嗜虫耶尔森氏菌HlyA及HasA外分泌表达系统的构建

【目的】构建一株具备外分泌蛋白功能的工程菌,解决杀虫毒素无法由胞内分泌至胞外,无法直接作用于虫体等问题,为松墨天牛防治提供新思路。【方法】本研究先测定从松墨天牛肠道及其生境中分离出的嗜虫耶尔森氏菌(CSLH88)的生长特性及抗性,进而对其进行分子改造。构建HlyA (pGHKW2)以及HasA (pGHKW4)外分泌表达载体,利用电穿孔法将其转入CSLH88菌株,获得能够表达绿色荧光蛋白的工程菌。利用稀释涂板及荧光体式镜检测技术对两个质粒进行遗传稳定性检测,并采用SDS-PAGE及Western blotting技术验证蛋白外分泌功能。【结果】CSLH88菌株培养2–4 h能够进入对数生长期,并对卡那霉素(Kan)敏感。成功构建了含有Kan抗性基因的pGHKW2(GenBank:MK562405)和pGHKW4(GenBank:MK562404)两个外分泌表达载体的CSLH88工程菌株。其中,发现pGHKW4质粒更加适合在嗜虫耶尔森氏菌中稳定遗传。SDS-PAGE及Western blotting检测结果表明HlyA系统无法在CSLH88菌株中将目的蛋白分泌到胞外,而HasA系统则可以有效地发挥外分泌表达功能。【结论】通过对HlyA及HasA两个外分泌表达系统进行研究,从中筛选出HasA型血红素转运系统作为CSLH88菌株的外分泌表达系统,为后续外分泌杀虫毒素蛋白菌株构建以及CSLH88菌株的致病性研究奠定基础。国家重点研发计划课题(2017YFD0600105);;\n国家自然科学基金(31601905);;\n福建省科技厅自然科学基金(2016J01097);;\n福建省科技计划项目(2018N5002);;\n福建农林大学科研基金(xjq201614);福建农林大学林学院林学高峰学科项目(71201800720,71201800753,71201800779);;\n福建省大学生创新创业训练计划项目(201810389102);;\n福建省林业科学研究项目[Minlinke(2017)03]~

国家会展中心E1单体结构设计综述

国家会展中心E1单体,地上7层,地下1层。由于地铁从其中心穿过,地下室被地铁线路一分为二,上部结构的最大转换跨度为117m,转换区域存在的弯矩、扭矩与剪力使得结构的受力极为复杂,设计难度大。经过方案比选,结构设计采用了带屈曲约束钢板墙的框架-支撑筒体结构,通过巨型的转换箱形曲梁实现大跨度跨越地铁,采用轻骨料混凝土减小了转换区域的荷载。由于施工期间,地铁需保持正常运营,结构设计与施工采取了多项措施来满足地铁运行的维护保养要求;采用整体结构的缩尺静力荷载试验验证了结构设计的可靠性

藏北高原高寒草甸地上生物量与气候因子的关系

采用收获法测量了藏北不同海拔高度(4300~4700m)2010年(6~8月)嵩草草甸群落地上总生物量,通过相关分析和多重回归分析法探讨了地上生物量与土壤温度、土壤含水量、空气温度、相对湿度、饱和水汽压亏缺以及比湿的关系。结果表明:总体而言,随着海拔高度的升高地上生物量逐渐增加,地上生物量与相对湿度、比湿以及土壤含水量分别呈极显著的正相关关系,与饱和水汽压亏缺呈极显著的负相关关系,而与土壤温度、空气温度呈不显著的负相关关系;相对湿度和饱和水汽压亏缺共同解释了地上生物量94%的变异,其中相对湿度的贡献较大。相对湿度是决定高寒嵩草草甸沿海拔分布的主导因子

Study on the Anticorrosion of LD-2 Compound Inhibitor on Reinforcing Steel in Seawater

[中文文摘]利用电化学检测技术和海水浸泡试验等方法 ,观测和研究了经筛选研制的LD_2复合缓蚀剂对海水介质中钢筋腐蚀电化学行为的影响 ,考察和评价了复合缓蚀剂对钢筋的阻锈作用 .结果表明 ,LD_2复合缓蚀剂主要起阳极型缓蚀剂作用 .在海水中加入 2 5 g·L- 1复合缓蚀剂后 ,钢筋的腐蚀电位提高约 0 .2 2 0V ,腐蚀电流降低至未加缓蚀剂的 1% ,缓蚀效率达 99% .钢筋混凝土试样在海水中浸泡 2年 ,表明混凝土中加入占水泥重量 1.0 %～ 2 .5 %LD_2复合缓蚀剂时 ,能有效阻止混凝土中钢筋的腐蚀.[英文文摘]The effect of LD_2 compound inhibitor developed in our laboratory on its anticorrosion action on the reinforcing steel in concrete immersed in seawater was shown in this paper. The corrosion behavior of the reinforcing steel in seawater was studied using electrochemical techniques and immersion tests. The polarization curve of the reinforcing steel immersed in seawater showed the free corrosion potential of the steel increased by 0.220 V (vs. SCE), and the corrosion current decreased by two orders of magnitude by adding 25 g·L - 1 compound inhibitor to the seawater. The potentiodynamic anodic polarization curve of reinforcing steel in the seawater with com2 pound inhibitor exhibited a passive range and the breakdown potential of the steel increased by 0.900 V as against in the seawater without inhibitor. Being immersed in the seawater over 24 months , the surface of the reinforcing steel in concrete with LD-2 compound inhibitor content of 1. 0 % - 1. 5 % of the cement mass was intact , while pitting corrosion occurred on the surface of the steel in concrete without inhibitor for 6 months. LD-2 compound inhibitor is an effective corrosion inhibitor for steel in concrete in seawater and in those environments contained chlorideions for the above experimental results.国家自然科学基金 (5 98710 4 3)资助项目; 福建省自然科学基金 (E9910 0 0 4 )资助项

中国微重力科学研究回顾与展望

微重力科学主要研究微重力环境中物质运动的规律,以及不同重力环境中重力对物质运动的影响.中国微重力科学研究起步于20世纪60年代,兴起于80年代中后期,经过多年发展,目前已初具规模,在一些重要方向具有明显特色和一定优势.本文回顾了中国微重力科学研究的早期历程,评述了近年来中国微重力科学研究进展,特别是利用实践十号科学实验卫星、天宫二号空间实验室等空间平台开展的微重力科学与技术应用研究取得的最新成果,并对中国载人空间站时代微重力科学发展的前景予以瞻望,推动微重力科学与应用研究在中国的快速、可持续发展