Preventing effect of vitamin E on oocytes apoptosis in morphinetreated mice

Several studies have shown that Morphine Sulfate affects on fertility, embryogenesis and consequent pregnancy loss and ultrastructural alterations of oocytes in animal model. This study was done to determine the effect of morphine sulfate on oocytes apoptosis and preventive role of daily supplementation of Vitamin E on oocytes apoptosis in morphine sulfate -treated mice. Twenty-four NMARI female mice were randomly allocated into four experimental groups. For 15 days, control group received saline (0.2 ml/day by subcutaneous injection), group I Vitamin E (60 mg/kg/day orally), group II Morphine Sulfate (10 mg/kg/day by subcutaneous injection) and group III Morphine Sulfate with Vitamin E (60 mg/kg/day orally). Then, animals were superovulated with PSMG (10 Units) and 10 Unites of HCG. The next day the animals were sacrificed, oocytes were flushed from each fallopian tube. The collected oocytes were subjected to determine apoptosis by Tunnel assay with using Fluorescent Microscope. According to our results, the number of retrieved oocytes were 121, 132, 86 and 114 in control, experimental group I, II and III, respectively. Morphine Sulfate treatment increased apoptosis in oocytes to 17.44% whereas oocytes apoptosis was 4.13% in Controls. Supplementation with Vitamin E in Morphine Sulfate -treated mice reduced the oocytes apoptosis to 7.01%. This study showed that Morphine can increase apoptosis in oocytes and Vitamin E treatment significantly reduces oocytes apoptosis in the Morphine Sulfate -treated mice

La vitrificación de ovocitos por método de mínimo volumen, método potencial para la criopreservación de la gameta femenina en bovinos

La producción de ganado vacuno es una de las explotaciones más importantes de nuestro país, siendo la de mayor relevancia en la producción pecuaria. Las biotecnologías asociadas a la reproducción permiten obtener mayores progresos genéticos y disminuir la incidencia de enfermedades de transmisión sexual, entre otras aplicaciones. La vitrificación es una biotecnología que permite la criopreservación de ovocitos y embriones. Consiste en el enfriamiento ultra rápido utilizando soluciones con alta concentración de sustancias crioprotectoras que evita la formación de cristales de hielo. Sin embargo, estas altas concentraciones de crioprotectores producen daño celular principalmente por su toxicidad y su efecto osmótico. Esta biotecnología está siendo utilizada ampliamente con éxito para la criopreservación de ovocitos y embriones humanos en las clínicas de fertilidad, habiendo desplazado en la práctica al congelamiento lento. En el bovino todavía no es utilizada de forma rutinaria, a pesar de que se ha demostrado que mejora la sobrevida embrionaria luego de la criopreservación respecto al congelamiento lento tradicional.Fil: Gutnisky, Cynthia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal; ArgentinaFil: Morado, Sergio Adrián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal; ArgentinaFil: Gadze, Tomás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal; ArgentinaFil: Donato, Antonella María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal; ArgentinaFil: Cetica, Pablo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal; Argentin

NO DIFFERENCE IN MATURATION CAPACITY, IN VITRO FERTILIZATION AND PREGNANT RATE OF OOCYTES OBTAINED BY ULTRASOUND-GUIDED OVUM PICK-UP FROM PREGNANT DAIRY COWS AND HEIFERS

Several lines of evidence assign to the ovarian follicular microenvironment the disparity between the fertility of dairy cows and heifers. This work evaluated the difference in maturation and subsequent embryonic development and pregnancy rate of oocytes from pregnant cows and heifers, during the spring season in a hot-desert weather location in Mexico. The oocytes were obtained from 112 ovum pickup technique (OPU) sessions, from Holstein pregnant cows, which were transported and maturated for 24 hoursusing a shipping and maturation commercial medium (SMM), fertilized and incubated in vitro (IVP-ET) evaluating number of oocytes obtained and embryoproduction. In the same way, oocytes obtained from 39 OPUsessions, from Holstein pregnant heifers, were exposed to the same protocol as the cows, and compared embryoproduction. Sexed frozen semen was used for both experiments. The 113 embryos obtained from cows and heifers were transferred, until reaching gestation diagnostic at day 45. Results showed significant differences in the number of oocytes obtained between cows of second and third lactation; however, no difference was shown among the number of embryos produced. While, for development of matured, fertilized and cultured oocytes, there was only significant difference in cows of second lactation, however, there was not an influence on the pregnancy rates. Although, the cleavage rate was higher for the group of heifers (63.5%), no difference was observed between groups. Also the pregnancy rate of transferred embryos, showed no difference between groups. We conclude that the number of recovered oocytes, the rate of cleavage, oocyte maturation and embryonic development through the OPU technique in pregnant dairy cattle are similar to what is obtained from pregnant heifer

Buffalo embryos produced by in vitro fertilization from oocytes matured during long-term transport

El búfalo (Bubalus bubalis) es una especie con excelente adaptación a sectores inundables. El mejoramiento genético a través de superovulación y transferencia embrionaria ha tenido escasos resultados debido a difcultades en la detección de celo, pobre respuesta ovárica y limitada recuperación de embriones post-lavaje. La técnica de fertilización in vitro de embriones (FIV) es una biotecnología de gran impacto en el progreso genético. El objetivo del presente trabajo fue estudiar los eventos tempranos de la FIV, analizando la tasa de maduración y desarrollo embrionario post-fertilización de ovocitos madurados in vitro (IVM) durante el transporte. Ovocitos bovinos y bubalinos fueron obtenidos por punción folicular de ovarios post-mortem e IVM durante el transporte por un período de 18 h. Se realizó la FIV con toros de fertilidad comprobada, con una concentración en microgotas de inseminación de 3-4 x 106 espermatozoides motiles/ml por un período de 6 horas. Los embriones fueron cultivados en medio oviductal sintético SOFaa en incubadora gaseada y ambiente humidificado a 38,5ºC durante 9 días. Se evaluaron las tasas de IVM, clivaje (día 2 post-fertilización) y blastocisto (días 7 a 9). Los resultados fueron analizados estadísticamente utilizando Fischer's Exact Test (p<0,05). No se observaron diferencias significativas en la tasa de maduración de ovocitos bubalinos de buena calidad respecto al control sin transporte (72 vs 88%), pero se registró una reducción significativa en la maduración de los ovocitos bubalinos de mala calidad (35%). Asimismo, se lograron producir los primeros embriones bubalinos luego de FIV, aunque las tasas de clivaje (34 vs 70 y 78%) y blastocisto (3 vs 27 y 31%) fueron significativamente menores en búfalos que en bovinos con y sin transporte, respectivamente. Los datos del presente trabajo constituirían el primer informe de FIV en búfalos y producción in vitro de embriones luego de IVM de ovocitos durante el transporte.The water buffalo (Bubalus bubalis) is a species with excellent adaptation to food-prone environments. Genetic improvement using the multiple ovulation and embryo transfer approach has been met with poor results in the buffalo, mainly due to difficulties in heat detection, erratic ovarian response to treatments and low embryo recovery post-flush. In vitro fertilization (IVF) is a powerful reproductive biotechnology that may provide a tool for genetic improvement in this species. The objective of this experiment was to study early embryonic events after IVF in the buffalo, analyzing in vitro maturation and IVF of oocytes matured during ground transportation. Bovine and bubaline oocytes were collected by follicular aspiration of post-mortem ovaries and in vitro matured for 18 h during ground transportation. In vitro fertilization was conducted, semen form bulls of proven fertility was processed and adjusted to a fnal concentration of 3-4 x 106 motile spermatozoa/ml in the insemination drops, oocytes were co-incubated for a period of 6 h. Embryos were then cultured in synthetic oviductal fluid (SOFaa) medium in an incubator and humidified atmosphere at 38.5ºC for 9 days. Oocyte maturation, cleavage and blastocyst rates were evaluated on days 0, 2 and 7 to 9, respectively and results were statistically analyzed using Fischer´s Exact Test (p<0.05). No significant difference was observed in the maturation rate of bubaline oocytes of good quality vs the non-transported control (72 vs 88%); however, the maturation rate of bubaline oocytes of bad quality was significantly lower (35%) than the rest of the groups. Data of present experiment are the first report of buffalo embryos produced by IVF from oocytes matured during transportation, although the cleavage (34 vs 70 and 78%) and blastocyst (3 vs 27 and 31%) rates were significantly lower for the buffalo than for the transported and non-transported domestic cattle, respectively.Fil: Konrad, José Luis. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Cs.veterinarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Scian, R.. Pont. Universidad Catolica Arg."sta.maria de Los Bs.as.". Facultad de Cs.agrarias; ArgentinaFil: Garrido, María José. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Cs.veterinarias; ArgentinaFil: Taminelli, G.. Pont. Universidad Catolica Arg."sta.maria de Los Bs.as.". Facultad de Cs.agrarias; ArgentinaFil: Sansinena, Marina Julia. Pont. Universidad Catolica Arg."sta.maria de Los Bs.as.". Facultad de Cs.agrarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Primeros terneros producidos in vitro tras punción ecoguiada de folículos ováricos

We report several experiments looking for an optimisation of the in vitro embryo production combined to repeated ovum pick-up (OPU-IVF). For this purpose, we tested two in vitro maturation protocols (with EGF and with VERO cells) and two culture systems (SOF and VERO cells + B2). We obtained 6.8 oocytes/session/cow from which 5.8 were selected for maturation. In vitro maturation with VERO cells permitted oocytes to develop up to the blastocyst stage. Day 7 blastocys rates after culture in SOF (16.7 percent) were similar to those obtained after culturing with VERO cells (26.9 percent). Day 21 pregnancy rates after transfer of fresh embryos produced in SOF or in co-culture with VERO cells were 66.6 and 37.5 percent respectively (p>0.05); however, only embryos produced in co-culture allowed to the birth of calves (33.3 percent). We did no find differences between day 21 pregnancy rates after transfer of frozen (71.4 percent) and vitrified embryos (46.4 percent). Only vitrified embryos allowed to obtain calves (20 percent). As a result, we have obtained the first calves after transfer of fresh and vitrified embryos produced by OPU-IVF in Spain.Se describe la puesta a punto de la aspiración transvaginal de ovocitos combinada con técnicas de producción de embriones in vitro (OPU-FIV). Se ensayaron dos sistemas de maduración (con EGF o con células VERO) y dos tipos de cultivo (SOF y cocultivo con células VERO + B2). Se obtuvieron 6,8 ovocitos/sesión/ vaca de los que 5,8 fueron aptos para maduración. La presencia de células VERO permitió el desarrollo embrionario hasta blastocisto. Los blastocistos obtenidos en día 7 tras cultivo en SOF (16,7 p.100) o en cocultivo con células VERO (26,9 p.100) fueron similares. Los porcentajes de gestación a 21 días tras la transferencia de embriones frescos fueron del 66,6 y 37,5 p.100 respectivamente (p>0,05), pero sólo los embriones producidos en cocultivo con células VERO dieron lugar a nacimientos (33,3 p.100). No hubo diferencias en las tasas de gestación a 21 días entre embriones congelados (71,4 p.100) y vitrificados (46,4 p.100). Sólo produjeron nacimientos los embriones vitrificados (20 p.100). Se han obtenido los primeros terneros nacidos en España por transferencia de embriones frescos y vitrificados producidos por OPU-FIV

Donación de ovocitos en reproducción humana asistida. Cuidados de Enfermería

La esterilidad es un fenómeno que afecta a un grupo de población significativo en las sociedades modernas, lo que se traduce en una alteración del bienestar social, que genera un aumento en la demanda de atención en reproducción asistida. Las posibles causas relacionadas son múltiples, considerando el retraso de la edad de maternidad una de las principales. Los numerosos avances médicos han generado una amplia oferta de tratamientos eficaces, entre los que tradicionalmente se encuentran la inseminación artificial y la fecundación in vitro/ microinyección intracitoplasmática. A estas técnicas se han sumado otras complementarias, como la donación de gametos, que actualmente está experimentando un gran auge, constituyendo un recurso cada vez más demandado por presentar resultados realmente positivos. El acceso a estas técnicas precisa una serie de requisitos mínimos regulados por la Ley 14/2006, sobre técnicas de reproducción humana asistida, que garantiza su buen uso y determina que, antes de escoger la técnica a llevar a cabo, es necesario realizar un estudio exhaustivo de la pareja o mujer que va a realizar el tratamiento. Dentro de este ámbito, enfermería juega un papel muy importante, atendiendo no solo la esfera física, sino también la psicológica, ya que estas situaciones van acompañadas de sentimientos negativos. Enfermería debe colaborar ofreciendo el apoyo necesario para ayudar al paciente a recuperar su estabilidad emocional.Grado en Enfermerí

Comparison of the production of offspring in two populations of Thais chocolata (Duclos, 1832) in the II Region of Chile.

Se evaluó el tamaño de ovocitos, tamaño de cápsulas, número de huevos y tamaño de embriones tempranos de ejemplares de Thais chocolata colectados en las localidades de La Rinconada (23º 28’ S) y Caleta Punta Arenas (21º 38’ S), norte de Chile, cada una de ellas con diferente oferta alimentaria. La evaluación del tamaño medio de los ovocitos provenientes de agregaciones reproductivas de cada localidad, se realizaron en base a cortes histológicos transversales del complejo gónada-glándula digestiva. La evaluación del tamaño de capsulas, número y tamaño de embriones, se realizó desde posturas generadas en laboratorio a partir de hembras obtenidas de ambas localidades. Los resultados no evidencian diferencias en el tamaño de los ovocitos, relacionados con las tallas de los ejemplares analizados, sin embargo, si se registran diferencias significativas en el tamaño de las capsulas, número de embriones y tamaños de estos entre las localidades estudiadas. Se analiza la relación entre las características morfométricas de la descendencia (Cápsulas – embriones) y el posible efecto del tipo de dieta sobre estas variables.We evaluated the egg number and size of oocytes, egg capsules and early embryos of Thais chocolata collected in two localities in northern Chile (La Rinconada, 23º 28’ S and Caleta Punta Arenas 21º 38’ S) differing in food supply. The evaluation of the average size of the oocytes in spawning aggregations from each locality, was conducted based on transverse histological section of the gonad-digestive gland complex. Evaluation of capsule size, number and size of embryos was performed from laboratory generated postures from females obtained from both locations. Result shows no differences in oocyte size between localities. However, significant differences was found for the size of the capsules and number and sizes early embryos between localities. It analyzed the relationship between morphometric caracteristics of descendence (capsules-embryos) and effects of diet in this parameters

Role of assisted reproduction biotechniques in the transmission of bovine viral diarrhea virus

Las biotécnicas de reproducción asistida han adquirido importancia comercial en los últimos años. Asociado a estas técnicas surge el interrogante sobre su rol en la posible transmisión de agentes infecciosos vía semen y ovocitos utilizados como material de partida. La elevada prevalencia y capacidad de causar infecciones reproductivas del virus de la Diarrea Viral Bovina (vDVB) lo ha convertido en un problema potencial en la producción in vitro de embriones. La presente revisión aborda los antecedentes previos sobre la temática y muestra resultados propios sobre las vías de infección del virus de la Diarrea Viral Bovina (vDVB) asociadas a las técnicas de producción in vitro (PIV) y su impacto en la reproducción bovina. Los resultados obtenidos demuestran alteraciones en el desarrollo folicular ovárico asociadas a infecciones persistentes por vDVB. Estas alteraciones fueron reflejadas en la baja eficiencia obtenida en la fecundación in vitro (FIV) como resultado de la interacción temprana entre el virus y la línea germinal del ovario. Por otra parte, se determinó que el vDVB-no citopático (vDVB-ncp) puede atravesar la zona pelúcida de ovocitos bovinos infectados al inicio de la etapa de maduración in vitro (MIV). Este hallazgo pone en evidencia la importancia de controles sanitarios en los sistemas de producción in vitro basados en la comprensión de los riesgos de transmisión del virus a partir de semen y ovocitos. Asimismo, la asociación del vDVB con gametas fue demostrada cuando la FIV se realizó tanto con ovocitos como con semen de animales persistentemente infectados (PI), donde se observó una disminución en las tasas de división y desarrollo de embriones. La información presentada en este artículo de revisión aporta al conocimiento sobre las implicancias de infecciones por vDVB en los sistemas de PIV y su efecto en el desarrollo embrionario, como así también al impacto de la transmisión de la infección en el ganado bovino mediante técnicas de reproducción asistida.Biotechnical of assisted reproduction have become commercially important in recent years. Associated with these techniques the question about his possible role in the transmission of infectious agents via semen and oocytes used as starting material arises. The high prevalence and ability to cause reproductive infections of the bovine viral diarrhea virus (BVDV) has become a potential problem in the in vitro production embryos. This update addresses the previous data on the subject and shows own results on the ways of infection with bovine viral diarrhea (BVDV) associated with in vitro production techniques and their impact on the reproduction bovine. The results demonstrate changes in the ovarian follicular development associated with persistent BVDV infection. These changes were reflected in the low efficiency obtained in the in vitro fertilization as a result of early interaction between the virus and ovarian germ line. Moreover, it was determined that non-cytopathic BVDV can cross the zona pellucida of bovine oocytes infected at the beginning of the stage of in vitro maturation. This finding highlights the importance of to understand fully the risks of transmission of virus via semen and oocytes and appropriate quality assurances are used in in vitro production embryos systems (IVP). Likewise, the association of BVDV was demonstrated with gametes when IVF was performed with both types from animals infected persistent, where a decrease was observed in cleavage rates and embryo development. The information obtained in this review article contributes to knowledge about the implications of BVDV infections in IVP systems and its effect on embryonic development, as well as the impact of the transmission of infection in cattle by breeding techniques assisted.Fil: Gonzalez Altamiranda, Erika Analia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Kaiser, Germán Gustavo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Laboratorio de Biotecnología de la Reproduccion; ArgentinaFil: Odeón, Anselmo Carlos. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Área de Investigación en Producción y Sanidad Animal; Argentin