基因探针和PCR对鲤吉陶单极虫的检测

采用液氮冷冻研磨法破碎吉陶单极虫（Ｔｈｅｌｏｈａｎｅｌｌｕｓ ｋｉｔａｕｅｉ）孢子、按常规法提取其基因组ＤＮＡ。取ＤＮＡＥｃｏＲＩ消化 ，采用低熔点琼 糖回收法制备大（３．０－１５．０ｋｂ）、小（）．５－３．０ｋｂ）片段将其克隆于ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ｋｓ Ｅｃｏ ＲＩ位点，经α＝互补现象，酶切鉴定和虫体ＤＮＡ生物素标记探针筛选，构建了含２３个克隆的基因文库，克隆片段介于０．９－６．８ｋｂ之间

基因探针和PCR对鲤吉陶单极虫的检测

采用液氮冷冻研磨法破碎吉陶单极虫（Ｔｈｅｌｏｈａｎｅｌｌｕｓ ｋｉｔａｕｅｉ）孢子、按常规法提取其基因组ＤＮＡ。取ＤＮＡＥｃｏＲＩ消化 ，采用低熔点琼 糖回收法制备大（３．０－１５．０ｋｂ）、小（）．５－３．０ｋｂ）片段将其克隆于ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ｋｓ Ｅｃｏ ＲＩ位点，经α＝互补现象，酶切鉴定和虫体ＤＮＡ生物素标记探针筛选，构建了含２３个克隆的基因文库，克隆片段介于０．９－６．８ｋｂ之间

鲤吉陶单极虫免疫原性的研究

以鲤吉陶单极虫孢子的可溶性抗原 ,采用 B淋巴细胞杂交瘤融合技术制备了 4A8、6 B8、7B93株杂交瘤细胞 ,并用该抗原免疫新西兰白兔制备了高免血清。通过对虫体进行抗原检测、定位和 Western- blot试验 ,结果发现 :4A8、6 B8、7B9和多抗经间接 EL ISA可检出抗原的最低质量浓度分别为 0 .14、0 .2 0、0 .32和 0 .86 mg/ L;IFA定位显示 ,单、多抗检出的抗原都定位于虫壁 ,其中 4A8的抗原主要位于虫体后部 (胚核附近 ) ,6 B8和 7B9的抗原