Dissertação de mestrado em Genética MolecularYeasts of the genus Candida are important human pathogens. A new species, Candida
bracarensis, was recently described revealing phenotypic and genetic similarities with
Candida glabrata, a widespread pathogen, and also with Saccharomyces cerevisiae. The
incidence of C. bracarensis has increased globally being now regarded as an emergent
fungal pathogen. However, little is known about its characteristics as a pathogenic
agent and the interaction with its host. The aim of this work was to compare C.
bracarensis with C. glabrata and S. cerevisiae concerning their virulence atributes and
the interaction with the host. The analysis of virulence factors has an important role in
the study of pathogens and their strategies of infection. However, most of the virulence
attributes of the successful pathogen C. albicans are absent in C. glabrata. Here, the
inability of C. glabrata to produce secreted aspartyl proteinases (Sap) or hyphae was
confirmed. Moreover, we show in this study that all C. bracarensis strains analysed
failed to produce Sap and to filament.
Phagocytosis plays a critical role in innate immunity, facilitating the removal and killing
of pathogens, and priming the adaptive immune response. The phagocytosis rate of the
different yeast species was evaluated in murine and human macrophages. C. glabrata
was phagocytosed at higher rates than the other two yeast species, being S. cerevisiae
the one inducing the lowest phagocytosis rate. Upon interaction with pathogens,
phagocytes rapidly produce ROS to destroy invading microbes, however, several
pathogens have developed strategies to evade this microcidal mechanism. Here, it is
shown that not only viable C. glabrata and C. bracarensis could suppress ROS
production, but unexpectedly, S. cerevisiae could reduce ROS production to more than
a half.
Although these results do not by themselves fully elucidate the disparate incidence of C.
glabrata vs C. bracarensis, they nevertheless contribute to better understand the
differences on the interaction of these two related species with the host.As leveduras do género Candida são importantes agentes patogénicos em infeções
fúngicas humanas. Recentemente foi descrita uma nova espécie, Candida bracarensis,
que se assemelha tanto fenotípica como genotipicamente com Candida glabrata e
também com Saccharomyces cerevisiae. A incidência desta nova espécie tem vindo a
aumentar, estando entre os fungos considerados emergentes. Contudo, muito pouco se
conhece acerca das suas características como patogéneo, dos seus fatores de
virulência e sobre a sua interação com o hospedeiro. Assim, o objetivo deste projeto foi
comparar C. bracarensis, C. glabrata e S. cerevisiae no que diz respeito aos
mecanismos de interação com o hospedeiro.
A análise dos fatores de virulência tem um papel importante no estudo de agentes
patogênicos e das suas estratégias de infecção. No entanto, a maioria dos factores de
virulência do agente oportunista bem sucedido C. albicans estão ausentes em C.
glabrata. Neste estudo, confirmou-se a incapacidade de C. glabrata de produzir
proteinases asparticas (Sap) ou hifas. Além disso, mostramos neste estudo que todas
as estirpes de C. bracarensis analisadas não conseguiram produzir Sap nem filamentar.
A fagocitose desempenha um papel crítico na imunidade inata, facilitando a remoção e
morte de agentes patogênicos e estimulando a resposta imune adaptativa. A taxa de
fagocitose das diferentes espécies de levedura foi avaliada em macrófagos murinos e
macrófagos humanos. C. glabrata foi fagocitada a taxas superiores do que as outras
duas espécies de leveduras, sendo S. cerevisiae o que induz a menor taxa de
fagocitose. Após a interação com agentes patogênicos, os fagócitos produzem
rapidamente ROS para destruir microrganismos invasores, no entanto, vários
microrganismos desenvolveram estratégias para evitar esse mecanismo microbicida.
Aqui, mostra-se que não só C. glabrata e C. bracarensis apresentam capacidade de
suprimir a produção de ROS, mas, inesperadamente, S. cerevisiae consegue reduzir a
produção de ROS para mais de metade.
Ainda que estes resultados não expliquem por si só a disparidade encontrada na
incidência de C. glabrata e C. bracarensis, contribuem no entanto para um melhor
conhecimento da interação destas duas espécies com o hospedeiro
