8 research outputs found
Erythropoietic Potential of CD34+ Hematopoietic Stem Cells from Human Cord Blood and G-CSF-Mobilized Peripheral Blood
Red blood cell (RBC) supply for transfusion has been severely constrained by the limited availability of donor blood and the emergence of infection and contamination issues. Alternatively, hematopoietic stem cells (HSCs) from human organs have been increasingly considered as safe and effective blood source. Several methods have been studied to obtain mature RBCs from CD34+ hematopoietic stem cells via in vitro culture. Among them, human cord blood (CB) and granulocyte colony-stimulating factor-mobilized adult peripheral blood (mPB) are common adult stem cells used for allogeneic transplantation. Our present study focuses on comparing CB- and mPB-derived stem cells in differentiation from CD34+ cells into mature RBCs. By using CD34+ cells from cord blood and G-CSF mobilized peripheral blood, we showed in vitro RBC generation of artificial red blood cells. Our results demonstrate that CB- and mPB-derived CD34+ hematopoietic stem cells have similar characteristics when cultured under the same conditions, but differ considerably with respect to expression levels of various genes and hemoglobin development. This study is the first to compare the characteristics of CB- and mPB-derived erythrocytes. The results support the idea that CB and mPB, despite some similarities, possess different erythropoietic potentials in in vitro culture systems.ope
์ต์ฐฌ์ ๋ฌธํ ์ฐ๊ตฌ
ํ์๋
ผ๋ฌธ (์์ฌ)-- ์์ธ๋ํ๊ต ๋ํ์ : ์ธ๋ฌธ๋ํ ๊ตญ์ด๊ตญ๋ฌธํ๊ณผ, 2019. 2. ๊น์ข
์ฑ.๋ณธ ๋
ผ๋ฌธ์์๋ ๊ทธ๋์ ์ ๋๋ก ๊ท๋ช
๋์ง ์์๋ ์ ์์ค ์๊ฐ ์ต์ฐฌ์์ ๋ฌธํ์ธ๊ณ๋ฅผ ์ดํด๋ณด๋ ค๊ณ ํ๋ค. ์ต์ฐฌ์์ 1912๋
์ ์ถ์์์ผ๋ก ๋
์์ ์ฌ๋์ ํ ๋ชธ์ ๋ฐ์๊ณ , ์ด์ด ๊ธ๊ฐ๋ฌธโ
์์ ์ฑโ
๋ฅ๋ผ๋โ
์ถ๋ชฝ ๋ฑ ๋ง์ ์ํ์ ๋ฐํํ์๋ค. ๊ทธ๋ 1927๋
๊น์ง ๊พธ์คํ ์ฐฝ์ํ๋์ ํ์์ผ๋ฉฐ ์ ๋ฌธ๊ณ์ ๋ฐ๋์๋ก ์์ ๊ธฐ์๋ก ํ์ฝํ์๋ค. ์ต์ฐฌ์์ด ์ด์๊ฐ๋ ์๋๋ ๊ทผ๋์ ์ ๊ทผ๋๊ฐ ์ถฉ๋ํ๊ณ ์ธ๋์ ๊ฒ์ด ์์ฌ ๋ํ๋๋ ์๋์ ๊ฒฉ๋ณ๊ธฐ์๋ค. ๊ทธ๋ ๊ธฐ์ ์ต์ฐฌ์์ ์ ์์ค์ ํฅ๋ง๊ณผ ๋ฌธ๋จ์ ๋ณ์ฒ, ๊ต์ฒด๊ณผ์ ์ ๋ชธ์ ๊ฒฝํํ ์๊ฐ๋ผ๊ณ ํ ์ ์๋ค.
์ง๊ธ๊น์ง ์ต์ฐฌ์ ์ฐ๊ตฌ์ ์ฃผ๋ ํ๋ฆ์ ์น์ผ์ฑ๊ณผ ํต์์ฑ์ ์ด๋ถ๋ฒ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ผ๋ก ํ๊ฐํ๋ ๊ฒ์ด์๋ค. ์ต์ฐฌ์์ ์น์ผ๋จ์ฒด ์ผ์งํ์ ์ด๋ฌด์๋ ์๋ฒ์ง๊ฐ ์๋ค๋ ๊ฐ์ธ์ฌ์ ์ธ ์ธก๋ฉด๊ณผ ๊ฒฐ๋ถ๋์ด ๋ถ์ ์ ์ผ๋ก ํ๊ฐ๋์ด ์จ ๋ฐ ์๋ค. ๋ํ ์ํ์ ํต์์ฑ์ ๊ณ ์ ์์ค๋ก์ ํดํ์ด๋ผ๋ ์ ํ๊ฐ๋ฅผ ๋ฐ๊ฒ ๋ ์์ธ์ผ๋ก ์์ฉํ๋ค. ๋์๊ฐ, ์ต์ฐฌ์์ ์ํ์ ์ ๊ธฐ์ ์ผ๋ก ์ฐ๊ฒฐํ๋ฉฐ ์ด์ฒด์ ์ธ ์ธก๋ฉด์์ ๋ฌธํ์ธ๊ณ๋ฅผ ์ดํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ๋ถ์กฑํ๋ค. ํ์ง๋ง ์ต์ฐฌ์์ ์์ฐํ ์ด์ธ์ง, ์ดํด์กฐ ๋ค๋ฅผ ์ด์ด ์ ์์ค ๊ฐ์ฒ์ ์ ๊ตฌ์ ์ธ ์ญํ ์ ํ ์๊ฐ์ด๋ค. ์ด๋ฌํ ์ฐ๊ตฌ์ ํ๊ณ๋ค์ ๊ทน๋ณตํ๊ธฐ ์ํด ๋ณธ ๋
ผ๋ฌธ์ ์ต์ฐฌ์์ ๋ฌธํ ์ธ๊ณ๋ฅผ ๋ณด๋ค ์ ๊ธฐ์ ์ผ๋ก ์ฌ์กฐ๋ช
ํ๊ณ ์ ํ๋ค.
์ฐ์ 2์ฅ์์๋ ์ต์ฐฌ์ ์ฐ๊ตฌ์์ ๊ท๋ช
๋์ง ๋ชปํ๋ ์ต์ฐฌ์์ ์์ ์ ๋ฌธํํ๋์ ๋ฐํ๋ค. ์ต์ฐฌ์์ ํ์ ์ ๋ํด์๋ ์ถฉ๋ถํ ๋ฐํ์ ธ ์์ง ๋ชปํ ์ํ์ด์ง๋ง ๊ทธ๊ฐ ์ฐ๊ตฌ์์ ์ํด ๋ฌด๋นํ์ ์ผ๋ก ์ธ์ฉ๋์๋ค. ์ด์ ์ต์ฐฌ์์ ์์ ๋ฅผ ๋ณต์ํ์ฌ ๊ทธ์ ๊ต์ก๊ณผ์ ์ ์ง์ผ๋ณด ๋ถ์ ์ค๋ช
ํ๊ณ , ์๋ฒ์ง ์ต์๋
๊ณผ์ ๊ด๊ณ์ ๋ํ ์๋ก์ด ํด์์ ์๋ํ๋ค. ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ๊ทธ๊ฐ ๋ฐฉ์นํด๋์๋ ์ํ๊ณผ ์๋ก ๋ฐ๊ฒฌ๋ ์ํ ๋ฑ์ ์์ฐ๋ฅด๋ ์ฒด๊ณ์ ์ธ ์ํ์ฐ๋ณด๋ฅผ ๋ง๋ค๊ณ ์ ํ๋ค.
3์ฅ์ 1910๋
๋์ ๋ฐํํ ์์ค๊ณผ ์ ๋ฌธ๊ณ, ๋ฐ๋์๋ก ์ ๊ธฐ์๋ก ์์ผ๋ฉด์ ๋ฐํํ ๊ธฐํ๋ฌธ์ ๊ฐ์ด ์ดํด๋ด์ผ๋ก์จ ์ต์ฐฌ์ ์ด๊ธฐ์ ๋ฌธํ ํน์ง์ ์ดํด๋ณธ๋ค. ์ต์ฐฌ์์ ์ฒ๋
์ ์ถ์์์์ ๋จ๋ค๋ฅธ ๊ณต๊ฐ์ ๊ฐ๊ฐ์ ์ ๋ณด์์ผ๋ฉฐ ์ดํ ๊ธฐ์๋ก ์ฌ์งํ๋ ์ค ๋ง์ ๋ช
์น๊ณ ์ ์ ์ฌํํ๋ฉด์ ๊ธฐํ๋ฌธ์ ์ด ๋ฐ ์๋ค. ์ด ๊ณผ์ ์์ ์กฐ์ ์ ๋ช
์น์ง๋ ๊ธ์๊ฐ์ฐ์ ์ฌํ์ง๊ฐ ์์ค์ ๋ฌด๋๋ก ์ ๊ทน์ ์ผ๋ก ์ฌํ๋์๋ค. ์์ปจ๋ ๊ธ๊ฐ๋ฌธ, ๋ฅ๋ผ๋๊ฐ ์์ผ๋ฉฐ ์ง๋ช
์ผ๋ก ์์ค ์ ๋ชฉ์ ๋ช
๋ช
ํ๊ธฐ๋ ํ๋ค. ํฅ๋ฏธ๋ก์ด ๊ฒ์ ์ด๋ฌํ ํน์ ๊ณต๊ฐ์ ํตํด ์ต์ฐฌ์์ ์์ ์ ๊ฐ์น๊ด์ ๋ด์ธ์ฐ๊ณ ์์๋ค๋ ์ ์ด๋ค. ์ต์ฐฌ์์ ํ์ ์๋งค์ ์๋ฆฌ๋ฅผ ๊ฐ์กฐํ๋ฉฐ, ํนํ ํผ์ธ๊ด๊ณ ์์์๋ ๋ถ๋ถ๊ฐ์ ์ ์๋ฅผ ๊ฐ์กฐํ๊ณ ์์์ ๋ถ์ํ๋ค.
4์ฅ์ 1920๋
๋์ ๋ฐํ๋ ์์ค๊ณผ ์์ธ์ ์ ์ง์ค์ ์ผ๋ก ๋ถ์ํ๋ค. 1920๋
๋์ ์์ค์์ ์ต์ฐฌ์์ ํด์ธ ๊ณต๊ฐ-๋ง์ฃผ๋ฅผ ์ฃผ์ํ ๋ฌด๋๋ก ์ค์ ํ์์ผ๋ฉฐ ๋ง์ฃผ์ ๋ช
๋ฌผ-๋ง์ ์ ๊ธ์ ์ ์ผ๋ก ๋ถ๊ฐํ๋ค. ๋ฐ๋๋ก ์ต์ฐฌ์์ด ๋ถ๋จํ ํด์ธ๊ณต๊ฐ์ ๋ชจ์ํ์๋ค๋ ๊ฒ์ ๋น์ ์กฐ์ ์์ ์์ฃผํ ์ ์์์ ์๋ฌต์ ์ผ๋ก ๋ณด์ฌ์ค๋ค. ๊ทธ๋ผ์๋ ๋ถ๊ตฌํ๊ณ , ์ด ์๊ธฐ ์ต์ฐฌ์์ ํ์ค์ ์ฃผ์์ ์ ๋๊ณ ์ค์กด ์ธ๋ฌผ, ์ ๊ธฐ๋ฌผ์ ๊ด์ฌ์ ํ๋ช
ํ์์ผ๋ฉฐ ์ฌ๋ฌ ํธ์ ์ ๊ธฐ๋ฌผ์ ์ถํํ๋ค.
์ง๊ธ๊น์ง ๋จํธ์ ์ผ๋ก ๋
ผ์๋์ด ์๋ ์ต์ฐฌ์ ๋ฌธํ์ธ๊ณ๋ฅผ ์๋กญ๊ฒ ์กฐ๋ช
ํ๊ณ , ์ต์ฐฌ์์ ๋ํ ์ ๊ทน์ ์ธ ์ฌํ๊ฐ์ ๊ณ๊ธฐ๋ฅผ ๋ง๋ จํ๊ณ ์ ํ๋ค. ์ด๋ฌํ ์์
์ ํตํด ์ต์ฐฌ์์ ๋ฌธํ์ธ๊ณ์ ๋ํ ๋ณด๋ค ํ๋ถํ ์ดํด์ ์ด์์ด ๋ง๋ จ๋๊ธฐ๋ฅผ ๊ธฐ๋ํ๋ค.1. ์ ๋ก 1
1.1. ๋ฌธ์ ์ ๊ธฐ 1
1.2. ์ฐ๊ตฌ์ฌ ๋ฐ ์ฐ๊ตฌ์๊ฐ 2
2. ์ต์ฐฌ์์ ์์ ์ ๋ฌธํํ๋ 10
2.1. ์ต์ฐฌ์๊ณผ ์ต์๋
์ ๊ฑฐ๋ฆฌ 10
2.2. ์ ๋ฌธ ๊ธฐ์์ฒดํ๊ณผ ์์ค๊ฐ๋ก์์ ํ๋ 15
3. 1910๋
๋ ์์ค์ ๋ํ๋ ์ฌํ์ ์๋ฏธ 23
3.1. ๊ธฐํ๋ฌธ ์ฐ๊ธฐ์ ์์ค ์ฐ๊ธฐ์ ๊ด๋ จ์ฑ 23
3.2. ์ ํต์ ์๋ฆฌ์ ๊ฐ์ธ์ ์์ ์ ๋ชจ์๊ณผ ํํ 34
4. 1920๋
๋ ๋นํ๊ตฌ์ ๊ธ์ฐ๊ธฐ์ ์ ํ 45
4.1. ๋ง์ฃผ ๊ณต๊ฐ์ ๋ํ ๊ด์ฌ๊ณผ ๋ง์ ์ ํ์ฑํ 45
4.2. ์ค์กด ์ธ๋ฌผ์ ๋ค๋ฃจ๋ ์๋ก์ด ๊ธ์ฐ๊ธฐ 56
5. ๊ฒฐ๋ก 67
์ฐธ๊ณ ๋ฌธํ 69
๋ถ๋ก1 75
๋ถ๋ก2 82
Abstract 88Maste
Restoration of cardiac function using ex vivo expanded endothelial progenitor cells and mesenchymal stem cells derived from human umbilical cord blood in rats with acute myocardial infarction
Dept. of Medical Science/๋ฐ์ฌ[ํ๊ธ]
๊ธ์ฑ ์ฌ๊ทผ๊ฒฝ์์ฆ์ ์ฌํ๊ด๊ณ ์งํ์์ ๊ฐ์ฅ ์ค์ํ ์งํ์ ํ๋์ด๋ค. ์ต๊ทผ ๊ทธ ์ ๋ณ๋ฅ ๊ณผ ๋ฐ๋ณ๋ฅ ์ด ์ฆ๊ฐํ๊ณ ์์ผ๋ฉฐ ์ฌ๊ทผ๊ฒฝ์์ ์น๋ฃํ๊ธฐ ์ํด ๋ง์ ์น๋ฃ๋ฒ์ด ์๊ฐ๋๊ณ ์๋ค. ์ต๊ทผ์๋ ์ฌ๊ทผ๊ฒฝ์์ฆ์ ์ค๊ธฐ์ธํฌ๋ฅผ ์ด์ฉํ ์๋ก์ด ์๋๊ฐ ์ด๋ฃจ์ด์ง๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ์ ์ธ๊ณ์ ์ผ๋ก ๋ค๋ฅธ ์ฅ๊ธฐ์ ๋นํด ๋น๊ต์ ๋ง์ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ์งํ๋๊ณ ์์ผ๋ ์์์ ์ฉ์ ์๊ฐ๊ณจ์์ธํฌ๋ ์๊ฐ๋จํต๊ตฌ์ธํฌ๋ฅผ ์ด์ํ๋ ์ ๋์ ๊ตญํ๋๊ณ ์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ์์ง ๋์ข
์ธํฌ์ด์์ ๋ฐ๋ฅด๋ ๋ฉด์ญ๊ฑฐ๋ถ๋ฐ์์ด ํด๊ฒฐ๋์ง ์์๊ณ ๊ณจ์์ ์กด์ฌํ๋ ๊ณจ์์ธํฌ๋ฅผ ์ฌ์ฅ์กฐ์ง์ ์ด์ํ์์ ๋ ์ด๋ป๊ฒ ์ฌ์ฅ๊ธฐ๋ฅ ์ฌ์์ ๊ธฐ์ฌํ๋์ง์ ๋ํ ๊ธฐ์ ์ด ์ ํํ ๊ท๋ช
๋์ง ์์ ์ํ์ด๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ์์์ ์ฉ ํ์ฐ์๋ ํ๊ณ๊ฐ ์๊ณ ์์ง๋ ๋ง์ ๋๋ฌผ ์คํ์ ํตํ ์ ํ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ํ์ํ ์ํ์ด๋ค. ์ฌ๊ทผ๊ฒฝ์ ํ ์ฌ ๊ธฐ๋ฅ ํ๋ณต์๋ ํ๋ฅ๊ฐ์ ์ด ์ค์ํ๋ฐ ์ด๋ฅผ ์ํด ๋จ์ํ ๊ณจ์์ธํฌ ์ด์๋ณด๋ค๋ ๊ณจ์์ธํฌ ์ ๋ ๋ดํผ๊ธฐ์์ธํฌ์ ์ค๊ฐ์ฝ์ค๊ธฐ์ธํฌ๋ก ๋ถํ์์ผ ์ด์ํ๋ ๊ฒ์ด ์ข๋ ํจ๊ณผ์ ์ผ ๊ฒ์ด๋ผ๋ ๊ฐ์ค๋ก ์ฌ์ฅ ์ธํฌ์น๋ฃ๋ถ์ผ์ ์๋ก์ด ์ธํฌ ์์ผ๋ก ์์ฌ ๋๊ณ ์๋ค.๋ํ ๋ง์ ํ์๋ฅผ ๋์์ผ๋ก ํ ์ธํฌ์น๋ฃ์ ๋ผ ํจ์ ๋์ข
์ธํฌ ์ด์์ด ๊ฐ๋ฅํด์ผ ํ๋ค. ์ ๋ํ์ ์ด๋ฏธ ๊ณจ์ ์ด์์์ ํ์ธ๋ ๋ฐ ์๋ฏ์ด ๋ค๋ฅธ ์ธํฌ ๊ณต๊ธ์์ ๋นํด ๋ฏธ์ฑ์์ ์ค๊ธฐ์ธํฌ๊ฐ ํ๋ถํจ๊ณผ ๋์์ ์ฌ๋ฌ ๊ฐ์ง ์ธํฌ๋ก ๋ถํํ ์ ์๋ ๋ฅ๋ ฅ๊ณผ ๋ฉด์ญ๊ฑฐ๋ถ๋ฐ์์ด ๊ณจ์์ธํฌ์ ๋นํด ๋ฎ๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ์น๋ฃ ์ธํฌ ๊ณต๊ธ์์ผ๋ก ์ ๋ํ์ ์ด์ฉํ์ฌ 1) ์ ๋ํ๋ก๋ถํฐ ๋ดํผ๊ธฐ์์ธํฌ์ ์ค๊ฐ์ฝ์ค๊ธฐ์ธํฌ๋ฅผ ๋ถ๋ฆฌ ๋ฐฐ์ํ๋ ๊ธฐ์ ์ ํ๋ฆฝํ์๊ณ 2) ์ด๋ค ์ธํฌ๋ฅผ ์ ์ธํฌ๋ถ์๋ฒ, ๋ฉด์ญ์กฐ์งํํ์ผ์๋ฒ ๋ฑ์ ์ด์ฉํ์ฌ ๊ทธ ํน์ฑ์ ํ์ธํ์๋ค. 3) ๊ทธ ๋ค์ ๋จ๊ณ๋ก ๋ถ๋ฆฌํ ๋ดํผ๊ธฐ์์ธํฌ์ ์ค๊ฐ์ฝ์ค๊ธฐ์ธํฌ๋ฅผ ๊ธ์ฑ์ฌ๊ทผ๊ฒฝ์ SD ์ฅ ๋ชจ๋ธ์ ์ด์ํ์ฌ ์ด์ ํ 4์ฃผ ๋ค์ ์ฌ ์ด์ํ ๊ฒ์ฌ๋ก ๊ธฐ๋ฅ์ ํ๊ฐํ ํ ํฌ์ํ์ฌ ๋ฉด์ญ์กฐ์งํํ๊ฒ์ฌ๋ก ์ฌ ์กฐ์ง ๊ธฐ๋ฅ๊ฐ์ ์ ํ๊ฐํ์๋ค. ์ฐ๊ตฌ ๊ตฌ์ฑ์ ๊ฐ ์ธํฌ์ ์กฐ์ง ์ฌ์์ ๋ณด๊ธฐ ์ํด ํ๊ด์ฌ์์ ๊ด์ฌํ๋ ๋ดํผ๊ธฐ์์ธํฌ ์ด์๊ตฐ, ์ฌ๊ทผ์ ์ฌ์์ ๊ธฐ๋ํ๋ ์ค๊ฐ์ฝ์ค๊ธฐ์ธํฌ ์ด์๊ตฐ๊ณผ ๋ ์ธํฌ์ ์์นํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ธฐ๋ํ๊ธฐ ์ํด ๋ ์ธํฌ๋ฅผ ๋์์ ์ด์ํ ํผํฉ ์ด์๊ตฐ์ผ๋ก ๋๋์ด ์คํ์ ์งํํ์๋ค.๋ณธ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ ์ธ๊ฐ ์ ๋ํ ์ ๋์ ๋ดํผ๊ธฐ์์ธํฌ์ ์ค๊ฐ์ฝ์ค๊ธฐ์ธํฌ๋ ๊ธ์ฑ์ฌ๊ทผ๊ฒฝ์ ์ฅ ๋ชจ๋ธ์์ ์ฌ๊ทผ๊ฒฝ์๋ถ์ ๋๊ป๋ฅผ ์ฆ๋ ์ํค๊ณ ์ฌ๊ทผ๊ฒฝ์์ ๋ฉด์ ๊ณผ ์ข์ฌ์ค์ ์์ถ๊ธฐ๋ง ์ฉ์ ์ ์ค์ฌ์ฃผ๊ณ ๋ฐ์ถ ๊ณ์๊ฐ ์ฆ๊ฐ๋ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ ์ ์์๋ค. ๋ํ ์ ๋ํ ์ ๋์ ๋ดํผ๊ธฐ์์ธํฌ์ ์ค๊ฐ์ฝ์ค๊ธฐ์ธํฌ๋ ๋ชจ๋ ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํด ์ฌ๊ทผ๊ฒฝ์์ ์น๋ฃ์ ๊ธฐ์ฌํ๊ณ ์ฌ์ฅ ๊ธฐ๋ฅ์ ๊ฐ์ ํด์ค ์ ์์์ ํ์ธํ์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ๋ ์ธํฌ๋ฅผ ๋์์ ์ด์ํ ๊ตฐ์ด ๋ดํผ๊ธฐ์์ธํฌ๋ ์ค๊ฐ์ฝ์ค๊ธฐ์ธํฌ ๋ง์ ๋จ๋
์ผ๋ก ์ด์ํ ๊ฒฝ์ฐ๋ณด๋ค ์ฌ๊ทผ๊ธฐ๋ฅ์ ์์นํจ๊ณผ๊ฐ ์ ์๋๋ฐ ์ด๋ ๋ ์ธํฌ ์ด์์ ์์นํจ๊ณผ๋ณด๋ค๋ ์ธํฌ๋๋๋ฅผ ๋ง์ถ๊ธฐ ์ํด ๋จ๋
ํฌ์ฌ๊ตฐ์ ๋นํด ์ธํฌ์๋ฅผ ๋ฐ์ฉ ์ด์ํ์๋ ์ , ๋๋ ์์นํจ๊ณผ๋ณด๋ค๋ ๋ ์ธํฌ ์ฌ์ด์ ๊ฒฝ์์ ๋์ ์ํ ๊ฑฐ๋ถ๋ฐ์ํจ๊ณผ ๋ฑ์ ์์ธกํ ์ ์์ผ๋ ์ด์ ๋ํ ํ์ธ ์คํ์ ์งํํ์ง ์์๋ค. ๋ค๋ง ์ ๋ํ ์ ๋์ ๋ดํผ๊ธฐ์์ธํฌ๊ฐ ๋ค๋ฅธ ๊ตฐ์ ๋นํด ๊ฐ์ฅ ํจ๊ณผ์ ์ธ ์น๋ฃ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ๋ํ๋ธ ๊ฒ์ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ์ ํํ ๋๋ฌผ๋ชจ๋ธ์ด ๊ธ์ฑ ์ฌ๊ทผ๊ฒฝ์ ๋ชจ๋ธ์ด์๊ธฐ ๋๋ฌธ์ผ๋ก ํ๋ฅ๊ฐ์ ์ด ๊ธฐ๋ฅํ๋ณต์ ๊ฐ์ฅ ์ค์ํ ์ญํ ์ ํ์ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๊ฐํ์๋ค. ๋ํ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ ์ฌ๋์ ์ ๋ํ์ ๋ ์ธํฌ๋ฅผ ์ฅ์ ์ด์ํ ์ด์ข
๊ฐ ์ด์์ด์์ผ๋ ๋ฉด์ญ์ต์ ์ ๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ง ์์์์๋ ๋ถ๊ตฌํ๊ณ ๋ฉด์ญ๊ฑฐ๋ถ๋ฐ์์ด ๊ด์ฐฐ๋์ง ์์์ ํ์ธํ ์ ์์๋ค.๊ฒฐ๋ก ์ ์ผ๋ก ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ์ ๋ํ ์ ๋ ๋ดํผ๊ธฐ์์ธํฌ๋ ์ค๊ฐ์ฝ์ค๊ธฐ์ธํฌ ์ด์์ ๋ฉด์ญ๊ฑฐ๋ถ๋ฐ์์ ๋ณด์ด์ง ์์์ผ๋ฉฐ, ์ฌ ๊ธฐ๋ฅ ์ฌ์์ ์ฐ์ํ ํจ๊ณผ๊ฐ ์์์ ๋ณด์ฌ์ฃผ์๋ค. ํนํ ์ฒด์ธ ์ฆํญํ ๋ดํผ๊ธฐ์ ์ธํฌ์ ์ด์์ผ๋ก ๋ฐ๋ฌ๋ ๋ชจ์ธํ๊ด ์์ฑ์ด ๊ธ์ฑ ์ฌ๊ทผ๊ฒฝ์ ์ค์์ ๊ฐ์ฅ ํจ๊ณผ์ ์ธ ์ธํฌ์น๋ฃ๋ฒ์์ ํ์ธํ์๋ค.
[์๋ฌธ]
Background: Many researchers have made lots of attempts, in order to restore the heart function from cardiac infarction. Recently, a kind of novel cell therapy has become an acceptable source of treatment methods for cardiac functional disorder and endothelial progenitor cells (EPC) and mesenchymal stem cells (MSC) especially represent a promising tool for new clinical concepts in cellular therapy. Human umbilical cord blood (hUCB) not only contains abundant immature stem/progenitor cells more than other adult stem cell source, but also have a remarkable capacity of differentiating into many types of tissue cells. To examine whether hUCB derived EPC and MSC restore the cardiac function in acute myocardial infarction (AMI), we isolated, expanded and characterized the hUCB derived EPC and MSC in vitro and performed in vivo animal experiments given cell transplantation.Methods: The hUCB was collected in sterile blood bags containing CPDA-1 from normal full-term deliveries. Mononuclear cells (MNC) were isolated using Ficoll-Hypaque, and plated MNC on the fibronectin coated six well culture dishes. Among adherent cells we isolated and ex vivo expanded the EPC and MSC. The characterization of cells was performed by flow cytometric analysis and immunohistochemical stains. hUCB derived EPC, MSC and combination of both (1:1) in endothelial cell basal medium were directly intramyocardially transplanted into the scar of a 1 hour old myocardial infarction in Sprague-Dawley rat at 5x106 cells/50 µl each group. The same volume of cell free medium was used as control. After 4 weeks, their effect on left ventricular (LV) ejection fraction and other related parameters were assessed using echocardiography. Then all the rats were sacrificed for histological and immunochemical examinations 4 weeks post AMI, including measurement of capillary density, infarct area and wall thickness.Results: Transplantation of hUCB derived EPC and MSC can increase the thickness of the infarct area and LV stroke volume, decrease LV end-systolic volume, and improve LV ejection fraction in a rat model of AMI. Interestingly, we found that hUCB derived EPC and MSC all can significantly contribute to the repair of infarcted myocardium and improve the heart function compared to control group. The transplantation of ex vivo expanded EPC to the infarcted myocardium showed significantly better recovery compared to the MSC or EPC/MSC combined cell injection group. In addition, the effect of MSC injection is better than the EPC/MSC combined cell injection group.Conclusion: We have isolated EPC and MSC from hUCB and successfully transplanted in animal experiments. Our results demonstrate that the ex vivo expanded EPC recruitment and blood supply might play a critical roles in the early restoration of heart function in AMI of rat.prohibitio
Korean Construction Company Advancing into the Chinese Market -Analyzing the cause of decreasing Investment-
ํ์๋
ผ๋ฌธ (์์ฌ)-- ์์ธ๋ํ๊ต ๋ํ์ : ๊ฑด์ถํ๊ณผ, 2014. 2. ์ดํ์.ํ๊ตญ๊ธฐ์
๋ค์ ๊ตญ๋ด ๊ฒฝ์ ์ฑ์ฅ์ ๋ํ์ ์น์ดํ ๊ฒฝ์ ๋ฑ์ ๊ฒฝ์ ํ๊ฒฝ ๋ณํ์ ์ง๋ฉดํ๋ฉด์ ์ด์ ๋์ฒํ๊ธฐ ์ํ ํ๋์ ๋ฐฉ์์ผ๋ก ํด์ธ์ ๋ํ ํฌ์์ ์ง์ถ์ ๋ชจ์ํ๊ธฐ ์์ํ์๋ค. ๊ฑด์ค์
๋ํ ๋๋ด์ ์ผ๋ก ๋ฐ์ฃผ๋ ๊ฐ์, ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ์ด์ ๋ฐ๋ฅธ ์์ฃผ๊ฒฝ์ ๊ณผ์ด ๋ฐ ์์ต์ฑ ๊ฐ์ ๋ฑ์ ์ด๋ ค์ด ํ๊ฒฝ์ ๋ง์ดํ์ฌ ํด์ธ์์ฅ ๊ฐ์ฒ์ ๊ฐํํ์๋ค. ๊ทธ ์ค ์ง์ ํ์ ์ผ๋ก ์กฐ๊ฑด์ด ์ ์ผ ์ ๋ฆฌํ ๋๋ผ์ธ ์ค๊ตญ์ ๋ํ ํฌ์์ ์ง์ถ์ ์์ํ์ฌ ๋ฏธ๊ตญ์ ๋ฅ๊ฐํ๋ ํ๊ตญ์ ์ 1์ ํฌ์๋์๊ตญ์ผ๋ก ๋ถ์ํ๊ณ ํฌ์ ์ด๊ธฐ์ ๋นํด 15๋ฐฐ์ ๋ ์ฆ๊ฐํ์ฌ 63์ต ๋ฌ๋ฌ์ ์ต๊ณ ์ ์์ค์ ๊ธฐ๋กํ๊ธฐ๋ ํ์๋ค.
๊ทธ๋ฌ๋ ์ค๊ตญ ๊ฑด์ค์์ฅ์์์ ํธํฉ๊ธฐ๋ฅผ ๋๋ ธ๋ ํ๊ตญ์ ์ต๊ทผ ๋ค์ด ์ค๊ตญ ๊ฑด์ค์์ฅ์ ๋ํ ํฌ์์ ์ง์ถ์ ์ถ์ธ๊ฐ ์ ์ ์ค์ด๋ค๊ณ ์์ผ๋ฉฐ ์ฌ์ง์ด ๊ธฐ์กด ์ง์ถํ๋ ๊ธฐ์
๋ค๋ง์ ์ฒ ์ ํ๊ฑฐ๋ ํ์ง ์ฌ๋ฌด์ค๋ง ๋จ๊ฒจ ๋์ ์ํ์ด๋ค.
์ค๊ตญ์ ๋งค๋
7%~8%์ ๊ฒฝ์ ์ฑ์ฅ๋ฅ ์ ์ ์งํ๋ฉด์ ๊ฑด์ค์์ฅ์ ๋ํ ํฌ์๋ ํ๋ํ๊ณ ์๋ ์ํฉ์ด๋ฉฐ 2020๋
์ด์ ์ ์ธ๊ณ1์ ๊ฑด์ค์์ฅ์ผ๋ก ๋ ๊ฒ์ด๋ผ๋ ์
๊ณ์ ์ ๋ง์ด๋ค. ์ด๋ฐ ์ํฉ์์ ํ๊ตญ ๊ฑด์ค๊ธฐ์
์ ์ค๊ตญ ๊ฑด์ค ์์ฅ ํฌ์ ๊ฐ์ ํ์์ ๋ํ ์ง๋จ์ด ํ์ํ๊ณ ์ฒด๊ณ์ ์ธ ๋ถ์๊ณผ ์ ์ ํ ๋์์ฑ
์ด ์๋ฆฝ๋์ด์ผ ํ๋ค.
๋ฐ๋ผ์ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ํ๊ตญ ๊ฑด์ค๊ธฐ์
์ ๅฐ ์ค๊ตญ ํฌ์ ๊ฐ์์ ์์ธ์ ๋ถ์ํ๊ณ ์ด์ ๋ฐ๋ผ ํ๊ตญ ๊ฑด์ค๊ธฐ์
์ ์ค๊ตญ ์ง์ถ์ ์์ด์์ ๋ฐฉํฅ์ฑ๊ณผ ๋์๋ฐฉ์์ ์ ์ํ๋๋ฐ ๋ชฉ์ ์ ๋๊ณ ์งํํ๊ณ ์ ํ๋ค.
๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ํด์ธํฌ์ ๊ด๋ จ ์ด๋ก ๊ณผ ํฌ์๊ฒฐ์ ์์ธ์ ๊ด๋ จ๋ ์ ํ์ฐ๊ตฌ ๋ฐ ๋ฌธํ๊ณผ ํด์ธ๊ฑด์ค์
์ด ๊ฐ์ง๊ณ ์๋ ํน์ฑ์ ํ ๋๋ก ํฌ์ ๊ฐ์์ ์ํฅ์ ์ฃผ๋ ์์ธ์ ๋์ถํ์ฌ ์ฐ๊ตฌ๋ชจํ์ ์ค๊ณํ ๋ค์ ๊ฐ์ค์ ์ธ์ ๋ค. ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ์์ง๋ ์ค๋ฌธ๋ฐ์ดํฐ๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ์ ํํ๊ท๋ถ์๊ณผ AHP๊ธฐ๋ฒ์ ์ค์ํ์ฌ ์ค๊ตญ์์ฅ ์ง์ถ์ ์์ด์ ์ํฅ์ ์ฃผ๋ ์์ธ๋ณ ์ค์๋๋ฅผ ๋์ถํ์๋ค.
๋ถ์๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ๋ณด๋ฉด ๋ค์๊ณผ ๊ฐ๋ค.
์ฒซ์งธ, ๊ธฐ์
ํน์ ์์ธ์ ์ํ ๊ฒฝ์. ๊ด๋ฆฌ๋ฅ๋ ฅ, ๊ธฐ์ ๊ฒฝ์๋ ฅ, ๊ฐ๊ฒฉ๊ฒฝ์๋ ฅ๊ณผ ์ฌ๋ฌด๋ฅ๋ ฅ์ ๋ชจ๋ ์ค๊ตญ์์ฅ ํฌ์ ๊ฐ์์ ์ํฅ์ ์ฃผ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ถ์๋์๋ค.
๋์งธ, ์ด๋ก ์ ๊ธฐ๋ฐ์ด ์์ด ์ค์ ๋ ๊ฐ์ค5๋ ์ฐ๊ตฌ๋ชจํ์ ์ ์์ฑ์ ๊ฐ์ง๊ณ ์์ง ์์ ๊ธฐ๊ฐ์ด ๋์์ง๋ง ํด์ธํฌ์์ ์ํฅ์ ์ฃผ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค.
์
์งธ, ์์ฅ ํ๊ฒฝ์์ธ์ ๋ํ ์ฆ ์์ฅ์ฑ์ฅ ๊ฐ๋ฅ์ฑ, ์๊ฐ, ์ ์น. ์ ์ฑ
์ ๊ท์ ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ํ๋ก์ ํธ ๋ณ์๋ ๋ชจ๋ ํฌ์ ๊ฐ์์ ์์ธ์ด ๋๊ณ ์ํฅ์ ์ฃผ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ถ์๋์๋ค.
๋ท์งธ, ์ฑํ๋ ๊ฐ์ค ์์ธ๋ค์ ์ค์๋๋ฅผ ๋ถ์ํจ์ผ๋ก์จ ์ค๊ตญ ๊ฑด์ค์์ฅ ํฌ์ ๊ฐ์์ ์์ด์ ๊ฐ๊ฒฉ ๊ฒฝ์๋ ฅ, ์๊ฐ, ์ ์น. ์ ์ฑ
์ ๊ท์ ๋ณ์๊ฐ ๋น๊ต์ ๋์ ์ค์๋๋ฅผ ๊ฐ์ง๊ณ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค.
๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์ ๋ง์ง๋ง์๋ ์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ํ ํ๊ตญ ๊ธฐ์
์ ๅฐ ์ค๊ตญ๊ฑด์ค์์ฅ ์ง์ถ์ ์์ด์์ ๋ฐฉํฅ์ฑ๊ณผ ๋์๋ฐฉ์์ ์ ์ํ๊ณ ์ฐ๊ตฌ์ ํ๊ณ์ ๋ฐ ํฅํ ์ฐ๊ตฌ๋ฐฉํฅ์ ์ ์ํ์๋ค.์ 1 ์ฅ ์ ๋ก 1
1.1 ์ฐ๊ตฌ์ ๋ฐฐ๊ฒฝ ๋ฐ ๋ฌธ์ ์ 1
1.2 ์ฐ๊ตฌ์ ๋ฒ์ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ 4
์ 2 ์ฅ ์ ํ์ฐ๊ตฌ 6
2.1 ๊ธฐ์
์ ํด์ธํฌ์์ ๊ดํ ์ด๋ก ๋ฐ ๋ฌธํ๊ณ ์ฐฐ 6
2.1.1 ํด์ธ์ง์ ํฌ์ ์ด๋ก ๋ฐ ๊ฒฐ์ ์์ธ 6
2.1.2 ํด์ธํฌ์ ์ฒ ์์ ๊ดํ ๊ฒฐ์ ์์ธ 12
2.2 ์ค๊ตญ๊ฑด์ค์์ฅ์ ํน์ฑ ๋ฐ ๋ฌธํ๊ณ ์ฐฐ 14
2.2.1 ๊ฑด์ค์
์ ํน์ฑ 14
2.2.2 ์ค๊ตญ ๊ฑด์ค์์ฅ์ ํน์ฑ ๋ฐ ํํฉ 15
2.2.3 ์ค๊ตญ๊ฑด์ค์์ฅ ์ง์ถ์ ๋ํ ์ ํ์ฐ๊ตฌ 19
์ 3 ์ฅ ํฌ์ ๊ฐ์์ ์ํฅ์์ธ ๋์ถ ๋ฐ ๋ถ์ 22
3.1 ์ฐ๊ตฌ์ ๋ชจํ ์ค๊ณ 22
3.1.1 ํฌ์ ๊ฐ์์ ์ํฅ์์ธ ๋์ถ 22
3.1.2 ์์ธ๋ณ ๊ฐ์ค ์ค์ 24
3.2 ๊ฐ์ค์ ๋ํ ๊ฒ์ 29
3.2.1 ํ๋ณธ์ ํน์ฑ ๋ฐ ๋ถ์๋ฐฉ๋ฒ 29
3.2.2 ์ ๋ขฐ๋ ๋ถ์ 31
3.2.3 ์ฐ๊ตฌ๊ฐ์ค์ ๊ฒ์ 33
์ 4 ์ฅ ์ค๊ตญ๊ฑด์ค์์ฅ ์ง์ถ๋ฐฉ์ 38
4.1 ์์ธ๋ณ ์ค์๋ ๋์ถ 38
4.2 ์ง์ถ ๋์๋ฐฉ์ 41
์ 5 ์ฅ ๊ฒฐ ๋ก 48
5.1 ์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ์ ์์ฝ 48
5.2 ํ๊ณ์ ๋ฐ ํฅํ ์ฐ๊ตฌ๋ฐฉํฅ 50
์ฐธ ๊ณ ๋ฌธ ํ 52
59
66
67
ABSTRACT 68Maste
Neural stem cells modified by a hypoxia-inducible VEGF gene expression system improve cell viability under hypoxic conditions and spinal cord injury
STUDY DESIGN: An in vitro neural hypoxia model and rat spinal cord injury (SCI) model were used to assess the regulation of therapeutic vascular endothelial growth factor (VEGF) gene expression in mouse neural stem cells (mNSCs) by the EPO (erythropoietin) enhancer or RTP801 promoter.
OBJECTIVE: To increase VEGF gene expression in mNSCs under hypoxic conditions in SCI lesions but avoid unwanted overexpression of VEGF in normal sites, we developed a hypoxia-inducible gene expression system consisting of the EPO enhancer and RTP801 promoter fused to VEGF or the luciferase gene, then transfected into mNSCs.
SUMMARY OF BACKGROUND DATA: On the basis of the ischemic response in the injured area, poor cell survival at the transplantation site is a consistent problem with NSC transplantation after SCI. Although VEGF directly protects neurons and enhances neurite outgrowth, uncontrolled overexpression of VEGF in uninjured tissue may cause serious adverse effects. To effectively improve NSC survival in ischemic sites after transplantation, we evaluated mNSCs modified by a hypoxia-inducible VEGF gene expression system in an SCI model.
METHODS: Hypoxia-inducible luciferase or VEGF plasmids were constructed using the EPO enhancer or RTP801 promoter. The effect of these systems on targeted gene expression and cell viability was evaluated in mNSCs in both hypoxic in vitro injury and a rat SCI model in vivo.
RESULTS: The gene expression system containing the EPO enhancer or RTP801 promoter significantly increased the expression of the luciferase reporter gene and therapeutic VEGF gene under hypoxic conditions. The Epo-SV-VEGF plasmid transfection group had significantly fewer apoptotic cells in vitro. This system also augmented cell viability in the in vivo SCI model.
CONCLUSION: These results strongly suggest the potential utility of mNSCs modified by a hypoxia-inducible VEGF gene expression system in the development of effective stem cell transplantation protocols in SCI.ope
Neuroprotective effect of combined hypoxia-induced VEGF and bone marrow-derived mesenchymal stem cell treatment
PURPOSES: To avoid unwanted adverse effects of higher doses of single treatment of stem cells and gene therapy and increase the therapeutic efficacies, we hypothesized the combined therapy with stem cells and gene therapy. This study assessed the neuroprotective effects of combined gene therapy and stem cell treatment under ischemic hypoxia conditions using hypoxia-inducible vascular endothelial growth factor (VEGF) and bone marrow-derived mesenchymal stem cells (BMSC).
METHODS: Experimental groups included the control which was N2A cells transfected with empty vectors, the transfection only group which was N2A cells treated with pEpo-SV-VEGF alone, the BMSC only group which was N2A cells transfected with empty vectors and cocultured with BMSCs, and the combined treatment group which was N2A cells treated with pEpo-SV-VEGF and cocultured with BMSCs. Each group was transfected for 4 h and cultured at 37 degrees C and 5% CO2 for 24 h. Each group was then cultivated under hypoxic conditions (1% O2) for 12 h. Neuroprotective effects were assessed by reverse transcription polymerase chain reaction, annexin V, and cytotoxicity assay.
RESULTS: Neurons exposed to hypoxic conditions exhibited neuronal apoptosis. Compared to single treatments, the combined hypoxia-inducible VEGF and BMSC treatment demonstrated a significant increase in VEGF expression and decreased neuronal apoptosis.
CONCLUSIONS: These results suggest that combined pEpo-SV-VEGF and BMSC treatment is effective in protecting neurons against hypoxic ischemic injury.ope