Preventive effect and mechanisms of 3,3-diindolylmethane on oxidative stress induced by hydrogen peroxide in HaCaT cells

目的:探究3,3'-二吲哚甲烷(dIM)对过氧化氢(H_2O_2)诱导人角质形成细胞(HACAT)氧化应激作用的预防效应及可能机制。方法:体外培养HACAT细胞,用H_2O_2建立氧化应激模型。采用CCk-8法检测不同浓度(1~20μMOl/l)dIM对HACAT细胞生长的抑制作用;流式细胞术检测dIM作用前后细胞内活性氧自由基(rOS)含量的变化;WESTErn blOT检测不同浓度dIM(0、5、10μMOl/l)对HACAT氧化应激相关蛋白核因子(nf-κb)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPkS)磷酸化表达水平的影响。结果:成功建立了HACAT氧化应激模型。CCk-8法研究结果显示1-10μMOl/l dIM对HACAT细胞无明显毒性作用(P>0.05);流式细胞术检测结果表明10μMOl/l dIM预处理可有效预防由H_2O_2诱导的HACAT内rOS产生(P0.05).Flow cytometry results indicated that pretreatment with DIM(10 μmol/L) could inhibit the level of intracellular ROS(P<0.05).With increasing concentration of DIM,the levels of p-p38-MAPK,p-JNK and p-NF-κB were significantly depressed.CONCLUSION:DIM could protect HaCaT cells from H_2O_2-induced oxidative stress via suppressing production of ROS levels and down-regulating the expression of NF-κB and members of MAPKs.DIM might be used as an effective drug to treat or reduce oxidative stressmediated injury in skin cells.国家自然科学基金青年基金(81101562); 广东省科技计划项目(2012B060300005); 广东省自然科学基金(S2012010009633

牡丹峰国家级自然保护区极北鲵产卵场生境

极北鲵（Salamandrella keyserlingii）为国家二级重点保护野生动物，其生存受到生境退化和丧失的严重威胁，深入探究其产卵时的生境选择偏好，对促进其种群数量的增长至关重要。2023年5月在牡丹峰国家级自然保护区，采用样方法调查极北鲵及其卵袋的数量，同时测量产卵场19个生境因子，以期揭示影响其繁殖行为的关键因子。结果显示：共发现154条极北鲵和85条卵袋，极北鲵倾向于选择植被茂密、近河流的静水池塘作为产卵地点，池塘面积65.20 ~ 300.00 m²，水体平均深度1.13 m，土壤以黏质为主。所选区域地表温度保持在14.50 ~ 17.20 ℃，水体温度在13.90 ~ 16.70 ℃，光照强度适宜（7.44 klx），空气湿度42.20% ~ 67.20%。水质分析表明，水体pH偏碱性（8.08 ± 0.17），水体电导率（135.35 ± 39.86） μS/cm，溶解氧质量浓度（3.62 ± 1.50） mg/L。通过相关性分析和主成分分析，确定影响极北鲵（r1）和卵袋数量（r2）的关键因子。其中，距道路距离（r1 = 0.827、r2 = 0.724）、水体面积（r1 = 0.792、r2 = 0.901）、郁闭度（r1 = 0.697、r2 = 0.658）、水体温度（r1 = 0.597）、地表温度（r1 = 0.582）、水体深度（r1 = -0.706、r2 = -0.667）、人为干扰程度（r1 = -0.682、r2 = -0.616）和水面覆盖物（r2 = 0.559）与极北鲵繁殖行为密切相关。气候因子、水因子以及干扰因子在极北鲵选择产卵位点时起到重要作用，保护此类环境因子对极北鲵的生存与繁殖具有重要意义