基因探针和PCR对鲤吉陶单极虫的检测

Abstract

采用液氮冷冻研磨法破碎吉陶单极虫（Ｔｈｅｌｏｈａｎｅｌｌｕｓ ｋｉｔａｕｅｉ）孢子、按常规法提取其基因组ＤＮＡ。取ＤＮＡＥｃｏＲＩ消化 ，采用低熔点琼 糖回收法制备大（３．０－１５．０ｋｂ）、小（）．５－３．０ｋｂ）片段将其克隆于ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ｋｓ Ｅｃｏ ＲＩ位点，经α＝互补现象，酶切鉴定和虫体ＤＮＡ生物素标记探针筛选，构建了含２３个克隆的基因文库，克隆片段介于０．９－６．８ｋｂ之间