三角褐指藻岩藻黄素-叶绿素蛋白复合体的分离纯化和功能研究

通过改进硅藻主要捕光天线(FCP)的分离和提取方法,得到高纯度、高均一性的三角褐指藻FCP蛋白,并通过电泳、液相色谱、质谱和吸收荧光光谱学等手段研究三角褐指藻FCP的氨基酸序列、色素组成和捕光特点等,初步预测三角褐指藻的结构和功能特点。结果表明三角褐指藻FCP含有198个氨基酸,与高等植物LHCII的序列Identity约为24%。三维结构预测显示FCP具有与LHCII相似的三次跨膜螺旋框架结构,但跨膜螺旋较短,且无膜表面螺旋结构。FCP中主要结合了叶绿素a、叶绿素c、岩藻黄素,不含叶绿素b,Chl.a/c为3.0。光谱学分析表明岩藻黄素可以在水下弱光环境中有效地捕获绿光,并高效地传递至叶绿素。而岩藻黄素在400—500 nm区域吸收的光能,向叶绿素传递效率较低,预示着岩藻黄素在强光下也有一定的光保护功能。FCP中有4个叶绿素结合的保守氨基酸位点,可能是其叶绿素结合位置,但岩藻黄素的结合位置因其结构和结合位点的变化而无法预测。研究为进一步探索FCP的结构和功能特性奠定了基础

三角褐指藻岩藻黄素-叶绿素蛋白复合体的分离纯化和功能研究

通过改进硅藻主要捕光天线(FCP)的分离和提取方法,得到高纯度、高均一性的三角褐指藻FCP蛋白,并通过电泳、液相色谱、质谱和吸收荧光光谱学等手段研究三角褐指藻FCP的氨基酸序列、色素组成和捕光特点等,初步预测三角褐指藻的结构和功能特点。结果表明三角褐指藻FCP含有198个氨基酸,与高等植物LHCII的序列Identity约为24%。三维结构预测显示FCP具有与LHCII相似的三次跨膜螺旋框架结构,但跨膜螺旋较短,且无膜表面螺旋结构。FCP中主要结合了叶绿素a、叶绿素c、岩藻黄素,不含叶绿素b,Chl.a/c为3.0。光谱学分析表明岩藻黄素可以在水下弱光环境中有效地捕获绿光,并高效地传递至叶绿素。而岩藻黄素在400—500 nm区域吸收的光能,向叶绿素传递效率较低,预示着岩藻黄素在强光下也有一定的光保护功能。FCP中有4个叶绿素结合的保守氨基酸位点,可能是其叶绿素结合位置,但岩藻黄素的结合位置因其结构和结合位点的变化而无法预测。研究为进一步探索FCP的结构和功能特性奠定了基础

Cloning and expression analysis of large yellow croaker (Larimichthys rocea)IL-10gene

白细胞介素10(Interleukin; 10,IL-10)是一种抗炎细胞因子,可以抑制机体免疫反应。本研究经过分析大黄鱼基因组数据库发现了IL-10同源基因,并对其cDNA编码区序列和; 基因组DNA序列进行了克隆分析。大黄鱼IL-10(LycIL-10)基因由5个外显子和4个内含子构成,其序列全长1; 869bp,其开放阅读框(ORF)长555bp,编码184个氨基酸,其N端的22个氨基酸残基为预测的信号肽,成熟肽由162个氨基酸残基组成,包含; 了脊椎动物IL-10标志性保守序列。LycIL-10的氨基酸序列同其他已知物种的IL-10氨基酸序列的一致性为26.49%~77.01%。Rea; l-time; PCR分析发现LycIL-10在检测的组织中为组成型表达,在脾脏和肌肉中转录水平相对较高。三联灭活细菌疫苗和聚肌苷酸胞苷酸(poly(I∶C)); 刺激后,大黄鱼头肾和脾脏中LycIL-10mRNA的转录水平会显著升高,表明LycIL- 10可能参与抑制大黄鱼由细菌和病毒引起的炎症反应。Interleukin-10(IL-10)is a central anti-inflammatory cytokine that; demonstrates immunosuppressive function. In this research,an; interleukin-10(IL-10)homologue has been identified by analyzed the; genomic data of large yellow croaker(Larimichthys; crocea).Subsequently,the open reading frame(ORF)of cDNA and the genomic; DNA sequences have been cloned and analyzed.The genomic DNA of large; yellow croaker IL-10(LycIL-10) consisted of 1 869bp that contains five; exons and four introns,sharing the same organization with mammalian IL-; 10genes.The open reading frame of LycIL-10consisted 555bp that give a; predicted 184amino acid IL-10molecule. It contains a predicted signal; peptide of 22amino acids in the N-terminal and a mature peptide of; 162amino acids,which contained the vertebrate IL-10family signature.The; LycIL-10exhibits a conserved IL-10motif signature and shares; 26.49%-77.01%amino acid sequence identity with other known; IL-10.Real-time PCR analysis showed that LycIL-10 was constitutively; expressed in all tissues tested,especially in spleen and muscle.The; LycIL- 10mRNA transcription level could significantly increase in the; spleen and head kidney of large yellow croaker after trivalent; inactivated vaccines or poly(I∶C)stimulated,indicating that LycIL-10may; be involved in suppressing the inflammatory induced by bacterium or; virus in the large yellow croaker.国家自然科学基金资助项目; 厦门南方海洋研究中心资助项