127 research outputs found
๊น์ ์ ์ ๊ถ์ ๊ถ๋ ฅ ์๋ฆฌํธ ํต์น ์ ๋ต
ํ์๋
ผ๋ฌธ (์์ฌ) -- ์์ธ๋ํ๊ต ๋ํ์ : ์ฌํ๊ณผํ๋ํ ์ ์น์ธ๊ตํ๋ถ(์ ์นํ์ ๊ณต), 2021. 2. ์๊ฒฝํ.๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ ๋
์ฌ์ ์น ์ด๋ก ์ ๊ด์ ์์ ๊น์ ์์ ๊ถ๋ ฅ ์๋ฆฌํธ ํต์น ์ ๋ต ๋ฐฉ์์ ๋ฐํ๊ณผ ๋์์ ๋น-๊ตญ๊ฐ์ฒด์ ์ โ์ ์ํโ๋ผ๋ ๋ถํ ์ ์น์ฒด์ ์ ๋ณํ๋ฅผ ์๋ น์ ์ ๊ถ ์์ ํ ๋๋ชจ๋ผ๋ ๋งฅ๋ฝ ์์์ ํด์ํ๋ ๊ฒ์ ๋ชฉ์ ์ผ๋ก ํ๋ค.
๋ถํ ์ฐ๊ตฌ์์ ๊ถ๋ ฅ ์๋ฆฌํธ์ ๋ํ ๊ธฐ์กด ์ฐ๊ตฌ๋ค์ ์ฃผ๋ก ๊ถ๋ ฅ ์๋ฆฌํธ ๊ฐ์ธ์ ์ถ์ ์ฑ๋ถ๊ณผ ์๋ น๊ณผ์ ์ฐ๊ด์ฑ ๋ถ์์ ์ค์ฌ์ผ๋ก ์งํ๋์๋ค. ๋ณธ ๋
ผ๋ฌธ์ ์ด๋ฌํ ๊ธฐ์กด ์ฐ๊ตฌ๋ค์ด ์ด๋ฃฌ ๋ถํ ๊ถ๋ ฅ ์๋ฆฌํธ์ ๋ํ ๋ถ์๊ณผ ์๋ฃ๋ค์ ๋ฐํ์ผ๋ก ์ ๊ถ ์์ ํ์ ์ฒด์ ์ ์ง๋ฅผ ์ํด ๋
์ฌ์๊ฐ ์๋ฆฌํธ ์ฐํฉ์ ๋ํด ์ด๋ ํ ์ ๋ต์ ์ฌ์ฉํ๋์ง ๋ถ์ํ๊ณ ์ ํ๋ค. ๋
์ฌ์ ์น ์ด๋ก ์ ๋
์ฌ์ ์ด์ธ์๋ ๋
์ฌ์ฒด์ ๋ฅผ ์ด๋ฃจ๋ ํ์์ง๋จ์ ๊ตฌ๋ณํ์ฌ ๊ทธ ๊ด๊ณ์ ๋ณํ๋ฅผ ํตํด ๋
์ฌ์ ์๋์๋ฆฌ๋ฅผ ๋ฐํ๋ค๋ ์ ์์ ์ ์ฉํ๋ค. ๊ทธ ์ค์์๋ ์ ์ถ์ธ๋จ๊ณผ ์น์์ฐํฉ์ ๊ท๋ชจ ๋ณํ, ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ํต์น์์ ์น์์ฐํฉ์ ๊ด๊ณ๋ฅผ ํตํด์ ํต์น์์ ์ ๊ถ ์ ์ง ์ ๋ต์ ์ค๋ช
ํ๋ ๋ถ๋ฅด๋
ธ ๋ฐ ๋ฉ์คํคํ์ ์ ์ถ์ธ๋จ์ด๋ก ์ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์ ์ด๋ก ์ ๋
ผ์ ๊ธฐ๋ฐ์ผ๋ก ์ผ๋๋ค.
๊น์ ์์ 1) ์ค์ง์ ์ธ ๊ถ๋ ฅ ์๋ฆฌํธ์ ๊ท๋ชจ๋ ์ถ์์ํค๋ฉด์ ์น์ ์ฐํฉ์ ๋ํ ์์ ์ ํต์ ๋ ฅ์ ๋์ด๊ณ , 2) ์ฆ์ ์กฐ์ง ๋ฐ ์ธ์ฌ ๊ฐํธ์ ํตํด ๊ถ๋ ฅ ์๋ฆฌํธ๋ค์ด ๋
์์ ์ธ ํ๋ฒ์ ํ์ฑํ๋ ๊ฒ์ ๋ง๋ ์ ๋ต์ ์ฌ์ฉํ๊ณ ์๋ค. ์ด๋ฌํ ์ ๋ต์ ๋
์ฌ์๊ฐ ์ถฉ์ฑ์ธ๋ ฅ์๊ฒ ์ ์ ํ ๋ณด์์ ์ ๊ณตํ๊ณ ์ด๊ถ์ ์ฌ๋ถ๋ฐฐํ๋ ๊ฒ์ ์ฉ์ดํ๊ฒ ํ๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ๋
์ฌ๊ตญ๊ฐ์์ ์ฝ๊ฒ ์ฐพ์๋ณผ ์ ์๋ ๋
์ฌ์์ ์ ๋ต์ด๋ค.
๊ทธ๋ฌ๋ ๋ถํ์ ๊น์ ์์ ์ด๋ฌํ ๋
์ฌ์์ ์ ๋ต์ ๋น-๊ตญ๊ฐ ์ฒด์ ์ ์ ์ํ๋ผ๋ ์ ๋์ ๋ณํ์ ํจ๊ป ์ฌ์ฉํ๋ค. ๋น-๊ตญ๊ฐ์ฒด์ ๋ ์๋ ์ฌํ์ฃผ์ ์ ์น์ฒด์ ์ ๊ฐ์ฅ ์ผ๋ฐ์ ์ด๊ณ ๊ธฐ๋ณธ์ ์ธ ํน์ง์ด์ง๋ง, ๋ถํ์ ๊ฒฝ์ฐ์๋ ์ฒด์ ๊ฑด์ค๊ณผ์ ๊ณผ ์๋ น๋
์ฌ์ฒด์ ์ ๊ณต๊ณ ํ๋ฅผ ๊ฑฐ์น๋ฉฐ ๋น์ ์๋๋ณด๋ค ์๋ น์ ์๋๊ฐ ๋ ์ฐ์์ ์์ด์๋ค. ๊น์ ์์ ์ง๊ถ ์ดํ ๋น-๊ตญ๊ฐ์ฒด์ ์ โ์ ์ํโ๋ ํน์ โ๋ณต์โ์ด๋ผ๊ณ ๋ถ๋ฆด ๋งํ ์ ๋์ ๋ณํ๋ฅผ ๊พํ๋ฉด์ ๊ฐํ๋ ๋น์ ๊ถ์๋ฅผ ํตํด์ ๊ถ๋ ฅ ์๋ฆฌํธ์ ๋ํ ํต์ ๋ฅผ ๊ฐํํ๋ค.
๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ์ด์ฒ๋ผ ๋น-๊ตญ๊ฐ์ฒด์ ์ โ์ ์ํโ๋ผ๋ ๊น์ ์ ์ ๊ถ ํ์์ ๋ํ๋๋ ๋ถํ ์ ์น์ฒด์ ์ ๋ณํ๋ฅผ ์ฌํ์ฃผ์ ๋น-๊ตญ๊ฐ์ฒด์ ์ ๊ฐ๋
๋ฐ ์๋ น์ ์ ํจ๊ป ๊ตฌ์ถ๋ ๋ถํ ์ฒด์ ์ ์๋ฆฝ ๊ณผ์ ๋ฑ๊ณผ ํจ๊ป ์ดํด๋ณด๋ฉด์, ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ผ๋ก ์ด๋ฌํ ๋ณํ๋ค์ ์ ๊ถ ์์ ํ์ ์ฒด์ ์ ์ง ๋ฐ ๊ถ๋ ฅ ์๋ฆฌํธ ํต์ ๋ฅผ ๋ชฉ์ ์ผ๋ก ํ ๋
์ฌ์์ ์ ๋ต์ ์ธก๋ฉด์์ ๋ถ์ํ๋ค.By analyzing the power elite of the Kim Jong-un regime from the perspective of autocratic theory, this thesis reveals Kim Jong-unโs strategy of taming power elites and explores the meaning of the political changes in North Korea.
Previous studies on the power elite in North Korea have focused mainly on analyzing the origins and backgrounds of individual power elites or their connection with Suryeong. This thesis interprets the analysis and data on the North Korean power elite achieved by these previous studies from the perspective of autocratic theory. The autocratic theory is useful because it distinguishes between groups of acts that form a dictatorship and reveals the operating principles of dictatorship through changes in their relationships. In particular, the Selectorate Theory of Bueno de Mesquita (BdM) explains the relationship between the ruler and the Winning Coalition through the size of the Selectorate and the Winning Coalition, which is the basis of the theoretical discussion in this thesis.
Kim Jong-un diminishes the size of power elites in an effort to consolidate the dictatorโs political standing. And he staves off factional coalitions from forming by stirring up organizational structure and frequent cabinet/elite reshuffle. These two strategies are accompanied by an institutional change in the โnormalizationโ of the Party-Sate System. This thesis analyzes the partyโs empowerment in North Korea from the perspective of Kim Jong-unโs strategy of maintaining his dictatorship.Chapter 1. Introduction 1
1.1 Research Questions 1
1.2 Research Methods and Materials 5
1.3 Composition of the Thesis 8
Chapter 2. Literature Review 10
2.1 Studies of Party-State System 10
2.2 Studies of Dictatorships. 14
2.3 "Selectorate Theory" of Bueno de Mesquita. 16
Chapter 3. Capitalizing on the Party-State System 18
3.1 Succession Strategy for Kim Jong-un 18
3.2 Reign of Terror under Kim Jong-un. 20
3.3 "Normalization" in Context. 22
Chapter 4. Party over Winning Coalition:
Maneuvering the Size 25
4.1 Shrinking of the Winning Coalition 25
4.2 Discussion of the Selectorate in North Korea. 30
Chapter 5. Stirring Up the Elite Coalitions 32
5.1 Revamping the Bureaucracy. 32
5.1.1 The Military. 32
5.1.2 Office No. 39. 39
5.2 Reshuffling the Personnel. 43
Chapter 6. Conclusion 44
Bibliography 46
Abstract in Korean 51Maste
์ธํฌ์น๋ฃ์ ๋ฅผ ์ํ ์ ์ธต์ ํ์ด๋๋ก๊ฒ ํ๋ฆ ์ธํฌ ์ฝํ
ํ์๋
ผ๋ฌธ(์์ฌ)--์์ธ๋ํ๊ต ๋ํ์ :๊ณต๊ณผ๋ํ ํํ์๋ฌผ๊ณตํ๋ถ,2019. 8. Nathaniel S. Hwang.Cell therapy has been emerged as a promising approach for severe diseases. However, the efficacy of cell therapy is limited by low cell survival owing to external stress during and after transplantation. In this study, we constructed a layer-by-layer cell coating platform with hydrogel film that provides cells a cytoprotective barrier. The hydrogel film was stabilized by Streptomyces avermitilis-derived tyrosinase (SA-Ty) which mediate oxidative coupling reactions of mono-phenols. Hydrogel film-coated cells were characterized by measuring zeta potential, fluorescence intensity, and TEM imaging. The 6-layer stacked hydrogel film was as thick as 139.40 nm. Cell viability was not deteriorated by coating procedures. Furthermore, hydrogel film was fabricated on ฮฒ-cell spheroids for the application in the field of islet transplantation. Confocal image showed thin, uniform, and compact film layers on ฮฒ-cell spheroids. In addition, hydrogel film-coated ฮฒ-cell spheroids showed higher insulin secretion ability than the native ฮฒ-cell spheroids. At last, the cytoprotective effects of the hydrogel film against physical and oxidative stress were evaluated in vitro. Overall, we expect our fast, facile, durable, and layer-controllable cell coating technique will offer a great potential for clinical applications in cell therapy.์ธํฌ์น๋ฃ์ ๋ ์ค์ฆ ์งํ์ ๋ํ ์น๋ฃ๋ฒ์ผ๋ก ์ฃผ๋ชฉ์ ๋ฐ๊ณ ์๋ค. ํ์ง๋ง, ์ธํฌ์น๋ฃ์ ์ ํจ๋ฅ์ ์ฃผ์ฌ ์ ๋๋ ํฌ์ฌ ํ ์ธ๋ถ ์คํธ๋ ์ค๋ก ์ธํด ๊ทธ ์์กด์จ์ด ๋ฎ๋ค๋ ํ๊ณ์ ์ด ์๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ์์ฒด ์ ํฉ ๋ฐ ์ธํฌ ๋ณดํธ ํ์ด๋๋ก๊ฒ ํ๋ฆ์ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ ์ธต์ ์ธํฌ ์ฝํ
ํ๋ซํผ์ ๊ตฌ์ถํ์๋ค. ํ์ด๋๋ก๊ฒ ๋ง ํ์ฑ์ ์ด์งํ๊ธฐ ์ํ์ฌ, ๋ฐ๋ ์ ํ๋ฅผ ๋๋ฉฐ Streptomyces avermitilis ์ ๋ ํ์ด๋ก์๋ค์ด์ฆ ๋งค๊ฐ ์ฐํ ์ปคํ๋ง ๋ฐ์์ ํตํด ์ธ๋ก ํ๋ฉด์ ์์ฉ๊ธฐ์ ๊ณต์ ๊ฒฐํฉ์ ํ์ฑํ๊ฑฐ๋ ๊ต์ฐจ๊ฒฐํฉํ๋ ํ์๋ฃจ๋ก ์ฐ ๋ฐ ๊ธ๋ผ์ด์ฝ ํคํ ์ฐ์ ๋จ์ผํ๋ ๊ทธ๋ฃน์ ๋์
ํ์๋ค. ํ์ด๋๋ก๊ฒ ํ๋ฆ์ด ์ฝํ
๋ ์ธํฌ๋ ์ ํ ์ ์, ํ๊ด ์ธ๊ธฐ๋ฅผ ์ธก์ ํ๊ณ TEM ์ด๋ฏธ์ง๋ฅผ ์ธก์ ํ์ฌ ํ์ธ๋์๋ค. 6๊ฐ ์ธต์ด ์์ธ ํ์ด๋๋ก๊ฒ ํ๋ฆ์ 139.40 nm์๋ค. ์ฝํ
๊ณผ์ ํ ์ธํฌ์ ์์กด์จ์ ๋๋น ์ง์ง ์์๋ค. ๋ ๋์๊ฐ, ์ท๋ ์ด์์์ ํ์ฉ์ ์ํ์ฌ ๋ฒ ํ ์ธํฌ ์คํ๋ก์ด๋์ ํ๋ฉด์ ํ์ด๋๋ก๊ฒ ํ๋ฆ์ ํ์ฑํ์๋ค. ์ปจํฌ์นผ ์ด๋ฏธ์ง์์ ์๊ณ , ๊ท ์ผํ๊ณ , ์์ถ๋์ด ์๋ ํ๋ฆ ์ธต์ ๊ด์ฐฐํ ์ ์์๋ค. ๋์ฑ์ด, ํ์ด๋๋ก๊ฒ ํ๋ฆ์ด ์ฝํ
๋ ๋ฒ ํ ์ธํฌ ์คํ๋ก์ด๋๋ ์ผ๋ฐ ์ธํฌ๋ณด๋ค ๋ ๋์ ์ธ์๋ฆฐ ๋ถ๋น ๋ฅ๋ ฅ์ ๋ณด์๋ค. ๋ง์ง๋ง์ผ๋ก, ํ์ด๋๋ก๊ฒ ํ๋ฆ์ ๋ฌผ๋ฆฌ์ , ์ฐํ ์คํธ๋ ์ค์ ๋ํ ์ธํฌ ๋ณดํธ ํจ๊ณผ๊ฐ ํ์ธ๋์๋ค. ๋ฐ๋ผ์, ์ฐ๋ฆฌ๊ฐ ๊ฐ๋ฐํ ๋น ๋ฅด๊ณ , ํธ๋ฆฌํ๊ณ , ๋จ๋จํ๊ณ , ์ธต ์ ์ ์ด๊ฐ ๊ฐ๋ฅํ ์ธํฌ ์ฝํ
๊ธฐ์ ์ด ์ธํฌ์น๋ฃ์ ์ ์์ ํ์ฉ์ ์์ด ํฐ ์ ์ฌ๋ ฅ์ ๋ถ์ฌํ ๊ฒ์ผ๋ก ๊ธฐ๋ํ๋ค.ABSTRACT 1
Table of Contents 3
List of Figures and Table 6
Chapter 1. The Scientific Background and Research Progress 8
1.1 Cell Therapy 8
1.2 Cell encapsulation for cell therapy 9
1.3 Strategies for cell surface engineering 10
Chapter 2. Construction of Layer-by-layer (LbL) Cell Coating Platform 12
2.1 Introduction 12
2.2 Materials and methods 13
2.2.1 Synthesis of GC-T, HA-T, GC-T-RITC, and HA-T-FA 13
2.2.2 Purification of recombinant tyrosinase from Streptomyces avermitilis (SA-Ty) 13
2.2.3 Attenuated total reflection-fourier transform infrared spectrometer (ATR-FTIR) 14
2.2.4 Quartz crystal microbalance (QCM) 15
2.2.5 Cell culture 15
2.2.6 Hydrogel film coating on 2D cell surface 16
2.2.7 Layer-by-layer hydrogel film coating of single cells 16
2.2.8 Measurement of zeta potential 17
2.2.9 FACS analysis 17
2.2.10 Transmission electron microscopy (TEM) 17
2.2.11 Evaluation of cell viability and proliferation 18
2.2.12 Statistical analysis 18
2.3 Results & Discussion 19
2.3.1 Synthesis and characterization of GC-T and HA-T 19
2.3.2 Characterization of SA-Ty. 19
2.3.3 Optimization of hydrogel film coating conditions on 2D cell surface 27
2.3.4 Identification of LbL hydrogel film by Quartz Crystal Microbalance 31
2.3.5 Identification of LbL hydrogel film-coated single cells 35
2.3.6 Cell viability and proliferation of hydrogel film-coated cells 39
Chapter 3. Layer-by-layer (LbL) Coating of ฮฒ-cell Spheroids for Islet Encapsulation 43
3.1 Introduction 43
3.2 Materials and methods 44
3.2.1 Fabrication of MIN6 ฮฒ-cell spheroids and layer-by-layer hydrogel film coating 44
3.2.3 Confocal laser scanning microscopy (CLSM) 44
3.2.4 Glucose-stimulated insulin secretion (GSIS) assay 44
3.2.5 Physical stress test 45
3.2.6 Oxidative stress test 45
3.2.7 Statistical analysis 46
3.3 Results & Discussion 47
3.3.1 Layer-by-layer hydrogel film coating of ฮฒ-cell spheroids 47
3.3.2 Cell viability of hydrogel film-coated ฮฒ-cell spheroids 47
3.3.3 Evaluation of the functionality of hydrogel film-coated ฮฒ-cell spheroids 53
3.3.4 Cytoprotection effect against physical stress 53
3.3.5 Cytoprotection effect against oxidative stress 53
Chapter 4. Conclusions 58
References 59
๊ตญ๋ฌธ์ด๋ก 64Maste
Estimation and Allocation of Cost Savings from Collaborations
ํ์๋
ผ๋ฌธ(์์ฌ) -- ์์ธ๋ํ๊ต๋ํ์ : ๊ณต๊ณผ๋ํ ์ฐ์
๊ณตํ๊ณผ, 2021.8. ๋ฌธ์ผ๊ฒฝ.The physical internet (PI) is a state-of-the-art open global supply chain network that is gaining attention from both participants and researchers of supply chains. The PI uses standardized containers to dispatch shipments through an interconnected network within a supply chain, where information, storage facilities, and transportation methods are shared participants of the physical internet. The network aims to save costs, handle volatile demand and information, and be socially and environmentally responsible. Up until now, however, almost all studies concerning the PI have focused primarily on its conceptual development and the advantages of putting it into practical, widespread use. Studies that consider realistic constraints of its use, such as empty runs of transportation, limited capacity of resources, or an equitable allocation of the cost savings obtained from its implementation are limited. While in general the PI can offer greater efficiency and sustainability compared to the traditional supply chain network, in certain situations some users of it experience loss through its use because of the inherent setup it presents of sharing capacitated resources. Therefore, compensating companies that experience loss when joining a PI is essential in building a solid network. In this thesis, in order to address the minimization of a total cost problem in the production-inventory-distribution decision of a PI, we first propose a mixed-integer linear programming (MILP) model formulation that takes into account capacitated factory and warehouse capacity, the penalty sustained by empty runs of transportation, and the maximum delivery distance of freight runs. Next, we use the model to compare the costs incurred by individual players when they do not participate in the PI and the costs of collaboration in the PI in which players do participate. After comparing the costs saved by participating in the PI, we then allocated the cost savings among independent supply chains, allotting them through three different allocation methods, including the Shapley value method, which is a cooperative game theory solution method.ํผ์ง์ปฌ ์ธํฐ๋ท์ ์ต์ฒจ๋จ์ ๊ณต์ ๊ธ๋ก๋ฒ ๊ณต๊ธ๋ง ๋คํธ์ํฌ๋ก ๋ค์ํ ํ์ ๋ฐ ์ค๋ฌด์๋ค์ ๊ด์ฌ์ ๋๊ณ ์์ต๋๋ค. ํผ์ง์ปฌ ์ธํฐ๋ท์ ํ์คํ๋ ์ปจํ
์ด๋๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ์ํธ ์ฐ๊ฒฐ๋ ๋คํธ์ํฌ๋ฅผ ํตํด ์ ํ ๋ฐ ์ฌํ๋ฅผ ๋ฐ์กํฉ๋๋ค. ์ด ๋, ์ ๋ณด, ๋ณด๊ด ์์ค ๋ฐ ์ด์ก ์๋จ์ ์ฐธ์ฌ์๋ค ๊ฐ์ ๊ณต์ ๋ฉ๋๋ค. ์ด ๋คํธ์ํฌ๋ ๋น์ฉ์ ์ ๊ฐํ๊ณ ๋ณ๋์ฑ์ด ํฐ ์์์ ์ ๋ณด๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌํ๊ณ ์ฌํ์ , ํ๊ฒฝ์ ์ผ๋ก ์ง์๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ์ ์งํ๋ ๊ฒ์ ๋ชฉํ๋ก ํฉ๋๋ค. ์ง๊ธ๊น์ง ํผ์ง์ปฌ ์ธํฐ๋ท์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๋ ์ฃผ๋ก ๊ทธ ๊ฐ๋
๊ณผ ํ๋ ์์ํฌ์ ๊ฐ๋ฐ, ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ์ฌํ์ ๋์
ํ์์ ๋์ ์ฅ์ ์ ์ฃผ๋ก ๋ค๋ฃจ์์ต๋๋ค. ํผ์ง์ปฌ ์ธํฐ๋ท ์์์ ์ด์ก ์๋จ์ ๊ณต์ฐจ ์ดํ, ์์์ ํ๊ณ ์ฉ๋, ์ ๊ฐํ ๋น์ฉ์ ๋ฐฐ๋ถ ๋ฑ๊ณผ ๊ฐ์ ํ์ค์ ์ธ ์์๋ค์ ๋ํ ๊ณ ๋ ค๋ฅผ ํ ์ฐ๊ตฌ๋ค์ ์์ง ์ ํ์ ์
๋๋ค. ํผ์ง์ปฌ ์ธํฐ๋ท์ ์ ์ฒด์ ์ผ๋ก ๋ณด์์ ๋ ๊ธฐ์กด์ ๊ณต๊ธ๋ง์ ๋นํด ๋ ํฐ ํจ์จ์ฑ๊ณผ ์ง์ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ์ป์ ์ ์์ง๋ง ํน์ ํ ์ํฉ์์๋ ์ผ๋ถ ์ฐธ๊ฐ์๋ ํ์ค์ ์ธ ์ ์ฝ ์ํฉ์ผ๋ก ์ธํด ์คํ๋ ค ์ํด๋ฅผ ๋ณด๋ ๊ฒฝ์ฐ๊ฐ ์กด์ฌํ ์ ์์ต๋๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋ ํฐ ํจ์จ์ฑ๊ณผ ์ง์ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ์ป์ ์ ์๋ ํผ์ง์ปฌ ์ธํฐ๋ท์ ๊ธฐ์
๋ค์ ์ฐธ์ฌ์ํค๊ธฐ ์ํด์ ๊ทธ๋ค์ด ์ฐธ์ฌํจ์ผ๋ก์จ ์ํด๋ฅผ ๋ณด๋ ์ํฉ์ ๋ง๋ค์ง ์๋ ๊ฒ์ด ํ์์ ์ธ ์กฐ๊ฑด์
๋๋ค. ๋ณธ ๋
ผ๋ฌธ์์๋ ๋จผ์ ์ด์ก ์๋จ์ ๊ณต์ฐจ ์ดํ ํ๋ํฐ ๋น์ฉ, ์ต๋ ์ด์ก ๊ฐ๋ฅ ๊ฑฐ๋ฆฌ, ์ฐฝ๊ณ ์ ํ์๋ฅผ ๊ณ ๋ คํ ํตํฉ ์์ฐ-์ฌ๊ณ -๋ฌผ๋ฅ ์ต์ ๋น์ฉ ํผํฉ ์ ์ ์ ํ ๊ณํ๋ฒ ๋ชจํ์ ์ ์ํ์์ต๋๋ค. ๊ทธ ํ, ๊ฐ๋ณ์ ์ธ ๊ณต๊ธ๋ง์ ๋น์ฉ๊ณผ ํผ์ง์ปฌ ์ธํฐ๋ท ํ์์ ํ์
ํ ํตํฉ ๊ณต๊ธ๋ง์ ๋น์ฉ์ ๋น๊ตํ์ฌ ๋น์ฉ ์ ๊ฐ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ณ์ฐํ ํ ํ๋ ฅ ๊ฒ์์ ์ผ์ข
์ธ ์ํ๋ฆฌ ๊ฐ์ ํฌํจํ ์ธ ๊ฐ์ง ๋ฐฐ๋ถ ๋ฐฉ๋ฒ์ ํตํด ๋น์ฉ ์ ๊ฐ ํจ๊ณผ ๋ฐฐ๋ถ์ ์ดํด๋ณด์์ต๋๋ค.Chapter 1 Introduction 1
Chapter 2 Literature Review 5
2.1 The Physical Internet 5
2.2 Cost Savings Allocation Problem 8
Chapter 3 Model Formulation 10
3.1 Problem Definition 10
3.2 Assumptions 15
3.3 Notaions and Formulations 17
Chapter 4 Numerical Analysis of the MILP model 22
4.1 Experimental Design 22
4.2 Results Analysis 26
4.3 Cost Parameter Sensitivity Analysis 29
Chapter 5 Cost Savings Allocation Problem 31
5.1 No Pre-set Rules 31
5.2 Proportional to Customer Demand 33
5.3 The Shapley Value 35
Chapter 6 Conclusions 37
Bibliography 39
๊ตญ๋ฌธ์ด๋ก 42์
Treatment Effect of Psychoeducation and Training Program Using Virtual Reality Technique in the Patients with Depressive Symptoms
Objectives To compare the clinical effectiveness of the virtual reality (VR) programs in assessing psychosocial problems, improving symptoms, and reducing suicide risk in depressive patients with those of pharmacotherapy. Methods Thirty-six patients were recruited with depression in the treatment group and 22 participants in the healthy control group through internet advertisements between November 2018 and March 2019. Participants in the treatment group were allocated randomly at a 1:1 ratio to either the VR group or pharmacotherapy group. At the baseline, all participants were assessed with a comprehensive battery for their psychological characteristics by structured scales using VR technologies. Assessments of patients in the treatment group were repeated four weeks after therapeutic intervention. The primary outcome measures were the Korean Version of Quick Inventory of Depressive Symptomatology-Self-Report and suicidality scales of the Korean Mini International Neuropsychiatric interview. The borderline personality (Personality Assessment InventoryโBorderline Features Scale) and resilience (Korean Resilience Questionnaire) were also evaluated. Results Twenty-four depressive patients completed the treatment, and the final assessment was conducted after four weeks of treatment. In the initial assessment, the patient group showed significantly higher depressive symptoms, suicidality, borderline personality trait, and lower resilience than healthy control group. After the four-week therapeutic interventions, the VR group showed significant improvement in depression, suicidality, borderline personality trait, and resilience. In addition, there was no significant difference in the treatment efficacy between the VR group and the pharmacotherapy group. Conclusion In this study, the VR treatment program has clear benefits for emotional distress and reducing suicidality in depressive patients. Evidence-based VR treatments may show new clinical potential for depressive disorder.ope
์ํ๋ํธ ์๋ฆฝ ์ ํ ์์์น์ํ์ ๊ฒ์ฌ์ ์ ๋นํ๊ทผ๊ฑฐ๊ธฐ๋ฐ์ง์นจ ๊ฐ๋ฐ
ํ์๋
ผ๋ฌธ (๋ฐ์ฌ) -- ์์ธ๋ํ๊ต ๋ํ์ : ์น์ํ๋ํ์ ์น์๊ณผํ๊ณผ, 2020. 8. ์ด์ผ์ .๋ชฉ์ : ์ด ์ฐ๊ตฌ์ ๋ชฉ์ ์ ์ํ๋ํธ ์๋ฆฝ ์ ์ ์ ํ ์ํ๋ํธ ์๋ฆฝ ์์น๋ฅผ ํ๊ฐํ๊ณ ์ถ์ ๊ฒ์ฌ์ ์ ์ ํ ์์์น์ํ์ ๊ฒ์ฌ์ ์ ๋นํ๊ทผ๊ฑฐ๊ธฐ๋ฐ์ง์นจ์ ๊ฐ๋ฐํ๋ ๊ฒ์ด๋ค.
๋ฐฉ๋ฒ: ์ง์นจ์ ๊ฐ๋ฐ๊ณผ์ ์ ๋ํ์์์ํํ์ ๊ทผ๊ฑฐ๊ธฐ๋ฐ ์์์์์ง์นจ ๊ฐ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ๋ก ์ ๋ฐ๋๋ค. ์ง์นจ ๊ฐ๋ฐ์ ์ํ ์์ํ๋ฅผ ๊ตฌ์ฑํ๊ณ ํต์ฌ์ง๋ฌธ์ ์ค์ ํ์๋ค. ๊ทธ ํ ํต์ฌ์ง๋ฌธ์ ํด๋นํ๋ ์ง์นจ์ ๊ฒ์ํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ๊ตญ๋ดยท์ธ ๋ฐ์ดํฐ๋ฒ ์ด์ค๋ฅผ ํ์ฉํ์๋ค. ๊ฒ์๋ ์ง์นจ๋ค์ Korean Appraisal of Guidelines for Research and Evaluation II (AGREE II)๋ก ํ๊ฐํ๊ณ ์ ๋ณํ์์ผ๋ฉฐ ๊ถ๊ณ ๋ฌธ์ ๊ทผ๊ฑฐ๊ฐ ๋๋ ์ง์นจ๊ณผ ์ต์ ๋ฌธํ์ ๊ฒ์ํ์ฌ Korean-Clinical Imaging Guidelines (K-CIG) ๋ฐฉ๋ฒ์ผ๋ก ์ง ํ๊ฐ๋ฅผ ํ์๋ค. ์ด๋ฅผ ๊ถ๊ณ ๋ฌธ์ผ๋ก ์์ฑํ๊ณ ์ ๋ฌธ๊ฐ๋ค์ ํฉ์ ๊ณผ์ ๊ณผ ๋ธํ์ด ๋ฐฉ๋ฒ์ผ๋ก ๊ถ๊ณ ๋ฌธ์ ์ต์ข
์์ ์์ฑํ์๋ค.
๊ฒฐ๊ณผ: ์ํ๋ํธ ์๋ฆฝ ์ ์ง๋จ์ ์ํ ์์๊ฒ์ฌ๋ฒ์ ๋ํด ์ด 294๊ฐ์ ์ง์นจ์ด ๊ฒ์๋์์ผ๋ฉฐ ๊ทธ ์ค ํด๋น ์ฃผ์ ์ ๊ด๋ จ๋ 3๊ฐ์ ์ง์นจ ๋ฌธํ์ ์ ์ ํ์๋ค. ๋ํ ์ ํ ์ํ๋ํธ์ ํ๊ฐ๋ฅผ ์ํ ์์๊ฒ์ฌ๋ฒ์ ๋ํด ์ด 66๊ฐ์ ์ง์นจ์ด ๊ฒ์๋์๊ณ ์ด ์ญ์ ์ ๋ณ๊ณผ์ ์ ๊ฑธ์ณ 3๊ฐ์ ์ง์นจ ๋ฌธํ์ ์ ํํ์๋ค. ์ ๋ณ๋ ์ง์นจ ๊ด๋ จ ๋ฌธํ์ ํตํด, ์ํ๋ํธ ์์ ์ ํ์ ์์์น์ํ์ ๊ฒ์ฌ์ ์ ์ ํ ์์๊ฒ์ฌ๋ฒ์ ๊ถ๊ณ ์์ ์์ฑํ์๋ค.
๊ฒฐ๋ก : ์ํ๋ํธ ์์ ์ ๊ณํ์ ์ํด ํ๋
ธ๋ผ๋ง๋ฐฉ์ฌ์ ์์์ด๋ ์น๊ทผ๋จ๋ฐฉ์ฌ์ ์์๊ณผ ๊ฐ์ ์ผ๋ฐ ๋ฐฉ์ฌ์ ์์ ํ๋์ด ์ฐ์ ๋๋ฉฐ, ์ด๋ฅผ ํ๋
ํ ํ ๋จ๋ฉด์์์ด ํ์ํ๋ค๊ณ ํ๋จ๋ ๊ฒฝ์ฐ์ ์ฝ๋นCT (cone-beam CT; CBCT)์์์ ํ๋ํ ๊ฒ์ ๊ถ๊ณ ํ๋ค. ๋ง์ฐฌ๊ฐ์ง๋ก ์ํ๋ํธ ์์ ํ ์ํ๋ํธ์ ์์น ๋ฐ ๊ณจ์ ์ฐฉ ํ๊ฐ์ ์์ด ์ผ๋ฐ ๋ฐฉ์ฌ์ ์์์ด ์ฐ์ ๋๋ ์ ํ ๊ฐ๊ฐ์ด์์ ํธ์ํ๋ ํ์์๊ฒ ์์ธ์ ๋ฐํ๋ด๊ณ ์ฒ์น๋ฅผ ํ๊ธฐ ์ํด์๋ ์ฝ๋นCT์์์ด ๊ถ๊ณ ๋๋ค.Purpose: This study aimed to develop evidence-based clinical imaging guidelines before and after dental implant surgery to assess the proper implant location to prevent complications and identify potential complications during follow-up.
Methods: The guideline development process employed an adaptation methodology in accordance with the Korean clinical imaging guidelines (K-CIG). A committee was developed for the development of guidelines and key questions were set. After that, domestic and international databases were used to search for guidance corresponding to the key question. The searched guidelines were selected according to established criteria, and the quality of the studys was evaluated by searching the latest documents that are the basis of the recommendations. Through this, recommendations and evidences for each key question are prepared . The recommendations were decided through the expert's consensus process (Delphi method), and the final recommendation was made.
Results: To derive recommendations for implant planning, the search identified 294 articles, of which 3 were selected as relevant guidelines. And our online search identified 66 articles, of which 3 were selected for the development of the guidelines regarding the appropriate imaging modalities that should be used following implant placement.
Conclusion: Cone beam computed tomography (CBCT) scanning is recommended for individual patients judged to require a cross-sectional image after reading of a panoramic X-ray image and a conventional intraoral radiological image for implant planning. Also, conventional imaging should be the first choice for assessing the implant following its placement and osseointegration. The metal artifacts in Cone Beam Computed Tomography (CBCT) should be considered. However, CBCT is recommended for patients with sensory abnormalities following dental implant surgery to evaluate and identify the underlying cause of implant complications and to determine the appropriate treatment.1.์๋ก 5
2.์ฐ๊ตฌ๋ฐฉ๋ฒ 7
2.1 ์์ํ ๊ตฌ์ฑ 7
2.2 ํต์ฌ์ง๋ฌธ ์ ์ 7
2.3 ์ง์นจ์ ๊ฒ์ 8
2.4 ์ง์นจ์ ์ ๋ณ 9
2.5 ์ง์นจ์ ์ง ํ๊ฐ 10
2.6 ์ต์ ๋ฌธํ ๊ฒ์ 13
2.7 ํต์ฌ์ง๋ฌธ๋ณ ๊ถ๊ณ ๋ฐ ๊ทผ๊ฑฐ์ ๋ฆฌ, ๊ถ๊ณ ๋ฌธ์ ์ด์์์ฑ 13
2.8 ํฉ์ ๋ฐ ๊ถ๊ณ ๋ฑ๊ธ ๊ฒฐ์ 19
2.9 ๊ถ๊ณ ๋ฌธ์ ์ต์ข
์ 20
3.์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ 20
3.1 PICO 20
3.2 ์ง๋ฃ์ง์นจ ๊ฒ์ 22
3.3 ์ง๋ฃ์ง์นจ ์ ๋ณ 30
3.4 ์ง์นจ์ ์ง ํ๊ฐ 32
3.5 ์ต์ ๋ฌธํ ๊ฒ์ 38
3.6 ๊ทผ๊ฑฐ์์ค ๊ฒฐ์ , ๊ถ๊ณ ๋ฌธ ์์ฑ, ๊ถ๊ณ ๋ฑ๊ธ ๊ฒฐ์ 39
3.7 ์ต์ข
๊ถ๊ณ ๋ฌธ์ ํฉ์ 44
4.๊ณ ์ฐฐ 46
5.๊ฒฐ๋ก 51
์ฐธ๊ณ ๋ฌธํ 52
Abstract 59Docto
Effects of presynaptic mitochondrial depolarization on short-term synaptic plasticity
ํ์๋
ผ๋ฌธ (์์ฌ)-- ์์ธ๋ํ๊ต ๋ํ์ : ์๊ณผํ๊ณผ ์๋ฆฌํ ์ ๊ณต, 2016. 2. ์ด์ํธ.๋ฏธํ ์ฝ๋๋ฆฌ์๋ ATP๋ฅผ ์์ฐํด๋ผ ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ ์ธํฌ ๋ด ์นผ์์ ์์ถฉํ๋ ์ญํ ์ ํ๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ ์ด๋ฌํ ๊ธฐ๋ฅ์ ๊ฐ์ง ๋ฏธํ ์ฝ๋๋ฆฌ์๊ฐ ์๋
์ค์ ๋ง๋จ์์ ์๋
์ค ์ ๋ฌ์์ ๊ฐ๋ ์ญํ ์ ์ฃผ๋ชฉํ๊ณ , dual patch-clamp recording์ด ๊ฐ๋ฅํ calyx of Held ์๋
์ค์์ ๋ฏธํ ์ฝ๋๋ฆฌ์์ ์ ๋ถ๊ทน์ด ๋จ๊ธฐ์๋
์ค ๊ฐ์์ฑ (short-term synaptic plasticity)์ ์ด๋ ํ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น๋์ง ์กฐ์ฌํ์๋ค.
Calyx of Held์๋
์ค์ ์ ๋๋ (1 ฮผM)์p-trifluoromethyl-oxyphenyl-hydrazone (FCCP)๋ฅผ ์งง๊ฒ (5๋ถ) ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ ๋ฏธํ ์ฝ๋๋ฆฌ์์ ๋ง์ ์์ ๋ถ๋ถ์ ์ผ๋ก ์ ๋ถ๊ทน ์์ผฐ๋ค. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ FCCP๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌํ๋ ์๊ฐ ๋์ basal EPSC๊ฐ ์ฆ๊ฐํ์๊ณ FCCP๋ฅผ ์ป์ด์ค ํ์ short-term facilitation๊ฐ ๊ฐ์ํ์๋ค. ์ด๋ฌํ ํ์์ ATP synthase inhibitor์ธ oligomycin์ด๋ mitochondrial calcium uptake inhibitor์ธ Ru360์ ์ํด์๋ ๋ํ๋์ง ์์๋ค.
Fura-2๋ฅผ ์ด์ฉํ ์นผ์ ์ด๋ฏธ์ง ์คํ์์ FCCP ์ฒ๋ฆฌํ๋ ๋์ ์๋
์ค์ ๋ง๋จ ๋ด์ ์นผ์ ๋๋๊ฐ ์ฆ๊ฐํ์๋ค. ๋ํ FCCP๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌ ์ ์ pulse train์ผ๋ก conditioningํ๋ฉด FCCP์ ์ํ ์ธํฌ ๋ด ์นผ์ ๋๋์ ์ฆ๊ฐ๊ฐ ๋ ์ด์ง๋์๋ค. mitochondrial Na+/Ca2+ exchanger์ blocker์ธ tetraphenylphosphonium (TPP+) ์กด์ฌ ํ์ FCCP๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌํ๋ฉด ์ธํฌ ๋ด ์นผ์ ๋๋์ ์ฆ๊ฐ๊ฐ ๊ด์ฐฐ๋์ง ์์๋ค.
์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ค์ ์๋
์ค์ ๋ง๋จ์ ์์นํ ๋ฏธํ ์ฝ๋๋ฆฌ์๊ฐ ์ ๋ถ๊ทน๋๋ฉด ๋ฏธํ ์ฝ๋๋ฆฌ์์ ์ํ ์ธํฌ ๋ด ์นผ์์กฐ์ ์ ๋ณํ์ ์ํ์ฌ ๋จ๊ธฐ์๋
์ค๊ฐ์์ฑ์ ์ํฅ์ ์ค ์ ์์์ ์์ฌํ๋ค.์๋ก 1
์คํ์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ 3
๊ฒฐ๊ณผ 8
๊ณ ์ฐฐ 27
์ฐธ๊ณ ๋ฌธํ 32
Abstract 35Maste
Structural Relationships between Professional Identity, Person-Job Fit, Self-Efficacy, Support for Career Development, and Job Challenge of HRD Practitioners in Korean Conglomerates
ํ์๋
ผ๋ฌธ (๋ฐ์ฌ)-- ์์ธ๋ํ๊ต ๋ํ์ : ๋์ฐ์
๊ต์ก๊ณผ, 2017. 2. ๊น์ง๋ชจ.์ด ์ฐ๊ตฌ์ ๋ชฉ์ ์ ์ฐ๋ฆฌ๋๋ผ ๋๊ธฐ์
HRD ๋ด๋น์์ ์ ๋ฌธ์ง์
์ ์ ์ฒด์ฑ๊ณผ ๊ฐ์ธ-์ง๋ฌด ์ ํฉ์ฑ, ์๊ธฐํจ๋ฅ๊ฐ ๋ฐ ๊ฒฝ๋ ฅ๊ฐ๋ฐ์ง์์ ๊ตฌ์กฐ์ ๊ด๊ณ๋ฅผ ๊ฒ์ฆํ๊ณ , ๊ตฌ์กฐ๋ชจํ์ ์ผ๋ถ ๊ฒฝ๋ก์์ ์ง๋ฌด๋์ ์ฑ์ ์กฐ์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ตฌ๋ช
ํ๋ ๋ฐ ์๋ค.
์ฐ๊ตฌ์ ๋ชจ์ง๋จ์ ๋๊ธฐ์
HRD ๋ด๋น์๋ก, ์ด ์ฐ๊ตฌ์์๋ 2015๋
๋งค์ถ์ก ๊ธฐ์ค 1,000๋ ๊ธฐ์
์ HRD ๋ด๋น์๋ก ๋ชฉํ๋ชจ์ง๋จ์ ์ค์ ํ์๋ค. ์ ๋ฌธ์ง์
์ ์ ์ฒด์ฑ์ ์ธก์ ํ๊ธฐ ์ํ ๋๊ตฌ๋ฅผ ๊ฐ๋ฐํ์๊ณ , ๊ฐ์ธ-์ง๋ฌด ์ ํฉ์ฑ, ์๊ธฐํจ๋ฅ๊ฐ, ๊ฒฝ๋ ฅ๊ฐ๋ฐ์ง์ ๋ฐ ์ง๋ฌด๋์ ์ฑ์ ๊ธฐ์กด์ ๋๊ตฌ๋ฅผ ํ์ฉํ์๋ค. ์๋ฃ ์์ง์ ์จ๋ผ์ธ ์ค๋ฌธ ์์คํ
๋ฐ ์ฐํธ์กฐ์ฌ๋ฅผ ํตํด ์ด๋ฃจ์ด์ก์ผ๋ฉฐ, ์ด 84๊ฐ ๊ธฐ์
์ HRD ๋ด๋น์ 312๋ช
์ด ์๋ตํ ์๋ฃ๋ฅผ ์์งํ์๋ค. ์ด ์ค ๋ถ์ฑ์ค ์๋ต์๋ฃ ๋ฐ ๋งํ ๋ผ๋
ธ๋น์ค ์ด์์น ์๋ฃ์ ํด๋นํ๋ ์ด 34๊ฐ์ ์๋ฃ๋ฅผ ์ ์ธํ๊ณ , ์ต์ข
๋ถ์์๋ 84๊ฐ ๊ธฐ์
์ 278๋ช
์ด ์๋ตํ ์๋ฃ๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ์ ๋ฌธ์ง์
์ ์ ์ฒด์ฑ๊ณผ ๊ฐ์ธ-์ง๋ฌด ์ ํฉ์ฑ, ์๊ธฐํจ๋ฅ๊ฐ, ๊ฒฝ๋ ฅ๊ฐ๋ฐ์ง์ ๋ฐ ์ง๋ฌด๋์ ์ฑ์ ๊ตฌ์กฐ์ ๊ด๊ณ๋ฅผ ๊ตฌ๋ช
ํ๊ธฐ ์ํ์ฌ AMOS 21.0์ ํ์ฉํ์ฌ ๊ตฌ์กฐ๋ฐฉ์ ์ ๋ชจํ์ ๋ถ์ํ์๋ค.
์ด ์ฐ๊ตฌ๋ฅผ ํตํด ์ป์ ์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ๋ ๋ค์๊ณผ ๊ฐ๋ค.
์ฒซ์งธ, ๊ตญ๋ด ๋๊ธฐ์
HRD ๋ด๋น์์ ์ ๋ฌธ์ง์
์ ์ ์ฒด์ฑ์ ์ค๋ช
ํ๊ธฐ ์ํด ๊ตฌ์๋ ์ฐ๊ตฌ๋ชจํ์ ์ฃผ์ด์ง ๊ฒฝํ ์๋ฃ์ ์ ํฉํ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค.
๋์งธ, ๋๊ธฐ์
HRD ๋ด๋น์์ ๊ฐ์ธ-์ง๋ฌด ์ ํฉ์ฑ, ์๊ธฐํจ๋ฅ๊ฐ ๋ฐ ๊ฒฝ๋ ฅ๊ฐ๋ฐ์ง์์ ์ ๋ฌธ์ง์
์ ์ ์ฒด์ฑ์ ์ ์ ์ธ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ๋ํ ๋๊ธฐ์
HRD ๋ด๋น์์ ๊ฐ์ธ-์ง๋ฌด ์ ํฉ์ฑ๊ณผ ๊ฒฝ๋ ฅ๊ฐ๋ฐ์ง์์ ์๊ธฐํจ๋ฅ๊ฐ์ ์ ์ ์ธ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ์ด๋ ๋๊ธฐ์
HRD ๋ด๋น์์ ์ ๋ฌธ์ง์
์ ์ ์ฒด์ฑ์ ํฅ์์ํค๊ธฐ ์ํด์๋ ๊ฐ์ธ-์ง๋ฌด ์ ํฉ์ฑ, ์๊ธฐํจ๋ฅ๊ฐ ๋ฐ ๊ฒฝ๋ ฅ๊ฐ๋ฐ์ง์์ ํฅ์์ํค๋ ค๋ ๋
ธ๋ ฅ์ด ํ์ํจ์ ์๋ฏธํ๋ค.
์
์งธ, ๋๊ธฐ์
HRD ๋ด๋น์์ ๊ฐ์ธ-์ง๋ฌด ์ ํฉ์ฑ ๋ฐ ๊ฒฝ๋ ฅ๊ฐ๋ฐ์ง์์ ์๊ธฐํจ๋ฅ๊ฐ์ ๋งค๊ฐ๋ณ์ธ์ผ๋ก ํ์ฌ ์ ๋ฌธ์ง์
์ ์ ์ฒด์ฑ์ ์ ์ํ ๊ฐ์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ฏธ์น๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ์ฆ, ๊ฐ์ธ-์ง๋ฌด ์ ํฉ์ฑ ๋ฐ ๊ฒฝ๋ ฅ๊ฐ๋ฐ์ง์๊ณผ ์ ๋ฌธ์ง์
์ ์ ์ฒด์ฑ์ ๊ด๊ณ์์ ์๊ธฐํจ๋ฅ๊ฐ์ด ๋งค๊ฐํจ๊ณผ๋ฅผ ์ง๋๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ๋๊ธฐ์
HRD ๋ด๋น์์ ๊ฐ์ธ-์ง๋ฌด ์ ํฉ์ฑ ๋ฐ ๊ฒฝ๋ ฅ๊ฐ๋ฐ์ง์์ด ์ ๋ฌธ์ง์
์ ์ ์ฒด์ฑ์ ํฅ์์ผ๋ก ์ฐ๊ณ๋๊ธฐ ์ํด์๋ ์๊ธฐํจ๋ฅ๊ฐ ์์ค์ ๋์ด๋ ๊ฒ์ด ํ์์ ์์ ์์ฌํ๋ค.
๋ท์งธ, ๋๊ธฐ์
HRD ๋ด๋น์์ ์ง๋ฌด๋์ ์ฑ์ ์๊ธฐํจ๋ฅ๊ฐ๊ณผ ์ ๋ฌธ์ง์
์ ์ ์ฒด์ฑ์ ๊ด๊ณ์์ ์ ์ ์กฐ์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ง๋๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๊ณ , ๊ฐ์ธ-์ง๋ฌด ์ ํฉ์ฑ๊ณผ ์ ๋ฌธ์ง์
์ ์ ์ฒด์ฑ์ ๊ด๊ณ, ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ๊ฒฝ๋ ฅ๊ฐ๋ฐ์ง์๊ณผ ์ ๋ฌธ์ง์
์ ์ ์ฒด์ฑ์ ๊ด๊ณ์์๋ ์ ์ ์กฐ์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ง๋์ง ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ์ด๋ HRD ๋ด๋น์๋ค์ ์ ๋ฌธ์ง์
์ ์ ์ฒด์ฑ์ ํฅ์์ํค๊ธฐ ์ํด์๋ ๊ฐ์ธ์ ๊ฐ์ธ-์ง๋ฌด ์ ํฉ์ฑ, ์๊ธฐํจ๋ฅ๊ฐ ๋ฐ ๊ฒฝ๋ ฅ๊ฐ๋ฐ์ง์ ์์ค์ ํฅ์์ํด๊ณผ ๋์์ ์ง๋ฌด๋์ ์ฑ ์์ค์ ์ ์ ์์ค์ผ๋ก ์ ์งํ๊ธฐ ์ํ ๋
ธ๋ ฅ์ด ์๊ตฌ๋๋ค๋ ๊ฒ์ ์๋ฏธํ๋ค.
์ด์ ๊ฐ์ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํ ๋๋ก ์ ์ํ ์ ์ธ์ ๋ค์๊ณผ ๊ฐ๋ค. ์ฒซ์งธ, ์ด ์ฐ๊ตฌ์์ ๊ฐ๋ฐํ ์ ๋ฌธ์ง์
์ ์ ์ฒด์ฑ ์ธก์ ๋๊ตฌ๋ฅผ ์ฌ๋ฌ ๋ถ์ผ์์ ํ์ฉ ๋ฐ ๊ฒ์ฆํ์ฌ ๋๊ตฌ์ ํ๋น๋๋ฅผ ํ๋ณดํ ํ์๊ฐ ์๋ค. ๋์งธ, ์ฐ๊ตฌ๋์์ ๋ฌ๋ฆฌํ์ฌ ์ ๋ฌธ์ง์
์ ์ ์ฒด์ฑ ๋ฐ ์ ํ๋ณ์ธ์ ๊ด๊ณ์ ๋ํ ๊ต์ฐจ ํ๋น์ฑ์ ๊ฒ์ฆํ ํ์๊ฐ ์๋ค. ์
์งธ, ์ด ์ฐ๊ตฌ์์์ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํ ๋๋ก ์ ๋ฌธ์ง์
์ ์ ์ฒด์ฑ๊ณผ ์ ํ๋ณ์ธ๋ค์ ๊ตฌ์กฐ์ ๊ด๊ณ๋ฅผ ์ฌํ์ธํ ํ์๊ฐ ์๋ค. ๋ท์งธ, ๊ธฐ์
๋ด HRD ๋ด๋น์์ ์์ ๋ฐ๋ฅธ ์ง๋จ์ ๊ตฌ๋ถํ์ฌ ์ ๋ฌธ์ง์
์ ์ ์ฒด์ฑ์ ์์ค๊ณผ ๊ด๋ จ ๋ณ์ธ๊ณผ์ ๊ด๊ณ์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๋ฅผ ์ํํ ํ์๊ฐ ์๋ค. ๋ค์ฏ์งธ, ์๊ธฐํจ๋ฅ๊ฐ๊ณผ ์ ๋ฌธ์ง์
์ ์ ์ฒด์ฑ์ ๊ด๊ณ์์ ํน์ ์๊ธฐํจ๋ฅ๊ฐ์ ๊ตฌ๋ถํ์ฌ ์ดํด๋ณผ ํ์๊ฐ ์๋ค. ์ฌ์ฏ์งธ, HRD ๋ด๋น์์ ์ ๋ฌธ์ง์
์ ์ ์ฒด์ฑ์ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น๋ ๋ณ์ธ๋ค์ ๊ด๊ณ๋ฅผ ๋ณด๋ค ์ข
ํฉ์ ์ผ๋ก ํ์ธํ๋ ์ฐ๊ตฌ๋ฅผ ์ํํ ํ์๊ฐ ์๋ค.I. ์ ๋ก 1
1. ์ฐ๊ตฌ์ ํ์์ฑ 1
2. ์ฐ๊ตฌ์ ๋ชฉ์ 4
3. ์ฐ๊ตฌ ๊ฐ์ค 4
4. ์ฉ์ด์ ์ ์ 6
5. ์ฐ๊ตฌ์ ์ ํ 7
II. ์ด๋ก ์ ๋ฐฐ๊ฒฝ 9
1. ๋๊ธฐ์
HRD ๋ด๋น์์ ์ ๋ฌธ์ง์
์ ์ ์ฒด์ฑ 9
2. ๊ฐ์ธ-์ง๋ฌด ์ ํฉ์ฑ 35
3. ์๊ธฐํจ๋ฅ๊ฐ 41
4. ๊ฒฝ๋ ฅ๊ฐ๋ฐ์ง์ 44
5. ์ง๋ฌด๋์ ์ฑ 46
6. ์ฐ๊ตฌ ๋ณ์ธ ๊ฐ ๊ด๊ณ 50
III. ์ฐ๊ตฌ ๋ฐฉ๋ฒ 57
1. ์ฐ๊ตฌ๋ชจํ 57
2. ์ฐ๊ตฌ๋์ 58
3. ์กฐ์ฌ๋๊ตฌ 63
4. ์๋ฃ์์ง 73
5. ์๋ฃ๋ถ์ 77
IV. ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ 83
1. ์ธก์ ๋ณ์ธ์ ๊ธฐ์ ์ ํต๊ณ๋ 83
2. ์ธก์ ๋ชจํ ๋ถ์ ๊ฒฐ๊ณผ 90
3. ์ฐ๊ตฌ๋ชจํ์ ์ ํฉ๋ ๊ฒ์ฆ 93
4. ์ฐ๊ตฌ ๋ณ์ธ ๊ฐ ์ํฅ๊ด๊ณ 94
5. ์๊ธฐํจ๋ฅ๊ฐ์ ๋งค๊ฐํจ๊ณผ 98
6. ์ง๋ฌด๋์ ์ฑ์ ์กฐ์ ํจ๊ณผ 99
7. ๋
ผ์ 110
V. ์์ฝ, ๊ฒฐ๋ก ๋ฐ ์ ์ธ 119
1. ์์ฝ 119
2. ๊ฒฐ๋ก 121
3. ์ ์ธ 124
์ฐธ๊ณ ๋ฌธํ 127
[๋ถ๋ก 1] ์ธก์ ๋ฌธํญ ์ด์ 145
[๋ถ๋ก 2] ์ธก์ ๋ฌธํญ ์ด์ ๋ด์ฉํ๋น๋ ๊ฒ์ฆ ๊ฒฐ๊ณผ 147
[๋ถ๋ก 3] ์ธก์ ๋๊ตฌ์ ์๋น์กฐ์ฌ ๋ฐ ๋ณธ์กฐ์ฌ ๊ฒฐ๊ณผ 151
[๋ถ๋ก 4] ์ค๋ฌธ์ง 161
Abstract 169Docto
๋ฏธ์ ๋ ์ง๋์ ๊ธฐ๋ก ์ ๋ณด ์ฐ๊ณ๋ฅผ ์ํ ๋ฐ์ดํฐ ๋ชจ๋ธ ์ฐ๊ตฌ
ํ์๋
ผ๋ฌธ (์์ฌ)-- ์์ธ๋ํ๊ต ๋ํ์ : ๊ธฐ๋ก๊ด๋ฆฌํ์ ๊ณต, 2017. 2. ๊นํ๊ธฐ.์ต๊ทผ ๊ธฐ๋ก ๊ด๋ฆฌ ๋ถ์ผ์์๋ ๊ธฐ๋ก์ ์์ง๊ณผ ๋ณด๊ด์ ๋์ด ๊ทธ๊ฐ ์์ฌ์จ ๊ธฐ๋ก์ ๋์ฑ ํธ๋ฆฌํ๊ฒ ์ด์ฉํ ์ ์๋ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๋ํด ๊ณ ๋ฏผํ๊ณ ์๋ค. ์ธํฐ๋ท ํ๊ฒฝ์ด ๋ฐ๋ฌํ ํ ์์ ์์๋ ์ด์ฉ์๊ฐ ์ํ๋ ๊ธฐ๋ก์ ์ฐพ๊ณ ์ ์ผ์ผ์ด ๊ธฐ๋ก๊ด์ ๋ฐฉ๋ฌธํ ํ์ ์์ด ์จ๋ผ์ธ์์์ ๊ธฐ๋ก ์ ๋ณด๋ฅผ ๊ฒ์ํ๊ณ ์ค๋ฌผ ์๋ฃ์ ๋์งํธ ์ฌ๋ณธ์ ์ด๋ํ ์ ์๋๋ก ์ง์ํด์ผํ๋ค. ๋ ๋์๊ฐ ์ฌ๋ฌ ๊ธฐ๊ด์ ์์ฅ ๊ธฐ๋ก์ ํ๋์ ๊ฒ์์ง์ (one point access)์์ ์ฐพ์๋ณด๊ณ ๊ด๋ จ ์ ๋ณด๋ฅผ ์ฐ๊ณํ์ฌ ์ดํด๋ณผ ์ ์๋๋ก ํ๊ฒฝ์ ์ ๊ณตํ ํ์๋ ์๋ค. ๊ธฐ๊ด์ ํฉ์ด์ ธ ๋ณด๊ด๋์ด ์๋ ๊ธฐ๋ก ์ ๋ณด๋ฅผ ์ฐ๊ณํ๋ ๋ฐฉ์์ ๊ธฐ๊ด ํ์ ์ ์ผ๋ก ์ด๋ฃจ์ด์ง ๊ธฐ์กด์ ๊ธฐ๋ก ์ ๋ณด ์๋น์ค์ ํ๊ณ๋ฅผ ๊ทน๋ณตํ๊ณ , ์ด์ฉ์์๊ฒ ๋์ฑ ํ๋ถํ ์ ๋ณด๋ฅผ ์ ๊ณตํ ์ ์๊ฒ ํ๋ค.
์ ๋ณด ์ฐ๊ณ์ ๋ํ ์๊ตฌ ์ฆ๊ฐ๋ ๋ฌธํ์ ์ฐ ์์ญ์์๋ ๋ง์ฐฌ๊ฐ์ง์ฌ์ ๊ฐ๋ณ ๊ธฐ๊ด์ ์์ฅ ์ ์ฐ ์ ๋ณด์ ํ์ฉ์ ์ํ ๋
ธ๋ ฅ๊ณผ ๋๋ถ์ด ๊ธฐ๊ด ์ํธํ๋ ฅ์ ํตํด ๋ฌธํ์ ์ฐ ์ ๋ณด๋ฅผ ํตํฉ์ ์ผ๋ก ์ ๊ณตํ๋ ค๋ ์๋๊ฐ ๋๊ณ ์๋ค. ๋ฌธํ์ ์ฐ์ ๊ฒฝ์ฐ ๋์ผํ ์ถ์ฒ์์ ์์ฐ๋์ด ์ฌ๋ฌ ๊ธฐ๊ด์ ํฉ์ด์ ธ ๋ณด๊ด๋์ด ์๊ฑฐ๋, ๋ค์ํ ์ถ์ฒ๋ก๋ถํฐ ์์ฐ๋์์ผ๋ ์ฃผ์ ๋ ์๋ฏธ์ ์ผ๋ก ์๋ก ์ฐ๊ด์ฑ์ ๊ฐ๋ ๊ฒฝ์ฐ๊ฐ ๋ง๋ค. ๋จ์ ๊นํ๋์ ์ํ์ ๊ตญ๋ฆฝ์ค์๋ฐ๋ฌผ๊ด๊ณผ ๊ฐ์ก ๋ฏธ์ ๊ด, ๋จ์ ๋ฏธ์ ๊ด ๋ฑ์ ์์ฅ๋์ด ์์ผ๋ฉฐ, ์ด์์ ์ฅ๊ตฐ์ ์์ ๊ณผ ๊ฑฐ๋ถ์ , ๊ท์ ๋, ๋์ค์ผ๊ธฐ๋ ๋ชจ๋ ์์ง์๋์ด๋ผ๋ ์ฃผ์ ๋ก ์ฐ๊ฒฐ๋ ์ ์๋ ๋ฌธํ์ ์ฐ์ด๋ค. ์ ๊ธฐ์ ์ผ๋ก ์ฐ๊ด๋์ด ์์ผ๋ ๋ฌผ๋ฆฌ์ ์ผ๋ก ๋ถ๋ฆฌ๋์ด ์๋ ์ด๋ฌํ ๋ฌธํ์ ์ฐ ์ ๋ณด๋ฅผ ์ฐ๊ณํ๊ณ ์ํ๋ ์๋๋ ์์ฐ์ค๋ฝ๋ค.
๋ฌธํ์ ์ฐ ์ ๋ณด์ ์ผ์ข
์ด๋ฉฐ ๋์์ ๋ฏธ์ ๊ธฐ๋ก ์ ๋ณด ๋ฒ์ฃผ์ ์ํ๋ ๋ฏธ์ ๋ ์ง๋์์ ๊ธฐ๋ก ์ ๋ณด ์ญ์ ์ ๋ณด ๊ฐ ์ฐ๊ณ๊ฐ ํ์ํ๋ค. ์ต๊ทผ ํ๋ ๋ฏธ์ ์๊ฐ๋ค์ ์์
์ค์ด์, ๋์๊ณต๊ฐ(alternative space), ๋ฏธ์ ๊ณ์ ๋ฑ์ฉ๋ฌธ ์ญํ ์ ํ๋ ๋ฏธ์ ๋ ์ง๋์๋ฅผ ์ด๋ํ๋ฉฐ ํ๋ํ๋ ๊ฒฝ์ฐ๊ฐ ๋ง๋ค. ์๊ฐ๋ค์ ๊ธฐ๊ด ๊ฐ ์ ๋์ด ๋น๋ฒํ ์ํฉ์์ ๊ธฐ๊ด ๊ธฐ๋ก ์ ๋ณด๋ฅผ ํ ๋ฒ์ ์ดํด๋ณด๋ ๊ฒ์ ํ๋ ๋ฏธ์ ์ฌ๋ฅผ ์ฐ๊ตฌํ๊ฑฐ๋ ์๊ฐ๋ค์ ํ๋ ์ฌํญ์ ์ดํด๋ณด๊ณ ์ํ๋ ๋ฏธ์ ๊ณ ์ ๋ฌธ๊ฐ๋ค์๊ฒ ๋์์ด ๋๋ค. ๋ ์ง๋์ ๊ฐ ๊ธฐ๋ก ์ ๋ณด๊ฐ ์ฐ๊ณ๋์ด ์๋ค๋ฉด ์๊ฐ๊ฐ ์ด๋ค ๋ ์ง๋์์ ์
์ฃผํ์ฌ ํ๋ํ์ผ๋ฉฐ, ๊ทธ ๊ณณ์์ ์ ์ํ ์ํ๊ณผ ์ด์ ๊ด๋ จ๋ ๊ธฐ๋ก์๋ ์ด๋ค ๊ฒ๋ค์ด ์๋์ง ๋ฑ์ ์ ๋ณด๋ฅผ ํ ๋ฒ์ ์ฐพ์๋ณผ ์ ์๊ฒ ๋๋ค.
ํ์ง๋ง ๊ทธ๊ฐ ๊ตญ๋ด์์ ์งํ๋ ๋ฏธ์ ๋ ์ง๋์์ ๊ดํ ์ฐ๊ตฌ๋ค์์๋ ๊ธฐ๋ก ์ ๋ณด ์ฐ๊ณ๋ฅผ ์ํ ๋
ผ์๋ฅผ ์ฐพ๊ธฐ ์ด๋ ต๋ค. ๋ํ ๋ฏธ์ ๋ ์ง๋์์ ๊ด๋ จ๋ ์ฐ๊ตฌ๋ค์์ ๊ธฐ๋ก์ ๊ด๋ จ๋ ๋
ผ์ ์์ฒด๋ฅผ ์ฐพ์๋ณด๊ธฐ ์ด๋ ต๊ณ , ๋๋ถ๋ถ ๋ ์ง๋์์ ์ด์ ํ์ฑํ ๋ฐฉ์์ ๋ํ ๋
ผ์์ ์น์ฐ์ณ์ ธ ์๋ ์ํฉ์ด๋ค. ํ์ง๋ง ๋ฏธ์ ๊ณ์์ ์์นด์ด๋ธ์ ๋ํ ๋
ผ์๊ฐ ํ๋ฐํด์ง๊ณ ๋ฏธ์ ๋ ์ง๋์์์๋ ์ด์ ๋ํ ํ์์ฑ์ด ์ญ์ค๋๋ ๊ฐ์ด๋ฐ, ๊ธฐ๋ก ์ ๋ณด๋ฅผ ์ฒด๊ณ์ ์ผ๋ก ๊ด๋ฆฌํ๊ณ ํ์ฉํ ์ ์๋ ๋ฐฉ์์ด ์ ์๋์ด์ผ ํ ์์ ์ด๋ค. ์ด์ ๋ณธ ๋
ผ๋ฌธ์์๋ ๋ ์ง๋์ ๊ธฐ๋ก์ ์ฒด๊ณ์ ์ผ๋ก ๊ด๋ฆฌํ๊ณ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ํ์ฉํ ์ ์๋ ๋ฐฉ์ ์ค ํ๋๋ก ๊ธฐ๋ก ์ ๋ณด์ ์ฐ๊ณ์ ๋ํ ๋ด์ฉ์ ๋ค๋ฃจ๊ณ ์ ํ์๋ค.์ 1์ฅ ์๋ก 1
์ 2์ฅ ๋ฏธ์ ๋ ์ง๋์์ ์ดํด 8
์ 1์ ๋ฏธ์ ๋ ์ง๋์์ ๊ฐ๋
8
์ 2์ ๊ตญ๋ด ๋ฏธ์ ๋ ์ง๋์์ ์ญ์ฌ ๋ฐ ์ด์ ์ฌ๋ก 11
์ 3์ฅ ๋ฏธ์ ๋ ์ง๋์ ๊ธฐ๋ก 14
์ 1์ ๋ฏธ์ ๋ ์ง๋์ ๊ธฐ๋ก์ ๊ฐ๋
๋ฐ ์ ํ 14
1. ๋ฏธ์ ๊ด ๊ธฐ๋ก 15
2. ๋ฏธ์ ๋ ์ง๋์ ๊ธฐ๋ก 18
์ 2์ ๋ฏธ์ ๋ ์ง๋์ ๊ธฐ๋ก ์ ๋ณด์ ๊ตฌ์ฑ 22
1. ๊ธฐ๋ก๋ฌผ์ ๋ํ ์ ๋ณด 25
2. ๊ธฐ๊ด์ ๋ํ ์ ๋ณด 27
3. ์ฌ๋(ํ์์ฃผ์ฒด)์ ๋ํ ์ ๋ณด 31
4. ํ์ฌ(ํ๋)์ ๋ํ ์ ๋ณด 33
์ 4์ฅ ๋ ์ง๋์ ๊ธฐ๋ก์ ๋ณด ์ฐ๊ณ๋ฅผ ์ํ ๋ฐ์ดํฐ ๋ชจ๋ธ ์ค๊ณ 35
์ 1์ ๋ฐ์ดํฐ ๋ชจ๋ธ ์ค๊ณ๋ฅผ ์ํ ์ฐธ๊ณ ๋ชจ๋ธ 36
1. ๋๋ธ๋ฆฐ ์ฝ์ด (Dubline Core) 36
2. FOAF ๋ชจ๋ธ 39
3. ์ ๋กํผ์๋ EDM ๋ชจ๋ธ 41
์ 2์ ๋ฐ์ดํฐ ๋ชจ๋ธ ์ค๊ณ 42
1. ๋ชจ๋ธ ์ฃผ์ ๊ฐ์ฒด ๊ด๊ณ ์ค์ 42
2. ํ์ฅ๋ ๋ชจ๋ธ 46
1) ๋ ์ง๋์ ์ ๋ณด ์์ญ 46
2) ์ฌ๋ ์ ๋ณด ์์ญ 51
3) ํ์ฌ ์ ๋ณด ์์ญ 56
4) ๊ธฐ๋ก๋ฌผ ์ ๋ณด ์์ญ 58
์ 5์ฅ ๊ฒฐ๋ก 66
์ฐธ๊ณ ๋ฌธํ 67
Abstract 70Maste
Production of isobutanol by pyruvate decarboxylase-deficient Saccharomyces cerevisiae
ํ์๋
ผ๋ฌธ (์์ฌ)-- ์์ธ๋ํ๊ต ๋ํ์ : ๋์๋ช
๊ณตํ๋ถ, 2014. 2. ์์งํธ.Global environmental problems and high oil prices are driving the development of technologies for synthesizing alternative liquid biofuels from renewable resources as transportation energy. Compared to ethanol traditionally used as a gasoline additive, branched-chain higher alcohols exhibit significant advantages such as higher energy density, lower hygroscopicity, lower vapor pressure and compatibility with existing transportation infrastructures. Isobutanol is regarded as a next generation transportation fuel of good quality and so microbial production of isobutanol from cellulosic biomass has been done extensively.
In this study, Saccharomyces cerevisiae was metabolically engineered to produce isobutanol. This strain has been traditionally used for industrial production of ethanol because of high tolerance against alcohols and many genetic tools. Naturally S. cerevisiae produces a little isobutanol by the valine biosynthesis pathway and the Erlich pathway.
To strengthen the isobutanol biosynthetic pathway, the modified endogenous ILV2 gene from S. cerevisiae without the mitochondria targeting sequence, the ilvC and ilvD genes from Escherichia coli and the kivD gene from Lactobacillus lactis were overexpressed in S. cerevisiae. ILV2 is coding the acetolactate synthase (ALS), ilvC and ilvD are ketoacid reductoisomerase (KARI) and dihydroxyacid dehydratase (DADH) and kivD is ketoacid decarboxylase (ADH). ALS, KARI, DADH and ADH are the enzymes necessary fo isobutanol biosynthesis. The constructed strain produced 120 mg/L isobutanol from glucose, along with production of ethanol as a major metabolite.
To improve isobutanol production through eliminating ethanol production, a pyruvate decarboxylase (Pdc)-deficient mutant (SOS4) was used as a host for isobutanol production, which is a non-ethanol producing and pyruvate accumulating strain. Pyruvate is a key intermediate for isobutanol production. When the modified endogenous ILV2 gene, ilvC and ilvD genes from E. coli and kivD gene from L. lactis were overexpressed in the SOS4, the resulting strain was able to produce 283 mg/L isobutanol from glucose in 144 h.
Acetohydroxyacid reductoisomerase and dihyroxyacid dehydratase encoded by ilvC and ilvD genes act in mitochondria of S. cerevisiae naturally. Also these enzymes are presumed to be expressed in mitochondria in the yeast because the ilvC and ilvD genes have the specific sequences for mitochondria targeting. So the modified ilvC and ilvD genes without the specific sequences were used and the resulting strain produced 326mg/L isobutanol from glucose in 144 h.
Additionally, to increase an expression level of all four genes involved in the isobutanol biosynthetic pathway, an existing GPD promoter was replaced with the truncated HXT7 promoter known as a strong promoter. The resulting strain produced 446 mg/L isobutanol from glucose in 144 h, which was about 15-fold higher than the wild type strain.
Isobutanol production from xylose that is abundant in lignocellulosic hydrolyzate would make the production of isobutanol more sustainable and economical. However S. cerevisiae cannot utilize xylose as a carbon source, the XYL1, XYL2 and XYL3 genes coding for xylose reductase (XR), xylitol dehydrogenase (XDH) and xylulokinase (XK) derivied from Schefferosomyces stipitis were introduced into the SOS4 for xylose fermentation. The resulting strain (SOS4X) accumulated pyruvate by utilizing xylose without ethanol production. By introducing the isobutanol biosynthetic system into the SOS4X, the resulting strain produced 121 mg/L isobutanol from xylose in 144h. These results suggest that S. cerevisiae might be a promising host for producing isobutanol from lignocellulosic biomass for industrial applications.ABSTRACT i
CONTENTS vi
LIST OF TABLES vii
LIST OF FIGURES โ
ท
I. INTRODUCTION 1
1. Advanced biofuel - Isobutanol 1
2. Isobutanol production in microorganisms 3
3. Isotubanol biosynthetic pathway 6
3.1. The valine biosynthesis pathway 6
3.2. The Ehrlich pathway 7
4. Compartmentalization of the whole isobutanol biosynthetic pathway into cytosol of S. cerevisiae 9
5. Promoter for efficient gene expression in yeast 12
6. Pyruvate decarboxylase-deficient S. cerevisiae 14
7. Isobutanol production from xylose 16
8. Research objectives 20
II. MATERIALS AND METHODS 21
1. Reagents 21
2. Strains and plasmids 21
2.1. Strains 21
2.2. Plasmids 25
3. DNA manipulation and transformation 30
3.1. Enzymes 30
3.2. Transformation of E. coli 30
3.3. Preparation of plasmid DNA and yeast genomic DNA 31
3.4. Isolation of DNA fragments and DNA sequencing 31
3.5. Polymerase chain reaction (PCR) 31
3.6. Yeast transformation 32
4. Media and culture conditions 32
4.1. Media 32
4.2. Inoculum 33
4.3. Cultivations 34
5. Analysis 35
5.1 Dry cell mass 35
5.2 Metabolite detection 35
5.3 Isobutanol detection 36
III. RESULTS AND DISCUSSIONS 38
1.Production of isobutanol by pyruvate decarbyoxylase-defieient S. cerevisiae (SOS4) with the isobutanol biosynthetic pathway 38
1.1. Production of isobutanol in S. cerevisiae 38
1.2. Production of isobutanol in the SOS4 42
2. Construction of the efficient isobutanol biosynthetic system 45
2.1. Evaluation of the acetolactate synthases from various microorganisms 45
2.2. Re-localization of the whole valine biosynthesis pathway into cytosol of S. cerevisiae 49
2.3. Promoter replacement to increase gene expression level of the isobutanol biosynthetic pathway 52
3. Production of isobutanol from xylose by pyruvate decarboxylase-deficient S. cerevisiae with xylose fermenting pathway and the isobutanol biosynthetic system 56
IV. CONCLUSIONS 61
V. REFERENCES 62
๊ตญ ๋ฌธ ์ด ๋ก 69
๊ฐ์ฌ์ ๊ธ 72Maste
์ ๋ฌ์์์ ์ ๋ฝ์ ํฌ๋ฆผ๋ฐ๋์์ ์ถฉ๋ํ๋๊ฐ? ์ฃผ๊ถ์ธ์ ์ฐจ์ด ์ค์ฌ์ ๊ตฌ์ฑ์ฃผ์์ ํด์
ํ์๋
ผ๋ฌธ (์์ฌ)-- ์์ธ๋ํ๊ต ๊ตญ์ ๋ํ์ : ๊ตญ์ ํ๊ณผ(๊ตญ์ ํ๋ ฅ์ ๊ณต), 2016. 8. ์ด๊ทผ.This thesis explores the reasons why Russia and Europe clash on Crimea focusing on different conceptions of sovereignty in Russia and Europe. In an effort to provide a Constructivist interpretation of the clash in the Ukrainian peninsula of Crimea, this study investigates the concepts of sovereignty adopted in Russia and Europe as a foundation for their clash.
In addressing the main research question Why do Russia and Europe clash on Crimea? the main thesis laid out is that Russia and Europes conceptions of sovereignty significantly differ, and this difference serves as a critical impetus for the clash between Russia and Europe on Crimea. The first part of the analysis demonstrates the different conceptions of sovereignty in Russia and Europe, while the second part provides the reasons for such discrepancy.
It is revealed that the conceptions of sovereignty in Russia and Europe diverge from one another at the core due to their unique national identities. Whereas the Russian concept, driven by its hegemonic identity, distinguishes legal (de jure) and real (de facto) sovereignties, the European construct of sovereignty conception, driven by the shared sense of establishing peace and equality among states, is a unitary and undiscriminating conception.
The main objective of this research was to provide a Constructivist interpretation for the clash between Russia and Europe on Crimea. This study shows that the different conceptions of sovereignty โ influenced by states national identity โ serve as a reason behind the clash, which substantiates that acknowledging national identity and discovering states understanding of foreign policy concepts could serve a useful purpose in understanding international relations.I. Introduction 1
1. The Annexation of Crimea in 2014 1
2. Why Russia 3
3. Russia and Europe 6
4. Research Question 10
5. Structure of the Thesis 11
II. Theoretical Framework and Methodology 14
1. Constructivism 14
1-1. Limitations of competing Realist Theory 14
1-2. Choice of Constructivism 17
2. Key Conceptions and Proposition 21
2-1. National Identity and Foreign Policy 21
2-2 National Identity and Conception of Sovereignty 24
2-3. Sovereignty 25
2-4. Concept of Sovereignty in Foreign Policy 29
3. Research Methodology 30
3-1. Foreign Policy Analysis 30
3-2. History Analysis 35
3-3. Discourse Analysis 36
III. Annexation of Crimea in 2014 38
1. The Annexation of Crimea in 2014 38
1-1. Overview 38
1-2. The 2014 Crimean Crisis 41
2. Different Conceptions of Sovereignty in Russia and Europe 44
2-1. De jure and de facto Sovereignty 45
2-2. Absoluteness of Sovereignty 54
IV. National Identity and Concept of Sovereignty 57
1. Different Conceptions of Sovereignty 57
2. Russian National Identity 58
2-1. National Identity in Russia 58
2-2. Imperial Legacy and Hegemonic Identity 61
2-3. Hegemonic Identity and Concept of Sovereignty 71
3. The European Identity 77
3-1. Identity of Europe 77
3-2. Legacy of the WWII and Isocratic Identity 79
3-3. Isocratic Identity and Concept of Sovereignty 87
V. Conclusion 91
1. Different Conceptions of Sovereignty in Russia and Europe 91
2. Limitations of the Study and Further Research 96
3. Concluding Remark 99
Annex 101
Bibliography 121Maste
- โฆ