Brasil, Carolina Serpa

Facchin, Ana Carolina Brusius

Padilha, Janice Pacheco Dias

Saute, Jonas Alex Morales

Lume 5.8

39ª SEMANA CIENTÍFICA DO HOSPITAL DE CLÍNICAS DE PORTO ALEGRE              69  Clin Biomed Res 2019; 39 (Supl.)     como um novo alvo terapêutico coadjuvante ao tratamento da neoplasia da mama com DOX, oferecendo benefícios antineoplásico, mas não cardioprotetor.  eP2497 Desafios à eficácia do sequenciamento de nova geração em amostras tumorais Bruno da Silveira Corrêa; Fernanda de Paris; Tiago Finger Andreis; Fernanda Salles Vianna; Luis Fernando da Rosa Rivero; Francine Hehn de Oliveira; Patricia Ashton-Prolla; Gabriel de Souza Macedo HCPA - Hospital de Clínicas de Porto Alegre  Introdução: O uso das plataformas de Sequenciamento de Nova Geração (Next-generation sequencing - NGS) caracteriza-se como um grande avanço tecnológico com aplicações na medicina personalizada direcionada à oncologia. Para os testes moleculares realizados em material parafinado, diversos fatores podem influenciar na obtenção de resultados satisfatórios, como a quantidade de tecido tumoral presente na amostra e a integridade do DNA extraído. Objetivo: Analisar o desempenho da técnica de NGS em amostras de câncer de pulmão de não pequenas células. Métodos: Foram avaliadas pelo Programa de Medicina Personalizada do HCPA amostras recebidas entre os anos 2016-2018 oriundas de diferentes centros do sul do Brasil. Após uma primeira triagem do material por um médico patologista, amostras consideradas adequadas tiveram seu DNA extraído e quantificado utilizando espectrofotometria (NanoDrop - Thermo Fisher) e fluorimetria (Qubit - Thermo Fisher). O sequenciamento foi realizado na plataforma Ion Torrent PGM (Thermo Fisher). Todos os dados foram analisados retrospectivamente e de maneira anônima, incorporando parâmetros como: adequabilidade das amostras e percentual de células tumorais, presença de necrose e resultados do sequenciamento. Para comparação estatística, foi utilizado o teste do Chi-quadrado, com um nível de significância P<0,05. Resultados: Classificaram-se os resultados em 119 amostras não conclusivas (inconclusivos ou inadequados) e 599 conclusivas, totalizando 798 análises realizadas. Como resultados prévios, observamos que a presença de necrose no tecido não se relacionou com o sucesso no sequenciamento, bem como a razão de pureza das amostras (P=0,296; P=0,058). Amostras provenientes do HCPA apresentaram taxas de efetividade similares aos demais centros (P=0,987). Dentre os resultados não conclusivos, cerca de 22% das amostras exibiram um percentual de células tumorais abaixo de 5%. Em comparação, dentre as amostras com resultados conclusivos, somente 1,84% estavam abaixo de 5% de células tumorais (P<0,01). Conclusão: Evidenciou-se a relevância da percentagem de células tumorais como um indicador de sucesso na obtenção de resultados satisfatórios. Análises complementares, como o tamanho da amostra biopsiada, tecido de origem e quantificações de DNA ainda serão realizadas. Por fim, o estudo espera estabelecer parâmetros para o melhor desempenho e otimização do uso de recursos na técnica de NGS para avaliação de amostras tumorais parafinizadas.  eP2513 Análise molecular de Genes relacionados a Doença de Charcot-Marie-Tooth e neuropatia hereditária com susceptibilidade à paralisia por pressão Janice Pacheco Dias Padilha; Carolina Serpa Brasil; Ana Carolina Brusius Facchin; Jonas Alex Morales Saute HCPA - Hospital de Clínicas de Porto Alegre  Introdução: As neuropatias hereditárias, em especial a doença de Charcot-Marie-Tooth (CMT), são um grupo de doenças com grande heterogeneidade genética. As formas de CMT desmielinizantes autossômicas dominantes são classificadas como CMT tipo 1 (CMT1) e as autossômicas recessivas como CMT4, as formas axonais como CMT2 e as formas com herança ligada ao X como CMTX, havendo mais de 60 genes associados a estas condições.  A diferenciação entre os subtipos de CMT não é possível clinicamente, sendo necessário o diagnóstico molecular para esta definição. Objetivo: Avaliar o rendimento diagnóstico do Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification (MLPA) dos genes PMP22 (relacionado às formas CMT1A e CMT1E, e à Neuropatia Hereditária com Susceptibilidade à Paralisia por Pressão, NHSPP), MPZ (CMT1B) e GJB1(CMTX1) em pacientes com suspeita de CMT ou NHSPP. Métodos: Foram analisadas amostras de casos índices recrutados consecutivamente no ambulatório de genética das doenças neuromusculares do Hospital de Clínicas de Porto Alegre com suspeita clínica e eletrofisiológica de CMT desmielinizante ou HNPP. A análise foi feita através da técnica de MLPA (MRC-Holland-P405A1) por sondas que hibridizam com os genes PMP22 (17p11.2), MPZ e GJB1. A avaliação do número de cópias nestes genes foi realizada através do software Coffalyser.Net. Resultados: dos 32 casos índices com suspeita de CMT avaliados, 16 (50%) apresentaram duplicações no PMP22 confirmando o diagnóstico de CMT1A, 14 (43,7%) não apresentaram alterações e 1 (3,1%) apresentou deleção no GJB1 confirmando o diagnóstico de CMTX1. Encontramos deleção no PMP22 nos 2 pacientes avaliados que tinham suspeita de NHSPP. Conclusão: A análise por MLPA dos genes de interesse possibilitou o diagnóstico de 56% das famílias avaliadas, sendo possivelmente uma estratégia custo-efetiva para o diagnóstico de CMT/NHSPP em nosso meio. A implementação desta técnica diagnóstica trará benefícios diretos aos pacientes e familiares ao propiciar adequado aconselhamento genético. Além disso, o conhecimento da epidemiologia das neuropatias hereditárias  no Rio Grande do Sul fomentará o desenvolvimento de futuros projetos nestas condições raras e negligenciadas.  eP2514 Doença de Alzheimer: disfunção mitocondrial pré-sináptica e efeito neuroprotetor da guanosina Jussemara Souza da Silva; Andressa Wigner Brochier; Francieli Rohden; Thais Martins de Lima; Fernanda Urruth Fontella; Yasmine Nonose; Alexandre Umpierrez Amaral; Antonio Galina; Diogo O. Souza UFRGS - Universidade Federal do Rio Grande do Sul  Introdução: A patofisiologia da Doença de Alzheimer (DA) apresenta agregados neurofibrilares, proteína beta amilóide e alterações do metabolismo energético cerebral. Os oligômeros beta-amiloide (AβOs), cujos níveis estão elevados na DA, causam toxicidade neuronal, prejudicando a função mitocondrial e a produção de ATP, em uma região de alta demanda energética, a sinapse. A Guanosina (GUO), uma purina endógena, tem efeitos neuroprotetores em modelos de doenças cerebrais envolvendo excitotoxicidade glutamatérgica, estresse oxidativo e inflamação. Por isso, a GUO vem sendo estudada em modelo de DA. Nesse estudo, avaliamos a sinaptotoxicidade causada pela administração in vivo de AβOs e o efeito neuroprotetor da GUO. Materiais e Métodos: Camundongos Swiss, de 90 dias, (CEUA 30.169), receberam Injeção Intracerebro-ventricular (I.C.V.), com solução veículo 

Portuguese

Análise molecular de genes relacionados a Doença de Charcot-Marie-Tooth e neuropatia hereditária com susceptibilidade à paralisia por pressão

Universidade Federal do Rio Grande do Sul

https://lume.ufrgs.br/bitstream/10183/211391/1/001109905.pdf

Análise molecular de genes relacionados a Doença de Charcot-Marie-Tooth e neuropatia hereditária com susceptibilidade à paralisia por pressão

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Lume 5.8

Universidade Federal do Rio Grande do Sul