Редкое митохондриальное заболевание: синдром Лея – описание клинического случая

Institute of Mother and ChildIntroducere. Maladiile mitocondriale sunt un grup clinic eterogen de tulburări care apar ca urmare a disfuncției lanțului respirator mitocondrial. Sindromul Leigh este o tulburare neurodegenerativă progresivă, care afectează 1 din 40.000 de nou-născuți. Din punct de vedere genetic, modificările sau mutațiile complexului enzimatic respirator mitocondrial sau ale complexului piruvat dehidrogenază sunt responsabile pentru dezvoltarea sindromului Leigh. Scopul acestui studiu este de a raporta o maladie mitocondrială neurodegenerativă rară la un copil cu convulsii, hipotonie, ataxie și retard psihomotor. Materiale și metode. Raportăm un caz al unui băiețel de 20 luni, născut la termen la un cuplu sănătos neconsangvin. Pacientul a prezentat convulsii generalizate, hipotonie, tremor, ataxie, slăbiciune generală și oboseală, dificultăți de hrănire și întârziere psihomotorie. Rezultate. În conformitate cu tabloul clinic al pacientului, a fost suspectată o eroare înnăscută de metabolism. Lactatul din sânge, LDH și CK-MB au fost semnificativ crescute. Constatările imagistice au fost sugestive pentru o tulburare neurodegenerativă progresivă, caracteristice pentru encefalopatie mitocondrială. Analiza genetică a relevat mutația m.3243A>G în gena TL1 a genomului mitocondrial. Discuții. Caracteristicile sindromului Leigh sunt leziunile simetrice în ganglionii bazali sau la nivelul trunchiului cerebral vizualizate la IRM și o evoluție clinică caracterizată de deteriorarea rapidă a funcțiilor cognitive și motorii. Concluzii. Apariția semnalelor bilaterale simetrice hiperintense a imaginii IRM în regim T2 care implică mai mulți nuclei/structuri ale trunchiului cerebral la un copil cu probleme neurologice ar trebui să determine clinicianul să ia în considerare sindromul Leigh și să efectueze investigații suplimentare, cum ar fi determinarea lactatului seric și, dacă este posibil, analiza genetică.Introduction. Mitochondrial diseases are a clinically heterogeneous group of disorders that arise as a result of dysfunction of the mitochondrial respiratory chain. Leigh syndrome is a progressive neurodegenerative disorder, affecting 1 in 40,000 live births. Genetically, alterations or mutations of the mitochondrial respiratory enzyme complex or pyruvate dehydrogenase complex are believed to be responsible for the development of Leigh syndrome. The aim of this study is to report a rare progressive neurodegenerative, mitochondrial disorder in a child with seizures, hypotonia, ataxia and psychomotor delay. Material and methods. We report on a case of a 20 months old boy, born from non-consanguineous, healthy parents. The patient presented with generalized seizures, hypotonia, tremor, ataxia, general weakness and fatigue, feeding difficulty and psychomotor retardation. Results. According to the patient’s clinical picture, an inborn error of metabolism was suspected. Blood lactate, LDH and CK-MB were markedly elevated. The imaging findings suggested a progressive neurodegenerative disorder with the possibility of a mitochondrial encephalopathy. Genetic analysis revealed the m.3243A>G mutation in the TL1 gene of the mitochondrial genome. Discussions. Hallmarks of Leigh disease are symmetrical lesions in the basal ganglia or brain stem on MRI, and a clinical course with rapid deterioration of cognitive and motor functions. Conclusions. Bilateral symmetric T2 prolongation involving multiple brainstem nuclei/structures in a child with neurological problems should prompt the clinician to consider Leigh syndrome and conduct further investigations such as measurement of blood lactate, and if possible, genetic analysis.Введение: Митохондриальные заболевания – это клинически неоднородная группа нарушений, возникающих в результате дисфункции митохондриальной дыхательной цепи. Синдром Лея – прогрессирующее нейродегенеративное заболевание, которым страдает 1 из 40.000 новорожденных. Генетически, изменения или мутации комплекса митохондриальных респираторных ферментов или комплекса пируватдегидрогеназы ответственны за развитие синдрома Лея. Цель исследования – сообщить о редком прогрессирующем нейродегенеративном митохондриальном нарушении у ребенка с судорогами, гипотонией, атаксией и задержкой психомоторного развития. Материалы и методы: мы сообщаем о клиническом случае пациента в возрасте 20 месяцев, рожденном в некровнородственном браке здоровых родителей. У пациента жалобы на генерализованные судороги, гипотонию, тремор, атаксию, общую слабость и утомляемость, трудности с кормлением и задержку психомоторного развития. Результаты: В соответствие с клинической картиной пациента было подозрение на врожденное нарушение обмена веществ. Лактат в крови, ЛДГ и CK-MB были заметно повышены. Результаты томографии свидетельствуют о прогрессирующем нейродегенеративном заболевании с возможностью митохондриальной энцефалопатии. Генетический анализ выявил мутацию m.3243A>G в гене TL1 митохондриального генома. Обсуждения: Признаками болезни Лея являются симметричные поражения базальных ганглиев или ствола мозга на МРТ и клиническое течение с быстрым ухудшением когнитивных и двигательных функций. Заключение: Двустороннее симметричное повышение интенсивности сигнала на Т2 с участием нескольких ядер / структур ствола мозга у ребенка с неврологическими проблемами должно побудить клинициста рассмотреть вопрос о синдроме Лея и провести дальнейшие исследования, такие как измерение концентрации лактата в крови и, если возможно, генетический анализ

Leigh syndrome: a rare case report

Institute of Mother and Child, Chisinau, Republic of MoldovaIntroduction. Mitochondrial diseases are the most common group of inherited metabolic disorders characterized by defects in energy production, caused by mutation of genes encoded by nuclear or mitochondrial DNA. Leigh syndrome is a progressive neurological disorder, affecting 1:40,000 live births. The purpose. To report a rare progressive neurodegenerative, mitochondrial disorder in a child with seizures, hypotonia, ataxia and psychomotor delay. Material and methods. We report on a case of a 20 months old boy, born at term from non-consanguineous, healthy parents, with an uneventful perinatal history. He had no family history of any genetic or neurological disorder. Results. According to the patient's clinical picture, an inborn error of metabolism was suspected. Blood lactate, LDH and CK-MB were markedly elevated. Amino acid analysis was performed in the blood and urine and a high level of Alanine and deviant Ala/Lys ratio was determined. The electroencephalography revealed dysfunction in cortical structures and low convulsive threshold. Magnetic resonance imaging revealed symmetrical hyperintensity in T2w images in thalamus, mesencephalon, brainstem, medullary tegmentum and cerebellar hemispheres (periventricular), medulla oblongata. Genetic analysis revealed the m.3243A>G mutation in the TL1 gene of the mitochondrial genome. Nijmegen Mitochondrial Disease Criteria Scale: based on clinical signs and metabolic / imaging studies, the patient obtained 8 points, which suggests the presence of a mitochondrial disease. MRI findings of Leigh syndrome – symmetrical hyperintensity in T2-weighted images in thalamus, mesencephalon, brainstem, medullary tegmentum and cerebellar hemispheres (periventricular) and medulla oblongata. Conclusions. The diagnosis of Leigh syndrome should be considered in a child with neurological symptoms whose MRI shows bilateral symmetric hyperintense T2w images of the brainstem and basal ganglia. Further investigations include evaluation of blood gas profile and genetic analysis

Спинальная мышечная атрофия: новости и перспективы

Institute of Mother and Child, Republic of MoldovaIntroducere. Atrofia musculară spinală (SMA) este o boală neuromusculară progresivă moștenită recesiv autozomal. Boala este cauzată de mutații care apar în gena SMN1 (Survival Motor Neuron) și se consideră că severitatea sa este modulată de gene precum SMN2, NAIP (Proteina Inhibitoare Neoponală) sau GTF2H2 (General Transcription Factor IIH Subunitate 2) Material și metode. Diagnosticul pentru maladia SMA este disponibil prin diferite metode. Diagnosticul genetic molecular este efectuat prin PCR-RFLP, dar mai detaliat și considerat ca fiind standard de aur este tehnica MLPA. Diagnosticul se efectuează la persoanele care prezintă simptome, dar și înainte de apariția lor. Astfel, diagnosticul poate fi pus cât mai curând posibil, de exemplu, prenatal pentru familiile în care s-au născut deja copii cu SMA, pentru nou-născuți (screeningul nou-născutului) și chiar în procesul de planificare familială (screening al purtătorilor). Diagnosticul diferențial al SMA este complicat și necesită luarea în considerare a multor boli cu simptome similare. Rezultate. În baza de date a Laboratorului sunt înregistrați 131 de pacienți diagnosticați cu SMA. Până în 2016, tratamentul pacienților a inclus doar îngrijire curativă îmbunătățind simptomele bolii. După 2016, Food and Drug Administration (FDA) a fost aprobat singurul tratament pentru SMA. În prezent, la nivel mondial, se fac eforturi pentru implementarea screeningului nou-născutului. Concluzii. Odată cu reevaluarea criteriilor necesare pentru screening și aprobarea tratamentului, screeningul pentru această boală devine esențial. Diagnosticul precoce poate îmbunătăți evoluția stării pacienților cu SMA.Введение: Спинальная мышечная атрофия (СМА) является прогрессирующим нервно-мышечным заболеванием с аутосомно-рецессивным типом наследования. Заболевание вызывается мутациями в гене SMN1 (Survival Motor Neuron) и его тяжесть модулируется такими генами, как SMN2, NAIP (белок, ингибирующий апоптоз нейронов) или GTF2H2 (субъединица 2H общего транскрипционного фактора IIH). Материалы и методы: Диагностика проводиться различными методами. Молекулярно-генетическая диагностика проводится методом ПЦР-РФЛП, но золотым стандартом является метод MLPA. Диагностика может проводиться у людей, у которых уже есть симптомы, но и до их появления. Диагноз СМА может быть поставлен пренатально в семьях, где уже имеется случаи СМА и постнатально у новорожденных (скрининг новорожденных) и у больных, а также в процессе планирования семьи (скрининг носителей). Дифференциальная диагностика СМА сложна и требует рассмотрения многих заболеваний с похожими симптомами. Результаты: В базе данных лаборатории зарегистрировано 131 пациент с диагнозом СМА. До 2016 года лечение пациентов включало только лечебную помощь для улучшения симптомов заболевания. С 2016 года Управление по контролю за продуктами и лекарствами (FDA) одобрило единственное лечение СМА (Spinraza). В настоящее время во всем мире предпринимаются усилия по внедрению скрининга новорожденных на СМА. Заключение: После переоценки необходимых критериев скрининга и утверждения лечения скрининг на это заболевание становится необходимым. Ранняя диагностика может улучшить состояние пациентов с СМА

Dereglările profilului lipidic la pacienţii cu cardiopatie ischemică în funcţie de vârstă

Disciplina Sinteze Clinice, Clinica Medicală nr.1, Universitatea Stat Medicină şi Farmacie "N.Testemiţanu”, SCM „Sfânta Treime”, Chişinău, I-a Conferinţă Internaţională de Geriatrie şi Gerontologie din Republica Moldova 21 septembrie 2012Creșterea nivelului fracţiilor lipidice conform scării de vârstă, este considerat ca un semn de accelerare a procesului de îmbătrânire. Obiectivul studiului a fost evaluarea dereglărilor profilului lipidic la pacienţii cu cardiopatie ischemică în funcţie de vârstă. Material şi metode În studiul dat au fost incluși 405 de pacienţi cu cardiopatie ischemică, cu diapazonul de vârstă 35-65 de ani, care au fost repartizaţi în funcţie de clasificarea Canadiană (lot I:<49ani, lot II:50-59ani și lot III:>60ani). Spectrul lipidic (CT, LDL-C, HDL-C, TG) a fost determinat pe probe de sânge colectat dimineaţa după 12 ore de post alimentar prin metoda enzimatică fotometrică. Aprecierea cantitativă a apoproteinelor apoAI și apoB și a lipoproteinei (a) [Lp(a)] prin testul imunoturbidimetric. Rezultate Evaluarea spectrului lipidic la pacienţii cu CPI a evidenţiat o dislipidemie caracteristică, ce s-a exprimat prin valori semnificativ avansate ale LDL-C, TG și apoB cu nivel veridic scăzut al HDL-C și apoAI, însoţite de valori semnificativ sporite ale raportului apoAI/apoB, ceea ce presupune un risc major pentru dezvoltarea patologiei aterosclerotice la pacienţii respectivi urmată de consecinţele ei. De remarcat dinamica ascendentă a nivelului colesterolului total și trigliceridelor în dependenţă de categoria de vârstă la pacienţii cu CPI: s-a constatat o tendinţă de creștere a concentraţiei de LDL-C, care s-a păstrat în aceiași magnitudine până în grupul de vârstă înaintată (5.42±0.1mmol/l vs 5.76±0.07mmol/l, p<0.01). Este de notat faptul, că în ambele probe conţinutul de HDL-C, în funcţie de vârstă, practic a rămas neschimbat. Atrage atenţie faptul că, în categoria de vârstă <49 de ani s-a apreciat o scădere a nivelului relativ de HDL-C, în timp ce conţinutul de colesterol total și trigliceride nu s-a schimbat. Distribuţia datelor apoproteinelor apoAI și apoB potrivit grupelor de vârstă nu a relevat diferenţe statistice, la fel în valorile raportului apoAI/apoB și lipoproteinei (a) [Lp(a)]. Concluzie Creșterea nivelului fracţiilor lipidice conform scării de vârstă, oglindește majorarea riscului aterogen la pacienţii cu cardiopatie ischemică de vârstă înaintată.Summary Age-related lipid profile disorders in patients with coronary artery disease. Increased lipid fractions according to the scale of age, reflects increased atherogenic risk in patients with ischemic heart disease of old age

Mултисистемные поражение у детей: синдром NARP – митохондриальная болезнь (клинический случай)

Institute of Mother and Child, Chisinau, Republic of Moldova, Translational Metabolic Laboratory, Radboudumc, Nijmegen,Netherland, Institute of Psyhiology and Sancreatology, of Academy of Science, Chisinau, Republic of Moldova, State University of Medicine and Pharmacy, ”Nicolae Testemițanu”, Chisinau, Republic of MoldovaIntroducere. Maladiile mitocondriale fac parte din grupul tulburărilor neurodegenerative cauzate de dereglările ale generării energiei mitocondriale celulare. Sindromul NARP (neuropatie, ataxie și retinită pigmentară) este determinat de mutații punctiforme în gena MT-ATP6 din cadrul ADN-ului mitocondrial și este caracterizat prin variabilitatea manifestărilor clinice. Transmiterea mutației se realizează pe cale maternă, iar incidența este 1: 12.000 nașterii. Gravitatea manifestărilor clinice este asociată cu gradul de heteroplasmie a mutației ce determină patologia în cauză. Materiale și metode. Se raportează cazul unei fetițe, născută la termen, care s-a dezvoltat normal până la vârsta de 3 luni, însă ulterior a dezvoltat hipotonie, deficit ponderal, retard psiho-motor sever, dificultăți de alimentare, convulsii rezistente la terapie anticonvulsivantă, atrofie parțială a nervului optic și hepatomegalie. Investigațiile metabolice de bază, RMN-ul cerebral și analiza molecular-genetică au fost utilizate pentru diagnosticul patologiei mitocondriale. Rezultate. Luând în considerarea afectarea multisistemică și prezența manifestărilor clinice preponderent neurologice, pacientul a fost suspectat pentru o eroare înnăscută de metabolism. Inițial, considerând prezența hipotoniei progresive marcate ca simptom clinic cheie, s-a exclus Atrofia musculară spinală. În același timp a fost inițiat work-up-ul metabolic, dezvăluindu-se schimbări relevante pentru o maladie mitocondrială în sânge: hiperlactatacidemie [lactat 3.7-7.8 mmol/L, x 3 ori la rând, val. ref. 0.7-2.1 mmol/L], hiperalaninemie Ala [1038, val. ref. < 450 μmol/L], raportul Ala/Lys [11.8, abnormal dacă >3] și în urină: hiperaminoacidurie parțială. RMN cerebral (3,0T) – focare patologice la nivelul nucleilor bazali bilaterali. În urma sumării manifestărilor clinice și paraclinice s-au obținut 8 puncte ca scor specific pentru maladie mitocondrială definită (Criteriile Nijmegen). Nu a fost efectuată biopsia musculară, ca test confirmativ de diagnostic. Copilul a decedat la 9 luni de viață, iar diagnosticul molecular genetic la nivelul ADN-ului mitocondrial a fost efectuat postmortem în RadboudUMC (Nijmegen, Olanda), determinându-se mutația punctiformă m.8993T>G (Leu156Arg), cunoscută ca fiind determinantă în dezvoltarea sindromului NARP. Nu a fost posibilă aprecierea heteroplasmiei. Discuții. Sindromul NARP se caracterizează printr-o varietate de simptome și semne clinice cu preponderent de afectare neurologică. Diagnosticul acestei patologii deseori reprezintă o provocare pentru clinicieni determinată heterogenitate clinică care se suprapune cu alte maladii genetice. Debutul și evoluția simptomelor clinice depinde de gradul de heteroplasmie a mutației. Algoritmul de diagnosticul include inițierea work-upului metabolic, efectuarea RMN cerebral, biopsia musculară și determinarea mutației la nivel molecular genetic. Managmentul terapeutic rămâne a fi simptomatic pentru îmbunătățirea calității vieții pacientului. Concluzii. Debutul precoce, polimorfismul manifestărilor clinice, cum ar fi afectarea sistemului nervos central, slăbiciunea musculară, retardul psihomotor și convulsii în cazul unui copil ar trebui să determine clinicianul să ia în considerare sindromul NARP cu efectuarea investigațiilor suplimentare, cum ar fi măsurarea acidului lactic în sânge, efectuarea electromiografiei, rezonanței magnetice nucleare și testarea genetică.Introduction. Mitochondrial diseases are part of the group of neurodegenerative disorders caused by disruptions of cellular mitochondrial energy generation. NARP syndrome (Neurogenic weakness, ataxia, and retinitis pigmentosa) is caused by point mutations in the MT-ATP6 gene in mitochondrial DNA and is characterized by variability in clinical manifestations. The mutation is transmitted maternally, and the incidence is 1: 12,000 births. The severity of clinical manifestations is associated with the degree of heteroplasmia of the disease-causing mutation. Material and methods. We report on a case of a girl, born at term, who developed normally until the age of 3 months, but later developed hypotonia, weight deficit, severe psychomotor retardation, eating difficulties, seizures resistant to anticonvulsant therapy, partial atrophy of the optic nerve and hepatomegaly. Basic metabolic investigations, brain MRI and molecular-genetic analysis were used to diagnose mitochondrial pathology. Results. Considering the multisystemic impairment and the presence of predominantly neurological clinical manifestations, the patient was suspected of an innate metabolic error. Initially, considering the presence of marked progressive hypotonia as a key clinical symptom, spinal muscular atrophy was excluded. At the same time, the metabolic work-up was initiated, revealing relevant changes for a mitochondrial disease in the blood: hyperlactatacidemia [lactate 3.7-7.8 mmol/L, x 3 times in a row, ref. val. 0.7-2.1mmol / l], hyperalaninemia Ala [1038, ref. val. <450 μmol/L], Ala/ Lys ratio [11.8, abnormal if >3] and in urine: partial hyperaminoaciduria. Brain MRI (3.0T) – pathological foci in the bilateral basal nuclei. Following the summation of clinical and paraclinical manifestations, 8 points were obtained as a specific score for defined mitochondrial disease (Nijmegen Criteria). No muscle biopsy was performed as a confirmatory diagnostic test. The child died at 9 months of age, and the genetic molecular diagnosis of mitochondrial DNA was performed postmortem in RadboudUMC (Nijmegen, Netherlands), determining the point mutation m.8993T> G (Leu156Arg), known to be decisive in development of NARP syndrome. It was not possible to assess level of heteroplasmy. Discussions. NARP syndrome is characterized by a variety of symptoms and clinical signs, with predominantly neurological impairment. Diagnosis of this pathology is often a challenge for clinicians due to clinical heterogeneity that overlaps with other genetic diseases. The onset and development of clinical symptoms depends on the degree of heteroplasmic mutation. The diagnostic algorithm includes performing of metabolic work-up, brain MRI, muscle biopsy and genetic analysis. Therapeutic treatment is symptomatic and supportive of improving the patient’s quality of life. Conclusions. Early onset in the presence of complete health, the polymorphism of clinical manifestations, such as a central nervous system lesion, muscle weakness, impaired psychomotor development, and seizures in a child should prompt the clinician to consider NARP syndrome and conduct further investigations such as measurement of blood lactate, performing electromyography, magnetic resonance imaging, and genetic analysis.Введение. Митохондриальные заболевания относятся к группе нейродегенеративных заболеваний, вызванных нарушением выработки клеточной митохондриальной энергии. синдром NARP (Невропатия, атаксия, пигментная дегенерация сетчатки) вызывается точечными мутациями в гене MT-ATP6 в митохондриальной ДНК и характеризуется вариабельностью клинических проявлений. Мутаций передаются от матери, частота встречаемости составляет 1:12 000 рождении. Выраженность клинических проявлений связана со степенью гетероплазмии болезнетворной мутации.Материалы и методы. Мы сообщаем о клиническом случае доношенной девочке, которая нормально развивалась до 3 месяцев, но позже у нее развилась гипотония, дефицит веса, тяжелая психомоторная отсталость, трудности с питанием, судороги, устойчивые к противосудорожной терапии, частичная атрофия оптических нервов и гепатомегалия. Для диагностики митохондриальной патологии использовались базовые метаболические исследования, МРТ головного мозга и молекулярно-генетический анализ. Результаты. Учитывая мультисистемное нарушение и наличие преимущественно неврологических клинических проявлений, у пациента заподозрили врожденную метаболическую ошибку. Первоначально, учитывая наличие выраженной прогрессирующей гипотонии как ключевой клинический симптом, спинальная мышечная атрофия была исключена. В то же время, было начато исследование метаболизма, выявившее соответствующие изменения для митохондриального заболевания в крови: гиперлактатацидемия [лактат 3.7-7.8 ммоль/л, x 3 раза подряд, референсные значения 0.7-2.1 ммоль / л], гипераланинемия Ala [1038, референсные значения 3] и в моче: частичная гипераминоацидурия. МРТ головного мозга (3.0Т) – патологические очаги в двухсторонних базальных ядрах. После суммирования клинических и параклинических проявлений, было получено 8 баллов в качестве специфической оценки для определенного митохондриального заболевания (Неймегенские критерии). Биопсия мышц в качестве подтверждающего диагностического теста не проводилась. Ребенок умер в возрасте 9 месяцев, и генетическая молекулярная диагностика митохондриальной ДНК была проведена посмертно в RadboudUMC (Неймеген, Нидерланды), определив точечную мутацию m.8993T>G (Leu156Arg), которая, как известно, является решающей в развитии синдрома NARP. Оценка уровня гетероплазмии не удалось. Обсуждения. Синдром НАРП характеризуется множеством симптомов и клинических признаков с преимущественно неврологическими нарушениями. Диагностика этой патологии часто представляет собой проблему для клиницистов из-за клинической неоднородности, которая частично совпадает с другими генетическими заболеваниями. Возникновение и развитие клинических симптомов зависит от степени гетероплазмы мутации. Диагностический алгоритм включает в себя начало метаболических исследований, выполнение МРТ головного мозга, биопсию мышц и определение мутации на генетическом молекулярном уровне. Терапевтическое лечение остается симптомом улучшения качества жизни пациента. Заключение: Ранний дебют на фоне полного здоровья, полиморфизм клинических проявлений: поражение центральной нервной системы, мышечная слабость, нарушение психомоторного развития, судороги у ребенка, должны побуждать клинициста к рассмотрению синдрома NARP и проводить дальнейшие исследования, такие как измерение лактата в крови, выполнение электромиографии, магнитно-резонансной томографии и генетического анализа

Задача диагностики врождённых заболеваний гликозилирования в отношении митохондриальных заболеваний: клинический случай

Institute of Mother and Child, Chisinau, Republic of Moldova, Translational Metabolic Laboratory, Radboudumc, Nijmegen, Olanda, Tulane Medical School, New Orleans, LA, SUA, State University of Medicine and Pharmacy, ”Nicolae Testemițanu”, Chisinau, Republic of MoldovaIntroducere: Dereglările Congenitale ale Glicozilării (CDG) reprezintă un grup de erori înnăscute de metabolism determinate de defecte în sinteza glicanilor și altor glicoconjugate. Maladiile Mitocondriale (MD) apar ca urmare a perturbării căile metabolice localizate în mitocondrii. Atât mitocondiriile cât și procesul de glicozilare sunt aproape în toate celulele din organismul uman. Astfel, ambele grupuri de patologii sunt multisistemice, iar manifestările clinice sunt foarte variate și se suprapun în același timp, ceia ce reprezintă o provocare pentru clinicienii. Materiale și metode: Se raportează pacientul X, baiețel născut fără particularități patologice, dar care din prima lună de viață prezintă manifestări clinice, predominant de afectare a sistemului nervos central cu hipotonie, spasticitate, episoade de opistotonus, convulsii, atrofia nervului optic și trăsături dismorfice. Rezultate: Luând în considerație tabloul clinic, s-a suspectat o eroare înnăscută de metabolism, inițiindu-se work-upul metabolic. Lactat, amoniac, profilul acilcarnitinic, aminoacizi în sânge și urină fără modificări. S-a determinat episoade de hipoglicemie, hipocalcemie și creșterea transaminazelor. EMG, ECG și RMN cerebral-modificări nepecifice. IEFT – profilul transferinei normal. Cariotip normal. Scorul Clinic după Nijmegen al Criteriilor de Diagnostic al Maladiilor Mitocondriale 5puncte – posibil maladie mitocondrială. Analiza molecular-genetică a fost efectuată utilizând metoda High Resolution Melting (HRM), determinându-se prezența mutației punctiforme m.3243A>G în gena TL1 al genomului mitocondrial. Discuții: CDG și MD reprezintă un grup de erori înnăscute de metabolism cu afectare multisistemică, predominant neurologică care necesită un algoritm de diagnostic diferențial bine punctat. Manifestările clinice ale acestor grupuri de patologii de cele mai multe ori se suprapun, îngreunând procesul de diagnostic. Standardul de aur pentru diagnosticul CDG este screeningul prin IEFT, iar pentru maladiile mitocondriale – biopsia musculară. Pasul final în diagnosticul acestor maladii este reprezentat de metodele de secvențiere pe panel de gene sau al întregului exom/genom. Concluzii: CDG și MD reprezintă o provocare pentru clinicieni, mai ales în stadiul precoce al bolii. Variabilitatea de manifestări clinice conduce spre mimarea patologiilor, astfel acestea fiind subdiagnosticate. Pentru stabilirea diagnosticului cat mai precoce este necesar de a implementa în fiecare departament genetic metodele de screening al CDG și de secvențierea pe panel de gene sau chiar al întregului genom/exom.Introduction: Congenital Glycosylation Disorders (CDG) are a group of inborn errors of metabolism caused by defects in the synthesis of glycans and other glycoconjugates. Mitochondrial diseases (MD) occur as a result of disruption of metabolic pathways located in the mitochondria. Both mitochondria and the glycosylation process are present in almost every cell in the human body. Thus, both groups are multisystem afection, and the clinical manifestations are very variable and overlap at the same time, which is a challenge for clinicians. Materials and methods. Was reported, a boy born at term, who from the first month of life presents clinical manifestations, predominantly affecting the central nervous system with hypotonia, spasticity, episodes of opisthotonus, convulsions, optic nerve atrophy and dysmorphic features. Results. Considering the clinical picture, an inborn error of metabolism was suspected, initiating the metabolic work-up. Lactate, ammonia, acylcarnitine profile, amino acids in the blood and urine without changes. Episodes of hypoglycemia, hypocalcemia and increased transaminases have been reported. EMG, ECG and brain MRI-nonspecific changes. IEFT - normal transferrin profile. Karyotype was normal. Clinical score by Nijmegen of the Diagnostic Criteria for Mitochondrial Diseases 5 points - possibly mitochondrial disorder. Molecular-genetic analysis was performed using High Resolution Melting (HRM) and revealed the presence of point mutation m.3243A>G in the TL1 gene of the mitochondrial genome Discussions: CDG and MD represent a group of inborn errors of metabolism with multisystem involvement, predominantly neurological impairment that require a well-targeted differential diagnostic algorithm. The clinical manifestations of these groups of pathologies often overlap, making the diagnostic process difficult. The gold standard for CDG diagnosis is IEFT screening and for mitochondrial diseases - muscle biopsy. The final step in the diagnosis of these diseases is represented by the methods of sequencing on the gene panel or of the whole exome / genome. Conclusions. The diagnosis of CDG and MDs is a challenge for clinicians, especially in the early stages of the disease. The variability of clinical manifestations leads to the mimicking of pathologies, so they are often underdiagnosed. In order to establish the diagnosis as early as possible, it is necessary to implement in each genetic department the methods of CDG screening and sequencing on the gene panel or even of the entire genome / exome.Введение: Врождённые нарушения гликозилирования (CDG) представляют собой группу врождённых нарушений метаболизма, вызванных дефектами синтеза гликанов и других гликоконъюгатов. Митохондриальные заболевания (MDs) возникают в результате нарушения метаболических путей митохондрий. И митохондрии, и процесс гликозилирования присутствуют почти в каждой клетке человеческого тела. Таким образом, обе группы представляют собой мультисистемное поражение, а клинические проявления очень разнообразны и частично совпадают, что является проблемой для клиницистов. Материалы и методы: Mальчик, рождённый без патологических особенностей, но с клиническими проявлениями с первого месяца жизни, затрагивающими преимущественно центральную нервную систему с гипотонией, спастичностью, эпизодами опистотонуса, судорогами, атрофией зрительного нерва и дисморфизмами. Результаты: Принимая во внимание клиническую картину, подозревалось врожденное нарушение обмена веществ, что послужило приичиной метаболического обследования. Профиль лактата, аммиака, ацилкарнитина, аминокислоты в крови и моче без изменений. Сообщалось об эпизодах гипогликемии, гипокальциемии и повышении уровня трансаминаз. ЭМГ, ЭКГ и МРТ – неспецифические изменения головного мозга. IEFT - нормальный профиль трансферрина. Нормальный кариотип. Клиническая оценка по Неймегену диагностических критериев митохондриальных заболеваний 5 баллов – возможно, митохондриальная патология. Молекулярно-генетический анализ проводили методом High Resolution Melting (HRM), определяя наличие точечной мутации m.3243A> G в гене TL1 митохондриального генома. Обсуждение: CDG и MD представляют собой группу врожденных ошибок метаболизма с мультисистемным вовлечением, преимущественно неврологическими нарушениями, которые требуют целенаправленного алгоритма дифференциальной диагностики. Клинические проявления этих групп патологий часто пересекаются, что затрудняет диагностический процесс. Золотым стандартом диагностики CDG является скрининг IEFT, а при митохондриальных заболеваниях - биопсия мышц. Заключительный шаг в диагностике этих заболеваний представлен методами секвенирования панели генов или всего экзома / генома. Выводы. Диагностика CDG и MD является проблемой для клиницистов, особенно на ранних стадиях заболевания. Разнообразие клинических проявлений является причиной трудности дифференциальной диагностики, поэтому данные патологии часто недооценивают. Чтобы поставить диагноз как можно раньше, необходимо внедрение во всех генетических отделах методов скрининга и секвенирования CDG панели генов или даже всего генома / экзома

Методологические подходы в молекулярно-генетическом анализе митохондриальной ДНК у пациентов с клиническими проявлениями митохондриальной болезни

Institute of Mother and Child, Chisinau, Republic of MoldovaIntroducere. Bolile mitocondriale sunt una dintre cele mai frecvente erori înnăscute ale metabolismului, cu o prevalență estimată de aproximativ 1: 5.000. Disfuncția mitocondrială poate apărea din cauza unor defecte ale genelor din ADN-ul mitocondrial și nuclear care codifică proteine mitocondriale structurale sau cele implicate în funcția mitocondrială. Scopul: Detectarea și cuantificarea heteroplasmiei ADN-ului mitocondrial la pacienții cu simptomatologia caracteristică dereglărilor mitocondriale. Materiale și metode. Studiul a implicat un grup de cercetare format din 20 de pacienți cu simptomatologia caracteristică dereglărilor mitocondriale și 10 persoane sănătoase ca grup de control. Tehnica ARMS PCR a fost realizată pentru toate probele din grupul de studiu și din grupul control. Ulterior, s-a aplicat tehnica ARMS-qPCR doar în cazurile în care mutația a fost detectată prin tehnica ARMS PCR. Rezultate. Tehnica ARMS-PCR, efectuată la ambele grupuri de cercetare, a determinat prezența mutației 3243A>G la toate persoanele din grupul de studiu și cel de control și mutația 3460G>A la 4 pacienți din grupul de studiu. Datele preliminare cu privire la analiza heteroplasmiei ADN-ului mitocondrial au relevat un nivel înalt de heteroplasmie (55-78%) la 5 pacienți cu mutația 3243A>G și la 4 pacienți cu mutația 3460 G>A, fiind în concordanță cu semnele clinice. Concluzii. Metoda ARMS-qPCR este o tehnică simplă, eficientă din punctul de vedere al timpului și costului, comparativ cu alte metode.Введение: Митохондриальные заболевания являются одним из наиболее распространенных врожденных нарушений обмена веществ, с распространенностью приблизительно 1: 5000. Митохондриальная дисфункция может возникать из-за дефектов генов в митохондриальной и ядерной ДНК, которые кодируют структурные митохондриальные белки или белки, участвующие в митохондриальной функции. Цель: выявление и количественная оценка гетероплазмической мутантной митохондриальной ДНК у пациентов с клиническими проявлениями митохондриальной болезни. Материалы и методы: В исследовании участвовала группа из 20 пациентов с клиническими проявлениями митохондриальной болезни и 10 здоровых персон в качестве контрольной группы. Метод ARMS-PCR был выполнен для всех образцов из исследовательской группы и контрольной группы. Далее, был проведён анализ ARMS-qPCR только в тех случаях, когда мутация была идентифицирована методом ARMS-PCR.Результаты: Метод ARMS-PCR был выполнен у субъектов обеих исследовательских групп и было определено наличие мутации 3243 A> G у всех субъектов в группе исследования и контроля, и мутации 3460 G> A у 4 пациентов исследовательской группы. Предварительный анализ уровня гетероплазмии выявил высокую степень гетероплазмии (55-78%) у 5 пациентов с мутацией 3243 A> G и у 4 пациентов с мутацией 3460 G> A в соответствии с клиническими проявлениями. Заключение: Метод ARMS-qPCR удобен в использовании, экономичен и эффективен по сравнению с другими методами для определения гетероплазмии

Sindromul Leigh: caz clinic rar

IMSP Institutul Mamei și CopiluluiBackground. Mitochondrial diseases are the most common group of inherited metabolic disorders characterized by defects in energy production, caused by mutation of genes encoded by nuclear or mitochondrial DNA. Leigh syndrome is a progressive neurological disorder, affecting 1:40,000 live births. Objective of the study. To report a rare progressive neurodegenerative, mitochondrial disorder in a child with seizures, hypotonia, ataxia and psychomotor delay. Material and Methods. We report on a case of a 20 months old boy, born at term from non-consanguineous, healthy parents, with an uneventful perinatal history. The patient presented with generalized seizures, developmental regression, hypotonia, ataxia, general weakness and fatigue, feeding difficulty and psychomotor retardation. He had no family history of any genetic or neurological disorder. Results. According to the patient's clinical picture, an inborn error of metabolism was suspected. Blood lactate, LDH and CK-MB were markedly elevated. Amino acid analysis was performed in the blood and urine and a high level of Alanine and deviant Ala/Lys ratio was determined. The electroencephalography revealed dysfunction in cortical structures and low convulsive threshold. Magnetic resonance imaging revealed symmetrical hyperintensity in T2w images in thalamus, mesencephalon, brainstem, medullary tegmentum and cerebellar hemispheres (periventricular), medulla oblongata. Genetic analysis revealed the m.3243A>G mutation in the TL1 gene of the mitochondrial genome. Conclusion. The diagnosis of Leigh syndrome should be considered in a child with neurological symptoms whose MRI shows bilateral symmetric hyperintense T2w images of the brainstem and basal ganglia. Further investigations include evaluation of blood gas profile and genetic analysis.Introducere. Bolile mitocondriale sunt cele mai frecvente tulburări metabolice, caracterizate prin defecte de producere a energiei, cauzate de mutațiile genelor codificate de ADN-ul nuclear sau mitocondrial. Sindromul Leigh este o tulburare neurologică progresivă, cu incidența 1:40.000 nașteri vii. Scopul lucrării. Raportarea unui caz rar de patologie mitocondrială neurodegenerativă progresivă la un copil cu convulsii, hipotonie, ataxie și retard psihomotor. Material și Metode. Raportăm cazul unui băiat de 20 luni, născut la termen fără complicații perinatale la un cuplu sănătos neconsangvin. Pacientul a prezentat convulsii generalizate, regresie în dezvoltarea neuro-motorie, hipotonie, ataxie, slăbiciune generală și oboseală, dificultăți de hrănire și retard psihomotor. Absența anamnesticului heredocolateral de tulburare genetică sau neurologică. Rezultate. În conformitate cu tabloul clinic al pacientului a fost suspectată o eroare înnăscută de metabolism. Acidul lactic sangvin, LDH și CK-MB au fost semnificativ crescute. Profilul aminoacizilor din sânge și urină a relevat un nivel ridicat de Alanină și devierea raportului Ala/Lys. Electroencefalografia a prezentat disfuncții în structurile corticale și prag convulsivant scăzut. IRM a relevat prezența semnalelor bilaterale simetrice hiperintense în regim T2, în proiecția la talamus, mezencefal, trunchiul cerebral, tegmentul medular și emisferele cerebelare (periventricular), medula oblongata. Analiza genetică a prezentat mutația m.3243A>G în gena TL1 a genomului mitocondrial. Concluzii. Sindromului Leigh trebuie luat în considerare la un copil cu simptome neurologice, al cărui IRM prezintă semnale bilaterale simetrice hiperintense în regim T2, din trunchiul cerebral și ganglionii bazali. Investigațiile suplimentare includ analiza gazelor în sânge și analiza genetică