Profil Ekspresi Protein Interleukin 8 (IL-8) Pada Sapi Mastitis Subklinis.

Abstract

Mastitis merupakan suatu kondisi peradangan (inflamasi) pada kelenjar mammae akibat infasi bakteri patogen ke dalam puting sapi atau akibat adanya luka yang menimbulkan peluang infeksi baik secara akut maupun kronis. Mastitis subklinis merupakan tipe mastitis yang sulit dideteksi peternak karena gejala-gejalanya tidak dapat diketahui tanpa melalui metode uji kualitas susu tertentu. Salah satu metode deteksi mastitis subklinis yang sampai saat ini dianggap sederhana dan cepat adalah metode California Mastitis Test (CMT). Hasil deteksi melalui metode inipun sangat baik untuk menentukan kondisi keparahan mastitis hingga tingkat subklinis meski kemudian perlu dilakukan uji tambahan untuk meyakinkan status positif mastitis. Neutrofil memiliki agen aktivator dan kemoatraktan yang spesifik yaitu interleukin 8 (IL-8), protein yang diproduksi oleh sel limfoid yang teraktivasi oleh induksi lipopolisakarida bakteri dalam tubuh sehingga mampu mengaktifkan dan menimbulkan migrasi neutrofil ke area infeksi (kelenjar susu) untuk proses pemusnahan patogen. Hal ini kemudian digunakan sebagai kandidat marka molekul yang berkaitan dengan kejadian mastitis terutama untuk mendukung ditegakkannya status mastitis subklinis setelah uji dengan CMT. Penelitian in bertujuan untuk mengetahui profil ekspresi IL-8 pada sapi perah mastitis subklinis dan mengetahui keterkaitan antara konsentrasi IL-8 dengan tingkat keparahan mastitis subklinis berdasarkan CMT. Sampel darah dan susu dalam penelitian ini diperoleh dari 30 ekor sapi perah Friesien Holstein (PFH) (120 puting) milik KUTT Suka Makmur kecamatan Grati Kabupaten Pasuruan. Masing-masing sapi anggota sampel diuji dengan CMT, dilakukan klasifikasi tingkat mastitis subklinis yang terdeteksi, dikoleksi susu dan darahnya, kemudian sampel protein susu dan serum diuji konsentrasi IL-8 dengan metode ELISA pada panjang gelombang 450nm. Profil berat molekul IL-8 dikonfirmasi melalui metode elektroforesis SDS-PAGE. Konfirmasi keberadaan IL-8 dilakukan melalui metode imunohistokimia pada pulasan darah menggunakan antibodi bovine anti IL-8. Hasil penelitian menunjukkan bahwa IL-8 merupakan protein dengan berat molekul 8,5 kDa. Konsentrasi IL-8 memiliki korelasi positif terhadap tingkat keparahan mastitis subklinis dengan koefisien determinasi sebesar 99,5%. Dengan demikian dapat disimpulkan bahwa semakin tinggi tingkat mastitis maka konsentrasi IL-8 semakin meningkat