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Morfología y ultraestructura espermática en semen fresco y crioconservado a largo término de cachama blanca (piaractus brachypomus)
Incluye tablas y figuras.La crioconservación seminal en peces nativos es considerada una biotecnología
reproductiva poco estudiada, debido a la baja cantidad de ensayos que se han
reportado para éstas especies. Sin embargo, en Piaractus brachypomus con el
aumento de la producción piscícola éste proceso puede contribuir al desarrollo del
mejoramiento genético de la especie, además de su conservación. En
consecuencia, es necesario estudiar varios aspectos de dicha biotecnología, entre
los cuales está las alteraciones morfológicas y ultraestructurales que sufren los
espermatozoides crioconservados, debido a que estos cambios pueden afectar el
proceso de fertilidad. Por lo anterior, el objetivo de la presente investigación fue
aportar al conocimiento básico del efecto de la crioconservación seminal a largo
término sobre la calidad espermática en cachama blanca (Piaractus brachypomus).
Para ello se realizó colecta seminal de 6 machos (n=6) ubicados en las instalaciones
del Instituto de Acuicultura de los Llanos (IALL) de la Universidad de los Llanos en
Villavicencio Meta, Colombia. Las muestras colectadas fueron diluidas en una
solución crioprotectora (agua destilada estéril, 5,5% (p: v) de glucosa, 12% (v:v) de
yema de huevo de gallina y 10% (v:v) de dimetilsulfóxido) y luego empacadas en
pajillas de 5ml y llevadas a almacenamiento en tanques de nitrógeno líquido a
temperaturas de -196°C. Se evaluaron 3 tiempos de conservación del semen en
nitrógeno líquido (24h, 1 mes y 6 meses), además de la evaluación de la muestra
control (semen fresco). El proceso de descongelación se realizó en baño de agua a
una temperatura de 37°C durante 60 segundos, seguido de la evaluación de calidad
seminal (tiempo de activación seminal, motilidad, concentración, morfología y
ultraestructura espermática). El control de semen fresco obtuvo el porcentaje de
motilidad más alto (90 ± 0,0%) y la motilidad más baja fue de 50 ± 9 y 51 ± 11 %, en
los tratamientos de 1 y 6 meses, respectivamente. Las anormalidades espermáticas
específicas que más se presentaron fueron colas cortas, evidenciándose
mayoritariamente en el tratamiento de 6 meses de congelación. A nivel de ultraestructura espermática, se encontraron rupturas parciales en las membranas
plasmáticas flagelares por procesos de lisis, además en la pieza media se halló
perdida de la forma mitocondrial y presencia de protuberancias facilitando así un
aumento significativo de esta estructura.Seminal cryopreservation in native fish is considered a poorly studied reproductive
biotechnology, due to the low number of trials that have been reported for these
species. However, in Piaractus brachypomus with the increase in fish production this
process can contribute to the development of the genetic improvement of the
species, in addition to its conservation. Consequently, it is necessary to study
several aspects of said biotechnology, among which are the morphological and
ultrastructural alterations that cryopreserved sperm undergo, because these
changes can affect the fertility process. Therefore, the objective of this research was
to contribute to the basic knowledge of the effect of long-term seminal
cryopreservation on sperm quality in white cachama (Piaractus brachypomus). For
this purpose, a seminal collection of 6 males (n = 6) located in the facilities of the
Instituto de Acuicultura de los Llanos (IALL) of the Universidad de los Llanos in
Villavicencio Meta, Colombia. The collected samples were diluted in a cryoprotective
solution (sterile distilled water, 5.5% (p: v) glucose, 12% (v: v) chicken egg yolk and
10% (v: v) dimethylsulfoxide) and then packed in 5ml straws and taken to storage in
liquid nitrogen tanks at temperatures of -196°C. Three times of semen conservation
in liquid nitrogen (24h, 1 month and 6 months) were evaluated, in addition to the
evaluation of the control sample (fresh semen). The defrosting process was carried
out in a water bath at a temperature of 37°C for 60 seconds, followed by the seminal
quality evaluation (seminal activation time, motility, concentration, morphology and
sperm ultrastructure). Fresh semen control obtained the highest motility percentage
(90 ± 0.0%) and the lowest motility was 50 ± 9 and 51 ± 11%, in the 1 and 6 month treatments, respectively. The specific sperm abnormalities that occurred most were
short tails, evidenced mostly in the treatment of 6 months of freezing. At the level of
sperm ultrastructure, partial ruptures were found in the flagellar plasma membranes
due to lysis processes, and in the middle piece it was found to be lost in the
mitochondrial form and the presence of bumps, thus facilitating a significant increase
in this structure.Resumen. -- Abstrac. -- OBJETIVO GENERAL. -- Objetivos específicos. -- INTRODUCCION. -- MARCO TEORICO. -- Aspectos generales de la especie. -- Crioconservación seminal en peces. -- Morfología y ultraestructura espermática. -- MATERIALES Y METODOS. -- Localización y descripción del área de estudio. -- Material biológico. -- Obtención de semen. -- Preparación del semen pre-congelación. -- Empacado y congelación. -- Descongelación seminal. -- Evaluación seminal. -- Determinación de motilidad y tiempo de activación espermática. -- Morfología espermática. -- Ultraestructura espermática. -- Microscopia electrónica de transmisión. -- Análisis estadístico. -- Resultados. -- Discusión. -- Conclusiones. -- Bibliografía. --PregradoMedico(a) Veterinario(a) ZootecnistaMedicina Veterinaria y Zootecni