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    Métodos subsidiários para o diagnóstico da Leishmaniose tegumentar americana (LTA): comparação dos resultados do seqüenciamento de DNA e da PCR-RFLP para determinação da espécie de leishmania em amostras cutâneo-mucosas

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    FUNDAMENTOS: Métodos moleculares têm-se mostrados mais eficazes para o diagnóstico da LTA. OBJETIVOS: Comparar os resultados da intradermorreação de Montenegro (IRM), presença de leishmania em biópsia (Bc), reação de imunofluorescência indireta (Rifi), seqüenciamento de DNA e PCR-RFLP (-restriction fragment lenght polymorphism) para o diagnóstico da LTA. MÉTODOS: Foram estudados 152 pacientes com LTA. Para a PCR em Bc, utilizaram-se primers específicos para seqüência de 120bp do kDNA do minicírculo comum a todas as espécies de leishmanias. O produto da PCR, utilizado para seqüenciamento e para restrição enzimática com Hae III, foi comparado às culturas L. (L.) amazonensis e L. (V.) braziliensis. RESULTADOS: Houve predomínio do sexo masculino (75%), da cor branca (80%) e da profissão urbana (48%). A idade variou de três a 77 anos, com 56,5% entre 21 e 50 anos. 65,8% eram do Estado de São Paulo, prevalecendo a forma cutânea (79,6%). A IRM foi positiva em 73,4%, e a Rifi em 59,7%, enquanto a Bc evidenciou presença de leishmania em 30,6%. A PCR foi positiva em 81,6%, e a PCR-RFLP identificou L. (V.) braziliensis como espécie predominante (66%), o que também ocorreu com o seqüenciamento. Comparando PCR-RFLP e seqüenciamento, houve 61% de concordância entre os resultados, mostrando significância da PCR-RFLP para L. (V.) braziliensis. CONCLUSÕES: A IRM e a PCR foram estatisticamente equivalentes como métodos subsidiários para o diagnóstico da LTA, a PCR-RFLP e o seqüenciamento também o foram na identificação das espécies de leishmania, o primeiro apresentando menores custo e tempo de execução comparado ao seqüenciamento de DNA

    Cytokines and NO in American tegumentary leishmaniasis patients: profiles in active disease, after therapy and in self-healed individuals

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    Submitted by Kamylla Nascimento ([email protected]) on 2017-12-14T14:26:17Z No. of bitstreams: 1 ART. Cytokines and NO - SOUZA.pdf: 327507 bytes, checksum: 9cb92ad0b2d17463cf0552be0e260631 (MD5)Approved for entry into archive by Kamylla Nascimento ([email protected]) on 2017-12-15T12:19:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ART. Cytokines and NO - SOUZA.pdf: 327507 bytes, checksum: 9cb92ad0b2d17463cf0552be0e260631 (MD5)Made available in DSpace on 2017-12-15T12:19:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ART. Cytokines and NO - SOUZA.pdf: 327507 bytes, checksum: 9cb92ad0b2d17463cf0552be0e260631 (MD5) Previous issue date: 2013Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Departamento de imunologia. Recife, PE, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Departamento de imunologia. Recife, PE, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Departamento de imunologia. Recife, PE, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Departamento de imunologia. Recife, PE, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Departamento de imunologia. Recife, PE, Brasil.Universidade de São Paulo (IMT/USP). Instituto de Medicina Tropical de São Paulo. São Paulo, SP, Brazil.Universidade de Pernambuco (HUOC/UPE). Hospital Universitário Oswaldo Cruz. Recife, PE, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Departamento de imunologia. Recife, PE, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Departamento de imunologia. Recife, PE, Brasil.Studies suggest the influence of immune response on the successful treatment of American tegumentary leishmaniasis (ATL), and indicate the existence of protective immunity in self-healed patients. Thus, the aim of this work was to quantify interferon-gamma (IFN-γ), tumor necrosis factor-alpha (TNF-α), interleukin (IL-) 10, IL-17, IL-22 and nitric oxide (NO) in culture supernatants of PBMC from patients with active disease (AD), after treatment (AT), and from self-healed (SH) and healthy subjects (CT), in response to Leishmania (Viannia) braziliensis insoluble antigen (AgIns). All groups of patients produced IFN-γ, indicating a predominant proinflammatory profile. AD and AT patients presented TNF-α levels, with a slight increase after therapy, whereas it was weakly quantified in SH. Interestingly, NO secretion was significant in these individuals, whereas IL-17 appeared in low levels and seems to be regulated by NO. Although IL-22 was detected in AD, its role is still questionable. The presence of IL-10 in all groups of patients suggests that the cytokine plays distinct roles in the disease. These results indicate that specific cellular immunity takes part against Leishmania, but with some similarities between the different clinical states herein described; these mediators seem to be necessary for the cure to occur

    Estudo comparativo da prevalência de Staphylococcus aureus importado para as unidades de terapia intensiva de hospital universitário, Pernambuco, Brasil Comparative study on the prevalence of Staphylococcus aureus imported to intensive care units of a university hospital, Pernambuco, Brazil

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    O Staphylococcus aureus é um dos principais patógenos que coloniza indivíduos saudáveis na comunidade e responde por infecções em pacientes hospitalizados. Um estudo transversal foi realizado para determinar a prevalência de S. aureus meticilina-resistente e sensível entre 231 pacientes, internados entre janeiro e abril de 2003, nas unidades de terapia intensiva (UTIs) do Hospital Universitário Oswaldo Cruz, assim como os possíveis fatores associados à colonização. Foram coletadas secreções de narinas, axilas, região perineal e dermatoses com soluções de continuidade, de todos os pacientes, nas primeiras 48 horas de internamento nas UTIs. O material foi semeado em meios de cultura adequados. A prevalência de S. aureus igualou-se a 37,7% (87/231), sendo 13% (30/231) meticilina-resistente e 24,8% (57/231) meticilina-sensível. Idade, sexo, uso de antibioticoterapia, corticoterapia, motivo e local do internamento não se associaram à presença do S. aureus ou do meticilina-resistente. Houve associação significante entre procedência hospitalar e colonização por S. aureus, independente da cepa, e entre internamento anterior e presença do S. aureus meticilina-resistente. As narinas foram o sítio de colonização mais significante, por S. aureus meticilina-resistente (47/57=82,4%) e sensível (23/30=76,7%). Foi alta a prevalência do S. aureus (meticilina resistente ou sensível), assim como do meticilina-resistente entre os pacientes das UTIs deste hospital. Estudos futuros poderão comprovar se os resultados aqui descritos e medidas de rastreamento para S. aureus poderiam ser adotadas, de forma prospectiva, para se avaliar o risco, assim como a magnitude do efeito, no controle de infecções hospitalares provocadas por estes patógenos.<br>Staphylococcus aureus is the most important pathogen that colonizes healthy individuals in the community and is responsible for infections in hospitalized patients. A cross-sectional study was carried out to determine the prevalence of methicillin-resistant and sensitive S. aureus, in 231 patients, hospitalized from January to April 2003, in the Intensive Care Units (ICU) of Hospital Universitário Oswaldo Cruz, as well as possible factors associated with colonization. Secretions, from the anterior nostrils, armpits, perineum and dermatosis with continuity solutions, were collected from all patients, within the first 48 h of admission at the ICU. These samples were spread on appropriate media. The prevalence of S. aureus was 37.7% (87/231), of which 13% (30/231) methicillin-resistant and 24.8% (57/231) methicillin-sensitive. Age, gender, antibiotic therapy, corticoid therapy and cause and place of hospitalization were not associated to colonization by S. aureus or methicillin-resistance. There was a significant association between hospital of origin and S. aureus colonization, regardless of strain, as well as between previous hospitalization and the presence of methicillin-resistant S. aureus. Regardless of strain, nostrils were the most significant colonization site for methicillin-resistant (47/57=82.4%) and methicillin-sensitive S. aureus (23/30=76.7%). There was a high prevalence of S aureus, (methicillin resistant or sensitive), as well as of methicillin resistance among ICU patients in this hospital. Future studies may prove the results reported here and screening routines for S. aureus should be adopted, prospectively, to evaluate risk, as well as the magnitude of the effect, on the control of hospital infections caused by these pathogens
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