Adenosine의 cAMP 신호경로 활성화를 통한 검은콩의 항혈소판 작용

학위논문 (박사)-- 서울대학교 대학원 : 약학과, 2013. 2. 정진호.많은 임상연구들을 통해서 콩 (Glycine max)이 심혈관계에 유익한 영향을 준다는 사실이 알려져 있다. 다양한 콩들 중에서 검은콩은 항산화, 항염증, 항암작용 등에 있어서 다른 콩들에 비해 강한 생리활성을 보인다는 보고들이 있었다. 그러나 검은콩이 심혈관계에 미치는 영향에 대한 연구는 심도 있게 이루어지지 않았다. 본 연구에서는 검은콩 추출물이 혈전질환에 있어서 주요한 역할을 하는 혈소판 활성화에 미치는 영향에 대해 연구하였다. 검은콩 추출물은 collagen에 의한 혈소판 응집에 대해 강한 억제효과를 보인 반면, 노란콩 추출물은 억제효과를 보이지 않았다. 또한 검은콩 추출물은 혈소판과 다른 혈구 세포 및 혈관조직과의 상호작용에 관여하는 serotonin 분비, P-selectin 발현, thromboxane A2 생성도 억제하였다. 이러한 in vitro 실험 결과들은 ex vivo 혈소판 응집 실험과 in vivo 혈전 생성 시험계를 통해 검증되었다. 검은콩 추출물을 경구 투여한 경우 collagen에 의한 혈소판 응집을 억제하였으며, FeCl3로 유도된 정맥 혈전 생성 또한 저해하였다. 반면, 검은콩 추출물은 항혈소판 작용의 대표적인 부작용인 혈액응고이상 및 출혈에는 영향을 주지 않았다. 이러한 결과는 심혈관계 질환의 예방 및 혈행 개선에 있어서 검은콩의 활용 가능성을 뒷받침한다. 검은콩 추출물의 항혈소판 작용에 대한 활성성분의 분리는 collagen에 의한 혈소판 응집 억제 효과를 토대로 bioassay-directed fractionation을 통해 이루어졌다. 단일 활성성분으로 분리된 분획은 NMR 분석과 ESI-MS 분석을 통해 adenosine으로 확인되었으며, HPLC-UV 분석과 혈소판 응집 억제 활성을 비교하여 검증하였다. 이를 토대로 검은콩 추출물의 항혈소판 작용에 대한 작용기전 및 adenosine의 역할에 대한 연구를 진행하였다. 검은콩 추출물은 cAMP 신호경로를 매개로 세포 내 calcium 증가, GP IIb/IIIa 발현, fibrinogen 부착을 저해하였으며, 최종적으로 혈소판의 부착 및 응집을 억제하였다. 또한 adenosine에 의해 활성화되어 cAMP를 생성하는 adenylyl cyclase에 대한 길항제들을 전처리한 결과, adenosine 및 검은콩 추출물에 의한 혈소판 활성화 억제 효과들이 저해되었다. 이러한 결과들은 검은콩 추출물에 의한 항혈소판 작용에 있어서 활성성분인 adenosine의 cAMP 신호경로 활성화가 주요한 역할을 한다는 것을 보여주었다. 본 연구를 통하여 검은콩 추출물에 의한 항혈소판 작용의 기전을 규명하였으며, 콩에서 adenosine의 생리적 활성효과에 대한 활성성분으로서의 역할을 제시하였다.Many clinical trials have demonstrated the beneficial effects of soybean (Glycine max) on general cardiovascular health. Among a variety of soybeans, black soybean is known to display diverse biological activities superior to yellow or green soybeans such as in antioxidant, anti-inflammatory and anticancer activities. However, few studies have been directed on the effect of black soybean on cardiovascular function. In this study, we aimed to investigate the effect of black soybean extract (BB) on platelet activation, a key contributor to thrombotic diseases. In the freshly isolated human platelets, BB has shown potent inhibitory activity on collagen-induced platelet aggregation while yellow soybean extract had only marginal activity. BB also attenuated serotonin secretion and P-selectin expression, important factors for the platelet-tissue interaction along with thromboxane A2 formation. These in vitro results were further confirmed in ex vivo platelet aggregation measurement and in vivo venous thrombosis model where oral administration of BB reduced collagen-induced platelet aggregation and FeCl3-induced thrombus formation significantly. Of particular note, administration of BB didn't increase coagulation disorder and bleeding risks, a common and severe side effect of antiplatelet drugs. A potential active ingredient for anti-platelet effects of BB was isolated and identified to be adenosine through bioassay-directed fractionation and NMR and ESI-MS analysis. These results indicate that black soybean can be a novel dietary supplement for the prevention of cardiovascular risks and the improvement of blood circulation. We further elucidated the molecular mechanism of BB-mediated anti-platelet activity and demonstrated the significant role of adenosine in BB-induced health effects. Adenosine-cAMP signaling is found to be responsible for BB-mediated effects, resulting in inhibition of collagen-stimulated platelet activation such as intraplatelet calcium increase, adhesion receptor GP IIb/IIIa expression, fibrinogen binding and further platelet adhesion/aggregation. Taken together, we provide a complete understanding for molecular mechanism of BB-induced anti-platelet activity and a new insight into the role of adenosine as a bioactive compound in soybeans.초 록 i 목 차 iii List of Figures v List of Abbreviations vii 서 론 1 I. 심혈계질환과 혈소판 1 심혈관계 질환과 혈전질환 1 혈전 생성에서의 혈소판의 역할 2 심혈관계 질환에서의 항혈소판제 적용 3 II. 콩과 검은콩 6 콩의 생리활성 6 검은콩의 생리활성 6 콩의 활성성분 7 III. 연구 목적 8 실 험 방 법 10 I. 시약 및 시료 준비 10 시약 10 콩의 추출 및 분리 11 혈액 및 혈소판 준비 11 II. 혈소판의 활성화 측정 12 혈소판 응집 측정 및 관찰 12 P-selectin의 발현 측정 13 Serotonin의 분비 측정 13 Thromboxane A2 생성 측정 14 II. 동물 실험 14 In vivo 정맥 혈전 생성 측정 및 관찰 14 Clotting time 측정 15 Bleeding time 측정 16 III. 활성성분 분리 및 분석 16 활성성분 분리 16 활성성분 분석 17 혈중 adenosine 분석 17 Adenosine의 혈중 안정성 측정 18 IV. 작용기전 연구 18 혈소판-collagen 부착 측정 18 세포 내 Ca2+ 농도 측정 19 GP IIb/IIIa 발현 측정 19 cAMP 측정 20 Fibrinogen binding 측정 20 V. 통계처리 21 실 험 결 과 22 I. 콩 추출물의 항혈소판 및 항혈전 작용 22 II. 검은콩 추출물의 활성성분 분리 및 분석 34 III. 검은콩 추출물의 작용 기전 연구 44 고 찰 58 참 고 문 헌 66 Abstract 79Docto

Cyclin-dependent protein kinase Cdk2 plays an essential role in etoposide-induced apoptosis in HeLa cells Etoposide에 의해 유도된 HeLa cells의 apoptosis 과정에서 CDKs의 기능적 역할 규명에 관한 연구

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기업다각화와 영업활동 현금흐름 조정

학위논문(석사)--서울대학교 대학원 :경영대학 경영학과,2020. 2. 이용규.This study examines the existence of possible association between corporate diversification and firms tendency to inflate reported cash from operations(CFO) in the statement of cash flow. Cash flow management is distinct from earnings management in an aspect that it looks at managers manipulation of CFO on financial statement by classification and timing, alternative to accruals. Diversification is positively related to abnormal level of CFO, but their statistical significance is slightly mere in the full sample, if no adjustment is done to a specific firm quality. Nevertheless, from the testing of the sub-samples separately distinguished for higher level of financial distress or greater CFO value relevance to firms stock return, I was able to observe statistically stronger positive relationship between diversification and upward management of CFO.본 논문은 기업다각화와 기업의 현금흐름표 상 영업현금흐름 보고를 조정하는 경향과의 관계에 대하여 연구한다. 영업현금흐름 조정은 발생액변화에 초점을 맞추는 이익조정과는 달리 경영진의 재무제표상의 현금흐름 분류와 보고 시점의 차이를 통하여 실현된다. 본 논문은 기업이 다각화를 통하여 현금흐름 조정에 유리한 환경과 기회를 가질 때 현금흐름 조정에 임하는지에 대하여 분석한다. 기업다각화는 재량적 영업현금흐름과 양의 관계를 가지나 그 통계적 유의미성은 기업 전체를 본 샘플에서는 그 크기가 아직 미미하다. 그러나 기업이 재무적 불건전성이 높은 경우 또는 기업의 영업현금흐름이 주가와 관련성이 상대적으로 높은 경우 다각화와 영업현금흐름 상향조정과의 양의 관계가 더 커지는 것을 관찰할 수 있다. 또한 기업 지배구조의 질을 통제하더라도 기업다각화와 영업현금흐름 조정의 양의 관계간의 유의미성이 지속적으로 나타났다.1. Introduction 1 2. Literature Review 5 2.1. Earnings Management 5 2.2. Cash Flow Management 7 2.3. Corporate Diversification 9 3. Hypotheses Development 11 4. Sample 14 5. Research Design 15 6. Empirical Results 18 7. Conclusion 23 Appendix 25 8. Reference 27 국문초록 38Maste

금은화로부터의 분리 성분이 shear stress에 의한 혈소판 활성 억제에 미치는 영향

학위논문(석사) --서울대학교 대학원 :약학과,2008.2.Maste

현대 도시에서 한옥의 의미 : 서울 북촌의 사례 연구

학위논문(석사)--서울대학교 대학원 :인류학과 인류학전공,2003.Maste

A simulation study of the semileptonic decay B - l v at the BELLE experiment

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충청남도 재난안전연구센터 소식지 제2호-우리나라의 지진방재 정책과 대응방향

지진 및 지진파의 속성을 살펴보고, 그동안 우리나라의 지진방재 정책 흐름과 대응방향 모색 1. 배경 및 필요성 2. 지진과 지진파 3. 1900년 이후 국내외 주요 지진사례 4. 우리나라 지진방재 정책의 변화추

Effect of External Magnetic Field on Reduction Rate of Magnetite Ore

MasterThe reduction behavior of magnetite by hydrogen and H2-CO gas mixtures with applied magnetic field was investigated. Metallization of magnetite under Curie temperature with different external magnetic field strength and H2/CO gas ratio were investigated by thermo gravimetric analysis, TGA. The reduction rate increased with external magnetic field and hydrogen gas atmosphere. There was no wustite formation at below Curie temperature of magnetite. In order to find out external magnetic field effect on reduction of magnetite, two type of magnetite were utilized, pellet and powder. When powdered sample of magnetite were used, it was possible to observe enhancements of the reduction rate. Because the particles in the presence of an external magnetic field had highly exposed surface area to the reduction gas. In addition, the effect of reduction temperature, reducing agents, ore types, particle size, and specimen shape on the metallization behavior of magnetite below the Curie temperature with different external magnetic field strengths were investigated visually. The elemental distribution in the reduced magnetite were clarified using the BET, XRD, SEM, and EPMA method

북한 지하 대규모 발파의 발파원 특성 및 한반도 주변 지각 속도 구조 연구

학위논문 (박사)-- 서울대학교 대학원 : 자원공학과, 2011.2. 신창수.Docto

회절지오토모그래피를 이용한 지표레이다 자료의 영상화

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