RAF KINASE INHIBITOR PROTEIN (RKIP) EXPRESSION AND FUNCTION IN UTERINE LEIOMYOMA

Abstract

I leiomiomi uterini (detti anche fibromi, miomi) sono tumori benigni che originano dallo strato muscolare dell’utero (miometrio) e rappresentano la principale indicazione dell’isterectomia nel mondo. I leiomiomi uterini colpiscono circa il 77% delle donne in eta fertile e circa il 25% di esse presenta tumori con sintomatologia clinica evidente, tra cui la presenza di forte o anomalo sanguinamento uterino, dolore o pressione pelvica, infertilità e aborti ricorrenti. È comunemente noto che questi tumori sono caratterizzati da una elevata proliferazione cellulare ed una eccessiva deposizione di matrice extracellulare (ECM). Si ritiene che la crescita dei leiomiomi dipenda dall’azione degli ormoni ovarici mediante elementi intermedi come citochine e fattori di crescita. La Proteina Inibitore della Raf Chinasi (RKIP) ha un ruolo emergente come regolatore in diversi pathway molecolari ed è associato a un numero crescente di malattie, essendo coinvolto indiverse vie di trasduzione del segnale. Lo scopo della presente tesi è stato quello di indagare la presenza e il ruolo dell’RKIP nel leiomioma. Abbiamo dimostrato che l’RKIP è espresso nel miometrio e nel leiomioma. Per individuare il ruolo dell’RKIP, abbiamo eseguito esperimenti in vitro con un composto chimico quale la locostatina, capace di legarsi all’RKIP bloccandolo. Abbiamo dimostrato che il trattamento con la locostatina porta all’attivazione della via di segnale MAPK (fosforilazione di ERK), fornendo una opportuna validazione dell’efficacia nel bloccare l’RKIP. Inoltre, abbiamo dimostrato che l'inibizione dell’RKIP con la locostatina riduce le componenti della ECM, tra cui il collagene 1A1, la fibronectina, e il versican. In aggiunta, l'inibizione dell’RKIP con la locostatina riduce la proliferazione cellulare e la migrazione sia nelle cellule miometriali che di leiomioma. Infine, abbiamo dimostrato che il trattamento con la locostatina riduce l’espressione del GSK3β. Pertanto, anche se l'attivazione delle MAPK dovrebbe far aumentare la proliferazione e la migrazione, la destabilizzazione e l’inattivazione del GSK3β porta alla riduzione della proliferazione e della migrazione delle cellule miometriali e di leiomioma