35 research outputs found
์ธ์ฒด ์ํผ์ธํฌ์ ์ํ๊ด๋ด ์ฆ์์ ๊ดํ ์ฐ๊ตฌ
์ํ๊ณผ/๋ฐ์ฌ[์๋ฌธ]
[ํ๊ธ]
๊ด๋ฒ์ํ ํผ๋ถ๊ฒฐ์์ด ๋ฐ์ํ ์คํ์ ํ์์ ์ด์์ ์ธ ์น๋ฃ๋ ๋น ๋ฅธ ์์ผ๋ด์ ์๊ฐํผ๋ถ
์ด์์ ์ ์ํํ์ฌ ์ฃผ๋ ๊ฒ์ด ๋ฐ๋์งํ๋ฉฐ, ์์์ ์ผ๋ก ์ด๋ฌํ ํ์์์ ์ฌ์ฉ ๊ฐ๋ฅํ ๊ณต์ฌ
๋ถ์ ๋ถ์กฑ์ผ๋ก ํผ๋ถ์ด์์ ์ ์ํ์ ์ ํ์ ๋ฐ๊ฒ๋๋ค. ์ฌ๋ฌ ์ ์๋ค์ ์ํด ๋ค์ํ ์ฒด์ธ๋ฐฐ
์๋ฒ์ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์์ ํผ๋ถ ์ ํธ์ผ๋ก๋ถํฐ ๋์ ์ํผ์ธํฌ์ธต์ ์ป๊ธฐ ์ํ ๋ง์ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ํํ
์ฌ ์ก์ง๋ง, ์์ง๊น์ง ํจ๊ณผ์ ์ด๋ฉฐ ์ผ๊ด์ฑ์๋ ๋ฐฐ์๋ฐฉ๋ฒ์ด ์ถฉ๋ถํ๊ฒ ์๋ ค์ง์ง ์์๋ค.
๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ 111๋ช
์ ์ ์์ธ์์ ์ ๋ํ 113๊ฐ์ ํผ๋ถํธ์ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ํ๊ด๋ด ๋ฐฐ์์ ์
ํํ์ฌ ๊ฐ์ฅ ํจ๊ณผ์ ์ธ ์ํผ์ธํฌ์ ๋ฐฐ์๋ฒ์ ์ฐ๊ตฌํ๊ณ , ๋ฐฐ์์ธํฌ์ ์ฑ์ฅํน์ฑ์ ๊ด์ฐฐํ์์ผ
๋ฉฐ, ๋ํ ์ฌ๋ฌ ์๋ฌผํ์ ํน์ ํํ์ ์ ์ฌ๋ฅผ ๋ฐฐ์์ก์ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ, ์ด๋ค์ด ๋ฐฐ์ ์ํผ์ธํฌ์
์ฆ์๊ณผ ์ฑ์ฅ์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ ์กฐ์ฌํ์ฌ ๋ค์๊ณผ ๊ฐ์ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ์ป์๋ค.
1. ํผ๋ถ ๋ฏธ์ธ์ ํธ์ 0.25% trypsin-0.1% ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA)๋ก ์ฒ
์นํ ๋ฐฐ์์์ ์ ํธ์ฃผ๋ณ์ ์ํผ์ ์ธํฌ์ ํ๋ฐํ ์ฆ์์ ๋ณด์์ผ๋, 0.05% collagenase๋ฅผ
์ฒ์นํ ๋ฐฐ์์์๋ ์ํผ์ ์ธํฌ๋ณด๋ค๋ ์ฌ์ ์์ธํฌ์ ํ๋ฐํ ์ฆ์์ด ๋ณด์๋ค. ํจ์๋ฅผ ์ฒ์น
ํ์ง ์์ ๊ตฐ์์๋ ์ธํฌ์ ์ฆ์์ ๊ฑฐ์ ๊ด์ฐฐํ ์ ์์๋ค.
2. ๋ฐฐ์์ธํฌ์ ์ฑ์ฅ ์์์ 0.25% trypsin-0.1% EDTA๋ก ์ฒ์นํ ๋ฐฐ์ 5์ผ์ ์ํผ์ ์ธํฌ
์ ํ๋ฐํ ์ฆ์์ ๋ณด์์ผ๋ฉฐ, ๋ฐฐ์ 10โผ14์ผ์ ๋์ฑ ์ฆ์๋์ด ์ ํธ์ฃผ์์ ํ์ฑ๋ ์ํผ์
์ธํฌ์ธต์ ๊ด์ฐฐํ ์ ์์๊ณ , ์ด๋ฌํ ์ํผ์ ์ธํฌ์ธต๋ด์ ์ฐ๋ฐ์ ์ผ๋ก ๋ถ๊ท์น์ ์ธ ๋ค์ธํฌ์ธต
์ด ์ด๋ฃจ์ด์ก์ผ๋ฉฐ, ์ฆ์์ธ๊ณฝ๋ถ๋ ๋จ์ธต์ผ๋ก ์ด๋ฃจ์ด์ ธ ์์๋ค. ๋ฐฐ์์ฉ๊ธฐ ํ๋ฉด์ ๋ถ์ฐฉํ ์ ํธ
์ ์์น๊ฐ ์๋ก ๊ทผ์ ํ ๊ฒฝ์ฐ์๋ ์ ํธ์์ ์๋ผ๋์จ ์ํผ์ ์ธํฌ๊ฐ ์ตํฉํ์ฌ ์ํธ์ฐ๊ฒฐ๋
์ธํฌ์ธต์ ํ์ฑํ์๋ค.
3. Keratin์ ๋ฐ์ํ๋ ํน์ดํญ์ฒด๋ฅผ ์ด์ฉํ ๋ฉด์ญํจ์ ์ผ์๊ฒ์ฌ๋ ๋ฐฐ์ ์ฆ์๋ ์ํผ์ ์ธ
ํฌ์์ ์์ฑ๋ฐ์์ ๋ณด์์ผ๋ฉฐ, ์ด๋ฌํ ์์ฑ๋ฐ์์ ๋๋ถ๋ถ ๋ค์ธํฌ์ธต์ ์์ธต์์ ๋ํ๋ ๋ค
์ธํฌ์ธต์ด ์ธต์ํ๊ฐ์ด๋ฃจ์ด์ง ๋ถํ๋ ์ํผ์ธํฌ์ธต์์ ํ์ธํ์๋ค.
4. Crude interleukin-6๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ ๋ฐฐ์์์ ์ ์ํ๊ฒ ๋์ ์ํผ์ธํฌ์ ์ฆ์์ด ๊ด์ฐฐ๋์
๊ณ ,2-mercaptoethanol, cholera toxin, epidermal growth factor, recombinant interleuk
in-1, recombinant tumor necrosis factor๋ ์ ์ํ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น์ง ๋ชปํ๊ฑฐ๋ ์ฝ๊ฐ ์ต์ ํ
๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ํ๋๋ค.
5. ํผ๋ถ์กฐ์งํธ์ ํด๋ถํ์ ๋ถ์์ ๋ฐ๋ฅธ ์ํ๊ด๋ด ์ํผ์ธํฌ์ ์ฆ์์ ๋ํด๋ถ ํผ๋ถ์ ํ
ํผ์์ ์ฑ์ทจํ์ ๊ฒฝ์ฐ ์ฆ์์ด ์ฆ๊ฐ๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์๊ณ , ํผ๋ถ ์ ์ธต๋ณด๋ค ์์ ๋ถ๋ถ์ธต ํผ๋ถ๋ก
๋ฐฐ์ํ์ ๋ ์ฆ์์ด ์์์๊ฒ ์ฆ๊ฐํ์๋ค.
์ด์์ ๊ฒฐ๊ณผ๋ก, ์ธ์ฒด ์ํผ์ธํฌ์ ์ํ๊ด๋ด ๋ฐฐ์์ ์ต์ ์กฐ๊ฑด์ ํผ๋ถ ๋ฏธ์ธ์ ํธ์ 0.25% t
rypsin-0.1% EDTA๋ก ์ฒ์นํ ํ ์ด๋ค์ ๋ฐฐ์์ฉ๊ธฐ ํ๋ฉด์ ๊ทผ์ ํ๊ฒ ๋ถ์ฐฉ์์ผ ๋ฐฐ์ํ ๊ฒฝ์ฐ๋ก
์จ, ์ด๋์ ์ธํฌ์ฆ์์ผ๋ก ์ํธ์ฐ๊ฒฐ๋์ด ๋ฉด์ ์ด ํ์ฅ๋ ์ํผ์ธํฌ์ธต์ ์ป์ ์๊ฐ ์๊ณ , ํน
ํ crude interleukin-6์ ์ฌ์ฉ์ผ๋ก ์ด์๊ฐ์ ์ธ์ฒด ์ํผ์ธํฌ์ ๋ฐฐ์์ ๋์ฑ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก
์ํํ ์ ์์ผ๋ฆฌ๋ผ๊ณ ์ฌ๋ฃ๋๋ค.
Study on the Growth Charaeteristics of In Vitro Cultured Human Epidermal Cells
Dong Chul Kim
Department of Medical Science The Graduate School, Yonsei Uniuenity
(Directed by Professor Young Ho Lee, M.D.)
Skin autograft is an ideal procedure to resurface burn wounds of patients with
extensive burns. However, since the availability of autogenous skin tissue is
practically limited in such patients, many attempts were made by researchers to
obtain expanded tissue or cell sheets from tiny skin fragments using various in
vitro culture techniques. Nevertheless, the effective means for such cultures have
not been fully established.
The present study was undertaken to investigate the most effective procedures for
in vitro cultivation of human epidermal cells using 113 skin fragments from 111
normal subjects. Growth characteristics of cultured cells as well as the effects of
various biological and chemical agents on their growth were evaluated.
The results were summarized as folluws:
1. Treatment of minced skin fragments with 0.25% trypsin-0.1%
ethylenediaminetetraacetic acid(EDTA) resulted in an active proliferation of
epithelioid cells around the fragments, whereas similar treatment with 0.05%
collagenase showed an overgrowth of fibroblasts. In control cultures of the
fragments not treated with enzymes, little growth of cells was observed.
2. In culture of skin fragments treated with 0.25% trypsin-0.1% EDTA, the
outgrowth of epidermal cells from the edges of explants was observed at 5 days of
culture, and thereafter rapidly multiplied and formed an extended cell layer which
showed sporadic multilayered cell colonies at 10-14 days. In cases where the
culture explants were attached closely, cells located in the periphery of the
outgrown monolayers from each fragment formed bridges and ultimately the cell
monolayers were fused together to form doubly expanded cell layers.
3. Detections of keratin in cultured cells, using an immunoperoxidase assay, have
revealed that cells showing a typical pink-brown color as a positive reaction were
located mostly in the upper portion of mutilayered cell colonies.
4. Crude interleukin-6 added in culture media significantly increased the
proliferation of epidermal cells, whereas 2-mercaptoethanol, cholera toxin,
epidermal growth factor, recombinant interleukin-1, and recombinant tumor necrosis
factor had little or no effects.
5. Skin fragments from thigh or foreskin with thin split thickness showed
relatively increased proliferations of epidermal cells.
From these results, it can be concluded that the optimal in vitro culture
condition to obtain expanded human epidermal cells was the seeding of the minced
skin fragments closely following treatment with 0.25% trypsin-0.1% EDTA. This could
be achieved more effectively by the addition of crude interleukin-6 in the culture
medium.restrictio
์ค๋ฑ์ฒด์ก ์ถ๊ตฌ๋จ์์ ์ ์ฉ๋ ์ดํด์ค์ฌ๊ฒ์์์ ์ฌ๋ก์ฐ๊ตฌ
ํ์๋
ผ๋ฌธ(์์ฌ)--์์ธ๋ํ๊ต ๋ํ์ :์ฒด์ก๊ต์ก๊ณผ,2004.Maste
์์ค๋๊ฐ ๋ํ๋ ํด๋ฆฌ์์ธํธ๋ ์ ํํจ๊ณผ์ ์๊ธฐ์ ํญ ์ฐ๊ตฌ
Thesis (master`s)--์์ธ๋ํ๊ต ๋ํ์ :๋ฌผ๋ฆฌํ๊ณผ,1998.Maste
๊ธฐ์ ์ ์ํ๊ณผ ๋น์ํ ๊ธ์ต๊ธฐ๊ด ์ฐจ์ ๊ธ ์ด์ฉ์ ๊ดํ ์ฐ๊ตฌ
ํ์๋
ผ๋ฌธ(์์ฌ)--์์ธ๋ํ๊ต ๋ํ์ :๊ฒฝ์ ํ๋ถ ๊ฒฝ์ ํ์ ๊ณต,1999.Maste
์์ฑ๋ฐฉ์ก ์์ ์ฉ ์ด๋์ฒด ํ์ฌํ ์๋์ถ์ ์ํ ๋ ์์คํ ์ ๊ดํ ์ฐ๊ตฌ
์ ๊ฒฝ์กฐ์ ์ด ๋ฐฑ์ ํผ๋ถํ ์์กด์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ ๋ํ ์คํ์ ์ฐ๊ตฌ
์ํ๊ณผ/์์ฌ[ํ๊ธ]
ํผ๋ถํ ์์กด์ ์ฑํ์ธ๊ณผ ์์ญ์์ ์ค์ํ ๋ฌธ์ ์ ํ๋๋ก ํผ๋ถํ ์์กด์ ์ฆ์ง์ํค๊ธฐ ์
ํ์ฌ ๋ง์ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ํํ์ฌ ์ก๋ค. ์ ๊ฒฝ์กฐ์ง์ด ํผ๋ถ์์ ํ๋ฅ์ ์กฐ์ ๊ณผ ๋ถํฌ์ ์ค์ํ ์ญํ
์ ํ๊ณ ์์ผ๋ ํผ๋ถํ ์์ฐฉ์ ๋ฏธ์น๋ ๊ธฐ๋ฅ์ ์ ๊ฒฝ์ง๋ฐฐ ํจ๊ณผ์ ๋ํ์ฌ๋ ํ์คํ ๋ฐํ์ ธ
์์ง ์๋ค. ๋ฏธ์ธํ๋ฅ ์ํ์ ๋ฏธ์น๋ ๋ด์ธ์ฑ ์ ๊ฒฝ์กฐ์ (endogenous neural regulation)์
์์ค์ด ํผ๋ถํ ๊ดด์ฌ ์์ธ์ ํ๋๋ก ์ถ์ ๋ ์ดํ Jonsson๋ฑ(1975), Finseth์ Adelberg (1
978)๋ฑ์ ์ฌ๋ฌ ์ ์๊ฐ ์ ๊ฒฝ์ข
๋ง๊ธฐ (neural receptor )์ ์ฝ๋ฌผ์ ์ธ ์ฒ๋ฆฌ๋ฅผ ํ์ฌ ํผ๋ถํ ์
์ฐฉ์ ์ฆ์ง์ ์๋ํ์ฌ ์์ผ๋ ๊ทธ ๊ธฐ์ ์ ์ถฉ๋ถํ ๋ฐํ์ง์ง ์๊ณ ์๋ค. ํผ๋ถํ ์์กด์ ๋ฏธ์น
๋ ๋ด์ธ์ฑ ์ ๊ฒฝ์กฐ์ ์ ํจ๊ณผ์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๋ ํผ๋ถํ ์์กด ์ฆ๋์ ์ฐ์ฌ์ง ์ธ์ธ์ฑ ์ ๊ฒฝ์กฐ์ (e
xogenous neural regulation)์ ๋ฐ๋ฌ์ ์ ๋ํ ๊ฒ์ด๋ค. ์ด ์คํ์์๋ ๋ฐฑ์์ ๋ฐฐ๋ถ์ 2ร
10ใ ํฌ๊ธฐ์ ์ ๊ฒฝ์ง๋ฐฐ๊ฐ ์ ๊ฑฐ๋ ์์ํ ํผ๋ถํ(denervated random pattern flap)๊ณผ ์ ๊ฒฝ
์ง๋ฐฐ๋ฅผ ์ ์งํ ์์ํ ํผ๋ถํ(innervated random pattern flap)์ ์์ฑํ์ฌ ์์ ํ 7์ผ์
์์กด๋ฉด์ ์ ๋น๊ต ๊ด์ฐฐํ๋ฉฐ, ๊ต๊ฐ์ ๊ฒฝ ์ฐจ๋จ์ ์ธ guanethidine ๊ณผ ๋ถ๊ต๊ฐ์ ๊ฒฝ ์ฐจ๋จ์ ์ธ at
ropine ์ ์ ์ ์ ์ผ๋ก ํฌ์ฌํ์ฌ ํผ๋ถ๊ด ์์กด์ ๋ฏธ์น๋ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ด์ฐฐํ์ฌ ๋ค์๊ณผ ๊ฐ์ ๊ฒฐ๊ณผ
๋ฅผ ์ป์๋ค
์ฒซ์งธ, ์ ๊ฒฝ์ง๋ฐฐ ํผ๋ถํ์ 80.9 %์ ํ๊ท ์์กด์จ์ ๋ณด์ธ ๋ฐ๋ฉด ๋น์ ๊ฒฝ์ง๋ฐฐ ํผ๋ถํ์ 58.3
%์ ํ๊ท ์์กด์จ์ ๋ณด์ฌ์ฃผ์ด, ๋ด์ธ์ฑ ์ ๊ฒฝ์กฐ์ (endogenous neural regulation)์ ์์ค์ด
_ํผ๋ถํ ๊ดด์ฌ์ ์ค์ํ ์ญํ ์ ํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค.
๋์งธ, ์ ๊ฒฝ์ง๋ฐฐ ํผ๋ถํ์ ๊ต๊ฐ์ ๊ฒฝ์ฐจ๋จ์ ์ธ guanethidine์ ์ ์ ์ ์ผ๋ก ํฌ์ฌํ ๊ฒฝ์ฐ์
์ ํผ๋ถํ์ ํ๊ท ์์กด์จ์ 69.5 %์ด์๊ณ , ๋ถ๊ต๊ฐ์ ์ ์ฐจ๋จ์ ์ธ atropine์ ์ ์ ์ ์ผ๋ก ํฌ
์ฌํ ๊ฒฝ์ฐ์์ ํผ๋ถํ์ ํ๊ท ์์กด์จ์ 59.0%๋ก ๋ํ๋, ๋์กฐ๊ตฐ์ ์ ๊ฒฝ์ง๋ฐฐ ํผ๋ถํ์ ์
์กด๋ฉด์ ์ ๋นํ์ฌ ๊ฐ๊ฐ ํ์ ํ ํผ๋ถํ์ ์์ค์ ๋ณด์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ํผ๋ถํ ๊ดด์ฌ๋ฅผ ์ด๋ํ๋
๋ด์ธ์ฑ ์ค๊ฒฝ์กฐ์ ์ ์์ค์ ๊ต๊ฐ์ค๊ฒฝ์กฐ์ (adrenergic regulation)๊ณผ ๋ถ๊ต๊ฐ์ ๊ฒฝ์กฐ์ (chol
inergic regulation) ๋๊ฐ์ง ๋ชจ๋๊ฐ ๊ด์ฌํ๊ณ ์์์ ๋ณด์ฌ ์ฃผ์๋ค.
[์๋ฌธ]
Numerous pagers concerning improved flap survival have been published in the
field of Plastic Surgery. With the suggestions that loss of endogenous neural
regulation accounts for flap necrosis , many authors attempted to improve flap
survival with pharmacological treatment on neural receptor sites. It would be
expected that investigation for effects on functional endogenous neural regulation
to flap survival mar further advance exogenous neural manipulation for improvement
of flap survival.
In this study, the effects of functional neural regulation on flap survival was
observed on the experimentally made innervated and denervated flaps in rats . Also
observed was the effects on flap survival by administration to sympathetic neuronal
blocking agent (Guanethidine) and parasympathetic postganglionic blocking agent
(Atropine). In results, the innervated flaps were survived significantly more than
the denervated flaps. The blocking of sympathetic innervation showed flap necrosis
more than the innervated flaps and so as the parasympathetic blocking did the same
results .
In conclusion, the loss of the endogenous neural regulation on flap survival is
directly related to flap necrosis, and adrenergic regulation as well as cholinergic
regulation have a significant role in flap survival.restrictio