복합 유산균의 면역 회복에 의한 아토피성 피부염 마우스의 증상 완화

학위논문(박사)--서울대학교 대학원 :농업생명과학대학 농생명공학부,2019. 8. 윤철희.Atopic dermatitis (AD) is a chronic inflammatory skin disease, seen mostly in children causing eczema often together with intense itching. AD can be caused by genetic factors, immune system dysfunction and/or environmental factors in conjunction with the uncontrolled permeability of the skin. AD is caused by excessive T helper (Th) 2 responses, which induce immunoglobulin (Ig)E. Hypersensitivity of Th2 cells to AD is also associated with increased risk of other allergy diseases such as asthma. There are variety of therapies available to relieve AD, including emollients, anti-inflammatory agents and inhibitors. However, excessive use of these therapies causes side effects such as skin thinning, purpura, telangiectasias, drowsiness and edema. Therefore, for a fundamental atopic treatment, a particular strategy to maintain the continuous immune balance seems to be necessary. The use of probiotics could be such strategy for overcoming AD. However, selection of probiotics and their combination are important task when consider AD treatment. Therefore, to overcome AD, it is necessary to understand the exact immune mechanism induced by each probiotic. In the first study, the immunomodulatory capacity of Duolac ATP, a mixed formulation of probiotics, was examined. Results showed that the expression of programmed death-ligand (PD-L)1 was significantly upregulated on dendritic cells (DCs) treated with Duolac ATP. Furthermore, the anti-inflammatory cytokines, interleukin (IL)-10 and transforming growth factor (TGF)-β were both upregulated when BMDCs were treated with Duolac ATP. The percentage of proliferated regulatory T cells (Tregs) was enhanced when CD4+ T cells were co-cultured with Duolac ATP-treated DCs on plates coated with anti-CD3/CD28 antibodies. Intriguingly, IL-10 secretion from CD4+ T cells was also observed. The AD symptoms, histologic scores, and serum IgE levels in spontaneous mutation AD mice (Nc/Nga) were significantly decreased after oral treatment with Duolac ATP. Moreover, the Th1-mediated response in AD-induced mice treated with oral Duolac ATP showed upregulation of IL-2 and IFN- as well as of downstream signaling molecules T-bet, STAT1, and STAT4. Conversely, Duolac ATP suppressed Th2 and Th17 responses in AD-like mice, as evidenced by the downregulation of GATA3, C-maf, IL-4, IL-5, and IL-17. Additionally, Duolac ATP increased the number of Tregs found at Peyer's patches (PP) in AD mice. These results suggest that Duolac ATP modulates DCs to initiate both Th1 and Treg responses in AD mice. In the second study, the mechanism of alleviation of AD by YK4, a probiotic mixture consisting four strains of Lactobacillus and Bifidobacterium, was unveiled through intestinal galectin-9 production and immune cells analysis. The results showed that administration of YK4 in AD mouse alleviates symptoms of AD by regulating Th2-mediated response. YK4 inhibited the expression of skin thymic stromal lymphopoietin and serum IgE to near normal concentration. YK4 administration also resulted in decrease in IL-4 producing CD4+ T cells whereas increased Tregs population in PP and mesenteric lymph node (mLN). Moreover, YK4 induced an increase in interferon-gamma (IFN-producing CD4+ T cells in spleen. Furthermore, the proportion of CD103+ DCs in mLN and spleen was significantly increased in repetitive treatment of skin irritants AD mice administered with YK4 when compared to AD mice. Expression of galectin-9 in the intestine was significantly increased in AD mice administered with YK4. The expression of CD44, a receptor of galectin-9, together with PD-L1 was significantly up regulated on BMDCs when treated with YK4. Furthermore, the anti-inflammatory cytokine, IL-10 was upregulated when BMDCs were treated with YK4. The percentage of proliferated Tregs was enhanced when CD4+ T cells were co-cultured with YK4-treated BMDCs. Galectin-9 appeared to be partially contributed to the proliferation of Tregs. In summary, in the spontaneous mutation mouse model, Duolac ATP regulated IL-10 and TGF-β expression and allowed DCs to become functionally tolerant and potentially induce Treg differentiation. Furthermore, Duolac ATP regulated transcription factors and cytokines to drive naïve T cell differentiation toward Th1 lineages. In the skin irritation mouse model, YK4 induced expression of IL-10 and IL-12 in DCs, which inhibited Th2 responses by inducing Tregs differentiation. Furthermore, YK4 regulated intestinal galectin-9 and CD103+ DCs to drive naïve T cell differentiation toward Th1 and Tregs. Taken together, these results suggest that the probiotic mixture, Duolac ATP and YK4 have therapeutic potential to prevent AD symptoms and may act as an immunomodulator for AD patients.Abstract. I Contents.V List of Figures. IX List of Tables. XII List of Abbreviations. XIII Chapter 1. Review of Literature. 1 1. Atopic dermatitis. 2 1.1. Characteristics and symptoms. 2 1.2. Pathogenesis and immune responses of atopic dermatitis. 3 1.2.1. Pathogenesis. 3 1.2.2. Immune responses. 3 1.3. Animal models for atopic dermatitis. 9 1.4. Therapeutics for atopic dermatitis and their limitation. 11 2. Probiotics. 14 2.1. General characteristics. 14 2.2. Probiotics as intestinal epithelial cell modulators. 14 2.3. Immunological roles of probiotics. 17 2.4. Probiotics in the treatment for atopic dermatitis. 20 3. Galectin-9. 22 3.1. Characteristics and members of galectins. 22 3.2. Immune function of galectin-9. 27 Chapter 2. Dietary probiotic mixture, Duolac ATP reduces the symptoms in mice with atopic dermatitis. 29 1. Introduction. 30 2. Material and Methods. 33 2.1. Animal. 33 2.2. Probiotics. 33 2.3. Generation and culture of BMDCs in vitro. 33 2.4. In vitro CD4+ T cell stimulation. 34 2.5. Mouse AD model. 35 2.6. Histology. 36 2.7. TUNEL assay. 36 2.8. RNA isolation and qPCR. 37 2.9. Western blot. 38 2.10. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). 39 2.11. Phenotypic and functional examination of immune cells by using flow cytometry analysis. 40 2.12. Statistical analysis. 41 3. Results. 42 3.1. Duolac ATP effectively induces regulatory immune responses by BMDCs. 42 3.2. BMDCs treated with Duolac ATP promote proliferation of Tregs in vitro. 45 3.3. Amelioration of AD in mice treated with Duolac ATP. 47 3.4. Maintenance of systemic T cell balance in AD mice treated with Duolac ATP. 51 3.5. Maintenance of intestinal T cell balance in AD mice treated with Duolac ATP. 55 4. Supplementary Figures. 59 5. Discussion. 65 Chapter 3. Dietary probiotic mixture, YK4 regulates immune balance in mice with atopic dermatitis. 70 1. Introduction. 71 2. Material and Methods. 75 2.1. Animal. 75 2.2. Probiotics. 75 2.3. Mouse with atopic dermatitis model. 75 2.4. Dermatitis index. 76 2.5. Sample preparation. 76 2.6. Generation and culture of BMDCs. 77 2.7. In vitro CD4+ T cell stimulation. 78 2.8. RNA isolation and qPCR. 78 2.9. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). 79 2.10. Phenotypic and functional examination of immune cells by using flow cytometry. 80 2.11. Statistical analysis. 82 3. Results. 83 3.1. Amelioration of AD in mice treated with YK4. 83 3.2. YK4 administration induces a decrease in Th2 response coincident with an increase in Tregs in vivo. 87 3.3. YK4 administration induces an increase in CD103+ DCs in vivo. 91 3.4. Galectin-9 at intestine appears to be associated with alleviation of AD symptom. 94 3.5. YK4 effectively induce regulatory immune responses by BMDCs. 96 3.6. YK4 and galactin-9 induced proliferation of Tregs and increase of immunomodulatory cytokines. 99 4. Supplementary Figures. 102 5. Discussion. 106 Chapter 4. General Conclusion. 112 References. 116 Summary in Korean. 142Docto

The Relationship between Perceived Parental Overprotection and Cyber-Bullying Offending in High School Students : The Mediating Effects of Narcissism and Anger

The purpose of this study was to identify the relation among parental overprotection, cyber-bullying offending, narcissism and anger. The study participants(540 students) drawn from 2 high school in Seoul. The data were analyzed with Pearson’s correlation, Structural Equation Modeling by SPSS 22.0 and M-plus 7.0. The results of the study were as follows: First, there were slight but positive correlations among parental overprotection, cyber-bullying offending, narcissism and anger. It means that high perceiving of parental overprotection is related to cyber-bullying offending, high narcissism, and high level of anger. Second, the examination of structural relation among the major variables showed that all the paths were significant except the path from parental overprotection to anger and narcissism to cyber-bullying offending. Third, the result indicated that the dual-mediated effect of narcissism and anger between parental overprotection and cyber-bullying offending was significant. These results suggested that narcissism and anger should be considered in designing prevention program for high school students who have trouble in cyber-bullying offending behavior caused by parental overprotection. Findings in this study also exhibited the direction for future research of parental overprotection , narcissism, anger and cyber-bullying offending of adolescents.;본 연구는 부모의 양육태도가 청소년의 문제행동 중 하나인 사이버불링 가해를 예측하는 중요한 변인이라는 기존 연구를 바탕으로, 부모의 바람직하지 못한 양육태도 중 특히 과보호적 양육태도와 사이버불링 가해의 관계를 살펴보고, 이 관계를 자기애와 분노가 매개하는지 살펴보기 위해 행해졌다. 이를 위해 서울에 소재한 고등학교 재학생 540명을 대상으로 자기보고식 설문조사를 실시하였으며, 먼저 각 변인들의 기술통계와 상관분석을 실시하였다. 다음으로 구조방정식 모형 분석을 통해 각 변인들의 구조적 관계를 파악한 뒤, 과보호적 양육태도와 사이버불링 가해의 관계에서 자기애와 분노의 매개효과가 통계적으로 유의한지 검증하였다. 본 연구의 결과는 다음과 같다. 첫째, 상관분석을 실시하여 변인들 간의 상호 관련성을 살펴본 결과 과보호적 양육태도, 사이버불링 가해, 자기애, 분노 모든 변인들 간 상관이 경미하지만 정적으로 유의미하였다. 즉, 부모의 과보호적 양육태도를 높게 지각하는 것이 빈번한 사이버불링 가해 및 높은 자기애 성향, 높은 분노 수준과 관련이 있음을 의미하며, 빈번한 사이버불링 가해 또한 높은 자기애 성향 및 높은 수준의 분노와 관련 있다는 것을 의미한다. 높은 자기애 성향 역시 높은 수준의 분노와 관련이 있었다. 둘째, 과보호적 양육태도와 사이버불링 가해 간의 관계를 자기애와 분노가 매개하는 연구모형을 설정하고 구조방정식 분석을 실시한 결과 과보호적 양육태도에서 분노, 자기애에서 사이버불링 가해로 가는 경로를 제외한 모든 경로들이 유의한 것으로 나타났다. 셋째, 과보호적 양육태도와 사이버불링 가해의 관계에서 자기애와 분노의 매개효과를 검정하기 위해 다변량 델타 분석을 실시하였다. 그 결과, 과보호적 양육태도에서 자기애와 분노를 순차적으로 거쳐 사이버불링 가해에 이르는 이중매개효과가 유의한 것으로 나타났다. 연구결과를 종합해보면, 부모의 과보호적 양육태도는 직접적으로 사이버불링 가해를 예측할 뿐 아니라, 청소년의 자기애를 발달시키고, 이러한 높은 자기애 성향이 분노 수준을 높여 결국에는 사이버불링 가해로 이어진다는 것을 확인할 수 있었다. 청소년기에 해당하는 중, 고등학생 시기는 자기중심성을 특징으로 자기개념과 정체성을 발달시키기 때문에 건강한 자기애 발달이 중요한 시기이다. 본 연구에서는 자녀의 자기애 발달에 영향을 주는 과보호적 양육태도가 사이버불링 가해에 영향을 주는 기제를 확인했다는 점에서 의의가 있다. 부모의 과보호적 양육태도가 사이버불링 가해에 미치는 영향과, 자기애 및 분노의 이중매개효과를 확인함에 따라 과보호적 양육을 경험한 청소년의 사이버불링 가해를 예방하는 프로그램 개발에 본 연구를 활용할 수 있을 것으로 기대된다.Ⅰ. 서론 1 A. 연구의 필요성 및 목적 1 B. 연구 문제 4 Ⅱ. 이론적 배경 5 A. 부모의 과보호적 양육태도 5 B. 사이버불링 가해 6 1. 사이버불링의 개념 6 2. 부모의 과보호적 양육태도와 사이버불링 가해 7 C. 자기애 9 1. 자기애의 개념 9 2. 부모의 과보호적 양육태도와 자기애 11 3. 자기애와 사이버불링 가해 13 D. 분노 15 1. 분노의 개념 15 2. 부모의 과보호적 양육태도와 분노 15 3. 자기애와 분노 16 4. 분노와 사이버불링 가해 17 Ⅲ. 연구방법 19 A. 연구 대상 19 B. 측정도구 21 1. 과보호적 양육태도 척도 21 2. 사이버불링 가해 척도 21 3. 자기애 척도 22 4. 분노 척도 23 C. 연구 절차 24 D. 자료 분석 24 Ⅳ. 연구결과 25 A. 주요 변인들의 기술 통계치 25 1. 주요 변인들의 기술통계 25 2. 성별에 따른 주요 변인들의 비교분석 27 3. 주요 변인들의 상관분석 27 B. 과보호적 양육태도, 사이버불링 가해, 자기애, 분노의 관계 30 1. 측정모형의 검정 30 2. 구조모형의 검정 32 3. 구조모형의 분석 32 4. 자기애와 분노의 매개효과 검정 35 Ⅴ. 결론 및 제언 36 A. 결과 요약 및 논의 36 1. 주요 변인들의 상관분석 36 2. 과보호적 양육태도, 사이버불링 가해, 자기애, 분노의 구조적 관계 37 B. 연구의 의의 및 제언 41 참고문헌 44 부록. 설문지 55 ABSTRACT 6

Overlay agar 방법과 착색된 콜로니 측정을 이용하여 개선된 수막구균 혈청살상능 기법의 개발

배경 수막구균은 토착성 또는 유행성으로 발생하는 침습성 세균 감염으로 높은 사망률과 치명율을 보인다. 그러나 이 균에 의한 침습성 감염병은 예방접종으로 예방할 수 있다. 예방접종으로 생기는 항체의 기능을 측정하는 방법은 혈청살상능 검사법이며, 그동안 많은 형태의 혈청살상능 기법이 개발되어 왔다. 이 연구는 기존의 혈청살상능 검사법에 2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride (TTC) 라는 착색제와 overlay agar를 이용하여 개선시킨 기법에 관한 것이다. 방법 대상 세균의 준비, 어린 토끼 혈청 보체의 농도, 반응 시간, TTC농도와 같은 다양한 실험 조건들을 최적화하였다. 초기 희석이 되어 있는 혈청을 준비하여 96-well microtiter plate에 연속적으로 3배수로 희석했다. 수막구균과 3~4주 된 어린 토끼 혈청을 모은 것을 함께 넣어준다. 그 후 microplate를 37℃, 5% 이산화탄소 환경에서 배양한다. 그 이후 10 μl의 반응 검체를 말 혈청이 첨가된 brain-heart-infusion 우무배지에 2cm의 길이로 흘린다. 배지에 액체 성분이 모두 흡수된 후 TTC를 넣은 BHI-HS agar (0.75%)를 위에 흘려 덮어준다(overlay agar). 착색된 콜로니의 수를 NICE라고 하는 자동 콜로니 측정 프로그램을 이용하여 세었다. 실험 조건들을 결정하고 성인 백신 접종자로부터 얻은 품질 관리 혈청을 이용하여 혈청군 A, C, W135, Y에 대하여 혈청살상능 검사의 재현성을 확인하였다. 결과 이 실험 결과 다양한 실험조건을 최적화하였다. 그리고 세균살상능 반응에 의해 살아남은 세균들의 배양 조건을 여러 변수에 대하여 비교하였다. Overlay agar와 TTC를 추가하는 방법은 혈청살상능의 역가에 영향을 미치지 않았다. 또한 TTC의 가장 적절한 농도는 25 mg/L로 확인되었다. 최종 콜로니의 측정은 착색되지 않은 콜로니를 육안으로 센 것과 콜로니 측정 프로그램을 이용한 것과 비교하였다. 자동 콜로니 측정 프로그램은 육안으로 측정한 것과 비교하여 보았을 때 높은 상관성을 보였다. 실험 내, 실험 간 재현성도 적합하였다. 결론 Agar overlay 방법은 연구자에 대한 생물학적 위해(biohazard)를 줄일 수 있다. Overlay에 TTC를 넣어 특별한 장비 없이도 높은 정확도와 효율로 배양된 콜로니를 확인 할 수 있었다. 이러한 착색 기법을 이용한 혈청살상능 기법은 수막구균의 면역반응을 확인하는데 있어 이전 방법들에 비해 더욱 안전하고 노력이 덜 드는 효과적인 방법이다.;Background Neisseria meningitidis is a cause of endemic and epidemic invasive bacterial disease and is associated with high morbidity. Immunization with vaccine protects individuals against invasive meningococcal disease. The serum bactericidal assay (SBA) is required to evaluate the functional activity of antibody produced in response to meningococcal vaccines. However, SBA is time consuming and labor intensive assay and hazardous due to handling large volume of meningococcus frequently and in large volume. In this study, the improved SBA by using a dye, 2, 3, 5-triphenyl tetrazolium chloride (TTC) with a solid overlay agar method was tried to develop and optimize the assay. Methods Variant assay parameters were optimized: target bacteria preparation, concentration of baby rabbit complement, assay incubation period and concentration of TTC. Prediluted test sera were prepared and serial 3-fold diluted in a 96-well plate. Meningococcus and a pool of sera from 3- to 4- week-old baby rabbit were added to each well. Then microplates were incubated at 37°C and 5% CO2 for determined optimal incubation time. Ten microliter of samples from each well was allowed to run down in 2-cm lanes on brain-heart-infusion with horse serum (BHI-HS) agar plate. Plate was overlaid with BHI-HS agar (0.75%) containing TTC. Colorized colonies were counted using colony counting software called NICE (NIST’s Integrated Colony Enumerator; National Institute of Standard and Technology, Gaithersburg, MD, U.S.A.). The selection of the assay parameters and the evaluation of reproducibility of serogroup A, C, W-135 and Y SBA were done with quality control sera from adult with vaccinated. Results Various parameters of assay were optimized. The growth of target cell survivor was compared under various conditions. Overlay agar method and addition of TTC were not influenced on serum bactericidal index. The concentration of optimal TTC was determined to be 25 mg/L. The accuracy of the colony counting method using software was compared to manual counting method. The automated counting program with using TTC was highly correlated with manual counting of non-colorized colonies. Inter- and intra-assay reproducibility was acceptable. Conclusion A solid agar overlay method reduced biohazards associated assay. Overlay agar with TTC permitted high-throughput and high resolution imaging of bacterial colonies grown on plates without special equipment. This new improved SBA allowed safe, easy and efficient evaluation to measure immune response to meningococcal vaccines.I. Introduction 1 II. Methods 4 A. Materials 4 B. Methods 6 III. Results12 A. Optimized SBA 12 B. Growth of colorized colonies under overlay agar 16 C. Reproducibility of colorimetric SBA 23 IV. Discussion 27 References 33 Abstract in Korean 4

Evaluation of Mumps Vaccine Efficacy in Korea : a Case Control Study

After MMR vaccine coverage rate has more than 95% in Korean children, measles and rubella were almost controlled. However, there have been outbreaks of mumps in vaccinated population. Accordingly, the evaluation of mumps vaccine efficacy is urgently required. This study was done to assess the efficacy of the mumps component of the MMR vaccine and its relevance with disease occurrence. This study evaluated the efficacy of mumps vaccine component in MMR through case-control studies (2008.03~2009.12) in four university hospitals. A case control study of hospitalized patients was conducted. Details of the sex, age, MMR vaccine status of cases and controls were obtained from medical record. The data was analyzed with T-test, Chi square test and logistic regression analysis using SAS 9.1. One hundred and twenty-two cases of mumps patients and four hundred and forty-nine controls were selected. Ninety-eight percent of cases whose vaccination status were available had a history at least one MMR vaccination. The vaccination records including number of vaccination and vaccine names were not available in many subjects. Estimated risk for disease was OR 0.33 (95% CI 0.02-5.33, P >0.05) in vaccinated that was lower than in non-vaccinated (vaccine efficacy; 67%). Risk for mumps was OR 0.33 (95% CI 0.02-5.33, P >0.05) for one dose (vaccine efficacy; 67%) and OR 0.11 (95% CI 0.01-2.12, P >0.05) for two doses (vaccine efficacy; 89%). The possible factor for the outbreak of mumps in high vaccination rate population including Korea are described such as 1) waning immunity, 2) specific environmental exposure of person with insufficient immune status, 3) difference between wild and vaccine strain of mumps, 4) low immunogenicity of mumps component in MMR vaccine available in the world. Mumps vaccine efficacy was 49-95% in the developed countries such as USA, UK, Canada, Australia. In this study, mumps vaccine efficacy is 67% in one dose vaccinees and 89% in two doses vaccinees, which is similar with results in other countries. With immunization registration which is mandatory in Korea from 2011, collecting data of immunization status including vaccination number, vaccine name will be available. This will be very helpful for the vaccine efficacy study in the future. ;홍역, 유행성 이하선염, 풍진의 혼합 백신인 MMR은 국내 소아에서 2회 접종률 95% 이상, 집단 면역 95% 이상 유지되고 있고 그 결과 홍역과 풍진의 국내 발생은 거의 없으며 특히 홍역은 퇴치 선언을 위한 거의 모든 기준을 만족하고 있다. 그러나 같은 백신에 포함된 유행성 이하선염은 지속적으로 발생이 보고되고 있어 그 요인에 대한 평가가 요구되고 있다. MMR에 포함된 유행성 이하선염 백신의 효능 평가를 위해 4개의 대학병원 입원환자를 대상으로 하여 환자-대조군 연구를 시행하였다. 2008년 3월부터 2009년 12월까지 2년간 발생한 유행성 이하선염 환자들을 환자군으로 선정하였다. 대조군은 다른 이유로 입원한 입원환자 중 성별, 나이, 지역이 같은 환자를 환자군과 대조군의 비를 1:3으로 선정하였다. 환자군과 대조군에 대하여 나이와 성별, MMR 예방접종력을 조사하였다. 백신 접종 여부 혹은 접종 횟수에 따른 위험도는 짝지은 자료 분석에 적합한 조건부 로지스틱 회귀분석을 통해 분석하였다. 본 연구에서는 환자군 122명, 대조군 327명을 대상으로 하였다. 그 결과, 유행성 이하선염 백신 접종에 따른 위험도는 접종 받은 대상자에서 접종 받지 않은 대상자에 대해 오즈비(Odd ratio) 0.33 (95% CI 0.02-5.33, P>0.05)을 구할 수 있었고 이를 토대로 산출한 백신 효과는 67%이었다. 백신 접종 횟수에 따른 위험도는 1차 접종만 받은 경우에 오즈비 0.33 (95% CI 0.02-5.33, P>0.05)으로 백신 효과는 67%, 2차 접종까지 받은 경우는 오즈비 0.11 (95% CI 0.01-2.12, P>0.05)로 백신 효과는 89%이었다. 본 연구에서 환자의 대부분이 홍역-풍진 일제 예방접종사업의 접종대상 연령보다 이전에 출생한 경우여서 백신을 1회 접종 받은 경우라고 추정되었지만 많은 경우 예방접종 기록을 갖고 있지 않아 확인할 수 없었다. 이번 연구에서처럼 우리나라를 포함한 많은 선진국에서 높은 MMR 접종률을 가진 인구 집단에서 예방접종에도 불구하고 발생하는 유행성 이하선염의 유행에 대한 설명으로는 1) 면역력의 감소, 2) 불충분한 면역을 보유한 사람이 특정 생활 환경에 노출 시 유행 발생, 3) 유행주와 백신주 간의 차이, 4) 현재 세계적으로 유통되는 유행성 이하선염 백신 자체의 면역원성 문제 등이 있다. 미국, 영국, 캐나다, 호주 등 선진국의 연구들에서 유행성 이하선염 백신 효능은 49-95%로 보고되었다. 환자-대조군 연구로 다기관에서 진행된 이번 연구에서는 백신 효능은 1회 접종 시 67%, 2회 접종 시 89%의 경향을 보여 외국의 연구와 유사한 결과를 나타내었다. 최근 범국가적으로 시행되고 있는 예방접종 등록 사업이 지속되면 정확한 예방접종력과 접종 받은 백신 종류를 알 수 있어 백신의 효능 평가에 가장 걸림돌이 되었던 문제점이 해결되어 향후 백신의 효능 평가가 더욱 원활히 이루어 질 수 있을 것이다.I. 서론 1 II. 연구 방법 6 A. 대상 6 B. 방법 6 C. 통계 8 III. 결과 10 A. 환자군의 인구학적 특징 10 B. 임상 증상과 합병증 11 C. 실험실적 진단 12 D. 유행성 이하선염 백신의 통계학적 효능 평가 12 IV. 고찰 23 V. 결론 32 참고문헌 33 영문초록 3

타출기법을 중심으로

학위논문(석사)--서울대학교 대학원 :미술대학 디자인학부 공예전공,2019. 8. 서도식.기물에서의 양감은 입체감을 높여주고 제작자의 의도를 효과적으로 표현하는 수단이다. 제작자의 의도가 표현된 기물은 기능을 위한 사물에서 감정을 전달하는 예술품으로 변모한다. 이 연구는 요철문양의 유기적 양감을 가진 기물을 통해 나의 감정을 전달하고자 하였다. 연구에서 나는 금속 판재가 가진 특성을 이용해 표면에 요철을 가진 기물을 만들어 낼 수 있는 가능성을 찾았다. 다른 물질에 비해 얇은 두께로 기물을 만들 수 있는 금속은 재료에 따라 전성과 연성이 풍부하여 직접적인 가공이 용이하다. 이 연구는 금속판재에 요철을 가공하여 문양을 만드는 타출기법에 대한 기법 숙달과 조사에서 시작하였다. 기법숙달과정에서 타출기법의 기본적인 방법과 도구를 알아보았고, 우리나라에서 발견된 타출기법으로 만들어진 유물을 소개하였다. 또한 현대 금속공예가들의 작품을 통해 다른 기법과의 혼용에서 오는 다채로운 표현효과를 발견하였다. 나는 타출기법으로 만든 기물표면의 문양을 통해 물결에서 느낀 감정을 전달하고자 하였다. 물결은 상황에 따라 안정적이고 평화로운 느낌을 주는 율동감으로 표현되기도 하고, 역동적이고 활기찬 생동감으로 표현되기도 한다. 작품 제작을 위해 물결의 이미지에서 느껴지는 감정을 분류하고, 효과적으로 표현한 작가를 연구하였다. 또한 각각의 감정을 효과적으로 전달하기 위해 타출기법 이외의 기법을 연구하여 제작에 반영하였다. 이에 연구된 기법으로는 금속 표면의 색 차이를 표현하는 땜 상감기법과 부분적 주석도금기법, 그리고 요철로 인한 문양을 강조하기 위한 조금기법, 대비효과를 위해 은땜으로 겹붙이는 접합방법이 있다. 이러한 기법연구를 통해 인체에 무해한 재료를 찾을 수 있었고, 형태에 대한 새로운 가능성을 엿볼 수 있었다. 실용성을 염두에 두고 작업을 진행하다보니 최종적으로 완성한 작품에서 전체적으로 형태의 다양성이 부족했고, 표현 소재인 물결에서 느껴지는 감정을 개인적인 경험을 바탕으로 국한하여 분류한 것이 아쉬웠다. 이 연구를 바탕으로 소재를 통해 표현하고자 하는 바를 설득력 있게 전달하는 방법을 찾기 위해 힘쓰는 한편, 연구에서 발견한 형태의 다양성을 발전시키기 위해 노력하고자 한다. 또한 기법의 혼합사용으로 만들어진 작품에 착안하여, 다른 미술 분야와의 협업을 통해 새로운 표현력을 지닌 작품 제작을 이어가고자 한다.I. 들어가는 말 - 01 1. 연구 배경 및 목적 - 01 2. 연구 방법 및 범위 - 02 II. 타출기법 - 04 1. 기법소개 - 04 2. 현대 금속공예가들의 작품 - 09 III, 작품연구 - 12 1. 물결의 이미지 - 12 1.1. 안정적 율동감 - 12 1.2. 역동적 생동감 - 16 2. 작품설명 - 19 IV. 맺음말 - 42 참고문헌 - 44Maste

The Impact of Operating Room Nurses’ Knowledge and Attitudes of Pressure Injury on the Level of Performance in Pressure Injury Prevention

본 연구는 수술실 간호사의 욕창간호 지식, 욕창간호 태도, 욕창예방간호 수행도의 정도와 관계를 확인하고, 욕창예방간호 수행도에 영향을 미치는 요인을 규명하기 위한 서술적 조사연구이다. 자료 수집은 2025 년 3월 1일부터 3월 15일까지 국내 N 포털 사이트에서 운영되는 간호사 커뮤니티에서 모집한 165명을 대상으로 시행하였고, 이중 불성실한 답변 7부를 제외한 총 158부를 분석에 사용하였다. 수집한 자료는 SPSS/WIN 25.0 통계 프로그램을 이용하여 기술통계, 독립표본 t검정(Independent t-test), 일원배치 분산분석(One way ANOVA 또는 Welch ANOVA), 단순상관관계 분석(Pearson’s correlation coefficient), 위계적 회귀분석(Hierarchical regression analysis)을 실시하였다. 본 연구의 결과는 다음과 같다. 1. 대상자의 성별은 여성이 140명(91.1%)이었다. 평균 연령은 31.98±4.61세이었으며, 30세 이상에서 35세 미만이 77명(48.7%)이었다. 최종 학력은 학사가 134명(84.8%)이었고, 근무 중인 병원 유형은 종합병원이 86명(54.4%)이었다. 수술실 근무 경력은 평균 5.27±5.50년이었으며, 3년 이상 5년 미만이 67명(42.4%)으로 가장 큰 비중을 차지했다. 욕창예방간호 숙련도에 대해서는 ‘익숙함’으로 응답한 대상자가 84명(53.2%), ‘매우 익숙함’은 36명(22.8%)이었다. 욕창과 관련된 교육을 받은 경험이 있다고 응답한 대상자는 132명(83.5%)이었으며, 교육 유형으로는 소속 기관의 자체 실무교육이 67명(42.4%)으로 가장 많았다. 욕창예방간호의 수행 근거로는 임상지침이 86명(54.4%)으로 가장 많이 보고되었고, 수술로 인한 것으로 인지하는 욕창 발생 시점에 대해서는 ‘수술 후 24시간 이내’라고 응답한 대상자가 92명(58.2%)이었다. 욕창예방간호 수행의 방해 요인은 시간 부족 55명(34.8%), 인력 부족 40명(25.3%), 관련 물품 부족 29명(18.4%), 지식 부족 15명(9.5%), 중요성 인식 부족 11명(7%), 참고할 지침이나 도구 부족 5명(3.2%) 순으로 나타났다. 2. 욕창간호 지식은 28점 만점에 평균 21.35±5.45점(100점 기준 환산 시 76.25±19.46점)이었다. 하위 영역별로는 욕창 발생 위험요인 지식이 12점 만점에 평균 9.63±2.47점(100점 기준 환산 시 80.25±20.58점)으로 하위 영역 중 가장 높았고, 욕창예방 지식은 8점 만점에 6.13±1.86점(100점 기준으로 환산 시 76.63±23.25점), 욕창상태사정 지식은 8점 만점에 5.59±1.71점(100점 기준 환산 시 69.88±21.38점)이었다. 욕창간호 태도는 44점 만점에 평균 32.80±4.34점(100점 기준 환산 시 74.55점±9.86점), 욕창예방간호 수행도는 64점 만점에 평균 53.08±7.68점(100점 기준 환산 시 82.94±12.00점)이었다. 3. 대상자의 일반적 특성에 따른 욕창예방간호 수행도는 연령(F=29.952, p<.001), 최종 학력(H=19.013, p<.001), 재직 병원 유형(t=-2.627, p=.009), 수술실 근무 경력(F=12.351, p<.001), 욕창 관련 교육 경험(Z=-2.034, p=.021), 욕창예방간호 숙련도(F=20.612, p<.001)에서 통계적으로 유의한 차이가 있었다. 4. 욕창예방간호 수행도는 욕창간호 지식(r=.690, p<.001), 욕창간호 태도(r=.782, p<.001)와 양(+)의 상관관계를 보였다. 욕창간호 지식의 하위 영역에서 욕창 위험요인 지식(r=.740, p<.001), 욕창예방 지식(r=.568, p<.001), 욕창 단계 사정 지식(r=.504, p<.001)과 모두 유의한 양(+)의 상관관계가 나타났다. 또한, 욕창간호 지식과 욕창간호 태도 간에도 유의한 양(+)의 상관관계(r=.636, p<.001)가 확인되었다. 5. 욕창예방간호 수행도에 영향을 미치는 요인을 파악하기 위해 2단계 위계적 회귀분석(hierarchical regression analysis)을 실시하였다. 일반적 특성을 투입한 모형 1에서 욕창예방간호 수행도에 유의한 영향을 미치는 변수는 욕창간호 숙련도의 익숙함(β=.428, p<.001)과 매우 익숙함(β=.572, p<.001), 수술실 근무 경력의 5년 이상(β=.220, p=.022), 상급종합병원 재직(β=.153, p=.043)이었고, 모형 1의 설명력은 31.9%였다(F=11.514, p< .001). 욕창간호 지식의 하위 영역과 욕창간호 태도를 추가로 투입한 모형 2에서 욕창예방간호 수행도에 유의한 영향을 미치는 변수는 욕창간호 태도(β=.432, p<.001), 욕창 발생 위험요인 지식(β=.357, p<.001), 욕창예방 지식(β=.156, p=.034)이었고, 모형 2의 설명력은 71.5%로 모형 1에 비해 39.6% 증가하였다(F=36.760, p<.001). 본 연구 결과, 대상자의 재직 병원 유형, 수술실 근무 경력, 욕창예방간호 숙련도, 욕창 발생 위험요인 지식, 욕창 예방 지식과 욕창간호 태도가 욕창예방간호 수행도에 영향을 미치는 요인임을 확인하였다. 그러므로 수술실 간호사의 욕창예방간호 수행도를 향상시키기 위해서는 상급종합병원의 체계적인 교육 프로그램이나 표준화된 간호 지침을 다른 유형의 병원에도 확산·적용할 필요가 있으며, 수술실 간호사의 경력과 숙련도의 중요성을 인지하고, 욕창관련 지침이나 교육 프로그램 개발에 숙련된 경력 간호사를 참여시킬 필요가 있다. 또한, 수술실 간호사의 업무 환경과 특성을 고려한 맞춤형 실무 교육 프로그램을 개발하여 적용함으로써 욕창간호 지식을 체계적으로 강화하고, 수행을 저해하는 요인을 파악하여 제거하는 조직적 전략을 통해 수술실 간호사들이 긍정적인 욕창간호 태도를 형성할 수 있도록 해야 한다. 이를 통해 수술실 간호사의 욕창예방간호 수행도를 향상시키고, 나아가 수술 환자의 안전을 도모하는데 기여할 수 있을 것이다. 주요어: 욕창, 건강 지식, 태도, 수행, 수술실 간호사Maste

직접메탄올연료전지 Pt 촉매 산소환원반응과 메탄올 내성 증가를 위한 피리디늄계 이온성 액체의 합성

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 공과대학 화학생물공학부, 2018. 8. 김영규.This paper is about the synthesis and application of pyridinium-based ionic liquids for the enhancement of oxygen reduction and methanol tolerance on the Pt catalyst for DMFC. DMFC is a promising candidate for portable fuel cell because of the ease of transportation resulting from the liquid phase of methanol instead of gas phase. However, it has several unresolved problems that methanol crossover and the cost of Pt catalyst. To enhance the oxygen reduction reaction (ORR) activity and methanol tolerance of Pt catalyst, several ionic liquids were tested on the Pt surface. Herein, the monocyclic cation ionic liquids that are imidazolium, pyridinium, pyrrolidinium and piperidinium were synthesized. In addition, the multicyclic cation ionic liquids, such as isoquinolinium, phenanthrolinium and bipyridinium were also synthesized. The anion is fixed to bis(triflouoromethane)sulfonimide to analyze the effects resulted from cation structure such as saturation, aromaticity and protonation. The cation character was developed by alkylation with 1-boromobutane or by protonation with various acids. Alkylated and protonated cations were afforded in high yield over than 90%. And the yields of anion metathesis reaction were moderate to obtain the target ionic liquid. The ionic liquids were analyzed by proton, carbon and fluorine NMR followed by the measurement of melting point, viscosity, elemental analysis and single crystal XRD. The multicyclic ionic liquids can improve the ORR activity over three times. The multicyclic protonated ionic liquids also reduce the methanol oxidation current on the surface of the Pt catalyst.Abstract ⅰ List of Figures ⅲ List of Tables ⅳ List of Abbreviations ⅴ Chapter 1. Introduction 1 1.1. Ionic liquids 1.1.1 Introduction of ionic liquids 1.1.2 Applications of ionic liquids 1.2. Direct methanol fuel cell (DMFC) 1.2.1 Introduction of DMFC 1.2.2 Unresolved issues of DMFC 1.2.3 Applications of ionic liquids on DMFC Chapter 2. Results and discussion 16 2.1. Synthesis of ionic liquids 2.1.1 Synthesis of monocyclic ionic liquids 2.1.2 Synthesis of multicyclic ionic liquids 2.1.3 Synthesis of bipyridine based ionic liquids 2.1.4 Synthesis of protic ionic liquids 2.2. Electrochemical performance of DMFC 2.2.1 Oxygen reduction reaction on Pt catalyst of DMFC 2.2.2 Methanol oxidation reaction on Pt catalyst of DMFC Chapter 3. Conclusions 40 References 42 Experimentals 44 Appendices 50 Abstract in Korean 64Maste

계수 시계열 모형에서 통계적 공정 관리

학위논문 (박사)-- 서울대학교 대학원 : 자연과학대학 통계학과, 2018. 8. 이상열.This thesis consider cumulative sum (CUSUM) charts based statistical process control (SPC) in count time series. Time series of counts have gained much attention in recent years in diverse fields such as manufacturing process, communication, queueing systems, medical science, crime and insurance. First, we considers the first-order integer-valued autoregressive (INAR) process with Katz family innovations to include a broad class of INAR(1) processes featuring equi-, over-, and under-dispersion. Its probabilistic properties such as ergodicity and stationarity are investigated. Further, a SPC procedure based on the CUSUM control chart is considered to monitor autocorrelated count processes. The CUSUM-type test statistic with conditional least square (CLS) and squared difference (SD) estimator for the PINAR(1) model and its application to the diagnostic of control chart are also investigated. Also, we propose an upper one-sided CUSUM-type chart based on the considered CUSUM statistic for an effective detection and a change point estimation. For enhanced monitoring Markov counting process with excessive zeros. we consider three control charts, namely cumulative sum (CUSUM) chart with a delay rule (CUSUM-DR), conforming run length (CRL)-CUSUM chart, and the combined Shewhart CRL-CUSUM chart. Moreover, for an easy implementation of the attribute fixed sampling interval (FSI) and variable sampling internal (VSI) CUSUM control charts, an R package, attrCUSUM, is developed.1 Introduction 1 2 Reviews 7 2.1 Integer-valued autoregressive (INAR) models 7 2.2 CUSUM control chart 10 3 On First-order Integer-valued Autoregressive Process with Katz Family Innovations 13 3.1 Introduction 13 3.2 INAR(1) process with Katz innovations 14 3.3 Parameter estimation and real example 19 3.4 CUSUM chart to monitor a mean increase 24 3.5 Proofs 32 3.6 Concluding remarks 37 4 Improved CUSUM monitoring of Markov counting process with frequent zeros 38 4.1 Introduction 38 4.2 Modeling zero-inflated Markov counting process 40 4.2.1 Zero-inflated Poisson INAR(1) model 40 4.2.2 Zero-inflated Poisson INARCH(1) model 43 4.2.3 Some commonly required properties 44 4.3 Control chart for zero-inflated Markov counting process 47 4.4 Performance evaluation 52 4.5 A real data example 62 4.6 Concluding remarks 65 4.7 Appendix A. ARL computation for CUSUM-DR chart 68 4.8 Appendix B. ATS computation for CRL-CUSUM chart 69 5 Monitoring Mean Shift in INAR(1)s Processes based on CLSE-CUSUM Procedure 74 5.1 Introduction 74 5.2 Higher moments and CLSE-based CUSUM test 76 5.3 Monitoring mean shift using CLSE-CUSUM scheme 81 5.4 Performance comparison 85 5.5 A real data example 90 5.6 Proof of Proposition 5.2.1 93 5.7 Concluding remarks 94 6 On Residual CUSUM Statistic for PINAR(1) Model in Statistical Design and Diagnostic of Control Chart 95 6.1 Introduction 95 6.2 PINAR(1) process 97 6.3 Change point test based on SD estimator 100 6.4 Anomaly detection and post-signal diagnostic 107 6.5 Proofs 121 6.6 Concluding remarks 126 7 On the VSI CUSUM Chart for Count Processes and its Implementation with R Package attrCUSUM 128 7.1 Introduction 128 7.2 The zero-inflated model for count data 130 7.3 FSI and VSI control scheme for ZIB process 132 7.3.1 CUSUM control statistic for ZIB process 132 7.3.2 The Markov chain approach for CUSUM control chart 137 7.4 Effects of the VSI CUSUM control scheme in ZIB process 140 7.5 Software 144 7.5.1 Examples of usage with zero inflated binomial process 144 7.5.2 Other count models 148 7.6 Concluding remarks 152Docto

Serotype 6B from a pneumococcal polysaccharide vaccine induces cross-functional antibody responses in adults to serotypes 6A, 6C, and 6D

Cross-reactivity of pneumococcal capsular polysaccharides is a key element for formulating pneumococcal vaccines and evaluating vaccine efficacy. This study examined whether 23-valent pneumococcal polysaccharide vaccine (PPSV23), which only contains 6B, can elicit cross-functional immune responses against recently discovered serotypes (6C and 6D), as well as against 6A, in 2 adult age groups.Young adults (25-51 years; N=28) and elderly subjects (over 65 years; N=60) were immunized with PPSV23. Functional antibody responses were determined in pre- and postimmune sera via multiplexed opsonophagocytic killing assay against serotypes 6A/B/C/D.At postimmunization, the geometric mean opsonic indices (OIs) for 6B and nonvaccine serotypes (6A, 6C, and 6D) significantly increased in both age groups. The geometric fold increases of OIs for 6B/A/C/D significantly differed (18.2, 24.8, 3.1, and 7.1, respectively). Proportions of subjects with 4-fold increases in OIs for 6B/A/C/D were 73%, 70%, 31%, and 49%, respectively. Correlations of fold increases in OIs were highest between 6B and 6A, followed by 6B and 6D, then by 6B and 6C. Comparisons of young adults and the elderly revealed that most immunogenicity variables were higher in the former group.Our data demonstrated that 6B in PPSV23 induced cross-functional immune responses against serotypes 6A, 6C, and 6D, according to the degree of similarity in their capsular polysaccharide structures. In addition, we found significant age-related differences in PPSV23-induced cross-reactivity

Adolescents&amp;amp;apos; and parental knowledge, health beliefs toward hepatitis a vaccination

Adolescent; Hepatitis A; Knowledge; Parent; Vaccin