Detection of Drug-Resistant Pathogens with Displacing Probes-Based Real-Time PCR

本论文应用荧光置换探针技术，以乙型肝炎病毒在拉米夫定治疗过程中产生的耐药突变和多重耐药结核分枝杆菌为研究对象，考察荧光置换探针用于低GC含量和高GC含量突变基因的多位点检测情况，建立了可应用于多突变位点病原微生物检测的多色均相荧光PCR系统。快速有效的检测乙型肝炎病毒抗拉米夫定耐药突变，对于临床诊断和治疗具有重要的意义。本论文建立了于单管实时PCR实验中同时检测血清标本中存在的多个拉米夫定耐药突变的体系。应用4对标记了不同荧光基团的碱基特异性置换探针，通过单个实时PCR反应就能判断标本中包含了以下任何一种HBVDNA：野生型，rtM204突变型，野生和rtM204突变混合型，rtM204突变和...This dissertation consists of three parts for describing the application of the displacing probes to detecting the mutations in hepatitis B virus (HBV) and Mycobacterium tuberculosis. The first part describes the establishment of a single-tube, real-time PCR assay for simultaneous detection of multiple lamivudine-resistance mutations in sera samples. Effective detection of lamivudine-resistant ...学位：理学硕士院系专业：生命科学学院生物医学科学系_细胞生物学学号：20032607

射频消融双上肺静脉口治疗心房颤动一例

采用射频消融电学隔离双上肺静脉口成功治疗心房颤动 (简称房颤 ) 1例。电学隔离法有如下几个优点 :①以环型肺静脉 (PV)标测电极导管精确地显示整个环型管壁的电活动及靶点位置 ,引导靶肺静脉的电学隔离。②消融终点不仅要求自发或诱发的房性早搏 /房颤消失 ,而且要求消除靶肺静脉口所有的PV电位 ,它在窦性心律下或起搏冠状窦远端下即可消融和判断终点 (靶肺静脉电学隔离 ) ,不仅节省了大量的时间 ,而且提高了手术的成功率。③在肺静脉开口部 (或近端 )消融 ,较少出现PV狭

探针熔解分析法快速检测结核分枝杆菌链霉素耐药突变

目的评价探针熔解分析法快速检测结核分枝杆菌链霉素耐药突变的应用价值,为临床应用提供依据。方法首先用中国药品生物制品检定所提供的含37份标准非结核分枝杆菌的标准盘进行特异性评价,然后将野生型结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA梯度稀释进行灵敏度考察,最后对906株结核分枝杆菌临床分离株(其中37份有药物敏感性试验结果)的链霉素耐药相关基因进行检测,并对突变菌株、有药敏结果的菌株以及疑似杂合的菌株进行测序分析。结果标准盘评价结果证实该体系特异检测H37Rv结核分枝杆菌。分析灵敏度为5～50拷贝每反应。在所有的906份结核分枝杆菌培养标本中,103份标本发生突变且与测序结果一致,18份标本存在杂合信号,17份标本无信号。37份有药敏结果的标本中,敏感的标本用探针熔解分析法所得结果均为野生型,耐药的16份标本仅检测到7份突变,另有9份耐药的标本实时检测为野生型,与测序结果相符。结论探针熔解分析技术特异性好,可以快速、准确地检测结核分枝杆菌链霉素耐药常见突变,有望直接用于临床标本链霉素耐药性检测

荧光置换探针多重实时PCR检测结核杆菌3种耐药突变

[目的]建立单管检测结核分枝杆菌3种耐药突变的多重实时PCR检测方法,考察其敏感性并应用于痰标本的检测。[方法]将荧光双链置换探针、实时PCR和多重PCR相结合,针对3种一线药物链霉素、异烟肼和乙胺丁醇中最常见的且都是由于点突变而导致的耐药突变位点进行检测。[结果]该检测体系可以检测到5个菌/test。用该体系检测9份已知基因型的结核分枝杆菌培养标本和118份痰标本,所有检测结果均通过ARMS体系验证。[结论]该检测体系具有很高的敏感性和特异性,检测快速,测定突变位点范围较其它技术有较大提高,且操作简便,有利于结核病菌的早期耐药检测和指导医生用药

2011年春季华南师范大学石牌校区冷凝水的化学成分特征及其来源

为深入研究广州城区的大气环境质量,于2011年春季在华南师范大学石牌校区采用人工冷凝方法采集了33个冷凝水样品,对其进行pH和阴阳离子分析,以探讨这些冷凝水的化学成分特征.结果表明,石牌校区绝大多数冷凝水样品的pH值分布范围为5.65~7.11(个别样品pH值为5.06),平均值为6.45,显示其已不属于酸雨,这在一定程度上反映出过去10多年特别是广州为迎接2010年亚运会在城市大气环境污染治理方面取得了较好的成效.冷凝水的阴阳离子总浓度(TDS)介于195.96~1267.76&mu;eq&middot;L~(-1)之间,平均为395.46&mu;eq&middot;L~(-1);各离子浓度高低依次为Ca~(2-)、SO_4~(2-)、NH_4~+、Cl~-、Na~+、NO_3~-、Mg~(2+)、K~+、NO_2~-、F~-.石牌校区冷凝水的这种离子浓度分布特征指示,其清洁程度差于香港、广东鹤山、云南丽江、青海瓦里关山等地的大气降水,而优于同期采集的石牌校区大气降水;其污染来源除部分属自然源外,还主要与建筑活动、工业生产、汽车尾气等人类活动等有密切关系.</p