Preliminary Studies of Neuropilin-1 Expression on HCC and Inhibitive Effect of Anti-NRP-1 Monoclonal Antibody on HCC Growth

摘要 研究背景和目的 肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，男性与女性中肝癌诊断率分别为世界第五和第七，男性及女性肝癌相关死亡率在癌症相关死亡中分别居第二和第六。肝细胞癌占所有肝癌的70%-85%，其诊断和治疗取决于多方面因素——肿瘤的大小，范围，全身和肝功能情况。早期确诊的肝癌患者，才有可能接受肝脏切除或移植等治疗。然而仅有10%-30%的肝细胞癌患者适合根治性治疗，大多数肝细胞癌患者，确诊时已经处于中晚期，无法行根治性治疗，且预后较差。而传统的介入治疗、放化疗存在抗肿瘤效果较差、副作用大等缺点。分子靶向治疗有着良好的肿瘤靶向性，毒副作用也较低，为肝细胞癌治疗提供了新的治疗手段及研究方向；因...Abstract Background Liver cancer, one of the main malignant tumors, is harmful to human. Liver cancer in men is the fifth most frequently diagnosed cancer worldwide but the second most frequent cause of cancer death. In women, it is the seventh most commonly diagnosed cancer and the sixth leading cause of cancer death. Hepatocellular carcinoma (HCC) accounted for 70% of all the liver cancer, an...学位：医学硕士院系专业：医学院_影像医学与核医学学号：2452012115322

Down-regulation of TSPO expression doesn't affect the productions of TNF-α,IL-1β and IL-6 in LPS-stimulated BV-2 microglia

目的研究相对分子质量(Mr)18 000转运蛋白(TSPO)基因表达下调对脂多糖(lPS)诱导bV-2小胶质细胞分泌Tnf-α,Il-1β和Il-6的影响。方法以rnA干扰技术建立TSPO基因表达下调的细胞模型,实时荧光定量PCr(QrT-PCr)和WESTErn blOT法检测转染TSPO SIrnA bV-2细胞TSPO MrnA及蛋白水平表达的效果;用QrT-PCr法检测TSPO基因下调后小胶质细胞bV-2在lPS作用下分泌Tnf-α、Il-1β和Il-6的MrnA水平表达的情况;ElISA检测TSPO基因下调小胶质细胞bV-2在lPS作用下分泌Tnf-α、Il-1β和Il-6的蛋白水平表达的变化。结果成功建立了TSPO基因下调的细胞模型,稳定表达TSPO SIrnA细胞的TSPO MrnA和蛋白水平表达均明显下降,TSPO基因下调后bV-2细胞在lPS作用下分泌Tnf-α、Il-1β和Il-6的量无变化。结论下调TSPO的表达对lPS刺激引起的小胶质细胞Tnf-α、Il-1β和Il-6的分泌无明显影响。Objective To evaluate the effect of translocator protein( TSPO,Mr18 000) on the productions of TNF-α,IL-1βand IL-6 in lipopolysaccharide( LPS)-stimulated BV-2 cells.Methods RNA interference technique was used to decrease TSPO expression in BV-2 cells.Western blotting was performed to assess the level of TSPO protein in BV-2 cells transfected with TSPO siRNA.Then the mRNA and protein levels of TNF-α,IL-1β,and IL-6 were measured in LPS-stimulated BV-2 cells by real-time quantitative PCR( qRT-PCR) and ELISA,respectively.Results The level of TSPO protein obviously decreased in BV-2 cells transfected with TSPO siRNA.However,knockdown of TSPO had no effect on the productions of TNF-α,IL-1βand IL-6 in LPS-stimulated BV-2 cells.Conclusion Down-regulated TSPO is not directly involved in regulating TNF-α,IL-1βand IL-6 productions induced by LPS in microglia.国家自然科学基金(81071182); 福建省医学创新项目(2009-CXB-46); 厦门大学生命科学学院细胞生物和肿瘤工程教育部重点实验室开发基金(2009101); 福建医科大学非直属附属医院科研发展专项基金(2008031

中国物理海洋学研究70年：发展历程、学术成就概览

本文概略评述新中国成立70年来物理海洋学各分支研究领域的发展历程和若干学术成就。中国物理海洋学研究起步于海浪、潮汐、近海环流与水团,以及以风暴潮为主的海洋气象灾害的研究。随着国力的增强,研究领域不断拓展,涌现了大量具有广泛影响力的研究成果,其中包括:提出了被国际广泛采用的"普遍风浪谱"和"涌浪谱",发展了第三代海浪数值模式;提出了"准调和分析方法"和"潮汐潮流永久预报"等潮汐潮流的分析和预报方法;发现并命名了"棉兰老潜流",揭示了东海黑潮的多核结构及其多尺度变异机理等,系统描述了太平洋西边界流系;提出了印度尼西亚贯穿流的南海分支(或称南海贯穿流);不断完善了中国近海陆架环流系统,在南海环流、黑潮及其分支、台湾暖流、闽浙沿岸流、黄海冷水团环流、黄海暖流、渤海环流,以及陆架波方面均取得了深刻的认识;从大气桥和海洋桥两个方面对太平洋–印度洋–大西洋洋际相互作用进行了系统的总结;发展了浅海水团的研究方法,基本摸清了中国近海水团的分布和消长特征与机制,在大洋和极地水团分布及运动研究方面也做出了重要贡献;阐明了南海中尺度涡的宏观特征和生成机制,揭示了中尺度涡的三维结构,定量评估了其全球物质与能量输运能力;基本摸清了中国近海海洋锋的空间分布和季节变化特征,提出了地形、正压不稳定和斜压不稳定等锋面动力学机制;构建了"南海内波潜标观测网",实现了对内波生成–演变–消亡全过程机理的系统认识;发展了湍流的剪切不稳定理论,提出了海流"边缘不稳定"的概念,开发了海洋湍流模式,提出了湍流混合参数化的新方法等;在海洋内部混合机制和能量来源方面取得了新的认识,并阐述了混合对海洋深层环流、营养物质输运等过程的影响;研发了全球浪–潮–流耦合模式,推出一系列海洋与气候模式;发展了可同化主要海洋观测数据的海洋数据同化系统和用于ENSO预报的耦合同化系统;建立了达到国际水准的非地转(水槽/水池)和地转(旋转平台)物理模型实验平台;发展了ENSO预报的误差分析方法,建立了海洋和气候系统年代际变化的理论体系,揭示了中深层海洋对全球气候变化的响应;初步建成了中国近海海洋观测网;持续开展南北极调查研究;建立了台风、风暴潮、巨浪和海啸的业务化预报系统,为中国气象减灾提供保障;突破了国外的海洋技术封锁,研发了万米水深的深水水听器和海洋光学特性系列测量仪器;建立了溢油、危险化学品漂移扩散等预测模型,为伴随海洋资源开发所带来的风险事故的应急处理和预警预报提供科学支撑。文中引用的大量学术成果文献(每位第一作者优选不超过3篇)显示,经过70年的发展,中国物理海洋学研究培养了一支实力雄厚的科研队伍,这是最宝贵的成果。这支队伍必将成为中国物理海洋学研究攀登新高峰的主力军

大菱鲆呼肠孤病毒全基因组及其应用

本发明公开了一种大菱鲆呼肠孤病毒全基因组及及制备方法和应用，其步骤是：Ａ、大菱鲆呼肠孤病毒核酸的提取，使用Ｔｒｉｚｏｌ?Ｒｅａｇｅｎｔ试剂提取大菱鲆呼肠孤病毒ｄｓＲＮＡ核酸。Ｂ、连接人工接头，提纯的病毒核酸于琼脂糖凝胶电泳，使用凝胶回收试剂盒，回收各节段ｄｓＲＮＡ。Ｃ、逆转录，连上人工接头的ｄｓＲＮＡ使用引物逆转录；Ｄ、ＰＣＲ扩增及序列测定，取２μｌ?ｃＤＮＡ?ＰＣＲ扩增，将扩增条带切下，回收后连接到载体，挑选阳性克隆测序；Ｅ、ＮＳ２２基因在鱼类培养细胞内的表达及起始密码子的确定，将Ｓ７节段１－６１３碱基的核苷酸序列于载体设计构建成真核表达质粒。一种大菱鲆呼肠孤病毒基因序列及其编码蛋白在制备大菱鲆呼肠孤病毒诊断试剂或作为细胞融合诱导剂中的用途

2D Wave Simulation and Validation Based on Ocean Wave Spectrums

Wave simulation is a hot topic of Ocean Engineering. This article summarizes a method that can adapt to a wide range of random wave spectrums to emulate the waves environmentally. The method is converted to computer programs which are simple and convenie

蛙虹彩病毒cop基因的克隆表达及亚细胞定位

从蛙虹彩病毒（Rana grylio virus,RGV）基因组中克隆了含凋亡相关结构域的新基因-cop （ Caspase recruitment domain only protein, COP）基因的全部编码区，成功构建了重组表达载体，进行了原核表达，并在鲤鱼上皮瘤细胞 （Epithelioma papulosum cyprini , EPC）中进行了亚细胞定位．序列分析表明，RGV cop基因全长288bp，编码一个长为95aa，分子量为10．4×10^3的推定蛋白．二级结构预测表明其含有5个α螺旋．同源性比对分析显示，RGV cop与其他6株虹彩病毒及人类cop相关蛋白同源性最高为94％，最低为33％．重组原核表达质粒pET28a—COP转化大肠杆菌BL21后，经IPTG诱导表达，获得一条约14×10^3的融合蛋白．重组真核表达质粒pEGFPN3-COP转染EPC细胞，经DAPI染色后，在荧光显微镜下观察显示重组蛋白在整个细胞中均有分布

蛙虹彩病毒cop基因的克隆表达及亚细胞定位

从蛙虹彩病毒(Rana gryliovirus,RGV)基因组中克隆了含凋亡相关结构域的新基因-cop(Caspaserecruit ment domain only protein,COP)基因的全部编码区,成功构建了重组表达载体,进行了原核表达,并在鲤鱼上皮瘤细胞(Epithelioma papulosumcyprini,EPC)中进行了亚细胞定位.序列分析表明,RGVcop基因全长288 bp,编码一个长为95 aa,分子量为10.4×103的推定蛋白.二级结构预测表明其含有5个α螺旋.同源性比对

蛙虹彩病毒中一个erv1/Alr家族基因的鉴定

<正>蛙虹彩病毒(Rana grylio virus;RGV)是导致世界范围内养殖虎纹蛙大量死亡的一种病原。它属于正二十面体的大 DNA 病毒。为了进一步的了解该病毒的形态发生;致病机理等;我们开展了对蛙虹彩病毒基因功能的研究。在虹彩病毒

Lcdv-C胸苷酸合酶基因在鱼类细胞转化和肿瘤形成中的作用

淋巴囊肿病毒(Lcdv)能感染120余种鱼类,使之产生肿瘤。胸苷酸合酶(ts) 是 dna 合成所必需的关键酶。利用 lcdv-c ts-egfp 在肥头鲤细胞(fhm)和鲑鱼胚胎细胞(chse)中的瞬时转染,经荧光显微镜观察进行亚细胞定位;再将构建

蛙病毒同源蛋白rgv27r和adrv85l的表达及其免疫原性分析

沼泽绿牛蛙病毒(Rana grylio virus,RGV)和大鲵蛙病毒(Andrias davidianus ranavirus,ADRV)同属虹彩病毒科(Iridoviridae)蛙病毒属(Ranavirus)成员,是引起水产动物高死亡率的病原。其同源早期蛋白RGV-27R和ADRV-85L与蛙病毒代表株蛙病毒3型(Frog virus 3,FV3)25R基因所编码的大小为31 kD的早期蛋白P31K(FV3-P31K)同一性超过99%。我们在观察和比较RGV与ADRV感染大鲵胸腺细胞(Giant salamander thymus cell,GSTC)显微病变的基础上,将ADRV-85L和RGV-27R基因分别克隆到原核表达载体pET-32 a与pMAL-p5X中,转化宿主菌E·coli BL21(DE3)并诱导表达,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测,对这两种蛋白的原核表达及其产物免疫原性进行分析。结果显示这两种基因在载体pET-32 a中的表达效率要显著高于pMAL-p5X。随后,取高效诱导表达的pET-32 a-RGV-27R产物,经Ni-NTA His-Bind亲和层析分离提纯,获得浓度为1.2 mg/mL的融合蛋白His-RGV-27R,用其免疫动物,制备了抗体27R-Ab,酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测抗体的效价为1∶6.25×106。用经正常大肠杆菌菌液和正常GSTC细胞悬液吸附处理后的抗体作为一抗,对被RGV或ADRV感染的GSTC细胞悬液进行Western Blot检测,并以重组原核质粒表达的融合蛋白His-RGV-27R和His-ADRV-85L作为阳性对照,以正常GSTC细胞悬液为阴性对照,分别从RGV或ADRV感染的GSTC细胞悬液中,检出大小同为31 kD的特异性蛋白条带。本研究证实两种蛙病毒同源早期蛋白RGV-27R和ADRV-85L不仅都能在两栖动物细胞中表达,且具有相同的抗原特性,这为深入研究这类病毒蛋白对蛙病毒复制的影响及其与宿主相互作用的分子机制提供了实验材料