Anti-inflammatory and Antioxidant Mechanisms of Isoflavone Metabolites in Brain Glial Cells

I. Anti-inflammatory mechanisms of isoflavone metabolites in brain microglial cells. The microglial activation plays an important role in neurodegenerative diseases by producing several proinflammatory cytokines and nitric oxide (NO). I found that three types of isoflavones and their metabolites that are transformed by the human intestinal microflora suppress lipopolysaccharide (LPS)-induced release of NO and tumor necrosis factor (TNF)-α in primary cultured microglia and BV2 microglial cell lines. The inhibitory effect of the isoflavone metabolites (aglycon form) was more potent than that of isoflavones (glycoside form). The RNase protection assay showed that the isoflavone metabolites regulated inducible nitric oxide synthase (iNOS) and the cytokines at either the transcriptional or post-transcriptional level. A further molecular mechanism study was performed for irisolidone, a metabolite of kakkalide, which had the most potent anti-inflammatory effect among the six isoflavones tested. Irisolidone significantly inhibited the DNA binding and transcriptional activity of nuclear factor (NF)-κB and activator protein-1. Moreover, it repressed the LPS-induced extracellular signal regulated kinase (ERK) phosphorylation without affecting the activity of c-Jun N-terminal kinase or p38 mitogen-activated protein kinase. The level of NF-κB inhibition by irisolidone correlated with the level of iNOS, TNF-α, and interleukin (IL)-1β suppression in LPS-stimulated microglia, whereas the level of ERK inhibition correlated with the level of TNF-α and IL-1β repression. II. Antioxidant mechanisms of isoflavone metabolites in brain astrocytes. The brain is highly vulnerable to oxidative stress, and thus controlling the oxidative stress is considered to be an important therapeutic target for neurodegenerative diseases. In the present study, I investigated the antioxidant effects of two isoflavone metabolites (tectorigenin and glycitein) in rat primary cultured astrocyte and C6 glioma cells. Treatment of the cells with isoflavone metabolites inhibited ROS generation induced by hydrogen peroxide and subsequent cell death. The isoflavone metabolites increased the expressions of phase II antioxidant enzymes such as heme oxygenase-1 (HO-1) and NADPH:quinone oxidoreductase1 (NQO1), and pretreatment of the cells with the chemical inhibitor of HO-1 (ZnPP) or NQO1 (dicoumarol) reversed the antioxidant and cytoprotective effects of isoflavones. The results suggest that the antioxidant /cytoprotective effects of isoflavone metabolites are at least partly mediated through HO-1 and NQO1. Next, I further investigated the molecular mechanisms underlying isoflavone-mediated upregulation of antioxidant enzyme genes. Both the tectorigenin and glycitein increased the binding of transcription factors (Nrf2 and c-Jun) to antioxidant response element (ARE) on HO-1 and NQO1 promoters, and enhanced ARE-mediated transcriptional activities. Treatment of the cells with various signaling pathway inhibitors revealed that PI3 kinase and p38 MAPK pathway are involved in expression of HO-1, and JNK in expression of NQO1 in isoflavone-treated cells. Our data collectively indicate that phase II antioxidant enzymes such as, HO-1 and NQO1 play an important role in reducing the ROS levels and alleviating subsequent cell death in hydrogen peroxide-treated astroglial cells. Therefore, the anti-inflammatory and antioxidant effects of isoflavone metabolites in glial cells may therapeutic potential for various neurodegenerative diseases, which are accompanied by oxidative stress and neuroinflammation.;1. 뇌소교세포에서 이소플라본 대사체의 항염증 기전연구 뇌소교세포의 활성화는 염증성 싸이토카인과 산화질소 (nitric oxide) 를 생성함으로써 퇴행성 신경질환을 일으키는데 중요한 역할을 한다. 본 연구에서는 1차 배양 소교세포와 BV2 소교세포주에서 세 가지의 이소플라본과 각각의 장내 미생물 대사체를 처리시 LPS에 의해 유도된 산화질소와 TNF-α의 발현이 억제되는 것을 관찰하였다. 그 억제 효과는 배당체 (glycoside) 형태의 이소플라본보다 비당체 (aglycon) 형태의 이소플라본 대사체에서 보다 강하게 나타났다. RNase protection assay를 통하여 이소플라본 대사체가 iNOS와 싸이토카인의 발현을 전사단계 혹은 전사 후 단계에서 감소하는 것을 알 수 있었다. 더 나아가 여섯 개의 이소플라본 중 가장 항염증 효과가 좋았던 irisolidone을 이용해 항염증 관련 기전 연구를 수행하였다. Irisolidone은 NF-κB와 AP-1의 DNA 결합능과 전사활성을 현저히 감소시켰으며, LPS에 의해 유도된 ERK의 인산화를 감소시켰다. 반면, JNK나 p38 MAPK의 인산화에는 영향을 주지 않았다. LPS에 의해 활성화 된 뇌소교세포에 irisolidone에 의한 NF-κB 활성의 억제는 iNOS, TNF-α, IL-1β의 발현억제와 상관관계가 있고, ERK의 억제는 TNF-α와 IL-1β의 발현 억제와 상관관계가 있음을 증명하였다. 2. 성상세포에서 이소플라본 대사체의 항산화 기전연구뇌는 산화스트레스에 취약한 기관임이 잘 알려져 있으며, 따라서 산화스트레스를 조절하는 것은 퇴행성 신경질환의 중요한 치료 타깃이다. 본 논문에서는 1차 배양 성상세포와 C6 성상세포주에서 두 가지 이소플라본 대사체(tectorigenin and glycitein)의 항산화 효과 및 기전에 대해 연구하였다. 이소플라본 대사체는 과산화수소수 (H2O2) 에 의해 유도된 활성산소종 (ROS) 생성을 억제하였다. 또한 이소플라본 대사체는 phase II 항산화효소인 HO-1과 NQO1의 발현을 증가시켰으며 각각의 화학적 억제제인 ZnPP 와 dicoumarol 을 전처리 했을 때, 이소플라본의 항산화 그리고 세포보호 효과가 감소되는 것을 확인할 수 있었다. 이 결과로 이소플라본 대사체의 항산화/세포보호 효과는 HO-1과 NQO1의 발현증가와 관계가 있음을 알 수 있었다. 다음으로 이소플라본에 의한 항산화 효소 발현증가를 매개하는 분자적 기전을 살펴보았다. Tectorigenin과 glycitein 모두 HO-1과 NQO1 프로모터 상에 존재하는 antioxidant responseelement (ARE) 에 전사인자 (Nrf2 and c-Jun)의 결합을 증가시켰고 ARE를 매개한 전사활성을 증가시켰다. 다양한 신호전달 억제제를 처리하였을 때, 이소플라본을 처리한 세포에서 ARE에 의한 HO-1 발현에 있어 PI3K와 p38 MAPK 경로가 공통적으로 작용하며 반면 NQO1의 발현에 있어 JNK 경로가 관여함을 알 수 있었다. 본 연구결과를 종합하여 볼 때, H2O2 를 처리한 성상세포에서 이소플라본 대사체가 활성산소종과 세포 사멸을 억제하는데 있어서 항산화 효소 HO-1과 NQO1이 중요한 역할을 함을 알 수 있었다.I. INTRODUCTION 1 A. Microglia activation and neuroinflammation 1 B. Astrocyte and Nrf2-mediated neuroprotection 3 C. Isoflavone 6 D. Purpose of the present study 8 II. Materials and Methods 11 A. Preparation of three isoflavones and its bacterial metabolites 11 B. Reagents 12 C. Cell culture 12 D. Cell viability test 13 E. Measurement of cytokine and nitrite levels 13 F. RNase protection assay 14 G. Western blot 15 H. Nuclear extract preparation and electrophoretic mobility shift assay (EMSA) 15 I. Plasmids 17 J. Transient transfection and luciferase assay 17 K. Intracellular reactive oxygen species (ROS) measurement 18 L. RT-PCR 19 M. Transient transfection of small interference RNA (siRNA) 19 N. Statistical analysis 20 III. RESULTS 21 PART I 21 1-1. Effect of the isoflavones on NO, TNF-α and IL-1β production in LPS-stimulated microglial cells 21 1-2. Isoflavone metabolites suppress mRNA expressions of iNOS, TNF-α, and IL-1β 23 1-3. Irisolidone inhibits the DNA binding and transcriptional activities of NF-κB and AP-1 in LPS-stimulated microglial cells 23 1-4. Irisolidone suppresses LPS-induced ERK phosphorylation in LPS-Stimulated microglial cells but not JNK or p38 MAPK phosphorylation 25 1-5. Effect of ERK-specific inhibitor (PD98059) and NF-κB inhibitor (PDTC) on cytokine and iNOS expression in LPS-Stimulated microglial cells 28 1-6. The relationship between the ERK pathway and NF-κB activation in LPS- stimulated microglial cells 28 PART II 32 2-1. Tectorigenin and glycitein inhibited ROS production and cell death in H2O2-treated astrocyte cells 32 2-2. Tectorigenin and glycitein increased the expression of antioxidant enzyme HO-1 and NQO1 in astrocytes 32 2-3. Inhibition of HO-1 or NQO1 attenuated isoflavone-mediated ROS inhibition and cytoprotective effects in H2O2-treated astrocytes 36 2-4. HO-1 siRNA attenuated antioxidant effects of tectorigenin and glycitein in H2O2-treated astrocytes 36 2-5. Tectorigenin and glycitein increased ARE-mediated transcriptional activities in primary astrocytes 39 2-6. Tectorigenin and glycitein increased nuclear protein binding to ARE and translocation of transcription factors into nucleus in primary astrocytes 39 2-7. Nrf2 and c-Jun are involved in antioxidant enzyme gene expression and antioxidant activity of tectorigenin and glycitein 41 2-8. Tectorigenin and glycitein enhanced HO-1 promoter activity in an ARE-dependent manner 41 2-9. Tectorigenin and glycitein increased the phosphorylation of PI3K and MAP kinases 44 2-10. Signaling pathway involved in HO-1 and NQO1 expression in tectorigenin and glycitein-treated cells 44 IV. DISCUSSION 49 PART I. Anti-inflammatory mechanisms of isoflavone metabolites in lipopolysaccharide-stimulated microglial cells 49 PART II. Antioxidant mechanisms of isoflavone metabolites in hydrogen peroxide-stimulated astrocytes 51 REFERENCES 54 국문초록 6

(A) Study on the Utilization of Instructional Media in French Education : In the Case of High Schools in Seoul

The goal of learning French is to communicate with one another in French. The goal, however, has hardly been reached in Korea. Most of Korean Students have difficulties in making themselves understood in French. One of the major reasons is that they have been taught French focused on sentence structure and grammartical usage. Therefore, with an emphasis on developing communicative abilities, the communicative approach is required. To improve communicative competence, various teaching methods should be developed. Using instructional media will be an effecitve and efficient method. The purpose of this study is to examine the utilization of instructional media for teaching French in high schools through the inquiring investigation and to bring about the qualitative improvement for effective teaching. The examination was carried out with 117 responded qustionnaires among 207 ones delivered to 207 French teachers at high schools in Seoul. The analysis of the result is as follows: 1. Even though French teachers agree on the necessity of instructional media and many of them actually utilize the media, they responded negatively on the frequency of usage. 2. French teachers' usage concentrates on recording tape, an acoustic media. 3. The reasons of low frequency of usage are shortage of appropreate instructional media, insufficient educational environment, entrance exam oriented educational culture, lack of time and professional knowledge. 4. In order to use the instructional media, it is required to obtain media which meets the need of the students. 5. lnstuctional media is utilized in ordinary classroom environment, and French teachers manage the instruments by themselves. 6. Many of the French teachers feel the necessity of re-educational program on the usage of instructional media but only a few of them actually recevied one. On the basis of the findings above, this paper suggests some ideas as follows: 1. Actual usage of various kinds of instructional media is required in order to improve the ability to communicate in French effectively. 2. Improving communicative ability not only prerequisites easily accessible qualified instructional media but also requires reform of educational culture and more French class. 3. Chances of re-educational program on intructional media for French teacher should be more available.;국제화시대로 특징지워지고 있는 현대사회를 살아가고있는 사람들에게 외국어를 통한 의사소통능력은 보다 적극적인 삶을 위한 필수도구로써 인식되고 있다. 따라서 의사소통능력 함양을 위한 외국어 교육이 그 어느 때 보다도 강조되어지고 있으며 이를 위한 보다 효과적인 방법의 하나로 적절한 교수매체의 활용이 요구되어진다. 즉 언어활동은 상황과 표현이 관련지어지는 과정이므로 다양한 시청각 매체를 사용하면 언어표현의 상황제시와 본국인 음성의 무제한 경험 그리고 문화적 배경의 이해 촉진으로 보다 자연스런 환경에서 외국어를 학습함으로써 의사소통능력신장의 효과를 거둘 수 있으며, 적절한 교수매체의 활용은 학습자의 동기와 흥미를 유발하고 이해를 보다 용이하게 해주기 때문이다. 이에 본 연구는 국내외 관련 문헌을 통하여 주요 외국어 교수법과 선행연구에 대해 고찰함으로써 의사소통능력 함양에 적절한 교수법을 알아보고, 우리나라에서 불어교육을 담당하고 있는 교사들을 대상으로 불어교육 현장에서의 교수매체 활용실태와 문제점을 파악하고 이를 토대로 하여 불어교육에서의 교수매체 활용을 보다 활성화할 수 있는 방안을 모색해 봄으로써, 불어교육의 질적 향상에 이바지함을 그 목적으로 한다. 이를 위하여 고등학교 불어교육에서의 교수매체 활용실태를 알아보기 위해 설문조사를 실시하였다. 설문지는 서울시내 전체 불어교사 207명을 대상으로 배부되었고 이중 117명으로 부터 설문지가 회수되었다. 조사연구 결과 밝혀진 내용은 다음과 같다. 1. 불어교육에서의 교수매체활용의 필요성을 인식하고 있는 교사가 많았으며 실제 수업시에도 매체가 활용은 되고 있었으나 그 활용정도는 만족할 만한 것이 못되었다. 2. 교수매체의 활용이 만족할 만한 수준이 되지 못한 이유로는 교수매체의 부족, 매체를 효과적으로 사용할 수 있는 적절한 환경의 부족, 입시위주의 교육풍토, 매체를 사용할 시간적 여유의 부족, 매체 활용을 위한 전문지식의 부족 순으로 지적되었다. 3. 불어교사들이 주로 사용하는 매체는 청각자료인 녹음테입으로 편중되어 있었다. 4. 교수매체는 주로 일반교실에서 사용되며, 활용 및 조작 역시 담당교사가 직접하는 것으로 나타났다. 5. 교수매체 활용에 관한 연수의 필요성을 느끼는 교사는 많았으나 실제로 연수를 받은 경험이 있는 교사는 매우 적었다. 이와 같은 조사결과를 토대로 다음과 같은 제언을 하고자 한다. 1. 효과적인 불어를 통한 의사소통능력의 함양을 위해서는 보다 다양한 교수매체의 활용이 필요하다. 2. 불어교육에서의 교수매체활용을 활성화하기 위해서는 질 좋은 교수매체의 개발 및 보급과 이를 이용할 수 있는 적절한 시설의 마련이 필요하며 이와 함께 입시위주의 교육풍토 쇄신이 요구되어진다. 3. 불어교사를 위한 교수매체 활용에 관한 연수가 보다 활성화 되어야 한다.목차 논문개요 Ⅰ. 서론 A. 연구의 의의 및 목적 B. 연구방법 C. 연구의 제한점 Ⅱ. 이론적 배경 A. 외국어 교수법의 이론적 배경 B. 주요 외국어 교수법 C. 불어교육과 교수매채활용 D. 선행연구고찰 Ⅲ. 서울시내 고등학교 불어수업에서의 교수매체 활용에 관한 실태조사 결과분석 A. 연구의 방법 및 절차 B. 연구의 결과 및 해석 Ⅳ. 결론 및 제언 참고문헌 부록 ABSTRAC

Synthesis of LysoPC derivatives and synthesis of Por/PLL/DMB

본 논문은 part A와 part B 두 부분으로 구성되어 있다. Part A는 항진균적 생리 활성을 지닌 phospholipid 유도체의 전합성에 관한 내용이고, part B는 electron transfer 펩타이드 연구를 위한 Por/PLL/DMB의 합성에 관한 내용이다. Part A : 녹용으로부터 추출된 lysophosphatidylcholine 화합물들은 항진균적 생리 활성이 나타나지만, 기존 시판되고 있는 항진균 치료제에 비해 그 효능이 낮게 나왔다. 본 연구에서는 더 좋은 항진균 치료제를 개발하고자 하여 추출된 화합물의 유도체를 새로이 design하여 합성하였다. 출발 물질로는 아미노산인 L-serine과 enatiomer인 D-serine을 선택하여 methyl esterification과 amide bond formation을 시켜주었다. Phosphatidylcholine을 도입하기 위해 ethylene chlorophosphite을 사용하여 phospholylation을 시켜주고, amination을 하여 원하는 phosphatidylcholine moiety를 갖는 (R)-NALPCE과 (S)-NALPCE를 각각 enantioselective 하게 합성, 연구할 수 있었다. 이들은 각각 총 6 단계, 11%와 12%의 수득률로 합성할 수 있었고, 각각의 [α] 값은 -8.4˚와 +8.8˚으로 얻을 수 있었다. 또한, 각각의 (R)-NALPCE과 (S)-NALPCE으로부터의 reduction을 통해 (R)-NALPC과 (S)-NALPC를 각각 enantioselective 하게 합성, 연구할 수 있었다. 이들은 각각 총 7 단계, 6%의 수득률로 합성 할 수 있었고, 각각의 [α] 값은 +5.3˚와 -5.3˚으로 얻어졌다. 결론적으로 sn-1 위치에 methyl ester 또는 hydroxyl group, sn-2 위치에는 N-stearoyl amide, 그리고 sn-3 위치에는 phosphatidylcholine을 가지고 있는 phospholipid를 enantioselective하게 합성에 성공하였다. 이 유도체들은 추출물보다 좋은 항진균적인 생리 활성 가진 것으로 나타났다. Part B : 생리적인 조건에서 분자 구조가 변함에 따라 형광 특성이 변하는 전자 전달(Electron Transfer) 시스템을 design하여 합성하였다. 일반적으로 electron transfer(ET)는 fluorophore와 quencher 사이의 거리가 10Ａ˚내외에서의 donor-acceptor 거리 측정에 사용한다. 이것을 이용하면 지금까지 systematic한 연구가 시도된 바가 많지 않은 다양한 peptide의 형상 구조에 따른 전자 전달 메커니즘을 규명할 수 있을 것으로 기대된다. ET peptide의 예로서 간단한 α-helical turn 구조의 depsipeptide인 L-proline-L-lactate-L-lactic acid(PLL)를 design하여 fluorophore로서 porphyrin을, PLL의 다리에 의한 folding 구조 끝자락에 연결된 quencher로서는 2,5-dimethoxybenzylamine을 선택하였다. tBoc-L-proline을 출발물질로 peptide coupling과 hydrolysis를 하여 전체 6단계 15%의 수득률로 Por/PLL/DMB를 성공적으로 합성하였다.;Part A : Lysophosphatidylcholine (LysoPC) compounds from deer antler showed antifungal activities. LysoPC compounds, isolated phospholipid from deer antler, were demonstrated the hyphal transition suppressing activity, but these were not effective as compared with existing antifungal agents. In this study, we designed and synthesized the derivatives of LysoPC. Synthesis began with L-serine and its enantiomer D-serine. After formation of methyl ester, primary amine was converted to N-stearoyl amide by amide bond formation with stearic acid. Insertion of the phosphatidylcholine (PC) moiety was performed by the following sequential reactions: P(III) oxidation, ring opening, hydrolysis, and amination. After all, we synthesized (R)-N-acyllysophosphatidylcholine Ester (NALPCE) and (S)-NALPCE in overall 11% and 10% yields in six steps, enantioselectively. (R)-N-acyllysophosphatidylcholine (NALPC) and (S)-NALPC were synthesized by reduction from (R)- NALPCE and (S)-NALPCE overall 6% yields in seven steps, enantioselectively. In conclusion, phospholipid derivatives were designed and synthesized, the methyl ester or the hydroxyl group at the sn-1 position, the N-stearoyl amide at the sn-2 position, and phosphatidylcholine at the sn-3 position, enantioselectively. These derivatives displayed the better hyphal transition suppressing activity than isolated compounds. Part B : Porphyrin-depsipeptide-dimethoxybenzylamide has been used to study for conformation-activity relationships of biologically active peptide. Synthesis of a porphyrin donor linked to a dimethoxybenzylamide acceptor via a three residue depsipeptide, L-proline-L-lactate-L-lactate (PLL) has been investigated to study the effect of a protein folding interaction on electron transfer rates through a protein medium. Porphyrin/4(L-proline-L-lactate-L-lactate)/4dimethoxybenzylamide(Por/PLL/DMB) has an α-helical structure. These depsipeptides are homologues of peptides in which some of the backbone amide linkages are replaced by esters. The synthesis of Por/PLL/DMB began with commercially available ^(t)Boc-L-proline. The standard procedure of peptide coupling reaction was applied for the synthesis of Por/PLL/DMB, using DCC and HOBt. First, a carboxylic acid part is activated by appropriate peptide coupling reagent, and then reacted with amine part to make a desired peptide.논문개요 = 1 Part A Synthesis of Lysophosphocoline derivatives = 3 I. 서론 = 4 1. N-Acyllysophosphatidylcholine 의 연구 배경 = 4 2. 항진균제 합성 연구의 필요성 = 7 II. 결과 및 고찰 = 8 1. Retrosynthetic Analysis = 8 2. Amide Bond Formation = 10 3. Phosphatidylcholine (PC) Group 의 합성 = 12 4. (R)- N-Acyllysophosphatidylcholine (NALPC)의 합성 = 15 4. (S)- N-Acyllysophosphatidylcholine Ester (NALPCE)의 합성 = 16 5. (S)- N-Acyllysophosphatidylcholine (NALPC)의 합성 = 18 III. 결론 = 19 IV. 실험방법 = 21 1. General Procedure (일반적 방법) = 21 2. Synthesis (합성) = 22 참고문헌 = 27 부록 = 29 Part B Synthesis of Por/PLL/DMB = 46 I. 서론 = 47 1. Por/PLL/DMB 의 연구 배경 및 필요성 = 47 II. 결과 및 고찰 = 49 1. Retrosynthetic Analysis = 49 2. PLL/DMB 의 합성 = 51 3. Por/PLL/DMB 의 합성 = 53 III. 결론 = 55 IV. 실험방법 = 56 1. General Procedure = 56 2. Synthesis = 57 참고문헌 = 60 부록 = 61 Abstract = 7

Research on Correlation between Grade Percentage of Highschool And Ranking Percentage of Mathmatics Section in the Scholastic Aptitude Test for College

In a cognitive respect, students' results of educational activities can be shown through academic performance evaluation. The Scholastic Aptitude Test, which is meant for the evaluation of achievement of highschool curricula, can be different from highschool regular test. As we examine correlation between ranking percentage of math section and grade percentage of highschool, we will find more to talk about many problems seen in actual math education in highschool. Therefore, to verify that the grade percentage of highschool math, which is the most important to calculation for the transcripts, corresponds with the ranking percentage of Scholastic Aptitude Test properly, I computed Pearson's correlation coefficient through ASin of grade percentage by grades, department, gender and test application type and dealt with the problems shown by the regressive modeling formula and the scatter plot, which are for how much the school grade percentage predicts the results of the college test percentage. For this I got the most exact Excel data by individual and semester of school math grade percentage and math percentage in Scholastic Aptitude Test of February graduates in 2007, who are from liberal arts highschool in competitive districts - Ansan, Yongin and Chungnam. The following is the statistical analysis by SPSS 12.OK for Windows after through classification and integration by various criteria. First, among all of the highschool boys and girls, the Pearson' correlation coefficient was 0.7. This shows that the evaluation goals of school curricula and the Scholastic Aptitude Test are getting close and that school grade percentage is well-proportionate to the ranking percentage of the Test. Second, between natural science highschool boys who took type ga and natual science highschool girs who took type na, They showed strong relevance between school grade and the Test. On the other hand, the whole students of natural science highschool students showed no relevance. One of the reasons why the correlation coefficient lowered after data integration is that the application ratio for type na was 62.3% out of the samples of this study and boys, more than girls, seemed not be well prepared for math Ⅱ and other optional subjects. And girls who took type ga, as they are going higher years, seemed to lose confidence and interest in natural sciences. But the fact that natural science students who have been poor at differential and integral calculus can be admitted to the colleges will make college students of low scholastic ability. Therefore as for natural science and engineering departments of college, where a certain level of differential and integral calculus is needed for easier study, it is suggested that the college administrations should draw a limit within type ga in the Scholastic Aptitude Test. Third, out of sample students of this study, there are 13.4% of students who took math ga, which means there's a wide difference between the two types of math exams. The fact that a lot of students are trying to avoid majoring in natural science is worrisome indeed in terms of nation's future as well as for individual. And from the relatively low possibility of liberal art students continuing their special careers further, the present academic declination in math can affect the opportunity for higher education and professional careers. Therefore, it is their school teachers and parents that should play an important role in helping the highschool students make their careful decisions on their course. Lastly, for this research is for the students of competitive districts, it is hoped that there will be more study such as comparative research between other districts, and between special purpose highschools and general highschools, research on how to promote the confidence in school grade percentage through a variety of analysis on the correlation between the school grade and the Scholastic Aptitude Test, research on the problems that arise as natural science students take type na in math section, and how to improve college admission system based on the actual circumstances of the active education field.;인지적 측면에서 교육활동의 결과는 학생의 학업성취도 평가를 통해서 파악될 수 있다. 대학수학능력시험은 고등학교 교육과정의 성취도를 측정하는 평가로서 고등학교 정기고사와 별개일 수가 없다. 따라서 대학수학능력시험의 수리영역석차백분위와 고등학교 내신석차백분위간의 상관관계를 살펴볼 때 우리는 고등학교 수학교육현장의 실제상황을 파악하여 나타나는 문제점들에 대하여 논해 볼 수 있을 것으로 본다. 그래서 학생부 성적을 산출하는데 가장 중요한 수학 내신석차백분위가 수능석차백분위를 적절히 변별(내신과 수능을 비교한 글들을 보면 대부분 내신의 변별력이 수능에 비해 상대적으로 열등하다는 결론이었다. 본 연구에서도 문항제작등의 신뢰도와 타당도면에서 볼 때 내신보다는 수능이 학력의 척도로서 좀더 잘 변별해 준다고 보았다)해 주고 있는지를 알아보기 위해 학년별, 계열별, 남·여별, 수능시험 응시형태별로 석차백분위를 고전검사이론에 근거하여 역정현변환(아크사인)한 Pearson상관계수를 구하였고 내신석차백분위로 수능석차백분위를 어느 정도 예측해볼 수 있는지 회귀분석을 통한 모형식과 산점도를 살펴보고 나타난 문제점에 대하여 논하였다. 이를 위해 경기도 안산시, 용인시, 충남의 비평준화지역의 인문계 고등학교라는 공통점을 지닌 세 학교에서, 2007학년도 2월 졸업생들의 각 개인별, 매학기별 수학내신석차백분위와 대학수학능력시험의 수리영역석차백분위의 가장 정확한 엑셀자료를 받았다. 이 자료들을 다양한 기준으로 분류·통합한후 SPSS 12.OK for Windows통계프로그램을 이용하여 얻은 통계처리결과의 시사점은 다음과 같다. 첫째, 인문계열 남·여학생들은 내신과 수능간에 Pearson상관계수가 0.7정도 되었다. 이는 고등학교 교육과정에서 제시된 평가목표와 수능시험의 평가목표와 상당히 근접하였다고 볼 수 있고 내신석차백분위가 수능석차백분위를 적절히 변별해 준다고 할 수 있을 것이다. 둘째, 자연계열 수리가형 응시 남학생들과 자연계열 수리나형 응시여학생들은 내신과 수능간의 강한 관련성을 보였으나, 자연계열 전체 남·여학생들은 내신과 수능간에 아무런 상관관계도 보이지 않았다. 이처럼 자료를 통합후 상관계수가 낮아진 원인 중에는, 자연계열 수리나형 응시비율은 본 연구의 표본집단에서 62.3%로서 이들 중 특히 남학생들이 학교시험에서 수학Ⅱ와 선택과목을 소홀히 임하였다고 보여 진다. 그리고 수리가형 여학생들은 학년이 올라감에 따라 이공계열 관련 공부에 대한 자신감의 결여, 학업흥미 상실등에 문제가 있는 것으로 보인다. 이와 같이 자연계열 학생들이 수학Ⅱ와 미분적분학의 학습을 소홀히 하고 이공계대학에 진학할 수 있도록 함으로써 이공계 대학생들의 학력저하 현상이 문제점으로 크게 대두될 수 있다. 따라서, 수학Ⅱ와 미분적분학이 기본적으로 학습되어 있어야만 대학수업이 가능한 자연 및 공학계열 학과에서는 대학수학능력시험에서 반드시 수리가형만으로 제한하여 선발하였으면 한다. 셋째, 본 연구에서 표본학생 중 수리가형응시생은 전체의 13.4%로 수리‘가’형과 수리‘나’형의 현격한 차이를 볼 수 있었다. 오늘날 자연계열을 많은 학생들이 기피하고 있다는 사실은 개인적인 면에서뿐만 아니라, 국가 장래면 에서도 매우 염려스러운 일이 아닐 수 없다. 또한 인문계열은 자연 계열에 비하여 전문 직업인으로 진출하는 비율이 상대적으로 낮으므로, 수학에서의 열세는 고등교육 수혜 기회와 더 나아가 직업 세계로의 진출에 영향을 미친다고 할 수 있다. 그러므로 고등학교에서 계열을 결정해야 하는 시점에서 진로에 대한 신중한 판단을 할 수 있도록 교사와 학부모의 역할이 매우 중요할 것으로 생각된다. 넷째, 본 연구는 비평준화지역의 학생들을 대상으로 하였으나, 이후 폭넓은 지역과 특목고, 일반고와의 비교등 다양한 연구분석을 통하여 내신과 수능간의 상관관계 등을 통한 내신의 신뢰성 제고방안에 대한 연구, 자연계열 학생들이 수능시험에서 수리나형으로 응시하는 문제점에 대한 연구, 일선 교육현장의 실제상황을 고려한 현실적이며 합리적인 대학입시제도 개선방안등이 수립되었으면 한다.Ⅰ. 서론 = 1 A. 연구의 필요성 및 목적 = 1 B. 연구 문제 = 4 C. 연구 범위 및 분석결과의 제한점 = 5 Ⅱ. 이론적 배경 = 6 A. 학교 수학교육과정의 개관 = 6 1. 수학교육의 목적 = 6 2. 수학과 교육과정의 역사적 변천과 시사점 = 7 3. 제7차 수학과 교육과정 이해 = 9 B. 대학수학능력시험의 수리 영역 개관 = 11 1. 수리 영역의 개념 = 11 2. 수리 영역의 평가개념 = 12 3. 수리 영역의 평가목표 및 영역 = 12 3.1 내용 영역 = 13 3.2 행동 영역 = 14 4. 수리영역의 출제 방향 및 범위 = 18 5. 수리영역의 출제의 기본원칙 = 19 C. 선행연구 고찰 = 20 Ⅲ. 연구 방법 및 절차 = 25 A. 연구 대상 = 25 B. 연구 절차 = 26 Ⅳ. 연구 결과 및 논의 = 28 A. 인문계열 남·여학생 = 29 B. 자연계열 남·여학생 = 30 1. 자연계열 남학생 = 32 2. 자연계열 여학생 = 34 C. 수리가형과 나형 = 37 1. 수리가형 = 39 2. 수리 나형 = 41 3. 자연계열 수리나형 = 43 D. 인문계열·자연계열 = 45 E. 남학생·여학생 = 46 Ⅴ. 요약 및 결론 = 51 참고문헌 = 57 부록 = 60 <부록Ⅰ> 각학교별 내신석차백분위와 수능석차백분위자료 = 60 <부록Ⅱ> 내신과 수능간의 상관계수와 회귀분석통계 자료 = 83 ABSTRACT = 10

Anti-inflammatory mechanism of sodium butyrate in brain microglia

Microglia are resident immune cells of the central nervous system. They are activated in response to brain injury and release neurotoxic factors including nitric oxide (NO) and pro-inflammatory cytokines such as TNF-α and IL-1β. Inhibition of microglial activation, therefore, would be an effective therapeutic approach to alleviating the progression of diseases such as Alzheimer's disease (AD), Parkinson's disease (PD) and other neurodegenerative diseases. In the present study, we demonstrate that sodium butyrate repressed IFN-γ-induced expression of iNOS and TNF-α, but had little effect on LPS-induced expression in murine microglial cells. Sodium butyrate significantly inhibited NF-κB binding as well and NF-κB-mediated transcription induced by IFN-γ, suggesting that the anti-inflammatory effect of sodium butyrate is mediated via specific inhibition of the NF-κB pathway. In order to further determine the upstream signaling mechanism involved in the IFN-γ-specific down-regulation of iNOS by sodium butyrate in microglia, this study investigated the effect of sodium butyrate on the MAP kinase activities. Sodium butyrate significantly repressed the phosphorylation of ERK induced by IFN-γ, but had little effect on that induced by LPS. This suggests that sodium butyrate suppresses the IFN-γ-induced iNOS expression by inhibiting the ERK to NF-κB pathway. In addition, it was found that sodium butyrate suppressed the IFN-γ-induced interferon regulatory factor 1 (IRF-1) expression via the inhibition of ERK. Therefore, the ERK signaling pathway appears to play a key role in the sodium butyrate-mediated down-regulation of iNOS in the IFN-γ-stimulated microglia. Considering that IFN-γ is a major stimulator of innate and adaptive immune response, the specific down-regulation of IFN-γ-induced microglial activation by sodium butyrate may provide potential therapeutic strategies for a variety of inflammatory diseases in the central nervous system.;뇌소교세포는 중추신경계에 존재하는 면역세포로써, 뇌가 손상을 받으면 활성화되어 nitric oxide (NO) 나 염증성 cytokines 인 TNF-α, IL-1β 와 같은 뇌에 독성을 갖는 인자들을 분비하게 되며, 이렇게 분비된 인자들은 뇌세포의 퇴화를 유도한다. 따라서, 신경세포의 사멸과 기능의 저하를 막기 위하여, 뇌소교세포의 활성화를 억제하는 것은 Alzheimer's disease (AD), Parkinson's disease (PD) 와 같은 퇴행성 신경질환의 치료에 중요하리라 사료된다. 본 연구에서는, 쥐의 뇌소교세포에서 sodium butyrate가 염증을 유도하는 자극 (IFN-γ) 에 의해 유도된 iNOS 와 TNF-α 의 발현을 선택적으로 억제한다는 것을 발견하였다. Sodium butyrate 는 IFN-γ 에 의해 유도된 NF-κB (염증반응을 조절하는 것으로 알려진 신호전달 인자) 의 활성화를 두드러지게 감소시켰고 이것은 sodium butyrate 가 NF-κB pathway 를 선택적으로 억제함으로써 항염증 작용을 한다는 것을 암시한다. 또한 microglia 에서 sodium butyrate 가 IFN-γ 에 의해 유도된 iNOS 의 발현을 저하시키는데 관계된 upstream signaling mechanism 을 밝히기 위해, 본 실험에서는 sodium butyrate 가 MAP Kinase 의 activity 에 미치는 영향을 연구하였다. Sodium butyrate 는 IFN-γ 에 의해 유도된 ERK의 인산화를 현저히 억제지만 LPS 에 의해 유도된 ERK 의 인산화에는 영향을 주지 않는다는 것을 알 수 있었다. 이것은 sodium butyrate 가 IFN-γ 에 의해 유도된 ERK 와 NF-κB pathway 를 선택적으로 억제하여 iNOS 의 발현을 감소시키는 것이라 할 수 있다. 게다가 sodium butyrate 는 ERK 의 활성을 억제함으로써 유도된 interferon regulatory factor 1 (IRF-1) 의 발현을 감소시켰다. 그러므로, IFN-γ 에 의해 활성화된 뇌소교세포에서 iNOS 의 발현 억제는 ERK signaling pathway 와 연관이 있음을 알 수 있었다. 따라서 본 연구에서는 IFN-γ 에 의해 뇌소교세포가 활성화 되는 것을 sodium butyrate에 의해 특이적으로 억제되는 기전을 밝히고, sodium butyrate가 중추신경계에서 염증성 질환의 치료제로의 잠재적 가능성을 보여준다.І. INTRODUCTION = 10 A. Microglia are inflammatory mediators of neurodegenerative disease = 10 B. Microglia activation and intracellular signaling = 13 C. Metabolism and effects of sodium butyrate = 15 D. Purpose of this study = 17 ІІ. MATERIALS AND METHODS = 18 A. Reagents = 18 B. Microglia culture = 18 C. Rat primary microglial cell culture = 18 D. Animals = 19 E. Nitrite assay = 19 F. Cell viability test = 20 G. RT-PCR = 20 H. Measurement of TNF-α levels by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) = 21 I. Western blotting = 21 J. RNase protection assay (RPA) = 22 K. Nuclear extract preparation and electrophoretic mobility shift assay(EMSA) = 22 L. Transient transfection and luciferase assay = 24 M. Microinjection into corpus callosum = 24 N. Immunohistochemistry = 25 O. Statistical Analysis = 26 ІІІ. RESULTS = 27 A. Sodium butyrate suppresses IFN-γ-induced iNOS/NO generation = 27 B. Sodium butyrate represses IFN-γ-induced NO production and iNOS protein expression in a dose-dependent manner = 27 C. Sodium butyrate suppressed IFN-γ-induced cell death = 29 D. Sodium butyrate suppresses the expression of TNF-α induced by IFN-γ = 29 E. Sodium butyrate represses IFN-γ-stimulated NF-κB activity = 32 F. Sodium butyrate inhibits translocation of NF-κB into nucleus without affecting IkB phophorylation = 34 G. Sodium butyrate reduces IFN-γ-inducd IRF-1 mRNA = 37 H. Sodium butyrate does not inhibit IFN-γ-stimulated JAK/STAT activation = 40 I. Sodium butyrate inhibits IFN-γ-, but not LPS-induced activation ERK = 42 J. Inhibition of ERK selectively suppresses IFN-γ-induced iNOS expression = 42 K. Inhibition of ERK selectively represses IFN-γ-stimulated NF-κB activity = 44 L. Sodium butyrate represses IFN-γ-induced IRF-1 mRNA expression and DNA binding activity via inhibition of ERK = 48 M. Reduced OX42-immmunoreactivity by sodium butyrate in cerebral cortex and striatum at 1 d IFN-γ-injection into corpus callosum = 48 ІV. DISCUSSION = 53 REFERENCE = 60 국문초록 = 6

과학기술분야 연구회 체제의 운영 및 성과분석에 관한 연구 : 혁신체제와의 정합성을 중심으로

학위논문(석사)--서울대학교 대학원 :행정학과, 정책학전공,2006.Maste

Legal protection for TV program formats : a case study on reality show

학위논문(석사) - 한국과학기술원 : 지식재산대학원프로그램, 2021.2,[iv, 127 p. :]본 논문에서는 방송 포맷의 보호방안에 대하여 리얼리티 프로그램에 관한 논의를 중심으로 다루고 있다. 리얼리티 프로그램은 대본에 기반하여 제작되는 것이 아니라 일정한 형식, 전개, 구성을 유지하되, 무한히 변형이 가능한 열린 구조로 제작된다. 그 중 출연자들의 상호 작용에 기반하여 즉흥적으로 발생하는 부분은 창작성이 있다고 보기 어렵고, 정작 보호를 받아야 할 영역에 해당하는 구성 요소들은 아이디어성이 강하다. 리얼리티 프로그램의 법적 보호는 결국 방송 포맷을 아이디어 영역으로 볼 것인지 표현의 영역으로 볼 것인지에 관한 논의로 귀결되나, 아이디어 표현 이분법에 의하면 저작권법상 방송 포맷의 보호가 쉽지 않다. 2017년 11월 대법원은 <짝> 사건에서 방송 포맷이 일정한 요건을 갖춘 경우, 저작권법에 의해 보호받을 수 있다는 취지의 파기 환송 판결을 선고하였다. 리얼리티 프로그램을 구성하는 개별 요소들이 일정한 기획의도 하에 선택, 배열되어 해당 프로그램 자체가 다른 프로그램과 구별되는 창작적 개성이 있는 경우 저작권법을 통한 보호 대상이 될 수 있다고 판단하였다. 본 판결에서는‘어떠한 형태의 조합의 독창성을 표현으로 인정할 것인지’에 관하여 구체적으로 언급하지 않고 있으나, 모든 방송 포맷이 저작물로 인정되어야 한다는 의미는 아니며, 법적 보호 대상을 아이디어의 영역과 표현의 경계선에 위치한 방송 포맷으로 제한하여 해석함이 타당하다.한국과학기술원 :지식재산대학원프로그램

치매치료제인 tacrine(1,2,3,4-tetrahydro-9-aminoacridine)의 혈 중, 뇌 중 동태에 관한 연구

학위논문(석사)--서울대학교 대학원 :약학과 약제학전공,1999.Maste

Park, Jin Sun

학위논문(석사)--아주대학교 일반대학원 일반대학원 :의학과,2007. 8배경: B형 간염 바이러스 (hepatitis B virus; HBV) 감염은 다양한 임상 경과를 갖는다. HBV 감염의 자연경과의 다양성의 원인으로 유전자 다형성을 포함한 숙주 요인을 들 수 있으며, 사이토카인은 숙주 면역능에 중요한 역할을 한다. 본 연구는 HBV 감염 후의 자연 경과 및 간세포암 발생과 interleukin(IL)-12A 유전자 다형성(single neucleotide polymorphisms, SNP)과의 상관성에 대해 알아보고자 하였다. 대상 및 방법: 2002년 3월부터 2004년 12월까지 아주대병원 소화기 내과 외래를 내원한 HBV 만성화군 730명과 HBV 감염 후 자연 회복된 HBV 제거군 320명을 포함하여 총 1,050명을 대상으로 하였다. B형 간염의 만성화와 IL-12A의 유전자 다형성과의 관련성을 조사하기 위하여, HBV 만성화군과 HBV 제거군의 IL-12A SNP 및 haplotype에 따른 차이를 비교 분석하였고, 간세포암 발생과 IL-12A의 유전자 다형성과의 관련성을 조사하기 위하여, HBV 만성화군을 간세포암군과 비간세포암군으로 나누어 IL-12A SNP 및 haplotype에 따른 차이를 비교 분석하였다. 결과: IL-12A의 SNP는, IL-12A 유전자 번역 시작 부위로부터 +6400, +6624, +7003 부위에서 조사하였고, IL-12A exon 7 +6400 부위는 C/C 유전자형이 가장 흔하였고, T/T 유전자형은 발견되지 않았다. IL-12A exon 7 +6624 부위는 G/G 유전자형이 가장 흔하였고, IL-12A 3’UTR +7003 부위는 T/T 유전자형이 가장 흔하게 발견되었다. 대상 환자를 HBV 만성화군과 HBV 제거군으로 분류하고, IL-12A SNP와 HBV 만성화와의 관련성을 조사한 결과 IL-12A exon 7 +6400 및 +6624 두 부위 및 3' UTR +7003 한 부위의 SNP는 HBV 만성화군과 HBV 제거군 간에 통계적으로 유의한 차이를 보이지 않았다. 또한 +6400/+6624/+7003 haplotype에 따른 HBV 만성화 관련성 조사에서도 양군 간에 통계적으로 유의한 차이점은 관찰되지 않았다. IL-12A SNP와 간세포암과의 관련성을 조사한 결과 각각의 SNP 및 +6400/+6624/+7003 haplotype에 따른 HBV 감염 후 간세포암 발생과의 연관성도 관찰되지 않았다. 결론: IL-12A SNP 및 haplotype은 HBV 간염 진행 및 간세포암 발생과 연관성을 보이지 않았다. HBV 감염의 자연 경과에서 숙주의 유전적 인자의 중요성을 상기해 볼때 향후 환자의 유전적 소인에 대한 연구가 더 진행되어야 할 것으로 판단된다.Ⅰ. 서론 = 1 Ⅱ. 연구대상 및 방법 = 3 A. 연구대상 = 3 B. 방법 = 4 1. 유전자형 분석 (Genotyping) = 4 C. 통계분석 = 4 Ⅲ. 결과 = 6 Ⅳ. 고찰 = 11 Ⅴ. 결론 = 14 참고문헌 = 15 ABSTRACT = 18MasterBackground: Infection with hepatitis B virus (HBV) may result in various conditions. Natural course of HBV infection may result from host immune factors including single nucleotide polymorphisms(SNPs), and cytokines play a crucial role in host immune defense. This study was undertaken to investigate the association between HBV persistence and development of hepatocelluar carcinoma(HCC) and SNPs of interleukin(IL)-12A. Methods: Between March 2002 and December 2004, 730 Korean patients with HBV infection and 320 healthy individuals who recovered from HBV infection were enrolled. We assessed polymorphisms and haplotype in IL-12A, and the genotype distributions of the HBV clearance and persistence groups were compared to investigate the association between HBV persistence and SNPs of IL-12A. And the genotype distributions of the HCC and no HCC groups were compared to investigate the association between development of HCC and SNPs of IL-12A. Results: We asssesed SNPs in IL-12A at position +6400, +6624 and +7003. In IL-12A exon 7 +6400, the most common genotype was C/C and T/T genotype was not found. In IL-12A exon 7 +6624, the most common genotype was G/G. And in IL-12A 3' UTR +7003, the most common genotype was T/T. Study subjects were classified into 2 groups, the HBV persistence and the HBV clearance. On the basis of logistic regression analysis, no statistically significant association with HBV persistence was observed with IL-12A exon 7 +6400, +6624, 3' UTR +7003 SNP and haplotype of IL-12A +6400/+6624/+7003. Also, no statistically significant association with HCC development was observed with IL-12A exon 7 +6400, +6624, 3' UTR +7003 SNP and haplotype of IL-12A +6400/+6624/+7003. Conclusion: This study suggest that SNPs and haplotype of IL-12A were not associated with HBV persistence and development of HCC. Further studies are needed to identify the host genetic factors including SNPs

Anti-inflammatory effects of short chain fatty acids in IFN-γ-stimulated RAW 264.7 murine macrophage cells: Involvement of NF-κB and ERK signaling pathways

The overactivation of macrophages causes abnormal cell death and chronic inflammatory diseases. Therefore, the modulation of macrophage-mediated cytotoxicity is expected to become a new therapeutic strategy for various inflammatory diseases. In this study, three types of short chain fatty acids (sodium butyrate (NaB), sodium phenylbutyrate (NaPB), sodium phenylacetate (NaPA)) were found to have anti-inflammatory effects in IFN-γ-stimulated RAW 264.7 cells. They inhibited the expression of iNOS, TNF-α, and IL-6 induced by IFN-γ, while they enhanced the expression of the anti-inflammatory cytokine, IL-10. Their potency as anti-inflammatory agents was in the order of NaB > NaPB > NaPA. Further mechanistic studies revealed these three agents to repress the DNA binding and transcriptional activities of NF-κB, which is an important modulator of inflammation. In addition, these agents repressed the IFN-γ-induced ERK1/2 phosphorylation without affecting the Jak/STAT activities. The potency of NF-κB and ERK inhibition was also in the order of NaB > NaPB > NaPA. The results suggest that the NF-κB and ERK signaling pathways are at least in part involved in the anti-inflammatory activities of these SCFAs. Considering that SCFAs are normally present in the body and have few side effects, they might be promising agents for the prevention and/or treatment of various inflammatory diseases. © 2006 Elsevier B.V. All rights reserved