1-磷酸-神经鞘氨醇预防化疗大鼠卵巢功能损害的实验研究

【目的】探讨1-磷酸-神经鞘氨醇(S1P)对环磷酰胺(CTX)导致的大鼠卵巢功能损害的保护作用及可能机制。【方法】40只雌性SD大鼠随机分为4组,即实验对照组(生理盐水组)、CTX组、S1P+NS组及S1P+CTX组,每组10只,于结束用药的第1～2周内的动情间期处死,观察卵泡数量的变化,并采用半定量RT-PCR检测卵巢组织Bcl-2及Bax的mRNA变化。【结果】S1P+CTX组的原始卵泡、初级卵泡和生长卵泡数与S1P+NS组、对照组的差别不显著(P>0.05),而CTX组的所有卵泡数均少于其余3组,其差异均有显著性意义(P<0.01)。卵巢组织中,S1P两组Bcl-2 mRNA的表达明显高于对照组及CTX组(P<0.01),Bax mRNA表达明显低于对照组及CTX组(P<0.01);而CTX组的Bcl-2 mRNA表达明显低于对照组及S1P两组(P<0.01),BaxmRNA表达明显高于对照组及及S1P两组(P<0.01)。【结论】S1P能预防CTX导致的大鼠卵巢功能损害,其抗凋亡作用可能是通过调节Bcl-2家族成员表达而实现

不同年龄女性卵泡液及颗粒细胞的氧化应激状态对胚胎质量的影响

【目的】探讨不同生育年龄段女性取卵周期中卵泡液及颗粒细胞的氧化应激状态及其与胚胎质量的关系。【方法】收集2018年9月8日至2019年1月18日在本中心行新鲜体外受精胚胎移植助孕的不孕患者取卵日卵泡液共70例，按照年龄≥35岁及<35岁分为年长组（n=34）和年轻组（n=36），比较卵泡液中氧化应激3个阶段的7项指标及颗粒细胞抗氧化物的基因表达水平，分析两组氧化应激指标的差异及其与胚胎质量的关系。【结果】年长组卵泡液的过氧化氢（H2O2）水平显著增加［155.84（137.11~199.30）vs.66.94（51.05~95.42）μmol/L，=0.001］，总超氧化物歧化酶（SOD）活性显著降低［0.69（0.55~0.85）vs.0.83（0.76~0.94）U，=0.005］，年长组颗粒细胞的过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽还原酶（GSR）表达量显著下降（＜0.05）。卵泡液总SOD活性在正常受精率≥60%组、囊胚形成率≥60%组均较高［0.82（0.71~0.91）vs.0.67（0.55~0.80）U，P=0.007，0.83（0.78~0.90）vs.0.73（0.60~0.89）U，=0.049］，并且经相关因素校正后卵泡液总SOD活性高对正常受精率（≥60%）及囊胚形成率（≥60%）的影响有统计学意义（OR值分别为5.478、3.383，95%CI分别为1.721~17.433、1.111~10.299，值分别为0.004、0.032）。【结论】卵泡液和颗粒细胞的氧化应激状态在高龄女性中主要表现为卵泡液ROS增加、总SOD活性降低，颗粒细胞中过氧化氢酶及谷胱甘肽还原酶的水平显著降低，并且卵泡液总SOD活性与正常受精率和囊胚形成率呈正相关，提示其对卵子质量可能存在一定的影响

原癌基因 c- kit mRNA在自身免疫性睾丸炎中的表达及意义

[目的]探讨原癌基因c-kit mRNA在自身免疫性睾丸炎中的表达及意义.[方法]建立并分析自身免疫性睾丸炎动物模型：42只BALB/c小鼠随机分为6个实验组和1个对照组.6个实验组小鼠分别给予KM小鼠睾丸混悬液皮下注射,每周1次最多者4次,在第1次给予抗原注射后1,2,3,4,6,8周各取一组小鼠的睾丸组织,用RT-PCR检测其c-kit mRNA的变化.[结果]在第1次给予抗原注射后第1周开始c-kitm RNA转录水平开始降低,第2周起明显低于对照组（P＜0.05）,至第3,4周降至最低,第6周逐渐开始恢复,至第8周其水平与对照组相比差异已经没有统计学意义（P＞0.05）.[结论]c-kit基因与生精功能密切相关,c-kit基因mRNA的低表达可能参与自身免疫性睾丸炎导致不育的发病机制

慢速冷冻和玻璃化冷冻对人类卵巢组织中卵泡形态的影响

【目的】比较慢速冷冻、麦管玻璃化冷冻和尼龙网玻璃化冷冻对人类卵巢组织中卵泡形态的影响。【方法】16例人卵巢组织切成薄片随机分配到新鲜卵巢组(A组)、麦管玻璃化冷冻组(B组)、尼龙网玻璃化冷冻组(C组)和慢速冷冻组(D组)后行组织学和电镜检查。【结果】A、B、C、D组中形态正常的原始卵泡比例分别为72.5%±8.4%、65.6%±12.8%、66.1%±11.1%、48.4%±13.3%;形态正常的初级卵泡比例分别为62.0%±13.9%、58.1%±7.9%、59.0%±16.2%、37.0%±14.0%。D组中形态正常的原始卵泡比例和初级卵泡比例均明显低于A、B、C组。B、C组形态正常的原始卵泡比例和初级卵泡比例,与A组相比无统计学差异。B、C组中形态正常的原始卵泡超微结构无明显改变,D组中形态正常的原始卵泡超微结构存在一定程度的改变。【结论】玻璃化冷冻是人类卵巢组织较适宜的冷冻保存方法

冷冻胚胎解冻移植264个周期临床分析

【目的】探讨影响冷冻胚胎解冻移植妊娠率的因素。【方法】收集2001年11月到2006年1月264位病人在本中心进行冷冻胚胎解冻移植264个周期的资料,进行回顾分析。【结果】264个周期中有67个周期妊娠,周期妊娠率25.38%。妊娠组平均每次移植胚胎个数多于非妊娠组(2.84±0.57 vs 2.45±0.82,P<0.05),移植1个、2个、3个及以上冷冻解冻胚胎的妊娠率分别为9.38%、18.67%、38.22%,其中移植3个及以上胚胎者的妊娠率高于移植1个和2个胚胎者的妊娠率(P<0.05)。胚胎解冻后体外培养24h平均细胞数增长率≥50%者的妊娠率(34.43%)高于增长率<50%者(17.28%),P<0.05,至少移植一个胚胎细胞数在6细胞及以上的周期妊娠率明显高于移植胚胎细胞数小于6细胞的周期(35.85% vs 16.67%,P<0.05);移植Ⅰ级胚胎与Ⅱ级胚胎的妊娠率分别为35.26%、17.58%,P<0.05。新鲜移植周期妊娠者其冻融周期妊娠率为42.86%,而在新鲜移植周期未妊娠者其冻融周期妊娠率为28.31%,差异有显著性,P<0.05。自然周期、激素替代周期妊娠率分别为28.21%、21.30%，无统计学差异。LH峰日内膜厚度及类型无统计学差异。【结论】移植胚胎的个数、质量、发育潜能、原新鲜周期的结局影响冷冻胚胎移植能否妊娠

常规IVF不受精周期行补救卵母细胞单精子注射

【目的】探讨常规体外受精胚胎移植（in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET）不受精时,应用卵母细胞单精子显微注射（intracytoplasmic sperm injection,ICSI）技术进行补救授精的临床意义。【方法】2001年8月～2005年8月,在499个常规IVF-ET周期中有25个周期完全不受精,进行补救ICSI,并与同期实施的179个正常ICSI周期进行比较。【结果】补救ICSI组与正常ICSI组比较,HCG日平均血清雌二醇水平、每个成熟卵泡平均血清雌二醇量、每个周期的获卵数无明显差别,补救ICSI受精率为57.7%,低于正常ICSI组（67.8%）,补救ICSI组平均每个周期获得胚胎数（7.8±3.9）比正常ICSI（10.0±4.9）组少,且有统计学意义（P〈0.01）。补救ICSI组≥4细胞的胚胎占总胚胎数的54.5%,低于正常ICSI组（87.5%）,有统计学意义（P〈0.01）。正常ICSI组妊娠率为38.5%,补救ICSI组无一例妊娠。补救ICSI组中有8例在下一周期行ICSI,有2例妊娠并分娩2个健康女婴。【结论】补救ICSI虽可以避免取消IVF周期，但其受精率和妊娠率低，其临床应用价值还有待于进一步探讨。对于常规IVF不受精的患者，再次治疗时可考虑行ICSI助孕

胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞分离、原代培养与鉴定

【目的】探讨胎鼠肺泡Ⅱ型细胞原代培养及鉴定方法 , 建立肺泡Ⅱ型细胞培养模型 , 为体外研究肺泡Ⅱ型细胞及胎儿肺发育提供实验手段。【方法】采用低浓度胰酶消化 20 d 胎鼠肺组织, 经差速离心和特异性免疫吸附后, 分离、纯化胎鼠肺泡Ⅱ型细胞, 进行原代培养; 根据细胞生长特点、形态特征、细胞表型和肺表面活性特异蛋白 A 的分泌, 用免疫细胞化学染色、透射电镜及酶联免疫吸附法对分离的细胞进行形态学和功能鉴定。【结果】原代培养的肺Ⅱ型细胞 12 h 开始贴壁, 外观呈多边形, 岛状生长。培养的 24～48 h, 细胞连接成单层, 胞浆内颗粒明显, 培养的 6~7 d 细胞内颗粒大量减少; 免疫细胞化学鉴定细胞肺表面活性特异蛋白A( surfactant protein A, SP- A) 染色阳性, 透射电镜可见观察到细胞内板层小体, 培养液中 SP- A 含量随培养时间延长逐渐增多, 于培养 36 h 达峰值, 为 80 ng/mL; 细胞纯度达(92±2)%, 产量为(18.6±7)×106。【结论】差速离心和免疫黏附法是一种高效的分离和纯化胎肺Ⅱ型细胞的方法, 所得细胞产量大、纯度高, 可以用于体外研究肺泡Ⅱ型细胞和晚期胎肺发育的研究

改良简化的Ferriman-Gallwey 评分系统在中国女性多毛评价中的应用分析

【目的】通过改良（mFG）评分系统评价妇女妊娠期间身体不同部位新生体毛的生长状况；分析不同部位的多毛 评分对诊断多毛的价值，对mFG评分系统进行优化。【方法】收集自2014年7月至10月在中山大学孙逸仙纪念医院进行产 前检查的孕妇43例，于孕前、孕5 ~ 9、10 ~ 14、15 ~ 20和21 ~ 24周进行随访，并再纳入15 ~ 24周的72例孕妇进行观察。所 有孕妇在每次观察时均采用mFG评分系统进行多毛评分，同时采用高效液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）法检测血清总睾酮 水平。比较不同孕周睾酮水平及mFG分值，总体间的比较采用单因素方差分析法，两两比较采用LSD法。作受试者工作特 征曲线（ROC）分析各个部位的终毛生长对多毛症的诊断效能，同时通过Logistics回归分析出对多毛诊断有显著性意义的部 位。再将这些部位组合、分值相加命名为简化FG评分（sFG），ROC曲线评估sFG评分系统对多毛诊断的敏感性和特异性， 获得诊断界值。【结果】在43例从孕前随访到中孕的孕妇中，孕前的总睾酮为（1.09 ± 0.59）nmol/L，在孕5 ~ 9、10 ~ 14和15 ~ 20周分别为（1.13 ± 0.40）、（1.28 ± 0.38）、（1.83 ± 0.63）和（1.82 ± 0.52）nmol/L，各组与孕前总睾酮相比，差异有统计学意义 （P＜0.05）。9 个部位的多毛评分中，mFG 总分在各组中分别为：1.65 ± 0.60、2.30 ± 0.45、3.60 ± 0.68、4.20 ± 0.41 和 4.40 ± 0.77。身体不同部位新生终毛出现的先后顺序依次为：上腹部、下腹部、下背部、上唇、大腿、上背、胸部、上臂和下颌。纳入 15 ~ 24周观察的72例孕妇、共115例孕妇中，ROC曲线分析显示，各个部位对多毛（mFG ≥ 5）诊断的价值由高到低依次为， 上唇＞下背＞大腿＞下腹＞上臂＞上背＞胸/上腹＞下颌。而排在前4位的部位，即上唇、下背、大腿和下腹对多毛诊断的 贡献度最为显著，其ROC曲线下面积分别为0.779、0.728、0.675和 0.626。进一步Logistics回归分析也显示，对诊断多毛最有 价值的部位是上唇、下背、大腿和下腹部。将这4个部位组合诊断多毛，以3为诊断界值时诊断的敏感性和特异性最佳。 【结论】孕24周前，孕妇的mFG评分随着妊娠的进展逐步增加。上唇、下背、大腿和下腹是对多毛诊断有显著意义的部位， 有可能作为代替mFG评分的简化组合，用以诊断多毛；诊断界值为sFG≥3分

正常卵巢功能患者使用不同降调方案的临床研究

【目的】探讨不同剂量促性腺激素激动剂（GnRH-α）对卵巢储备功能正常的不孕女性垂体降调程度 及体外受精与胚胎移植（IVF-ET）妊娠结局的影响。【方法】63名年龄<35岁卵巢储备功能正常、拟行GnRH-α长 方案助孕的不孕患者，按曲普瑞林的剂量随机分为三组降调节，0.05 mg/d，0.1 mg/d和1.25 mg单次，达到降调标 准后常规予高纯度的尿促性腺激素（HMG-HP）促排卵，比较各组降调节程度及IVF结局。【结果】三组在注射 GnRH-α后均达到降调节标准，达到降调节的平均天数，降调节后启动日的LH、E2水平，窦卵泡总数、<4 mm及 8～9 mm的窦卵泡数差异无统计学意义。启动日当天，三组间血FSH水平差异具有显著统计学意义［（3.92±1.12）U vs.（3.03±1.14）U vs.（2.05±1.12）U，P<0.001］。短效0.05 mg组在GnRH-α注射4 h后，血清FSH、LH水平均高于 短效0.1 mg组。达到降调标准后，三组Gn启动剂量、使用时间及使用总量相似的情况下，hCG日直径14～18 mm 卵泡数［（3.91±2.12）个 vs.（5.81±3.55）个 vs.（6.43±3.39）个，P<0.001］、≥18 mm/≥10 mm 卵泡数比例［（33.1%± 13.2%）vs.（24.0%±12.4%）vs.（30.1%±12.2%），P<0.05］，差异具有统计学意义。0.05 mg组hCG日LH水平明显高 于0.1 mg组与1.25 mg组［（2.47±1.33）U vs.（1.80±0.69）U vs.（1.43±0.53）U，P<0.05］，但三组均未出现早发LH峰 和提前排卵。尽管三组获卵数差异存在统计学意义，分别为［（10.14±4.80）个vs.（11.51±2.42）个 vs.（12.79±2.73）个， P<0.05］，但三组之间MII卵子数相似，且0.05 mg组的E2水平/获卵数水平明显高于其他两组［（282.33±42.13）U vs.（221.62±32.02）U vs.（200.03±37.89）U，P<0.001］。三组新鲜周期活产率分别为61.9%、55.0%和50.0%，每取卵 周期累积活产率分别为85.7%、76.2%和75.0%，0.05 mg组的临床妊娠率、活产率、累积临床妊娠率及累积活产率 较0.1 mg组、1.25 mg组有升高趋势。【结论】对于卵巢储备功能正常的年轻不孕女性，GnRH-α用量减少，达到降 调后，垂体降调程度减轻，hCG日LH水平升高，虽然获卵数减少，但E 2 水平/获卵数显著升高，新鲜移植周期活产 率及取卵周期的累积活产率均有升高趋势

广州地区女性生殖道支原体感染及其药敏状况

目的:了解广州地区女性生殖道支原体感染及药敏状况及其临床意义。方法: 收集我院妇科门诊543例宫颈分 泌物标本进行支原体培养及药敏分析。结果: 本院妇科门诊生殖道支原体感染率 60. 8%; 其中,解脲脲原体感染占 68. 9%; 新 一代大环内酯类药及喹诺酮类药对解脲脲原体的敏感性较高; 支原体混合感染可使其耐药性提高 6～ 12 倍。结论: 宫颈分泌 物支原体阳性标本的药敏试验有助于本地区妇科门诊合理用药, 减少盲目性