Production of the rat polyclonal anti-hTNF antibody

Abstract

Czynnik martwicy nowotworów (TNF) jest cytokiną prozapalną indukowaną infekcją bakteryjną. Wpływa na ekspresję wielu genów o charakterze pro- jak i anty-apoptotycznym. W niniejszej pracy przedstawiono poszczególne etapy procedury mającej na celu otrzymanie szczurzych poliklonalnych przeciwciał anty-hTNF. W tym celu prowadzono hodowle komórek produkujących hTNF, oczyszczano białko wykorzystując chromatografię powinowactwa oraz przygotowanym antygenem immunizowano szczura. Wynikiem dwóch procesów oczyszczania było uzyskanie łącznie 82 µg hTNF. Uzyskany antygen użyto do immunizacji szczura. Proces immunizacji przebiegł pomyślnie i szczur został przygotowany do izolacji poliklonalnych przeciwciał anty-hTNF z surowicy.Tumor necrosis factor (TNF) is a pro-inflammatory cytokine-induced bacterial infection. It affects the expression of multiple genes of a pro- or anti-apoptotic character. This experiments present the various stages of procedure in order to obtain the rat polyclonal anti-hTNF antibody. For this purpose, cell cultures was carried out, purified hTNF using affinity chromatography and immunized a rat. Finally, purified 82 µg hTNF, as a result of the experiment. The obtained antigen was used for the rat immunization. The immunization process was successful and the rat was prepared to isolation polyclonal anti-hTNF antibody from serum