Screening of Marine Drugs Targeting the Nuclear Receptor with Identification of Exfoliazone in Inducing Apoptosis of HepG2 Cells through Nur77 Apoptotic Pathway

核受体是目前全球药物开发的重要靶点，孤儿受体Nur77是核受体超家族的重要成员，具有多种生物学功能，与细胞凋亡的发生有重要关系，是药物开发的关键靶点。海洋是一个巨大的天然产物宝库，海洋天然活性成分的发现是海洋药物研发的基础。本研究以核受体Nur77为靶点，通过RT-PCR法，从1000多种海洋天然化合物中筛选出一批能够诱导肿瘤细胞Nur77mRNA表达的化合物，之后通过研究化合物对HepG2细胞PARP蛋白的切割作用以及细胞免疫染色方法观察化合物是否诱导HepG2细胞Nur77出核，从而筛选出一种生物碱——Exfoliazone，并对其抗肿瘤作用及机制进行探讨。 我们的研究结果表明，Exfo...Nuclear receptors represent one of the most important drug targets. Nur77, an important member of the nuclear receptor superfamily, is such an ideal target for drug discovery due to its involvement in the mediation of the apoptotic effect of various apoptosis-inducing agents. In this study, we screened more than 1000 compounds of marine drugs that may target nuclear receptor Nur77 apoptotic pathwa...学位：理学硕士院系专业：生物医学研究院_化学生物学学号：2052007115099

Exfoliazone通过诱导细胞凋亡抑制HepG2细胞体外增殖

探讨Exfoliazone对肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响.采用细胞培养技术,用不同浓度的药物在一定的时间内处理细胞株,应用MTT比色法检测Exfoliazone对HepG2细胞体外生长的抑制作用;4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)荧光染料染色,显示凋亡细胞形态;用Western-Blotting检测聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)蛋白的表达;Annexin V/PI双染检测Exfoliazone对HepG2细胞凋亡的影响.Exfoliazone可抑制HepG2细胞的生长,并呈现剂量和时间的抑制,在药物处理24、48和72 h后,半数细胞抑制浓度(IC50)分别为35、16和8μmol/L.进一步研究表明,Exfoliazone可诱导PARP切割,细胞出现核质浓集和凋亡小体等典型的凋亡形态学特征,Annexin V/PI染色证实Exfoliazone能诱导HepG2细胞凋亡,并且以早期凋亡为主.Exfoliazone可能通过诱导HepG2细胞凋亡抑制癌细胞的生长