Function of the interaction between TFF2 and transcription factor Sp3 in gastric cancer cells

目的：验证三叶因子2（TFF2）与转录因子Sp3的结合关系，初步研究TFF2及Sp3相互作用在胃癌细胞中的功能，进而探索二者的作用机制，从而为胃癌的早期诊断及分子靶向治疗提供理论依据和新的方向。 方法：本研究在前期的酵母双杂交实验基础上，筛选TFF2候选结合蛋白Sp3，使用免疫荧光共聚焦及免疫共沉淀方法，明确TFF2及Sp3的共定位及结合关系；利用siRNA干扰及过表达技术，构建稳定干扰Sp3和（或）过表达TFF2的4株BGC-823胃癌细胞株，通过Brdu、细胞流式、Transwell小室等技术，检测TFF2及Sp3对胃癌细胞增殖、凋亡、周期、迁移及侵袭能力的影响；使用蛋白芯片技术检测TF...Objective：To verify the binding relationship of trefoil factor 2 (TFF2) and transcription factor Sp3, and study preli minary on the function of TFF2 and Sp3 in gastric cancer cells as well as the role of two proteins on development of gastric cancer. Furthermore, to explore the mechanism of two proteins on apoptosis of gastric cancer cells, which provide a theoretical basis and a new direction for...学位：医学硕士院系专业：医学院临床医学系_内科学学号：2452009115292

慢病毒敲减质粒pLKO.1-hSRF的构建及鉴定

目的:构建敲减人血清反应因子SRF基因的慢病毒质粒,为进一步研究SRF在口腔鳞状细胞癌中的作用提供工具。方法:利用Thermo Fisher公司RNAi网站设计出针对SRF基因特异性敲减的片段,然后通过对pLKO.1载体进行双酶切,胶回收纯化后,经T4连接酶将双酶切线性化载体与设计的目的片段进行连接,转化和质粒提取,采用双酶切以及测序的方法对重组质粒进行序列鉴定。利用293T细胞对构建正确的pLKO.1-hSRF质粒进行病毒包装后感染SAS口腔鳞癌细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定株,并通过Western blot和实时荧光定量PCR对稳定转染细胞株的敲减效率进行验证。结果:构建出的慢病毒敲减质粒pLKO.1-hSRF经测序和酶切鉴定均正确,感染该慢病毒质粒的SAS细胞后,其SRF蛋白表达量和mRNA水平与对照组相比均显著下降(P<0.01)。结论:慢病毒敲减质粒pLKO.1-hSRF构建成功,获得SRF低表达的SAS细胞株。国家自然科学基金(81671001,81771079,207201);;福建省中青年骨干人才项目(2015-ZQN-ZD-35);;厦门医学院科研基金(K2015-06);;厦门市重大疾病联合攻关项目(3502Z20179051

内镜下萨氏扩张器扩张联合局部注射曲安奈德治疗食管良性吻合口狭窄的疗效及安全性研究

目的:探讨食管良性吻合口狭窄经内镜下萨氏扩张器扩张联合局部注射曲安奈德治疗的临床疗效及安全性。方法:选取79例食管良性吻合口狭窄患者作为研究对象,根据数字表法将其随机分为对照组(n=38)和研究组(n=41),对照组给予内镜下萨氏扩张器扩张治疗,研究组在对照组基础上联合局部注射曲安奈德治疗,比较两组患者临床疗效、术后恢复情况以及安全性。结果:研究组治疗后总有效率为85.37%(35/41),高于对照组患者的65.79%(25/38)(x~2=4.138,P=0.002)。研究组持续症状缓解时间、再次进行内镜下扩张治疗的间隔时间均长于对照组(t=21.573、27.209,P=0.000、0.000),两组患者治疗前Stooler评分比较差异无统计学意义(t=0.266,P=0.791),两组患者治疗后Stooler评分均降低(t=16.606、25.962,P=0.000、0.000),且研究组低于对照组(t=7.407,P=0.000)。研究组术后并发症总发生率为19.51%(8/41),低于对照组患者的42.11%(16/38)(x~2=4.760,P=0.009)。结论:食管良性吻合口狭窄经内镜下萨氏扩张器扩张联合局部注射曲安奈德治疗后,可获得较好的疗效,患者临床症状得到改善,同时还可减少并发症发生率,临床应用价值较高。福建省科技计划引导性项目(2016D00210