胎肝造血期胎肝间充质干细胞的分离、培养及生物学特性

【目的】分离、培养人胎肝造血期胎肝间充质干细胞(MSC) , 研究其生长特性及表面标记的表达。 【方法】取孕16～20 周人胚胎肝脏, 分离培养胎肝MSC, 传代培养成系并检测其增殖能力, 应用流式细胞术、免 疫荧光方法检测其造血相关表面标记和细胞蛋白表达。【结果】人胎肝MSC 呈成纤维样形态, 指数生长期倍增 时间约为16h, 细胞增殖26.5 倍。传代15 次仍有94.18%的细胞处于G0/G1 期。流式细胞仪检测结果显示人胎 肝MSC 表达CD29、CD44、CD105、CD106 和CD166, 不表达CD31、CD34、CD45, 不表达与GVHD 相关的HLADR 、CD80、CD86、CD40、CD40L。免疫荧光检测结果显示胎肝MSC 表达造血微环境细胞外基质蛋白 Fibronectin、α-SMA 及上皮细胞标记蛋白AFP 和E-cadherin。【结论】人胎肝MSC 具有胚胎造血组织和发育中的 肝脏特异的相关分子表达, 免疫原性弱, 可以作为研究造血、胎肝发育机制的模式细胞

再生障碍性贫血儿童TCR Vβ亚家族T细胞克隆性增殖及其与HLA—DRB1＊15的关系

【目的】探讨再生障碍性贫血（再障）儿童TCR Vβ24个亚家族T细胞克隆性及其与HLA—DRB1＊15的关系。【方法】再障儿童17例（SAA14例，MAA3例），采用RT—PCR和基因扫描分析外周血或骨髓TCR Vβ24个亚家族基因的表达和克隆性，SSP—PCR检测HLA—DR。【结果】再障儿童外周血T细胞仅表达4—22个Vβ亚家族，而正常儿童外周血T细胞几乎表达所有Vβ亚家族。12例（包括初诊SAA4例，CR4例，复发1例和MAA3例）再障儿童存在不同程度T细胞克隆性增殖，但个体间差异较大，正常外周血和骨髓均为多克隆性T细胞。5例HLA—DRB1＊15（＋）患儿中4例（80％）有寡克隆T细胞，而12例HLA—DRB1＊15（-）患儿中仅3例（25％）见寡克隆T细胞，两组比较差异具有显著意义（P〈0．05）。伴寡克隆T细胞的6例S从儿童经免疫抑制治疗后达CR；不伴寡克隆T细胞的5例SAA儿童接受免疫抑制治疗，其中CRI例，PR2例、无效1例，死亡1例。【结论】大多数再障儿童存在T细胞克隆性增殖，寡克隆T细胞多见于SAA，尤其是HLA—DRB1＊15（＋）的SAA儿童。TCR VβT细胞克隆的检测对进一步了解再障免疫功能状态、预测免疫抑制治疗效果具有一定的参考价值

小剂量K562 细胞NOD/SCID 小鼠动物模型的建立

【目的】探索建立小剂量( 1×106) 人急性红白血病K562 细胞株的NOD/SCID 小鼠动物模型及通过 流式细胞仪对NOD/SCID 小鼠的肿瘤负荷情况进行评价的可行性。【方法】实验组NOD/SCID 小鼠分别经尾静 脉接种K562 细胞1×106、5×106, 比较不同剂量接种实验组小鼠的生存时间、组织病理改变及通过流式细胞术 对NOD/SCID 小鼠体内的肿瘤标记进行检测。【结果】1×106 及5×106 K562 细胞接种的NOD/SCID 小鼠的生存 时间分别为( 30.3±4.3) d 和(22.2±3.7)d; 其外周血、骨髓及肝、肺组织匀浆中均可发现不同比例的肿瘤细胞; 通 过流式细胞术检测5×106 K562 细胞接种组NOD/SCID 小鼠外周血、肝匀浆中人CD13 表达水平显著高于1× 106 接种组, 而肺匀浆的CD13 表达水平两组无显著性差异。【结论】小剂量( 1×106) K562 细胞NOD/SCID 小 鼠动物模型的建立是完全可行的,这有助于降低实验成本

含脐血MSCs 体系扩增后的脐血重建 NOD/SCID小鼠造血的研究

【目的】探讨含人脐血(umbilical cord blood，UCB)来源的间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)联合造血生长因子(hematopoietic growth factors，HGFs)体系扩增后的脐血造血细胞在NOD／SCID小鼠体内植入及重建小鼠造血的能力。【方法】①用含女性胎儿脐血MSCs(UCBMSCs)及HGFs组合的无血清扩增体系体外扩增男性新生儿UCB CD34~+细胞。②收获扩增第6天的UCB细胞，经尾静脉移植给亚致死量照射后的雌性NOD／SCID小鼠。③动态观察移植后小鼠生存情况及外周血象的恢复。④移植后8周，流式细胞仪检测存活小鼠骨髓中人CD45~+、CD45~+CD33~+、CD45~+CD41~+、CD45~+CD3~+和CD45~+CD19~+细胞含量；PCR法检测移植小鼠外周血中人Y染色体表达。【结果】①非扩增组小鼠存活率为60％，扩增组存活率为90％。②动态观察发现：扩增组白细胞和血红蛋白于移植后第20天恢复，PLT于移植后第40天恢复，明显短于非扩增组。③移植后8周，两组小鼠外周血中人Y染色体检测均为阳性，扩增组和非扩增组小鼠骨髓中人CD45+细胞的含量分别为18.5％±8.3％和16.5％±5.7％，差异无统计学意义(P＞0.05)。④移植后8周，扩增组小鼠体内CD45~+CD33~+和CD45~+CD41a~+细胞的百分率均高于非扩增组，但CD45~+CD3~+、CD45~+CD19~+细胞百分比均低于非扩增组。【结论】①含人UCBMSCs体系扩增后的UCB细胞具有NOD／SCID小鼠体内植入并重建小鼠造血的能力，似不具有提高小鼠体内植入率的作用。②扩增后的UCB移植可显著促进移植后小鼠造血恢复，提高小鼠存活率。③扩增后的UCB移植主要促进小鼠髓系及巨核系的植入，但对淋巴系的植入有抑制作用

基于内毒素血症探讨皂术茵陈方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠的影响

目的 基于内毒素血症探讨皂术茵陈方防治非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠的影响及其作用机制。方法 采用随机数字表法将40只大鼠分为5组,即正常组、模型组、皂术茵陈方组、盐酸吡格列酮组及培菲康组,每组8只。除正常组外,其余32只大鼠采用高脂饮食16周建立大鼠NASH模型,在造模第9周开始,皂术茵陈方组给予皂术茵陈方水提液60 mg/(kg·d)灌胃,盐酸吡格列酮组给予盐酸吡格列酮10 mg/(kg·d)灌胃,培菲康组给予培菲康210 mg/(kg·d)灌胃,正常组及模型组均给予双蒸水10 mL/(kg·d)灌胃,共治疗8周。第16周末经腹主动脉取血,生化法检测肝组织甘油三酯(TG)水平,苏木精—伊红(HE)染色观察肝组织病理学变化。终点显色法检测血浆内毒素(LPS)含量。ELISA法检测肝组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6等炎症因子的表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠肝组织显示出典型的NASH组织学特征,出现重度脂肪变性,不同程度的炎细胞浸润和坏死灶。大鼠肝湿重、肝指数、肝脏TG含量、血浆LPS水平、肝组织TNF-α、IL-1β、IL-6等炎症因..

基于肠肝轴研究栀子苷对非酒精性脂肪性肝炎大鼠的影响

目的观察栀子苷对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)大鼠的影响,并基于肠肝轴探讨栀子苷防治NASH的作用机制。方法将35只大鼠按随机数字表法分为5组,每组7只。即正常组、模型组、栀子苷组、盐酸吡格列酮组及培菲康组。除正常组外,其余28只大鼠采用高脂饮食16周建立大鼠NASH模型,在造模第9周开始给药,共治疗8周。第16周末经腹主动脉取血,生化法检测肝组织甘油三酯(TG)水平,苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织、肠组织病理学变化。ELISA法检测肝组织白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎症因子的表达水平。终点显色法检测血浆内毒素(LPS)含量。结果与正常组比较,模型组大鼠的肝组织显示出典型的NASH组织学特征,经栀子苷干预后,肝细胞脂肪变性、炎症浸润较模型组减轻。与正常组比较,模型组大鼠肠上皮细胞少量脱落,肠黏膜机械屏障受损。经栀子苷干预后,回肠黏膜结构完整,未见明显肠上皮细胞脱落。与正常组比较,模型组大鼠脂肪重量、肝湿重、肝指数、肝脏TG含量、血浆LPS水平、肝组织IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子水平均有不同程度增高(P<0.01)。经干预后,栀子苷组大鼠脂肪重量、肝湿重、肝指数、肝脏TG含量、血浆LPS水平、肝组织IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子水平均较模型组有不同程度的下降(P<0.05,P<0.01)。结论栀子苷能明显改善大鼠肠黏膜组织结构,保持肠黏膜屏障的完整性,显著降低血浆LPS水平,显著降低NASH大鼠肝组织IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子的表达。提示栀子苷治疗NASH的作用机制与调节肠肝轴、改善肠黏膜屏障、减少内源性LPS产生、降低炎症因子表达有关。国家自然科学基金资助项目(No.81673660)2017、2018厦门大学大学生创新创业训练课题(No.2017X0547; No.201810384230

基于肠肝轴研究栀子苷对非酒精性脂肪性肝炎大鼠的影响

目的 观察栀子苷对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)大鼠的影响,并基于肠肝轴探讨栀子苷防治NASH的作用机制。方法 将35只大鼠按随机数字表法分为5组,每组7只。即正常组、模型组、栀子苷组、盐酸吡格列酮组及培菲康组。除正常组外,其余28只大鼠采用高脂饮食16周建立大鼠NASH模型,在造模第9周开始给药,共治疗8周。第16周末经腹主动脉取血,生化法检测肝组织甘油三酯(TG)水平,苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织、肠组织病理学变化。ELISA法检测肝组织白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎症因子的表达水平。终点显色法检测血浆内毒素(LPS)含量。结果与正常组比较,模型组大鼠的肝组织显示出典型的NASH组织学特征,经栀子苷干预后,肝细胞脂肪变性、炎症浸润较模型组减轻。与正常组比较,模型组大鼠肠上皮细胞少量脱落,肠黏膜机械屏障受损。经栀子苷干预后,回肠黏膜结构完整,未见明显肠上皮细胞脱落。与正常组比较,模型组大鼠脂肪重量、肝湿重、肝指数、肝脏TG含量、血浆LPS水平、肝组织IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子水平均有不同程度增高(P<0.01)。经干预后,栀子苷组大鼠脂肪重量、肝湿重、肝指数、肝脏TG含量、血浆LPS水平、肝组织IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子水平均较模型组有不同程度的下降(P<0.05,P<0. 01)。结论栀子苷能明显改善大鼠肠黏膜组织结构,保持肠黏膜屏障的完整性,显著降低血浆LPS水平,显著降低NASH大鼠肝组织IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子的表达。提示栀子苷治疗NASH的作用机制与调节肠肝轴、改善肠黏膜屏障、减少内源性LPS产生、降低炎症因子表达有关

福建城市化发展战略博士笔谈

2003年5月,“福建省博士创业促进会”在福州举办了福建省城市发展战略“博士月谈”,与会者主要是省内高校和科研单位的专家、博士。会上,大家用书面发表意见,畅所欲言,崇论宏议。本刊精选部分意见,以飨读者。相信这些意见对福建城市化问题研究的深化将起到积极的推动作用

符号回归问题的解析矩阵进化算法

在许多工程应用中,人们希望通过积累下来的已知数据对某些感兴趣的指标进行预测与分析.比如在飞行器设计问题中,已知某些工况下(不同的飞行高度、攻角和来流马赫数等)飞行器的驻点温度数据,需要根据这些数据研究其他工况下的驻点温度情况.根据经验公式建立线性或非线性模型是一种常用的预测与分析方法.然而,当经验公式缺乏或经验公式包含错误,或者所研究的系统已经发生了变化时,这种方法就失去了效用.此时,数据驱动模

A New Evolutionary Algorithm for Ground to Flight Data Correlation

In hypersonic vehicle design, it is very difficult/expensive to simulate the environment in flight. Therefore, it is of key important to predict the aerodynamic coefficients of the flight vehicle using wind-tunnel and flighttest data. The task is called ground to flight data correlation, also shorten as ground/flight correlation. A number of methods have been applied to ground/flight correlation, including extrapolation [1], least squares regression [2], artificial neural network [3, 4] and maximum likelihood method [5]. However, all these methods are based on a certain model structure and optimize the parameters in the model. This is, in many cases, unreliable