Saitama Medical University Repository

素川 沙矢香

素川 沙矢香  内容の要旨                    論文内容の要約（要旨）                  【背景】 糖尿病網膜症は、糖尿病の主要な細小血管合併症の一つであり、重症化すると失明につながる可能性がある。従来の血糖コントロールと比較して、集中治療は網膜症の進行を抑制する一方、集中治療または急速な血糖改善が、網膜症の早期悪化（EWDR）と関連していることが報告されている。EWDR を予防するための HbA1c 低下の適切なタイミング及び他のEWDR リスクとの関連性についてはコンセンサスがない。そこで多様な因子の中で EWDRのリスク因子の関連性を明らかにすることを問いとした。 【目的】 本研究では初診後の EWDR について、初診時 HbA1c および治療内容などの患者情報、初診から 3、6、12 か月後の HbA1c 変化（Δ3、6、12MHbA1c）との関連性を後ろ向き調査により評価することで、初診後 EWDR のリスク因子の関連性を明らかにしようとした。 2 型糖尿病で網膜症がある患者において、12 か月以内という短期間での HbA1c 変化や治療強化が EWDR のリスク因子になっているかは報告がなく、これらを調査したことが独自の検討内容である。 【対象と方法】 対象は、2006 年 1 月から 2015 年 10 月に朝日生命成人病研究所附属医院もしくは埼玉医科大学病院内分泌糖尿病内科を初診した 2 型糖尿病患者のうち、初診日から 6 ヵ月以内に眼科検査を受けて単純網膜症（SDR）または前増殖網膜症（PPDR）と診断され、初診日から 6～18 ヵ月以内に 2 回以上眼底検査を受けた者。 方法は、初診と最終観察の眼底検査の所見悪化を EWDR とし、悪化・非悪化の両群を比較した。SDR 患者において、EWDR を目的変数、初診時 HbA1c やΔHbA1c、治療内容などを説氏  名      素川 沙矢香 学位の種類     博士（医学） 学位記番号     乙第 1514 号 学位授与の日付   令和 3 年 12 月 17 日 学位授与の要件   学位規則第 3 条第 1 項第 4 号に該当 学位申請論文タイトル及び掲載誌 Characteristics Associated with Early Worsening of Retinopathy in Patients with Type 2 Diabetes Diagnosed with Retinopathy at Their First Visit: A Retrospective Observational Study 初診時糖尿病網膜症を認めた 2 型糖尿病患者の網膜症の早期悪化の特徴：後ろ向き観察研究 Journal of Diabetes Research vol. 2021, Article ID 7572326, 9 pages, 2021. 2021 年 7 月 19 日 掲載 学位審査委員（主査）教授 篠田 啓       （副査）教授 泉田 欣彦、教授 前田 卓哉、教授 亀井 美登里 明変数としロジスティック回帰分析を行った。 【結果】 初診時 SDR を有する患者 109 名、PPDR を有する患者 63 名のうち除外基準により SDR 88名、PPDR 47 名が解析対象となった。 最終観察時に初診時 SDR 患者の 16%が網膜症なしに改善、65%が SDR を維持、18%が PPDRに悪化、1%が増殖網膜症（PDR）に悪化した。初診時 PPDR 患者では 9％が SDR に改善、72％が PPDR を維持、19％が PDR に悪化した。SDR 患者は、初診時 HbA1c が 1％上昇すると、網膜症が悪化するオッズ比が 1.44 となった。初診時から 3、6、12 ヵ月後に HbA1c が1％低下した場合の網膜症悪化のオッズ比は、それぞれ 1.34、1.31、1.38 であった。SDR 患者では、悪化群は非悪化群に比べて有意に治療強化がされており、また降圧剤を使用していなかった。多変量解析においてΔ12MHbA1c と初診時 HbA1c は EWDR と有意に関連していた。ΔHbA1c、初診時 HbA1c、治療強化が互いに交絡していた。 【考察】 本研究では SDR の対象者において、HbA1c の低下、治療強化、初診時 HbA1c 値が EWDRと関連していた。2 型糖尿病患者の EWDR については RCT で示されていない。EWDR のメカニズムは解明されていないが、多数のサイトカインが網膜症に関与していることが明らかになっている。EWDR は低血糖が要因かもしれないとされていたが、低血糖リスクが低い薬剤でも EWDR が増加したという報告がある。今回の研究は探索的な実臨床の研究として今後の実証的研究や新たな基礎研究に繋げることのできる内容になっている。 【結論】 初診時 HbA1c 高値、HbA1c の大幅な減少、および治療強化が、初診時 SDR 患者におけるEWDR のリスク因子として同定された。したがって、患者は初診時以降、網膜症の有無を綿密に追跡する必要がある。 

初診時糖尿病網膜症を認めた2型糖尿病患者の網膜症の早期悪化の特徴：後ろ向き観察研究

齋藤 良平

齋藤 良平 内容の要旨                 論文内容の要約（要旨） 【背景】  近年の生殖補助技術(ART)の進歩はめざましいものの、ART による妊娠成功率は、15-30%とまだ改善の余地がある。不成功症例の多くは、着床障害によるものと考えられ、着床プロセスの分子基盤の解明および着床率を制御する因子の開発の社会的意義は大きい。着床調節においては、胚側・子宮側において様々な分子の関与が知られる。例えば、インテグリンαvβ3 に代表される接着分子や、Leukemia inhibitory factor (LIF)に代表される分泌因子や、フィブロネクチンを含む細胞外基質が知られる。しかしながら、これら複数の因子は巧妙にクロストークしており、未だ着床成立の分子メカニズムの詳細は不明である。そこで、本研究では、着床成立を調節する新規分子の探索および新規分子による細胞間接着の分子基盤の解明を学術的な「問い」と設定した。 【目的】 本学医学部生理学のグループは、アフリカツメガエル卵保護膜に存在する低分子タンパク質であるダイカルシン（Dicalcin; DC）が標的糖タンパク質 gp41 と結合し、卵保護膜の超微細構造および粘弾性を制御することで、精子と卵保護膜の相互作用および受精成立を調節することを明らかにしてきた。「糖鎖および糖タンパク質」が関与する生殖事象として、着床成立における細胞間の接着・浸潤が知られる。本研究では、ダイカルシンの in vitro 着床モデルにおける細胞間接着に及ぼす作用について解析した。ダイカルシンという新規の着床調節因子を解析するという点から本研究は創造性をもち、ダイカルシンによる着床調節の分子基盤をインテグリン発現量やF-アクチン分布に基づき解析する点において、学術的独自性をもつと考えている。 【対象と方法】 着床研究においてヒト胚および子宮内膜を用いることは極めて困難なため、その替わりに胚モデル細胞(BeWo)のスフェロイド（数百個の BeWo 細胞からなる塊）とヒト子宮内膜モデル細胞(Ishikawa:ISK)の接着（in vitro 着床アッセイ）が頻繁に利用される。シート状に培養した ISK細胞上に BeWo スフェロイドを撒いて DC 前投与群とコントロール群とで接着率の変化を解析し氏  名      齋藤 良平 学位の種類     博士（医学） 学位記番号     甲第 1526 号 学位授与の日付   令和 4 年 3 月 25 日 学位授与の要件   学位規則第３条第１項第 3 号に該当 学位申請論文タイトル及び掲載誌 Dicalcin suppresses in vitro trophoblast attachment in human cell lines ダイカルシンはヒト細胞株を用いた in vitro 着床モデルにおける細胞間接着を抑制する Biochemical and Biophysical Research Communications (BBRC) 570 (2021) 206-213 2021 年 7 月 24 日 掲載 学位審査委員（主査）教授 奥田 晶彦       （副査）教授 髙井 泰、教授 齋藤 正博、准教授 藤田 恵子 た。また、両群における BeWo スフェロイド-ISK 細胞接着の超微細構造の変化を電子顕微鏡解析した。また、BeWo 細胞の F アクチン染色を行い、DC 投与の有無で細胞内 F-アクチン網の構造変化を解析した。 【結果】  あらかじめ BeWo 細胞スフェロイドを細胞外のダイカルシンタンパク質と反応させると、ISK細胞との接着率が有意に低下することが分かった（コントロール群に比べ 78%の接着率）。次に、ダイカルシン全長を複数のペプチド領域に分け、各々に対応した合成ペプチドの BeWo スフェロイドの接着に及ぼす影響を調べ、接着阻害作用を示す領域を同定した(ペプチド 6:P6)。P6をあらかじめ BeWo 細胞スフェロイドと反応させると、P6 用量依存性に接着率が低下した。また、P6 を投与した BeWo 細胞のウエスタンブロット解析により、P6 により BeWo 細胞のインテグリンαvβ3 発現量が低下したことが分かった（コントロール群に比べ 74%）。BeWo スフェロイドと ISK 細胞の接着面の電子顕微鏡解析をしたところ、P6 前投与により、接着部位数の減少および細胞間隙の拡張がみられた。P6 投与による BeWo 細胞内 F-アクチンの分布を定量解析したところ、F-actin の断片化・菲薄化がみられた。 【考察】 ダイカルシンは、BeWo 細胞におけるインテグリン発現量を低下し、インテグリン下流の細胞内F-アクチンネットワークを改変させることにより、BeWo スフェロイド-ISK 細胞間の接着を阻害することが示唆された。着床においては、胚側・子宮側において様々な分子の発現量が変動し、着床成立に関与することが知られる。今後、ダイカルシンによるインテグリン発現調節の分子機構を明らかにし、その他の着床調節因子とのクロストークを解明する必要があると考えている。 【結論】 広く脊椎動物に存在するダイカルシンというカルシウム結合タンパク質及びその一部のアミノ酸配列に基づくペプチドをヒト胚細胞モデルである BeWo 細胞のスフェロイドに細胞外から反応させると、ヒト子宮上皮細胞モデルである Ishikawa 細胞との接着率が有意に低下することを見出した。 

ダイカルシンはヒト細胞株を用いたin vitro着床モデルにおける細胞間接着を抑制する

榎本 直記

榎本 直記 審査結果の要旨 論文審査の結果の要旨 申請者：榎本 直記  学位申請論文：家族性大腸腺腫症における十二指腸腺腫の臨床病理学的/分子遺伝学的検討および高度十二指腸腺腫に対する外科的治療の検討（thesis）  代表指導教員：石田 秀行 指導教員：江口 英孝  審査委員会開催日時：2021 年 12 月 18 日 17 時 15 分～18 時 30 分 開催場所：日高キャンパスゲノム棟 603 会議室 審査委員：堀江 公仁子（主査）、櫻本 信一、今枝 博之、山田 健人（書面審査）  【事前審査】 審査委員会開催に先立ち、審査委員から寄せられたコメントに基づき、thesis の体裁や用語の統一性、図表の表記について改訂の要請を行い、適切に修正された thesis と論文内容の要約（要旨）を審査対象とした。  【審査内容】 申請者の資格、研究倫理申請内容に問題ないことが確認された上、申請者から研究内容についてプレゼンテーションが行われた。申請論文は「家族性大腸腺腫症における十二指腸腺腫の臨床病理学的 /分子遺伝学的検討および高度十二指腸腺腫に対する外科的治療の検討 」について遺伝学的・分子生物学的解析と外科学的検討を行った thesis である。  本研究では家族性大腸腺腫症(familial adenomatous polyposis, FAP)において比較的頻度が高い死因である十二指腸癌とその前駆病変である多発十二指腸腺腫症に注目し、３つの課題について検討を行った。 ①FAP 原因遺伝子 APC の生殖細胞系列病的バリアントが確定している十二指腸腺腫症/癌の症例コホートに基づき、進行性十二指腸腺腫症/癌（修正 Spigelman 分類：modified Spigelman’s classification, mSC の Stage IV/V）の予測因子の検討を行う。 ② mSC Stage IV 十二指腸腺腫症の腫瘍組織における DNA シーケンス解析（whole exome sequencing または target sequencing）を行い，腫瘍発生に関わる体細胞病的バリアントの検索を行う。 ③ 埼玉医科大学総合医療センター消化管・一般外科において膵温存全十二指腸切除術 (pancreas-sparing total duodenectomy , PSTD)を施行した症例について，術後新規原発腫瘍の発症と合併症について検討する。  これらの解析により、①FAP 55 家系 55 症例における mSC Stage IV/V の独立予測因子として、多変量解析により乳頭部腺腫が同定され、②DNA シーケンス解析を施行した 11 症例のうち5 症例で APC の体細胞病的バリアントを認めた他、SMAD4，MAP2K1，TERT，KRAS，TP53の病的バリアントを有する症例が各１例ずつ同定された。③ PSTD を施行した 17 症例のうち 10 例に Clavien–Dindo 分類 Grade II 以上の術後合併症を認め、中央値 48 ヶ月の追跡期間で発生した術後新規原発腫瘍は，胃癌が 2 例，デスモイド腫瘍・直腸癌・小腸癌が各１例ずつであった。  本研究により、FAP における進行性十二指腸腺腫症/癌について、予測因子としての乳頭部腺腫の重要性、APC 体細胞病的変異によるセカンドヒットとや既知 FAP 関連遺伝子体細胞病的変異の病態発症への関与、全十二指腸を切除する PSTD 後においても一定数、新規の消化管腫瘍が発生することが明らかになった。  本研究は、FAP 自体への診断・治療の向上により、大腸がん以外の死因が現在問題になっている趨勢において、FAP の死因として頻度が高い十二指腸癌とその前駆病変として十二指腸腺腫症における病態発症と遺伝学的要因との関連性、十二指腸全摘後の合併症と病態の観察を行っており、症例数は限られるものの、国内外において遺伝学的および外科学的に重要な取り組みであると考えられる。  申請者は外科学の臨床については専門的知識を有しており、発表において本研究についての必要十分な説明を行うことができた。後述の質疑応答内容（別紙参照）のように審査委員からの質問に対して真摯に回答を行い、当日回答しきれなかった内容については、再度文献等を調査、指導教員への確認を行った上で、書面での回答を行った。  なお、研究①の進行性十二指腸腺腫症/癌の予測因子の検討において、審査委員会時に提示された thesis 内容には他院において遺伝学的解析を行った症例も含まれていたため、本 thesis については同じプラットフォーム上で遺伝学的解析を行った本学の症例に限って比較の再解析を行い、修正版を再提出するに至った。  修正版 thesis ならびに要旨について全員で回覧し、審査前の対応から審査後の改訂に至るまで、一貫して誠実な態度で臨んだ申請者の人となりも鑑み、申請者は学位授与の水準に適格であると審査委員全員一致で判断した。  （文責：堀江 公仁子） 

家族性大腸腺腫症における十二指腸腺腫の臨床病理学的/分子遺伝学的検討および高度十二指腸腺腫に対する外科的治療の検討

宮内 幸子

宮内 幸子 審査結果の要旨 論文審査の結果の要旨 宮内幸子 氏（毛呂山キャンパス呼吸器内科学）の学位審査員会は 2021 年 12 月 13 日に毛呂山キャンパスカタロスタワー１階クロード・ベルナールホールで開催された。委員会構成員は、主査：村上 孝（毛呂山キャンパス微生物学）、副査：三村俊英（毛呂山キャンパスリウマチ・膠原病内科学）、菊地 茂（川越キャンパス耳鼻咽喉科学）、魚住尚紀（毛呂山キャンパス生化学）で、全員が出席した。  はじめに、本人の研究歴、倫理審査申請書類、出版掲載雑誌等について検討し、申請資格に問題がないことを確認した。申請論文は、タイトル「Japanese cedar pollen upregulates the effector functions of eosinophils」として、2021年 7月 5日付の Asia Pacific Allergy誌に電子版掲載されている。  本研究は、スギ花粉に感作されていない気管支喘息患者において花粉飛散時期に一致して喘息症状が悪化する例があることに着眼し、スギ花粉特異的 IgE 抗体を仲介しない独立した増悪機構を追求したものといえる。アレルギー疾患を代表する炎症細胞として好酸球を健常人末梢血から分離し、スギ花粉およびその主要アレルゲン Cry j 1の曝露による好酸球のエフェクター機能を試験管内で評価している。申請者は好酸球活性化の指標として接着分子 ICAM-1に対する細胞接着能を in vitro試験し、上記アレルゲン曝露による好酸球接着能の亢進とともに、αMおよびβ２インテグリン分子を介していることを示した。それと同時にアレルゲン曝露は好酸球からの活性酸素産生と好酸球特異的顆粒タンパク質 Eosinophil-derived neurotoxin (EDN)の放出を促進する結果が得られている。またアレルゲン曝露によるこれら好酸球エフェクター機能の亢進には炎症シグナルを伝達するプロテアーゼ活性化受容体 2 (PAR-2)を介する実験結果も得られている。これらの結果から、スギ花粉およびその主要アレルゲン Cry j 1は抗原感作とは独立に（健常人由来）好酸球を活性化することが示され、IgE非依存性の気管支喘息増悪を説明する機序となり得るものであった。申請者の行った実験系には一定の限界があるものの、本研究はアレルギー性疾患に対するスギ花粉の曝露回避が患者管理の実践において重要なエビデンスになるものと考えられた。  審査委員会においては、申請者からプレゼンテーションの後、研究内容について以下の質疑（コメントを含む）があった： 1. スギ花粉の主要アレルゲン Cry j 1を介した好酸球活性化の機序はどのようなものなのか。 2. 本研究は特異的 IgEを介した気管支喘息の増悪機序とはどのような関係にあるのか。 3. 気管支喘息患者由来好酸球におけるスギ花粉と Cry j 1の役割はどのように考えるべきか。 4. 分離好酸球における休止状態と活性化状態はどのように区別・評価していたのか。 5. 接着分子プレート・コーティングと各評価系はどのように仕分けしていたのか。 6. 中和抗体を用いた接着阻害実験で特異性を際立たせるために、他分子を標的とした抗体使用実験を考慮しなかったのはなぜか。 7. PAR-2 活性化の機序として他にどのようなことが考えられるか。 8. 一連の実験でもっとも苦労した部分はどこか。 9. 好酸球性副鼻腔炎など抗原特異的 IgE とは関連しない疾患の増悪との関連で、この好酸球活性化の機序は臨床的に納得できる興味深いエビデンスといえる。 10. 好酸球を「直接」活性化するとした文言について、その根拠はどこにあるのか。 11. Cry j 1 に対する会合分子はどのようなものを想定しているのか。 12. PAR-2 評価において好酸球由来のセリン・プロテアーゼを介した反応については考慮したことがあるか。 13. 実験系に使用した Cry j 1の濃度が極端に低いため(pg/mL)、希釈系で注意したことがあれば述べて欲しい。 14. 好酸球活性化の指標として ICAM-1との接着能を重要視しているが、この活性は病態形成のどの部分を反映したものなのか。また好酸球の走化性について試験したことはあるか。 15. TRL4と TRL7 については試験しているが、あえてこのパターン認識受容体のみを調べた理由はなぜか。 16. Cry j 1 がパターン認識受容体を介して好酸球活性化をするかどうか、既存のシグナルの分析から推測できないだろうか。  以上、申請者は、各委員からの質疑にも的確に回答することができた。また、その応答の仕方や考察内容から、本研究は申請者が主体となり実施されたものであることが十分に確認できた。また申請者の学識、真摯な態度を併せて判断し、審査委員全員が一致して学位授与に相応しいと判定した。 

スギ花粉は好酸球のエフェクター機能を活性化する

黄 海鵬

子宮内膜症合併妊娠の周産期予後と管理方法、ならびに経腟嚢胞穿刺の有用性と安全性に関する検討

松浦 紘一郎

松浦 紘一郎 内容の要旨                   論文内容の要約（要旨） 【背景】 子宮の悪性間葉系腫瘍（MMTU）と平滑筋腫では治療方針が大きく異なり治療前の鑑別が重要である。一般的に MMTU は T2 強調像で高信号を示し、平滑筋腫は低信号となるため鑑別は比較的容易であるが、稀に浮腫や変性により T2 強調像で高信号を示す平滑筋腫（T2HILM）があり鑑別が困難になることがある。これらの鑑別に MRI 所見は有用とされておりいくつか論文が発表されているが、明らかに子宮筋腫である T2 強調像で低信号の症例を含めているものや、症例数が多くない報告がほとんどである。また、拡散強調像の有用性が知られているが、computed DWI を含めた評価は行われていない。 【目的】 鑑別に有用と思われる複数の MRI 所見、臨床的所見から MMTU と T2HILM との鑑別に有用な新たな判別法を作成することを目的とした。 【対象と方法】 2007 年 5 月から 2020 年 8 月までに当院で手術を受けた MMTU の患者 32 人 32 例と、T2HILM の患者 30 人、34 例のデータを対象とした。これらの臨床所見、高 b 値の computed DWI(b=1500-4000 s/mm 2 )を含む MRI の質的特徴および量的特徴を retrospective に評価した。Fisher の正確確率検定、Wilcoxon の検定で分析を行い、多変量解析を用いて鑑別に有用な所見を検討した。 【結果】 MMTUとT2HILMの鑑別において、定性的評価としては出血を示唆するT1 bright areaが、定量的評価としては ADC 値がそれぞれ単独で最も有用な所見であった。Computed DWI の所見は実測した DWI(b=1000 s/mm 2 )より鑑別に有用であったが、b 値を高くすることによる診断能の向上には限界があった。T1 bright area、computed DWI（b=2000s/mm 2 ）での氏  名      松浦 紘一郎 学位の種類     博士（医学） 学位記番号     甲第 1527 号 学位授与の日付   令和 4 年 3 月 25 日 学位授与の要件   学位規則第３条第１項第３号に該当 学位申請論文タイトル及び掲載誌 Utility of magnetic resonance imaging for differentiating malignant  mesenchymal tumors of the uterus from T2-weighted hyperintense leiomyomas 子宮の悪性間葉系腫瘍と T2 強調像で高信号を示す平滑筋腫との鑑別における磁気 共鳴画像の有用性 Japanese Journal of Radiology  2021 年 11 月 9 日 掲載  学位審査委員（主査）教授 髙橋 健夫       （副査）教授 宮﨑 将也、教授 川崎 朋範、准教授 長井 智則 子宮筋層に比しての高信号、T2 hypointense band の有無を組み合わせることにより高い精度（86.4％）で MMTU と T2HILM の鑑別が可能であった。 【考察】 DWI では b 値を高くすることにより正常組織の信号が抑制され診断能が高くなるが、b 値が高すぎると病変の信号も抑制されるため、その診断能の上昇には限界があった。複数の所見の組み合わせで 86.4％の精度で MMTU と T2HILM の鑑別ができた。これは以前の報告よりやや低い精度であったが、以前の報告では T2 強調像で低信号を示す筋腫が含まれていたため、本研究での診断能は比較的高いものだと言える。 【結論】 MMTU と T2HILM の鑑別において T1 bright area、computed DWI（b=2000s/mm 2 ）での子宮筋層に比しての高信号、T2 hypointense band の有無の組み合わせが有用であった。 

子宮の悪性間葉系腫瘍とT2強調像で高信号を示す平滑筋腫との鑑別における磁気共鳴画像の有用性

金田 寿子

金田 寿子 審査結果の要旨 論文審査の結果の要旨 2021 年 12 月 16 日午後 6 時 00 分から日高キャンパス教員棟 2 階会議室にて審査委員全員の出席にて学位審査委員会を開催した。 冒頭、申請者の資格確認が行われ、大学院 3 年早期卒業の条件についても問題がないことを一同確認した。続いて、申請者の発表が行われた。  申請者は、細胞外小胞について概説を行った後、学位論文“近接プロテオミクスには細胞外小胞同定の可能性がある”の内容を説明された。  細胞外小胞 (EV) は、細胞間コミュニケーションのバイオマーカーおよびメディエーターであり、EV 上に発現するタンパク質の同定は、がんの研究および臨床応用に貢献する可能性がある。本研究では、肺がんに多く発現している接着分子、CHL1（close homolog of L1）の近接タンパク質の同定のため、近接分子標識法（Proximity Labeling）およびプロテオーム解析技術の組み合わせが有用であるかどうか検討した。野生型マウスおよび肺がんモデルマウス、健常者および肺がん患者の血清を用いて、それぞれ EV の精製、回収を行い、CHL1 が発現する血清 EV を、EMARS法で処理し、目的タンパク質分子の近接分子を標識した。肺がんモデルマウスの血清 EV の CHL1に近接する候補タンパク質SLC4A1を同定した。野生型マウスと比較し肺がんモデルマウスでは、血清 SLC4A1 は有意に高い値を示した。またヒトの血清 EV を用いた実験では、肺がん患者の血清 EV の CHL1 に近接する候補タンパク質 Caspase14 を同定した。肺がん患者の血清 Caspase14値は健常者と比べ、有意に高い値を示した。本研究では近接標識法とプロテオーム解析を組み合わせることにより、マウスとヒトの両方で EV 上 CHL1 で近接発現する候補タンパク質を同定しえた。この結果は、近接分子標識法（Proximity Labeling）およびプロテオーム解析の組み合わせが、EV 上に発現するタンパク質の同定に有用である可能性を示す。  その後、申請者に対して審査委員から以下の質問及びコメントが発せられた。  【質疑内容】 1．方法論に焦点を当てる内容で、学位審査の抄録を修正すべき。 2．「未来」という文言は奇異である。転移のことか。 3．SLC4A1 は large tumor では検出できているが、small tumor ではほとんど検出できていないようにみえる。 4．HRP を用いる近接分子標識法は周囲 200nm の広い領域の分子を検出しうる。EV 全体をカバーしてしまっているのではないか？EMARS の限界ではないか？ 5．SDS と NP-40 を使い分けている理由は？ 6．CHL1 はがん細胞から直接産生されたものがどの程度あるのか？ 7．ヒト検体は組織型やステージがバラバラであることに問題はないのか？ 8．10 匹のマウスをコンバインしているのは、マウスの個体差があるのであまりよくないのでは？ 9. マウスの腫瘍で large tumor と、small tumor で分けて発現を見ている理由は？ 10.トラップしている分子が１つとは限らなのではないか？他の検出した分子と比較し、どの程度トラップし ているかを明確に示さないと比較にならないのではないか？ 11．EML4-ALK 融合遺伝子のトランスジェニックマウスをしているのであれば、やはりヒトの血清も EML4-ALK 遺伝子陽性患者の血清を揃えて実験をするべきだったのでは？ そうすれば非常にクリアな論文になったと思いますが、どう思いますか？ 12．EV 中の CHL-1 の割合は？ 13．EV は情報伝達の役割がある。そのような観点から、今回の結果をどう考えるか？ 14．臨床応用を見据えると、血清でどのくらいの量で測定可能なのか？ 15．定量的な指標はどうすればよいと思うか？体積あたりの評価は？ 16．トランスジェニックマウスでは腫瘍がどのくらいできるのか？ 17．臨床応用には今後どのような研究が必要か？ 18．肺がんモデルマウスとヒト検体の乖離があるが、論文のリバイスでどういう対応したのか？ 19．検出された分子はどういう機能をもっているのか？ 20．今後の応用として、口腔癌では同様の研究を考えているのか？ これらの質問に対して申請者は適格にかつ誠実に回答していた。   質疑応答の終了後に、申請者及び指導教官などは一次退席し、審査委員によって申請者に関して学位授与に適格かどうかの審議を行った。その結果、審査委員一致して、申請論文は学位論文として、また申請者の知識、態度、理解力などは学位授与に相応しいと判断し、審査委員会として、申請者は学位授与に適格であると結論した。 

近接プロテオミクスには細胞外小胞同定の可能性がある

巻　頭　言紀要第 15 巻発刊によせて埼玉医科大学看護学科紀要第 15 号として，報告 2 編，資料 3 編，合計 5 編を掲載し，発刊の運びとなりました．2020 年度から猛威を振るっている新型コロナウイルス感染症は，2022 年 1 月には第 6 波としてオミクロン変異株による世界的パンデミックとなっています．本学科では，この 1 年間は分散登校による対面授業と遠隔授業を併用しつつ，実習も可能な限り行ってまいりました．学生の登校日が限られているため，先の日程を見ながら授業準備を計画的に進める必要がありましたし，分散登校では一日に 2 回あるいは 4 回同じ内容を繰り返すこともありました．また，感染拡大によって日々変化する実習現場の状況に応じて，急な変更にも迅速に実習調整を行い，場合によっては学内でのシナリオ学習等で代替するなど，状況判断と対応方法の決断と関係者との調整に奔走する毎日でした．日々の感染対策には慣れてきたとはいえ，大きな負担を背負いながらの教育活動となりました．また，有志の教員は業務がひっ迫している保健所の救援活動に，土曜日曜を使って参加いたしました．大学教員の責務は研究・教育・社会貢献であると言われます．このような中でも，研究にも力を注ぎ投稿された皆様の研究に対する熱意に，心より敬意を表します．また，査読者の皆様，紀要委員の皆様には，丁寧に原稿をみていただき，誠にありがとうございました．そしてこの紀要をお読みいただいている皆様，本号発刊に関わる全ての方に，深謝申し上げます．このような状況が今後も続くのか，現在の時点では予測できませんが，研究の結果をエビデンスとして，より質の高い教育を学生に提供し，根拠ある看護活動や健康教育等の社会活動につなげることが大学教員の役割であり，そこにやりがいがあると考えます．本号をお手に取っていただき，お気づきのことがあれば，遠慮なく委員にお知らせください．今後も，さらに良い内容となるよう，努めてまいりたいと存じます．　　　　令和 4 年 3 月　　　　　　　　　　　　　　　　　　埼玉医科大学保健医療学部看護学科　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　学科長　　千田　みゆき

埼玉医科大学看護学科紀要15巻1号　巻頭言

編  集  後  記　今年も桜の開花を心待ちにする時期となりました．この一年を振り返ると，新型コロナ感染に振り回された自粛の年でした．しかし，そのような中でも，東京オリンピック，北京冬季オリンピックも開催され，「with　コロナ」幕開け年度であったようにも思います．　大学では，昨年度に続く web 授業を中心としながらも，対面授業も併行し，これまでになく，さまざまな授業方法が工夫されるようになった年度でもありました．このような状況の中，研究活動も制約を受け，思うように研究が進まない方も多かったのではないでしょうか．　昨年度の紀要 14 号では論文掲載が 1 件，特別企画に取り組みましたが，紀要 15 巻では 5 件の論文を掲載するに至りました．投稿していただきました著者の方々に感謝いたします．一方で，投稿から掲載までの流れの中で，研究の時間が取れずに取り下げられた論文もございました．是非，心機一転チャレンジしていただきたいと思います．　なお，委員会は，メンバーの入れ替わりがあり，後期に新メンバー 1 名が加わり，7 名での活動となりました．　次年度の今頃は，活発な研究活動ができるようになり，大勢で桜の開花を心待ちにしている，そのような状況になっていることを委員会一同願うばかりです．令和 4 年 3 月　　　　　　…埼玉医科大学保健医療学部　　　　　　　　　　　　　　看護学科紀要・研究推進委員会　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　委員長　野田　智子　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　委員　　粟生田友子　菊池チトセ　櫻庭　奈美　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　千葉今日子　山本久美子　内田　久子（順不同）　Bulletin of School of Nursing, Saitama Medical University 　埼玉医科大学看護学科紀要　2022 年 3 月　Vol.15　No.1発行　埼玉医科大学保健医療学部看護学科　　　〒 350-1241　埼玉県日高市山根 1397-1　　　埼玉医科大学保健医療学部看護学科長　千田みゆき　　　TEL： 042-984-4801（代表）　　　FAX：042-984-4804　　　E-mail：chida@saitama-med.ac.jp　　　Homepage：http://www.saitama-med.ac.jp/index.html印刷　ヨーコー印刷株式会社ISSN1882-8167

埼玉医科大学看護学科紀要15巻1号　編集後記

池田 真弓

池田 真弓 内容の要旨 論文審査の結果の要旨  池田真弓氏（毛呂山キャンパス皮膚科学）の学位審査委員会は、2022年 2月 9日（水）18:00 – 19:40に、本部棟第 5講堂において、主査 片桐岳信（日高キャンパスゲノム基礎医学）、副査 市岡 滋（毛呂山キャンパス形成外科学）、中村泰大（日高キャンパス皮膚科学）、村上 孝（毛呂山キャンパス微生物学）の全員が出席のもと開催された。   始めに、全員で本学のディプロマ・ポリシーを確認した。続いて、提出された申請書類に基づき、池田氏の資格、および論文の倫理手続き等が学位審査の条件を満たすことを確認し、学位審査を開始した。池田氏の申請論文タイトルは、「TERTと BMI1の遺伝子導入による毛包誘導脳を維持したヒト毛乳頭細胞の樹立（Thesis）」である。学位審査は、申請者である池田氏の口頭発表と、その後の主査と副査による質疑応答の形式で実施された。   毛の最下層に存在する毛乳頭は、発毛や毛周期の制御に重要な役割を果たす。毛乳頭細胞の毛包誘導能や増殖能を維持したまま培養することは困難で、未だ簡便な方法が確立されていない。本研究は、毛乳頭細胞の増殖能低下がテロメアの短縮と細胞周期阻害分子 p16INK4aの蓄積である点に着目し、ヒト毛乳頭細胞にテロメラーゼ逆転写酵素（TERT）と p16INK4aの転写制御抑制因子である BMI1 をレンチウイルスベクターで遺伝子導入し、毛包誘導能と増殖能を維持した毛乳頭細胞の樹立を試みた。その結果、TERT と BMI1 の両者を遺伝子導入した細胞は 10 週以上の増殖能を示し、さらに、ヌードマウスの背部にチャンバーアッセイ法で移植すると高い発毛能を示した。しかし、一方の遺伝子のみを導入しても、増殖能や発毛能の維持は認められなかった。移植した毛乳頭細胞は毛包には存在せず、周囲の真皮に分布していた。定量的 PCR 法で遺伝子発現を解析すると、両遺伝子を導入した細胞では、それぞれの単独遺伝子導入群に比べて、発問に関連した遺伝子群の発現が有意に上昇していた。以上の結果から、TERT と BMI1 を遺伝子導入した毛乳頭細胞は、パラクライン効果で発毛を促したと考えられた。   質疑応答では、主に以下のような質問・コメントが合計 86 点挙げられた。 1．論文として、申請者自身が樹立した 1 種類の毛乳頭細胞の結果で構成するのが良い。 2．論文中の誤字、脱字を修正すると共に、複数箇所を適切な表現に改める必要がある。 4．「緒言」には、細胞増殖に関わるテロメアと細胞周期だけでなく、発毛に関わる細胞や分子、環境要因なども図を含めて示すことが望ましい。これにより、本論文の読者が、実験の意義や結果の価値を理解することができる。 3．実験データには、可能な限り positive/negative controlを示すことが望ましい。 5．実験に用いたヒト毛乳頭の由来を明記する必要がある。 6．移植実験の細胞比の根拠を、文献を引用しながら明記すべきである。 7．「結論」は、実験結果に基づく事実を正確に記述すべきである。  本論文が他に査読機会のない Thesisであることを鑑み、上記の質疑応答内容とコメントに沿って論文の修正を求めた。   2022 年 2月 21 日（月）：池田氏より、コメントへの回答と改訂版の論文が提出された。審査委員会の全員で内容を検討し、全てのコメントに従って丁寧かつ適切に改定されたことを確認した。   上記一連の学位審査により、池田真弓氏の倫理観、専門性、独創性、科学的精度、論理展開、プレゼンテーションスキル、研究立案能力、情報発信能力、リーダーシップ、医療人としての人間性等は本学のディプロマ・ポリシーに合致し、学位授与に適格であると判断された（2022年 2月23日）。 

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