Dissertação de mestrado em BioengineeringBacterial vaginosis (BV) is one of the most common gynaecological conditions
affecting women in reproductive age worldwide, being linked to serious public health
consequences. Due to their complexity and to the diversity of microorganisms involved
in this condition, the exact aetiology is inconclusive, but recent reports referring to the
presence of anaerobic biofilms led to the theory that the microorganisms which form the
biofilm, like Gardnerella vaginalis, may be relevant for the aetiology of BV. Biofilms
are complex structures that protect the microorganisms involved increasing their
resistance to antibiotics and natural defences of the body. As such, the aim of this work
was to isolate and characterise the microbial population present in the vagina of
Portuguese women. In order to achieve this, 54 samples of vaginal exudate were
collected in clinical settings from Portuguese women that were either healthy or had
been diagnosed with BV. After an initial characterization, 15 unique strains were
isolated and identified. The next step was the phenotypic characterization of the isolated
strains, which included the determination of their intrinsic capacity to form biofilm and
tolerance to some antibiotics typically prescribed by physicians around the world, by
determining the minimum inhibitory concentrations (MIC). The intrinsic capacity to
grow as biofilm of each one of the isolate was assessed under anaerobic conditions for
48 hours and using different media. It was observed that all isolates had the capacity to
form biofilm, but this was depending on the growth media used. The strains that showed
a higher capacity for biofilm formation were G. vaginalis, Enterococcus faecalis,
Streptococcus spp., Bifidobacterium breve and Propionibacterium acnes. Furthermore,
results of antimicrobial susceptibility assays showed that for the most part of
microorganisms had an MIC similar to those previously reported in the literature.
This work allowed the characterization of the vaginal microbial flora in
Portuguese woman and is the first study of this kind in Portugal. These results should be
taken into account when researching the epidemiology and pathogenesis of BV.A vaginose bacteriana (VB) é uma das condições ginecológicas mais comuns
que afetam as mulheres em idade fértil em todo o mundo, tendo sido associada a graves
consequências para a saúde pública. Devido à sua complexidade e à diversidade dos
microorganismos presentes, a sua etiologia é desconhecida. Dados recentes associaram
a presença de biofilmes anaeróbios, tanto na vagina saudável como em VB, levando à
teoria de que os microorganismos que formam biofilme, como Gardnerella vaginalis,
podem ser relevantes para a etiologia da VB. Biofilmes são estruturas complexas que
protegem os microorganismos podendo conferir resistência aos antibióticos e às defesas
naturais do hospedeiro. Assim, o objetivo deste trabalho foi isolar e caracterizar a
população microbiana presente na vagina de mulheres portuguesas. Para isso, foram
recolhidas 54 amostras de exsudado vaginal de mulheres saudáveis ou diagnosticadas
com BV. Após a caracterização inicial, 15 estirpes foram isoladas e identificadas. O
passo seguinte consistiu na caracterização fenotípica das estirpes, como a capacidade
intrínseca para formar biofilme e a tolerância a antibióticos, através da determinação das
concentrações mínimas inibitórias (CMI´s). A capacidade intrínseca de formação de
biofilme de cada um dos isolados foi avaliada em condições anaeróbias durante 48
horas utilizando diferentes meios de crescimento. Foi possível observar que todas as
estirpes isoladas apresentaram elevada capacidade para formar biofilme, dependendo
dos meios de crescimento utilizados. As estirpes que demonstraram maior capacidade
para formar biofilme foram G. vaginalis, Enterococcus faecalis, Streptococcus spp.,
Bifidobacterium breve e Propionibacterium acnes. Além disso, os resultados da
susceptibilidade antimicrobiana demonstraram que a maior parte dos microrganismos
apresentaram CMI´s semelhantes às previamente descritas na literatura.
Este trabalho permitiu fazer uma caracterização da flora microbiana vaginal de
mulheres portuguesas e é o primeiro estudo deste tipo em Portugal. Estes resultados
devem ser tidos em conta na investigação da epidemiologia e patogénese da VB.Fundação para a Ciência e Tecnologia (FCT) - Project with reference FCOMP-01-0124-FEDER-008991 (PTDC/BIA-MIC/098228/2008);This work was supported by European Union funds (FEDER/COMPETE)