Transgenic mouse model expressing P53(R172H), luciferase, EGFP, and KRAS(G12D) in a single open reading frame for live imaging of tumor

Genetically engineered mouse cancer models allow tumors to be imaged in vivo via co-expression of a reporter gene with a tumor-initiating gene. However, differential transcriptional and translational regulation between the tumor-initiating gene and the reporter gene can result in inconsistency between the actual tumor size and the size indicated by the imaging assay. To overcome this limitation, we developed a transgenic mouse in which two oncogenes, encoding P53(R172H) and KRAS(G12D), are expressed together with two reporter genes, encoding enhanced green fluorescent protein (EGFP) and firefly luciferase, in a single open reading frame following Cre-mediated DNA excision. Systemic administration of adenovirus encoding Cre to these mice induced specific transgene expression in the liver. Repeated bioluminescence imaging of the mice revealed a continuous increase in the bioluminescent signal over time. A strong correlation was found between the bioluminescent signal and actual tumor size. Interestingly, all liver tumors induced by P53(R172H) and KRAS(G12D) in the model were hepatocellular adenomas. The mouse model was also used to trace cell proliferation in the epidermis via live fluorescence imaging. We anticipate that the transgenic mouse model will be useful for imaging tumor development in vivo and for investigating the oncogenic collaboration between P53(R172H) and KRAS(G12D).ope

A Study on Classification and Determinants of Ethical Consumption

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 소비자학과, 2013. 2. 김난도.인간의 소비 욕망이 낳은 현대 소비사회의 문제를 해소하기 위한 대안으로서 윤리적 소비에 대한 관심이 증대되고 있다. 본 연구는 윤리적 소비의 본질과 특성을 이해하고, 윤리적 소비를 보다 활성화하고자 다음의 3가지 연구 문제에 대해 연구를 진행하였다. 첫째, 윤리적 소비 행동을 유형화한다. 둘째, 윤리적 소비에 대한 태도와 행동의 수준을 알아본다. 셋째, 윤리적 소비의 영향 요인과 그들의 상대적 영향력을 알아본다. 각 연구 문제에 대한 연구 결과는 다음과 같다. 첫째, 윤리적 소비 행동은 크게 사회의식적 소비, 행동주의적 소비, 절제적 소비의 3가지 차원으로 유형화되었다. 둘째, 윤리적 소비의 태도와 유형별 행동에 대한 수준은 모두 높은 편이었으나 행동이 태도에 비해 낮은 양상을 보였다. 그리고 성별, 연령대, 윤리적 소비 관련 프로그램 참가 경험, 종교, 주관적 사회 계층에 따라 윤리적 소비 수준에 차이를 보였다. 셋째, 윤리적 소비 태도에 있어서는 이타주의적 가치인 선행의 영향력이 가장 컸다. 한 편, 윤리적 소비 행동 중 사회의식적 소비에 있어서는 자기표현적 가치인 흐뭇함이, 행동주의적 소비에 있어서는 윤리적 소비 태도와 이타주의적 가치인 친사회성의 영향력이 큰 것으로 나타났다. 마지막으로 절제적 소비에 있어서는 프로그램 참가 경험만이 유일한 영향 요인이었다. 이상의 분석을 바탕으로 윤리적 소비의 활성화를 위해 본 연구에서 얻은 함의는 다음과 같다. 첫째, 소비자 스스로 소비 행동이 자신뿐만 아니라 타인과 사회, 그리고 환경에도 영향을 미칠 수 있음을 고려하고, 장기적인 관점에서 의식 수준 개선을 도모해야 한다. 둘째, 윤리적 소비와 관련된 다양한 프로그램을 개발하고, 실천 정보에 대한 접근성을 향상시키기 위한 제반 환경과 정책을 마련해야 한다. 셋째, 윤리적 소비를 통해 타인과 사회, 환경에 기여할 수 있을 뿐만 아니라 상품 가치와 만족에 있어서도 충분한 효용을 얻을 수 있다는 확신을 줄 수 있는 상품을 개발해야 한다.제 1 장 서론 1 제 1 절 문제 제기 1 제 2 절 연구 목적 및 연구 내용 3 제 2 장 이론적 고찰 5 제 1 절 윤리적 소비의 정의 5 1. 윤리적 소비의 개념 5 2. 윤리적 소비의 유사 개념 7 3. 윤리적 소비의 정의 8 제 2 절 윤리적 소비의 영향 요인 9 1. 이타주의적 가치 9 2. 자기표현적 가치 10 3. 인구사회학적 요인 13 4. 윤리적 소비에 있어서의 태도와 행동의 관계 16 제 3 장 연구 문제 및 연구 방법 18 제 1 절 연구 모형 및 연구 문제 18 1. 연구 모형 18 2. 연구 문제 18 제 2 절 연구 방법 및 자료 수집 20 1. 변수의 조작적 정의와 조사 도구 20 2. 조사 도구의 신뢰도 검증 27 3. 자료의 수집과 분석 29 제 3 절 조사 대상자의 일반적 특성 29 제 4 장 연구 결과 32 제 1 절 윤리적 소비 행동의 유형화 32 제 2 절 윤리적 소비의 수준 34 1. 윤리적 소비의 전반적인 수준 34 2. 인구사회학적 요인에 따른 윤리적 소비의 수준 35 제 3 절 윤리적 소비의 영향 요인과 상대적 영향력 39 1. 윤리적 소비 태도의 영향 요인과 상대적 영향력 39 2. 윤리적 소비 행동의 영향 요인과 상대적 영향력 41 제 5 장 결론 및 제언 46 제 1 절 연구 결과 요약 46 제 2 절 결론 및 함의 47 참고문헌 50 References 56 설문지 59 Abstract 65Maste

시스템 생물학을 통한 쥐에서의 식이제한의 유익한 효과에 기여하는 해독작용의 증가 연구

학위논문 (박사)-- 서울대학교 대학원 : 약학과, 2015. 2. 박성혁.Dietary restriction (DR) has many beneficial effects, but the detailed metabolic mechanism remains largely unresolved. For this, systems biology approach involving metabolomics and genomics was applied to identify molecular interaction networks related to effects of DR on multiple tissues. First, the metabolic profiles of urines from control and DR animals were investigated using NMR and LC-MS metabolomics approaches. Multivariate analysis presented distinctive metabolic profiles and marker signals from glucuronide and glycine conjugation pathways in the DR group. Broad profiling of the urine phase II metabolites with neutral loss scanning showed that glucuronide and glycine conjugation metabolites were generally higher in the DR group. The up-regulation of the phase II detoxifications in the DR group were confirmed by mRNA and protein expression levels of the UGT and GLYAT in actual liver tissue. In addition, the Nrf-2 signaling pathway was shown to be up-regulated, providing a mechanistic clue for the enhanced phase II detoxification in liver tissue. Next, metabolic and genomic profiles of multiple tissues from the control and DR rat were investigated using metabolomics and cDNA microarray. Multi-organ metabolomics markers indicated higher phase II detoxification and distinct energy metabolism in the DR group. Microarray analysis with gene, pathway enrichment, and gene ontology terms provided consistent results for the mechanism revealed by multi-organ metabolomics. In addition, pathway enrichment and gene ontology analysis gave evidence of enhanced phase I detoxification in the DR group as the beneficial effect of DR. Several other markers were also found related to age-associated diseases, such as diabetes, cancers, cardiovascular, neurodegenerative, hepatic, and renal diseases. These were consistent with the histopathology and serum biochemistry results that showed actual beneficial effects of DR in current experimental system. Taken together, metabolomics, microarray, and biochemical studies provide a possible metabolic and genomic perspective in understanding the complex mechanism of the beneficial effects of DR.Abstract i Table of contents iii List of figures vi List of tables viii 1. General introduction 1 2. Part I: Multi-platform urine metabolomics analysis revealed the contribution of phase-II detoxifications for beneficial effect of dietary restriction I. Introduction 4 II. Materials and methods 7 A. Materials 7 1. Chemicals and reagents 7 B. Methods 8 1. Animal and diets 8 2. Urine, blood, and tissue collection 8 3. Urine samples preparation for NMR 9 4. NMR Spectroscopic analysis of urine 9 5. LC-MS analysis of urine 10 6. Multivariate data and statistical analysis 12 7. Reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) 12 8. Western blot 13 9. Liver tissue histopathology and serum biochemistry 14 III. Results 15 A. General assessment of DR effects 15 B. NMR and LC-MS analysis of urine samples 17 C. OPLS-DA multivariate analysis 26 D. Metabolites related to DR 29 E. Profiling of general glucuronide and glycine conjugation via neutral loss scanning 32 F. Assessment of phase II detoxification pathways in liver tissue 35 G. Biochemical and histopathological changes in liver tissue 40 H. Up-regulation of Nrf-2 signaling pathway 44 IV. Discussion 47 3. Part II: Characterization of global metabolic and genomic alteration induced by dietary restriction using multi-organ metabolomics and cDNA microarray in rat I. Introduction 53 II. Methods 57 1. Tissues sample preparation for NMR and LC-MS 57 2. NMR spectroscopic analysis of tissues 57 3. LC-MS spectroscopy 58 4. Multivariate data analysis 59 5. Kidney tissue histopathology and serum biochemistry 60 6. Microarray data processing 60 7. Microarray data analysis 62 III. Results 64 A. Serum clinical biochemistry 64 B. NMR spectral acquisition and analysis 69 C. OPLS-DA multivariate analysis 74 D. Altered metabolic pathways in the DR group 77 E. General effects on gene expression 82 F. Pathway enrichment analysis 87 G. Functional enrichment analysis 92 IV. Discussion 95 4. Conclusion 117 References 119 Abstract in Korean 137 Appendix 139 This appendix includes the reprint of six published papers. Among them, I was involved as a first or a co-first author in one paper or five papers, respectively. These works were done during my doctor course in Seoul National University under my supervisor Professor Sunghyouk Park.Docto

건설산업 구조개편에 따른 건설보증기관의 발전방안 연구(Reform Strategies of the Construction Surety Body for Construction Industry Restructuring )

노트 : 이 연구보고서의 내용은 국토연구원의 자체 연구물로서 정부의 정책이나 견해와는 상관없습니다

Analysis of miRNA expression patterns in human and mouse hepatocellular carcinoma cells

AIM: Hepatocellular carcinoma (HCC), one of the most common malignancies in adults displays aberrant miRNA expression during its pathogenesis. We assessed expression of miRNA in surgically resected human HCC of an early stage and murine HCC with a high malignancy in order to find miRNA overexpressed in HCC regardless of tumor stage and underlying etiology. Further, the role of the deregulated miRNA in HCC pathogenesis was investigated. METHODS: miRNA were isolated from HCC tissues and surrounding non-tumorous tissues from HCC patients and a murine transgenic model of HCC. A quantitative reverse transcription polymerase chain reaction was performed to determine expression levels of miRNA. Human HCC cell lines stably expressing individual miRNA were generated to investigate the biological function of overexpressed miRNA. RESULTS: We found that levels of miR-221, -181b-1, -155-5p, -25 and -17-5p were significantly upregulated in both human and murine HCC regardless of tumor stage, underlying etiology or the presence of fibrosis. Using HCC cell lines stably expressing respective miRNA, we found that miR-221 increased the proliferation of hepatoma cells, while miR-17-5p induced cell migration. CONCLUSION: We identified miRNA that are consistently upregulated in HCC. The overexpressed miRNA could potentially be used as a bona fide biomarker for HCC.restrictio