRNAs, miRNAs and proteins to exchange signals as a form of intercommunication between cells. MicroRNAs (miRNAs) such as miR-124 or miR-9 play an important role in regulation of neuronal differentiation. Intercellular transfer of neurogenic microRNA (miRNA) induces neurogenesis and exosomes can mediate miRNA delivery from the leading differentiated cells to neighboring undifferentiated cells. The aim of this study is to confirm cell-non-autonomous miRNA/exosome-mediated differentiation of neural progenitor cells and to visualize exosomes carrying this neurogenic miRNA from leading to neighboring cells. F11 cells, neural progenitor cells, were stably transfected with reporter vector of pRV-effLuc/3xPT_miR-193a which luciferase signal could be turned off by binding of the identified miRNA to the triplicates of miRNA binding site in the 3' UTR of effLuc. Exosomes were isolated from the conditioned media and characterized by western blot. Transwell chambers system and microfluidic device were used to examine exosome-mediated miRNA transfer. The CMV-driven GFP-tagged CD63 vector was used to visualize endogenous exosomes. Target genes of MiR-193a considered as neurogenic miRNAs were related to cell proliferation, differentiation and axon guidance. Neurite outgrowth and neuronal marker expression such as βIII-tubulin, NeuroD and MAP2 were observed 3 days after identified MiR-193a treatment. Isolated exosomes were characterized for protein markers such as CD63, TSG101. qRT-PCR results showed that exosomes isolated from conditioned media in differentiated F11 cells highly increased miR-193a level. In addition to 2D co-culture and transwell culture setting, fluorescence signals of incorporated GFP-exosomes were detected within 2 days after co-culture with GFP-exosomes producing cells. Time-lapse live-cell confocal imaging using microfluidic device visualized the transport of single exosomes from differentiated to undifferentiated F11 cells. MiR-193a within the exosomes from differentiated donor F11 cells reached the recipient cells and was taken up to lead them to neuronal differentiation, showing increased neuronal marker expression. And these phenomenon were also reproduced in NE-4C, neural stem cells. Inhibition of the exosomal production by manumycin-A and treatment of anti-miR-193a in the differentiated donor cells failed to induce neurogenesis in undifferentiated recipient cells. These findings indicate that exosomes of neural progenitors and neurogenic miRNA within these exosomes propagate cell-non-autonomous differentiation to neighboring progenitors, which was captured visually on microfluidic device to delineate the roles of extracellular vesicles mediating neurogenesis of population of homologous progenitor cells.INTRODUCTION 12 1) Extracellular vesicles (EVs) 13 2) MicroRNA (miRNA) 15 3) Neurogenesis 18 4) MiRNA microarray 19 5) Co-culture system 19 6) MiRNA optical reporter gene 21 MATERIALS AND METHODS 23 Microarray Analysis 23 Gene Annotation Analysis 24 Cell culture and transfection 24 Quantitative reverse transcription-PCR 26 Immunofluorescence staining 26 In vitro luciferase assay 28 Preparation and characterization of exosomes 28 Fluorescent labeling of exosomes and cells 28 Transwell assay 29 Western blotting 30 Microfluidic cell culture device 31 Time-lapse imaging of exosomes 32 Bioluminescence imaging 33 Statistical analysis 33 Results 34 Identification of miR-193a newly associated with neurogenesis in Ngn1-overexpressing F11 cells 34 Enhanced neuronal differentiation in neural progenitor cells by overproduction of miR-193a 35 Elevated levels of miR-193a in differentiated F11 cell-derived exosomes 37 Exosomes-mediated transfer of miR-193a from differentiated cells to undifferentiated cells 38 Visualization of transport of individual exosomes using a microfluidic device 41 Reporting the action of exosomally delivered miR-193a in recipient F11-UD cells on microfluidic chamber 42 Discussion 84 Reference 92 Abstract in Korean 104Docto